конъюгаты цитотоксических средств с пептидами
| Классы МПК: | C07K14/655 соматостатины C07K7/06 содержащие от 5 до 11 аминокислот C07D491/22 в которых конденсированная система содержит четыре или более гетероциклических кольца A61K38/31 соматостатины A61K38/08 пептиды, содержащие 5-11 аминокислот A61P35/00 Противоопухолевые средства |
| Автор(ы): | ДОНГ Чжен Ксин (US), ШЕН Йилана (US), КАЛЛЕР Майкл Девитт (US), ТЮРЬО Кристоф Ален (FR), ЧЖАН Цзюньдун (US), КИМ Сунь Хюк (US) |
| Патентообладатель(и): | ИПСЕН ФАРМА С.А.С. (FR) |
| Приоритеты: |
подача заявки:
2007-10-17 публикация патента:
27.07.2012 |
Настоящее изобретение относится к цитотоксическим соединениям направленного действия и способам их терапевтического применения для лечения неоплазии и других заболеваний. 7 н. и 2 з.п. ф-лы, 12 табл., 31 пр.; 3 ил.
Формула изобретения
1. Смесь, содержащая камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 (SEQ ID NO:4) и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 (SEQ ID NO:4) или их фармацевтически приемлемые соли.
2. Смесь, содержащая камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 (SEQ ID NO:4) и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 (SEQ ID NO:4) или их фармацевтически приемлемые соли.
3. Фармацевтическая композиция для ингибирования нежелательной пролиферации опухоли, экспрессирующей один или несколько рецепторов соматостатина, у индивида, содержащая эффективное количество смеси по любому из пп.1 или 2 и фармацевтически приемлемый носитель.
4. Способ лечения заболевания или состояния у индивида, включающий введение указанному индивиду терапевтически эффективного количества смеси по любому из пп.1 или 2 или ее фармацевтической композиции, при этом указанное заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих один или несколько рецепторов соматостатина.
5. Способ уменьшения размера опухоли, экспрессирующей один или несколько рецепторов соматостатина, у индивида, включающий введение терапевтически эффективного количества смеси по любому из пп.1 или 2 или ее фармацевтической композиции, при этом указанное терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое уменьшает размер опухоли у указанного индивида.
6. Способ ингибирования нежелательной пролиферации опухолевых клеток, экспрессирующих один или несколько рецепторов соматостатина, у индивида, который включает введение терапевтически эффективного количества смеси по любому из пп.1 или 2 или его фармацевтической композиции, при этом указанное терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое ингибирует нежелательную пролиферацию опухолевых клеток у указанного индивида.
7. Способ по любому из пп.3-6, где указанное заболевание или состояние представляет собой тип рака, выбранный из группы, состоящей из нейроэндокринных опухолей, фиброза, доброкачественной гиперплазии предстательной железы, атеросклероза, рестеноза, рака молочной железы, рака ободочной кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, рака легкого, мелкоклеточного рака легкого, рака яичника, эпидермального рака, неходжкинской лимфомы, ходжкинской лимфомы, лейкоза, рака системы кроветворения, медуллярных опухолей надпочечника, феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы, опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы, глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника, гормонально-неактивных опухолей GEP, параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитом, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы, папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы, менингиомы и немелкоклеточного рака легкого.
8. Способ по п.7, где раком является рак молочной железы, мелкоклеточный рак легкого или рак предстательной железы.
9. Соединение камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Аера-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 (SEQ ID NO:4).
Описание изобретения к патенту
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к лекарственным композициям и их применению для лечения болезненных состояний. В частности, настоящее изобретение относится к соединениям и композициям, а также к способам лечения заболеваний и состояний, связанных с аберрантной или нежелательной пролиферацией, миграцией и/или физиологической активностью клеток.
Уровень техники
Большинство цитотоксических средств вызывают нежелательные токсические побочные эффекты из-за отсутствия избирательного воздействия на требующие лечения ткани или клетки. Были исследованы разные подходы для достижения избирательной доставки цитотоксических агентов к клетке-мишени.
Использование лигандов биологических рецепторов в качестве носителей лекарственных средств для направленной доставки указанных средств к представляющим интерес клеткам позволяет уменьшить токсические побочные эффекты и значительно улучшить эффективность доставки лекарственного средства. Например, в международной публикации патента № WO97/19954 описаны конъюгаты цитотоксического средства антрациклина, такого как доксорубицин, с пептидным гормоном, таким как LHRH, бомбезин или соматостатин. Указанный цитотоксический агент ковалентно связан с пептидом при помощи линкера формулы: -С(О)-(СН2)n-С(О), где n=0-7.
Аналогичным образом в заявке на европейский патент № ЕР 1118336 описаны конъюгаты аналогов соматостатина, например, остреотида, ланреотида и вапреотида, с цитотоксическим средством, таким как паклитаксель, доксорубицин или камптотецин, образованные при помощи спейсера, который также имеет формулу: -С(О)-(СН 2)n-С(О)-, где n=0-7.
В публикации заявки на патент США № 2002/0115596 описаны конъюгаты цитотоксических агентов с олигопептидами, в которых аминокислотные последовательности пептидов предпочтительно расщепляются свободным антигеном предстательной железы. Такие конъюгаты, как указано, являются подходящими для лечения рака предстательной железы и доброкачественной гиперплазии предстательной железы.
В публикации заявки на патент США № 2003/0064984 описаны конъюгаты цитотоксических аналогов СС-1065 и дуокармицинов с расщепляемыми линкерами и агента, обеспечивающего направленную доставку лекарственного средства, такого как антитело или пептид. Указано, что цитотоксические аналоги высвобождаются в результате расщепления линкера.
В международной заявке на патент № WO02/34237 описаны конъюгаты активных агентов, ковалентно связанных при помощи прямой связи с полипептидом. Отмечено, что полипептид стабилизирует активный агент, например, в желудке, защищая его структуру.
В международной заявке на патент № WO04/093807 описаны цитотоксические соединения направленного действия, конъюгированные с лигандом биологической мишени.
Однако по-прежнему существует значительная потребность в цитотоксических средствах направленного действия, обладающих улучшенными свойствами в отношении специфичности направленного воздействия, системной токсичности и фармакокинетики.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к цитотоксическим соединениям направленного действия, включающим цитотоксическую часть, связанную с частью, обеспечивающей направленную доставку лекарственного средства. Часть, обеспечивающая направленную доставку, является, например, лигандом биологического рецептора. Определенные преимущества соединений по настоящему изобретению и их применения при лечении опухолей и рака включают, не ограничиваясь ими:
a) менее выраженные токсические побочные эффекты;
b) более высокую эффективность лечения благодаря возможности введения более высоких доз, более продолжительного лечения, более частого введения доз и/или локализации и увеличения концентрации лекарственного средства в клетках-мишенях; и/или
c) уменьшение осложнений вследствие множественной лекарственной устойчивости;
или любые комбинации вышеуказанных преимуществ. Целью применения цитотоксических соединений направленного действия является лечение ряда раковых заболеваний или состояний. Например, лечение опухолей или разных типов рака, сверхэкспрессирующих рецепторы соматостатина, предполагает направленную доставку лекарственного средства и лечение нативным соматостатином, то есть H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH (SEQ ID N0:1), и/или его фрагментами или аналогами, образующими комплекс с определенными цитотоксическими частями. Такие типы рака включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли (например, карциноидные опухоли, нейробластомы, ульцерогенные аденомы поджелудочной железы, инсулиномы, медуллярный рак щитовидной железы или рак клеток Меркеля), рак молочной железы, лимфомы (ходжкинская и неходжкинская лимфома), лейкоз, мелкоклеточный рак легкого (SCLC), гепатомы, меланомы и рак почки, которые, как известно, характеризуются повышенным содержанием рецептора соматостатина типа 2 (SSTR-2). Карциномы и саркомы предстательной железы являются типичными примерами рака, сверхэкспрессирующего рецептор соматостатина типа 1, SSTR-1; кроме того, известно, что разные типы рака предстательной железы характеризуются высоким содержанием рецептора соматостатина типа 4 (SSTR-4). Аденомы гипофиза характеризуются повышенным содержанием рецептора соматостатина типа 5 (SSTR-5). (См. публикации Reubi, J.C. et al., Eur. J. Nucl. Med. Mod. Imaging, 2002, 29(7):855-62; Schally, A.V. et al., Life Sci., 2003, 72(21):2305-20; Hansson, J. et al., Prostate, 2002, 53(1):50-9; Reubi, J.C. et al., Eur. J. Nucl. Med., 2001, 28(7):836-46). Дополнительные типы рака или опухолей, которые можно лечить, используя соединения или композиции по настоящему изобретению, включают, не ограничиваясь ими, медуллярные опухоли надпочечника (феохромацитому, нейробластому, ганглионеврому), опухоли желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагоному, вазоактивную полипептидсекретирующую опухоль кишечника (VIPoma), гормонально-неактивные опухоли GEP), параганглиому, аденому гипофиза, астроцитомы, доброкачественные и злокачественные опухоли кости, дифференцированную карциному щитовидной железы (папиллярную карциному, фолликулярную карциному, оксифильную карциному), менингиому и немелкоклеточный рак легкого (см. публикацию Society of Nuclear Medicine Procedure Guideline for Somatostatin Receptor Scintigraphy with In-111 Pentetreotid, Version 1.0, February 2001). Дополнительные состояния или заболевания, на которые соединения по настоящему изобретению оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатия Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит (см. публикацию Society of Nuclear Medicine Procedure Guideline for Somatostatin Receptor Scintigraphy with In- 111 Pentetreotid, Version 1.0, February 2001). Таким образом, возможность направленно воздействовать на определенные типы SSTR при помощи определенных аналогов соматостатина, конъюгированных с цитотоксическими частями, позволяет лечить вышеуказанные раковые заболевания.
Аналогичным образом на опухоли, сверхэкспрессирующие рецепторы бомбезина, можно эффективно воздействовать при помощи цитотоксических соединений направленного действия, содержащих нативный бомбезин, то есть Tyr-Gln-Arg-Leu-Gly-Asn-Gln-Trp-Ala-Val-Gly-His-Leu-Met-NH2 (SEQ ID NO:2), и/или его фрагменты или аналоги. Такие типы рака включают, не ограничиваясь ими, рак молочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, ульцерогенные аденомы поджелудочной железы и рак почки (см. публикацию Reubi, J.C. et al., Clin. Can. Res., 2002, 8(4):1139-46).
Настоящее изобретение относится также к конъюгатам цитотоксических средств с пептидами, предназначенным для лечения ангиогенных и/или пролиферативных заболеваний. Например, соединения по настоящему изобретению можно использовать для лечения заболеваний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, экспрессирующих высокие уровни SSTR-2 (см. публикакацию van Hagen et al., Eur. J. Endocrinol., 2000, 143(Suppl.1):S43-51). Заболевания, ассоциированные с образованием новых кровеносных сосудов, являющихся мишенью для соединений по настоящему изобретению, включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз.
Первым объектом настоящего изобретения являются цитотоксическая часть и часть, обеспечивающая направленную доставку лекарственного средства, формулы IA:
А-В-С-Е
(IA)
где:
А означает камптотецин или его производное;
В означает rvAbu, rvAhp, rvAla, rvAnc, rvApn, rvArg, rvAsp, rvCha, rvDap(Z), rvGlu, rvGly, rvPhe, rvVal или отсутствует;
С означает D1-D 2-D3-D4, где
D 1 означает глутарил, сукцинил или отсутствует;
D2 означает (Doc)m, где m в каждом случае независимо означает 4, 5, 6 или [Peg]х, где х в каждом случае независимо означает 0-100;
D3 означает (Aepa)n, где n в каждом случае независимо означает 0 или 1; и
D4 означает D-Phe или Lys-D-Tyr-D-Tyr;
Е означает аналог соматостатина формулы
с(Cys-A2-A3-D-Trp-Lys-A 6-Cys)-A8-R, где
А2 означает Phe или отсутствует;
А3 означает Phe, 3-(I)Tyr или Tyr;
A6 означает Abu, Thr или отсутствует;
А8 означает Thr или отсутствует; и
R означает NH2 или ОН;
или их фармацевтически приемлемая соль.
Первый вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к соединениям формулы (IA), содержащим часть камптотецина, выбираемую из группы, включающей:
где пунктирной линией 
---
отмечена точка присоединения камптотецина ко второй части, например линкеру или пептиду.
Второй вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к соединениям формулы (IA), в которых часть, обеспечивающая направленную доставку лекарственного средства, является нативным соматостатином или его фрагментом и/или аналогом, соответствующим любой из нижеследующих формул:
H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH (нативный SRIF) (SEQ ID NO:1);
c(Cys-3-(I)Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
c(Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys)-NH 2 или
с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2,
или к их фармацевтически приемлемым солям.
Третий вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvGly-Glut-(Doc)6-Lys-D-Tyr-D-Tyr-c(Cys-3-(I)Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvGly-Glut-(Doc)4 -Lys-D-Tyr-D-Tyr-c(Cys-3-(I)Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvGly-Glut-(Doc)4 -Lys-D-Tyr-D-Tyr-c(Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys)-NH2 ;
камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvArg-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvDap(Z)-Sue-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvPhe-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvApn-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvAbu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvAla-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvVal-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-Glut-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvAnc-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-UHKno(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 ;
камптотецин-rvAhp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-UMKno(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
SN38-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Четвертый вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvAbu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvAla-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvVal-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvAnc-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
SN38-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c (Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Пятый вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvAbu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
SN38-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Шестой вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-cys)-Thr-NH2;
SN38-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys) -Thr-NH2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Седьмой вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Восьмой вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvCha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Девятый вариант осуществления первого объекта настоящего изобретения относится к соединению:
SN38-rvGly-Suc- (Doc)4-Aepa-D-Phe-c (Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Вторым объектом настоящего изобретения являются цитотоксическая часть и часть, обеспечивающая направленную доставку лекарственного средства, формулы IB:
где:
А означает камптотецин или его производное;
В означает rvD-Abu, rvD-Ala, rvD-Arg, rvD-Asp, rvD-Cha, rvD-Dap(Z), rvD-Glu, rvD-Phe, rvD-Val или отсутствует;
С означает D1-D 2-D3-D4, где
D 1 означает глутарил, сукцинил или отсутствует;
D2 означает (Doc)m, где m в каждом случае независимо означает 4, 5, 6 или [Peg]x, где х в каждом случае независимо означает 0-100;
D3 означает (Aepa)n, где n в каждом случае независимо означает 0 или 1; и
D4 означает D-Phe или Lys-D-Tyr-D-Tyr;
Е означает аналог соматостатина формулы
с(Cys-A2-A3-D-Trp-Lys-A 6-Cys)-A8-R, где
А2 означает Phe или отсутствует;
А3 означает Phe, 3-(I)Tyr или Tyr;
А6 означает Abu, Thr или отсутствует;
А8 означает Thr или отсутствует; и
R означает NH 2 или ОН;
или их фармацевтически приемлемая соль.
Первый вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединениям формулы (IB), содержащим часть камптотецина, выбираемую из группы, включающей:
где пунктирной линией --- отмечена точка присоединения камптотецина ко второй части, например линкеру или пептиду.
Второй вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединениям формулы (IB), в которых часть, обеспечивающая направленную доставку лекарственного средства, является нативным соматостатином или его фрагментом и/или аналогом, соответствующим любой из нижеследующих формул:
H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH (нативный SRIF) (SEQ ID NO:1);
с(Cys-3-(I)Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
с(Cys-Phe-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys)-NH 2 или
с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2,
или к их фармацевтически приемлемым солям.
Третий вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Arg-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Dap(Z)-Sue-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 ;
камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Phe-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Abu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Val-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Ala-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c (Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Peg3)3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-Pegn-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Четвертый вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Abu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Ala-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Val-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Peg3)3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-Pegn-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Пятый вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Abu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Peg3)3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-Pegn-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Шестой вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3)3-Aepa-D-Phe-c (Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
камптотецин-rvD-Asp-Suc-Pegu-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2;
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Седьмой вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Восьмой вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Девятый вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3) 3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Десятый вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvD-Asp-Suc-Pegu-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Одиннадцатый вариант осуществления второго объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Соединения формул IA и IB по настоящему изобретению являются по существу чистыми соединениями. По существу чистые соединения представляют собой соединения, которые содержат примерно 98% или более идентичных молекул формул IA или IB и примерно 2% или менее неидентичных молекул, то есть примесей, неполных молекул, промежуточных молекул или энантиомерных форм. По существу чистые соединения включают, конечно, соединения, содержащие примерно 99%, 99,5%, 99,8%, 99,9% или более идентичных молекул и примерно 1%, 0,5%, 0,2%, 0,1% или менее неидентичных молекул. По существу чистые соединения включают также соединения, содержащие 100% идентичных молекул.
Третьим объектом настоящего изобретения является смесь соединений формул IA и IB, в которых линкер аминокислоты, присоединенной в обратной ориентации, (rv) имеет D-форму (формула IB) в некоторых соединениях смеси или L-форму (формула IA) в некоторых соединениях смеси. Соединения находятся в смеси в массовом соотношении, равном примерно 2:98, примерно 5:95, примерно 10:90, примерно 15:85, примерно 20:80, примерно 25:75, примерно 30:70, примерно 35:65, примерно 40:60, примерно 45:50, примерно 50:50, примерно 55:45, примерно 60:40, примерно 65:35, примерно 70:30, примерно 75:25, примерно 80:20, примерно 85:15, примерно 90:10, примерно 95:5, примерно 97:3 или даже примерно 98:2, при этом линкер аминокислоты, присоединенной в обратной ориентации, имеет соответственно D-форму (формула IB) и L-форму (формула IA). Типичные смеси включают, не ограничиваясь ими, смеси соединений камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемых солей либо соединений камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемых солей.
Соединения формул IA и IB, относящиеся к третьему объекту настоящего изобретения, являются по существу чистыми соединениями в смеси. По существу чистые соединения представляют собой соединения, содержащие примерно 98% или более идентичных молекул формул IA или IB и примерно 2% или менее неидентичных молекул, то есть примесей, неполных молекул, промежуточных молекул или энантиомерных форм. По существу чистые соединения включают, конечно, соединения, содержащие примерно 99%, 99,5%, 99,8%, 99,9% или более идентичных молекул и примерно 1%, 0,5%, 0,2%, 0,1% или менее неидентичных молекул. По существу чистые соединения включают также соединения, содержащие 100% идентичных молекул.
В первом варианте осуществления третьего объекта настоящего изобретения смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли. В соответствии с одним отличительным признаком первого варианта осуществления третьего объекта настоящего изобретения смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в процентном соотношении по массе, соответственно равном примерно 44:56, примерно 58:42, примерно 87:13, примерно 88:12, примерно 97:3 или примерно 98:2.
В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 44:56. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 58:42. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc- (Doc)4-Aepa-D-Phe-c (Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 87:13. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 88:12. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 97:3. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 98:2.
Во втором варианте осуществления третьего объекта настоящего изобретения смесь включает в массовом соотношении камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 80:20, примерно 85:15, примерно 87:13, примерно 88:12, примерно 90:10, примерно 95:5, примерно 97:3 или примерно 98:2. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 80:20. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 85:15. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 87:13. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 88:12. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 90:10. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 95:5. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 97:3. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 98:2.
Четвертым объектом настоящего изобретения является фармацевтическая композиция, включающая терапевтически эффективное количество по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смесь по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения или их фармацевтически приемлемых солей и фармацевтически приемлемый носитель.
Пятым объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом указанное заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов. В другом варианте осуществления изобретения рецептор соматостатина является рецептором соматостатина типа 2.
Шестым объектом настоящего изобретения является способ уменьшения размера опухоли у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое уменьшает размер опухоли у субъекта.
Седьмым объектом настоящего изобретения является способ ингибирования нежелательной пролиферации опухолевых клеток у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое ингибирует нежелательную пролиферацию опухолевых клеток у субъекта.
Восьмым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое оказывает агонистическое воздействие на рецептор соматостатина.
Девятым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом рецептор является рецептором SSTR типа 2 и агонист является агонистом SSTR типа 2.
Десятым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом агонист является избирательно действующим агонистом SSTR типа 2.
Одиннадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Двенадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотецин-rvCha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Тринадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества SN38-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Четырнадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Пятнадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотеин-rvD-Cha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Шестнадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества смеси, включающей камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции.
Семнадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества смеси, включающей камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции.
Восемнадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3)3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NHa, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Девятнадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Asp-Suc-Pegu-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Двадцатым объектом настоящего изобретения является способ оказания агонистического воздействия на рецептор соматостатина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции.
Двадцать первым объектом настоящего изобретения является способ лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества по существу чистого соединения формулы (IA), по существу чистого соединения формулы (IB) или смеси по существу чистых соединений формул (IA) и (IB) в соответствии с любым из вышеуказанных вариантов осуществления изобретения, их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Конъюгаты цитотоксических средств с пептидами по настоящему изобретению могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитом, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы и немелкоклеточного рака легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Конъюгаты цитотоксических средств с пептидами по настоящему изобретению могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые благоприятное воздействие оказывают соединения по настоящему изобретению, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатия Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Первый вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abn-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитом, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии сдругим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Второй вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Камптотецин-rvCha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VI Рота), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvCha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Третий вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы: SN38-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. SN38-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы/ ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, SN38-rvGly-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые SN38-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт/ фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Четвертый вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Пятый вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения.
Камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvD-Cha-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lvs-Abu-Cys)-Thr-NH2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Шестой вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества смеси соединений формул камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или композиций, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз/рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Смесь камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или композиций может быть также использована для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VI Рота), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, смесь соединений формул камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 или его фармацевтически приемлемой соли и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 или его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции может быть также использована для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые смесь камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или композиций оказывает благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Смесь, используемая в шестом варианте осуществления изобретения, включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 или его фармацевтически приемлемую соль в массовом соотношении, равном примерно 2:98, примерно 5:95, примерно 10:90, примерно 15:85, примерно 20:80, примерно 25:75, примерно 30:70, примерно 35:65, примерно 40:60, примерно 45:55, примерно 50:50, примерно 55:45, примерно 60:40, примерно 65:35, примерно 70:30, примерно 75:25, примерно 80:20, примерно 85:15, примерно 90:10, примерно 95:5, примерно 97:3 или даже примерно 98:2. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys) -Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 44:56, примерно 58:42, примерно 87:13, примерно 88:12, примерно 97:3 или примерно 98:2. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 44:56. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 58:42. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 87:13. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 88:12. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 97:3. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, соответственно равном примерно 98:2.
Седьмой вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества смеси соединений камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или композиций, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Смесь камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или композиций может быть также использована для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, неиробластомы/ ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, смесь соединений формул камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемых солей или вышеописанной фармацевтической композиции может быть также использована для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые смесь камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, их фармацевтически приемлемых солей или композиций оказывает благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Смесь, используемая в седьмом варианте осуществления изобретения, включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 2:98, примерно 5:95, примерно 10:90, примерно 15:85, примерно 20:80, примерно 25:75, примерно 30:70, примерно 35:65, примерно 40:60, примерно 45:55, примерно 50:50, примерно 55:45, примерно 60:40, примерно 65:35, примерно 70:30, примерно 75:25, примерно 80:20, примерно 85:15, примерно 90:10, примерно 95:5, примерно 97:3 или даже примерно 98:2. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 80:20. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 85:15. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 87:13. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 88:12. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 90:10. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 95:5. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 97:3. В соответствии с другим отличительным признаком смесь включает камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 или их фармацевтически приемлемые соли в массовом соотношении, равном примерно 98:2.
Восьмой вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3)3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими/ нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3) 3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы. (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VI Рота), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3) 3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3)3-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Девятый вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболивания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Asp-Suc-Peg11-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Камптотецин-rvD-Asp-Suc-Peg 11-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости/ дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvD-Asp-Suc-Peg 11-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvD-Asp-Suc-Peg11-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Десятый вариант осуществления двадцать первого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы соматостатина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, нейроэндокринные опухоли, фиброз, доброкачественную гиперплазию предстательной железы, атеросклероз, рестеноз, рак молочной железы, рак ободочной кишки, рак поджелудочной железы, рак предстательной железы, рак легкого, мелкоклеточный рак легкого, рак яичника, эпидермальный рак, неходжкинскую лимфому, ходжкинскую лимфому, лейкоз и рак системы кроветворения. Камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения медуллярных опухолей надпочечника (феохромацитомы, нейробластомы, ганглионевромы), опухолей желудка, кишечника и поджелудочной железы (GEP) (глюкагономы, вазоактивной полипептидсекретирующей опухоли кишечника (VIPoma), гормонально-неактивных опухолей GEP), параганглиомы, аденомы гипофиза, астроцитомы, доброкачественных и злокачественных опухолей кости, дифференцированной карциномы щитовидной железы (папиллярной карциномы, фолликулярной карциномы, оксифильной карциномы), менингиомы, немелкоклеточного рака легкого и тому подобных. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком молочной железы. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является мелкоклеточным раком легкого. В соответствии с другим отличительным признаком опухоль или рак является раком предстательной железы. Кроме того, камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 , его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция могут быть также использованы для лечения ангиогенных и/или пролиферативных состояний, ассоциированных с образованием новых кровеносных сосудов, которые включают, не ограничиваясь ими, ангиогенез, пролиферативную диабетическую ретинопатию, кистозную опухоль желтого пятна, ревматоидный артрит, эндометриоз, рестеноз и псориаз. Дополнительные состояния или заболевания, на которые камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, его фармацевтически приемлемая соль или вышеописанная фармацевтическая композиция оказывают благоприятное воздействие, включают, не ограничиваясь ими, аутоиммунные заболевания (болезнь Грейвса, офтальмопатию Грейвса), бактериальную пневмонию, инсульт, фиброзную дисплазию, гранулемы (туберкулез, саркоид) и лучевой пневмонит.
Двадцать вторым объектом настоящего изобретения являются цитотоксическая часть и часть, обеспечивающая направленную доставку лекарственного средства, формулы II:
где:
А означает камптотецин или производное камптотецина;
С означает D 1-D2-D3-D4, где
D1 означает глутарил, сукцинил или отсутствует;
D2 означает (Doc)m, где m в каждом случае независимо означает 4, 5, 6 или [Ред]х, где х в каждом случае независимо означает 0-100;
D3 означает (Аера)пг, где п в каждом случае независимо означает 0 или 1; и
D4 означает Ahx, Nle, Apn-Asn, Arg-D-Ala-D-Tyr, Gaba-Asn, Gaba-D-Ser-D-Tyr, Leu-Gaba, Lys-D-Ser-D-Tyr, Nle или D-Ser-D-Tyr;
E означает аналог бомбезина формулы
Gln-Trp-Ala-Val-
-Ala-His-Leu-Nle-R (SEQ ID NO:3),
где R означает NH2 или ОН;
или их фармацевтически приемлемая соль.
Первый вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к соединениям формулы (II), содержащим часть камптотецина, выбираемую из группы, включающей:
где пунктирной линией "---" отмечена точка присоединения камптотецина ко второй части, например линкеру или пептиду.
Второй вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к любому из нижеследующих соединений:
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-Nle-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:4);
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-Ahx-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:5);
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-Leu-Gaba-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:6);
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-Gaba-Asn-GIn-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:7);
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-Apn-Asn-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:8);
камптотецин-rvGly-Suc- (Doc)4-Lys-D-Ser-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2;
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Arg-D-Ala-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2;
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Ser-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2;
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-Gaba-D-Ser-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2;
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Третий вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к соединению:
камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-Nle-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:4)
или к его фармацевтически приемлемой соли.
Соединения формулы II по настоящему изобретению являются по существу чистыми соединениями. По существу чистые соединения представляют собой соединения, содержащие примерно 98% или более идентичных молекул формулы IA или IB и примерно 2% или менее неидентичных молекул, то есть примесей, неполных молекул, промежуточных молекул или энантиомерных форм. По существу чистые соединения включают, конечно, соединения, содержащие примерно 99%, 99,5%, 99,8%, 99,9% или более идентичных молекул и примерно 1%, 0,5%, 0,2%, 0,1% или менее неидентичных молекул. По существу чистые соединения включают также соединения, содержащие 100% идентичных молекул.
Четвертый вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к фармацевтической композиции, содержащей терапевтически эффективное количество соединения формулы (II) по любому из вышеописанных вариантов осуществления изобретения или его фармацевтически приемлемой соли и фармацевтически приемлемый носитель.
Пятый вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (II), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы бомбезина одного или нескольких типов.
Шестой вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу уменьшения размера опухоли у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (II), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое уменьшает размер опухоли у субъекта.
Седьмой вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу ингибирования нежелательной пролиферации опухолевых клеток у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (II), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое ингибирует нежелательную пролиферацию опухолевых клеток у субъекта.
Восьмой вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу оказания агонистического воздействия на рецептор бомбезина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (II), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом терапевтически эффективное количество является таким количеством, которое оказывает агонистическое воздействие на рецептор бомбезина у субъекта.
Девятый вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу оказания агонистического воздействия на рецептор бомбезина у нуждающегося субъекта, который включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (II), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом указанным соединением является камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Arpa-Nle-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID N0:4).
Десятый вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества соединения формулы (II), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы бомбезина одного или нескольких типов. Кроме того, настоящее изобретение относится к конъюгату цитотоксического средства с пептидом, являющимся биологически активным аналогом природного бомбезина, имеющего активный центр, отвечающий за связывание бомбезина с рецептором клетки-мишени. В частности, конъюгаты цитотоксического средства с бомбезином формулы (II) являются подходящими для лечения всех форм рака, в которых родственные бомбезину вещества действуют в качестве аутокринных или паракринных митотических факторов, в частности, аденокарциномы и мелкоклеточного рака легкого.
Одиннадцатый вариант осуществления девятнадцатого объекта настоящего изобретения относится к способу лечения заболевания или состояния у нуждающегося субъекта, который включает введение указанному субъекту терапевтически эффективного количества камптотецин-rvGly-Suc-(Doc)4-Aepa-Nle-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:4), его фармацевтически приемлемой соли или вышеописанной фармацевтической композиции, при этом заболевание или состояние характеризуется нежелательной пролиферацией клеток, экспрессирующих рецепторы бомбезина одного или нескольких типов, таких как опухолевые или раковые клетки. Типичные заболевания или состояния включают, не ограничиваясь ими, мелкоклеточный рак легкого и рак поджелудочной железы.
В используемом здесь значении термины "около" или "примерно" служат для обозначения указанного значения ±5%.
В используемом здесь значении термин аминокислота означает любые природные и неприродные аминокислоты, которые включают, не ограничиваясь ими, 
-аминокислоты, -аминокислоты, 
-аминокислоты и могут быть D-аминокислотами или L-аминокислотами за исключением особо оговоренных случаев. За исключением N-концевой аминокислоты все аббревиатуры (например, Ala) аминокислот в настоящем описании изобретения определяют структуру -NH-C(R)(R')-CO-, где R и R' независимо означают водород или боковую цепь аминокислоты (например, R = СН3 и R' = Н для Ala) или R и R' могут быть связаны с образованием кольцевой системы. Для N-концевой аминокислоты аббревиатуры определяют структуру (R2 R3)-N-C-(R)(R')-CO-, где R2 и R 3 имеют значения, указанные в формуле (IA), формуле (IB) или формуле (II).
Иллюстративный перечень предпочтительных аминокислот включает, не ограничиваясь ими, Abu, Acc (где Acc означает А3с, А4с, А5с или А6с), Act, Adc, Ado, Ahp, Ahx, Aib, Ala, -Ala, Anc, Anc, Aoc, Apc, Apn, Arg, hArg, Asp, Asn, Aun, Caeg, Cha, Cit, Cys, Dab, Dap, Dap(Z), D-Dap(Z), Dhp, Dmt, 2-Fua, Gaba, Gln, Gly, Glu, pGlu, His, 3-Hyp, 4-Hyp, Ile, Inc, Inp, Ktp, Leu, hLeu, Lys, Met, Nle, Nva, Oic, Orn, 4-Pal, 3-Pal, 2-Pal, Phe, hPhe, Phg, Pip, Pro, Ser, Taz, 2-Thi, 3-Thi, Thr, Thz, Tle, Tic, Trp, Tyr, Sar, Val или D-Val.
Пептидная часть соединений по настоящему изобретению может быть также определена в настоящем описании изобретения другой формулой, например (Tyr 11)соматостатин(1-14)-NH2, при этом замещенные аминокислоты из природной последовательности, указанные в первых скобках (например, (Tyr11)соматостатин(1-14)-NH 2, показывают, что фенилаланин в положении 11-го остатка в последовательности нативного соматостатина был заменен тирозином, то есть H-Ala-Gly-Cys-Lys-Asn-Phe-Phe-Trp-Lys-Thr-Phe-Thr-Ser-Cys-OH). Числа, указанные во вторых скобках, означают число аминокислот, присутствующих в пептиде (например, соматостатин(1-11) означает аминокислоты 1-11 пептидной последовательности соматостатина). Обозначение NH2 , например, в (Tyr11)соматостатин(1-14)-NH 2 показывает, что С-конец пептида амидирован, в то время как (Tyr11)соматостатин(1-14)-ОН означает свободную кислоту.
Алкил означает углеводородную группу, содержащую один или несколько атомов углерода, причем при наличии нескольких атомов углерода указанные атомы углерода связаны простыми связями, и примеры таких групп включают, не ограничиваясь ими, метил, этил, пропил и бутил. Алкильная углеводородная группа может иметь прямую цепь или содержать одно или несколько ответвлений или циклических групп, примеры которых включают, не ограничиваясь ими, изопропил или трет-бутил.
Замещенный алкил означает алкил, в котором один или несколько атомов водорода углеводородной группы замещены одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген (то есть фтор, хлор, бром и иод), -ОН, -CN, -SH, -NH2, -NHCH3 , NO2, -C1-2 алкил, замещенный 1-6 атомами галогена, -CF3, -OCH3, -OCF3 и/или -(CH2)0-4-COOH. В других вариантах осуществления изобретения присутствуют 1, 2, 3 или 4 заместителя. Наличие -(СН2)0-4-СООН вызывает образование алкилзамещенной кислоты. Примеры алкилзамещенных кислот, содержащих -(СН2)0-4-СООН, включают, не ограничиваясь ими, 2-норборнануксусную кислоту, трет-масляную кислоту и 3-циклопентилпропионовую кислоту.
Гетероалкил означает алкил, в котором один или несколько атомов углерода в углеводородной группе замещены одним или несколькими следующими атомами или группами: амино, амидо, -О-, -S-, -N- или карбонил. В других вариантах осуществления изобретения присутствуют 1 или 2 гетероатома.
Замещенный гетероалкил означает гетероалкил, в котором один или несколько атомов водорода в углеводородной группе замещены одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген (то есть фтор, хлор, бром и иод), -ОН, -CN, -SH, -NH2, NHCH3, -NO2, -C1-2 алкил, замещенный 1-6 атомами галогена, -CF3, -OCH3, -OCF 3 и/или -(СН2)0-4-СООН. В других вариантах осуществления изобретения присутствуют 1, 2, 3 или 4 заместителя.
Алкенил означает углеводородную группу, образованную двумя или более атомами углерода при наличии одной или нескольких углерод-углеродных двойных связей, и примеры таких групп включают, не ограничиваясь ими, винил, аллил, бутенил и пропенил. Алкенильная углеводородная группа может иметь прямую цепь или содержать одно или несколько ответвлений или циклических групп, примеры которых включают, не ограничиваясь ими, н-бутенил по сравнению с трет-бутенилом и н-пентенил по сравнению с циклопентенилом.
Замещенный алкенил означает алкенил, в котором один или несколько атомов водорода замещены одним или несколькими заместителями, выбираемыми из группы, включающей галоген (то есть фтор, хлор, бром и иод), -ОН, -CN, -SH, -NH2, -NHCH3, -NO2 , -C1-2 алкил, замещенный 1-6 атомами галогена, -CF 3, -OCH3, -OCF3 и/или -(CH2 )0-4-COOH. В других вариантах осуществления изобретения присутствуют 1, 2, 3 или 4 заместителя.
Арил означает необязательно замещенную ароматическую группу, включающую по меньшей мере одно кольцо, имеющее конъюгированную систему -электронов, содержащую до двух конъюгированных или конденсированных кольцевых систем. Арил включает, не ограничиваясь ими, карбоксильные арильные, гетероциклические арильные и биарильные группы. Арил предпочтительно является 5- или 6-членным кольцом. Предпочтительные атомы для гетероциклического арила включают, не ограничиваясь ими, один или несколько атомов серы, кислорода и/или азота. Примеры арила включают, не ограничиваясь ими, фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, индол, хинолин, 2-имидазол и 9-антрацен. Заместители арила выбирают из группы, включающей -С(1-4) алкил, -С(1-4) алкокси, галоген (то есть фтор, хлор, бром и иод), -ОН, -CN, -SH, -NH2, -NO2, -C(1-2) алкил, замещенный 1-5 атомами галогена, -CF3, -OCF3 и -(СН2)0-4-СООН. В других вариантах осуществления изобретения арил содержит 0, 1, 2, 3 или 4 заместителя.
Алкиларил означает алкил , присоединенный к вышеуказанному арилу .
Термин циклоалкил означает моноциклоалкильную группу или бициклоалкильную группу с определенным числом атомом углерода, известным специалистам в данной области.
Термин гетероцикл означает моноциклические и бициклические системы, содержащие один или несколько гетероатомов, таких как атомы кислорода, азота и/или серы. Кольцевые системы могут быть ароматическими, такими как, например, пиридин, индол, хинолин, пиримидин, тиофен (известный также как тиенил), фуран, бензотиофен, тетразол, дигидроиндол, индазол, N-формилиндол, бензимидазол, тиазол и тиадиазол. Кольцевые системы могут быть также неароматическими, включая, но не ограничиваясь ими, такие группы, как, например, пирролидин, пиперидин, морфолин и тому подобные.
Квалифицированному химику должно быть известно, что определенные комбинации содержащих гетероатомы заместителей, указанных в настоящем описании изобретения, служат для определения соединений, являющихся менее устойчивыми в физиологических условиях. Такие соединения являются менее предпочтительными.
В структурах, иллюстрированных ниже и приведенных в настоящем описании изобретения, пунктирной линией --- отмечена точка присоединения определяющей части, например камптотецина, ко второй части, например линкеру или пептиду.
Ниже для удобства рассмотрения приведен список некоторых аббревиатур, использованных в настоящей заявке, однако любые аббревиатуры, определение которых не дано в настоящем описании изобретения, не противоречат общепринятым значениям.
Doc означает 8-амино-3,6-диоксаоктановую кислоту, имеющую структуру:
Аера означает 4-(2-аминоэтил)1-карбоксиметилпиперазин, имеющий структуру:
Suc или сукцинил имеет структуру:
Glut или глутарил имеет структуру:
Часть камптотецина имеет структуру:
Части производного камптотецина включают, не ограничиваясь ими, следующие структуры:
SN38 имеет структуру:
D-Lys(-) имеет структуру:
D-Orn(-) имеет структуру:
D-Dab(-) имеет структуру:
D-Dap(-) имеет структуру:
D-Apa(-) имеет структуру:
Некоторые аббревиатуры, использованные в настоящем описании изобретения, имеют следующие значения:
| Abu | -аминомасляная кислота |
| Асс | 1-амино-1-цикло(С 3-С9)алкилкарбоновая кислота, где А3с означает 1-амино-1-циклопропанкарбоновую кислоту; А4с означает 1-амино-1-циклобутанкарбоновую кислоту; А5с означает 1-амино-1-циклопентанкарбоновую кислоту; А6с означает 1-амино-1-циклогексанкарбоновую кислоту |
| Act | 4-амино-4-карбокситетрагидропиран, имеющий структуру: |
| где в данном случае и во всех других случаях, представленных в настоящей заявке, параллельными линиями = отмечены точки присоединения данной части к другой части или последовательности. | |
| Aib | -аминоизомасляная кислота |
| Ala или А | аланин |
| -Ala | бета-аланин |
| Арс | означает структуру: |
| Arg или R | аргинин |
| hArg | гомоаргинин |
| Asn или N | аспарагин |
| Asp или D | аспарагиновая кислота |
| Apn | 5-аминопентановая кислота |
| Cha | -циклогексилаланин |
| Cys или С | цистеин |
| Dab | 2,4-диаминомасляная кислота |
| Dap | 2,3-диаминопропионовая кислота |
| Dhp | 3,4-дегидропролин |
| Dmt | 5,5-диметилтиазолидин-4-карбоновая кислота |
| Doc | 8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота, имеющая структуру: |
| 2-Fua | -(2-фурил)аланин |
| Gln или Q | глутамин |
| Glu или Е | глутаминовая кислота |
| pGlu или Glp | пироглутаминовая кислота |
| Gly или G | глицин |
| His или Н | гистидин |
| 3-Hyp | транс-3-гидрокси-L-пролин, то есть (2S,3S)-3-гидроксипирролидин-2-карбоновая кислота |
| 4-Hyp | 4-гидроксипролин, то есть (2S,4R)-4-гидроксипирролидин-2-карбоновая кислота |
| Ile или I | изолейцин |
| Inc | индолин-2-карбоновая кислота |
| Inp | изонипекотиновая кислота |
| Ktp | 4-кетопролин |
| Leu или L | лейцин |
| hLeu | гомолейцин |
| Lys или К | лизин |
| Met или M | метионин |
| Nle | норлейцин |
| N | означает, что группа, указанная в скобках, присоединена к атому азота в эпсилон-положении боковой цепи лизина |
| Nva | норвалин |
| Oic | октагидроиндол-2-карбоновая кислота |
| Orn | орнитин |
| 2-Pal | -(2-пиридил)аланин |
| 3-Pal | -(3-пиридил)аланин |
| 4-Pal | -(4-пиридил)аланин |
| Peg11 |  |
| Peg |  |
| где w в каждом случае независимо означает 2-100, и, когда w равно 2, данная структура определяется как Peg3 | |
| Phe или F | фенилаланин |
| hPhe | гомофенилаланин |
| Pip | пипеколиновая кислота |
| Pro или Р | пролин |
| Sar | саркозин или N-метилглицин |
| Ser или S | серин |
| Taz | -(4-тиазолил)аланин, имеющий структуру: |
| 2-Thi | -(2-тиенил)аланин |
| 3-Thi | -(3-тиенил)аланин |
| Thr или Т | треонин |
| Thz | тиазолидин-4-карбоновая кислота |
| Tic | 1,2,3,4-тетрагидроизохинолин-3-карбоновая кислота |
| Tle | трет-лейцин |
| 3-(I)Tyr | 3-иодтирозин |
| 3-(I)Tyr(Dop2) | имеющий структуру: |
| Val или V | валин |
| Gaba | 4-аминомасляная кислота |
| Apn | 5-аминопентановая кислота |
| Ahx | 6-аминогексановая кислота |
| Ahp | 7-аминогептановая кислота |
| Аос | 8-аминооктановая кислота |
| Anc | 9-аминононановая кислота |
| Adc | 10-аминодекановая кислота |
| Aun | 11-аминоундекановая кислота |
| Ado | 12-аминододекановая кислота |
| Phg | фенилглицин |
| Caeg | N-(2-аминоэтил)-N-(2-цитозинил-1-оксоэтил)глицин, имеющий структуру: |
| rv(AA) | указанная аминокислота, присоединенная в соединении в обратной ориентации, например, |
| камптотецин-rvD-Asp-Suc- или CPT-rvD-Asp-Suc- имеет структуру: |
| камптотецин-rvD-Asp- или CTP-rvD-Asp- имеет структуру: |
| камптотецин-rvAsp-Suc- или CPT-rvAsp-Suc- имеет структуру: |
| камптотецин-rvAsp- или CPT-rvAsp- имеет структуру: |
Некоторые другие аббревиатуры, использованные в настоящем описании изобретения, имеют следующие значения:
| Aloc | аллилоксикарбонил |
| Вос | трет-бутилоксикарбонил |
| Bhoc | бензгидрилоксикарбонил |
| Bzl | бензил |
| DCM | дихлорметан |
| Dde | 1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогекс-1-илидин)этил] |
| DIC | N,N-диизопропилкарбодиимид |
| DIEA | диизопропилэтиламин |
| Dmab | 4-{N-(1-(4,4-диметил-2,6-диоксоциклогексилиден)-3-метилбутил)амино}бензил |
| DMAP | 4-(диметиламино)пиридин |
| DMF (ДМФА) | диметилформамид |
| DNP | 2,4-динитрофенил |
| et | этил |
| Fmoc | флуоренилметилоксикарбонил |
| HATU | гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония |
| HBTU | гексафторфосфат 2-(1Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония |
| cHex | циклогексил |
| HOAT | гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-1,1,3,3-тетраметилурония |
| HOBt | 1-гидроксибензотриазол |
| МВНА | 4-метилбензгидриламин |
| Mmt | 4-метокситритил |
| NMP | N-метилпирролидон |
| Pbf | 2,2,4,6,7-пентаметилдигидробензофуран-5-сульфонил |
| tBu | трет-бутил |
| TIS | триизопропилсилан |
| TOS | тозил |
| Trt | тритил |
| TFA (ТФУ) | трифторуксусная кислота |
| TFFH | гексафторфосфат тетраметилфторфорамидиния |
| Z | бензилоксикарбонил |
Краткое описание чертежей
Фигура 1. Воздействие соединений по примерам 5 В и 5С на модель опухоли мелкоклеточного рака легкого NCI-H69 у самок бестимусных "голых" мышей. Подавление роста опухоли in vivo у мышей (qwk ×3, внутривенное введение; модель ксенотрансплантатс SCLS NCI-H69), которым вводили смеси соединений камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 в массовых соотношениях 87,8:13,2 (обращенный вниз треугольник, пример 5 В) или 96,8:3,2 (обращенный вверх треугольник, пример 5С).
Фигура 2. Воздействие соединения по примеру 5С на модель опухоли хронического миелогенного лейкоза человека К562 у самок бестимусных "голых" мышей. Подавление роста опухоли in vivo у мышей (qwk ×3, внутривенное введение; модель ксенотрансплантата К562 HCML), которых не подвергали лечению (кружок), которым вводили 165,6 мг/кг (квадрат), 138 мг/кг (обращенный вниз треугольник), 55,2. мг/кг (обращенный вверх треугольник) соединения по примеру 5С или 7,5 мг/кг камптотецина (ромб).
Фигура 3. Воздействие соединения по примеру 5С на модель опухоли мелкоклеточного рака легкого SCLC H345 у самок бестимусных "голых" мышей. Подавление роста опухоли in vivo у мышей (qwk × 3, внутривенное введение; модель ксенотрансплантата SCLC H345), которых не подвергали лечению (кружок), которым вводили 165,6 мг/кг (квадрат), 138 мг/кг (обращенный вниз треугольник), 55,2 мг/кг (обращенный вверх треугольник) соединения по примеру 5С или 7,5 мг/кг камптотецина (ромб).
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к цитотоксическим соединениям направленного действия, включающим цитотоксическую часть, связанную с частью, обеспечивающей направленную доставку лекарственного средства, такой как, например, лиганд биологического рецептора, и к способам их терапевтического применения для лечения неоплазии, гиперплазии и других состояний, связанных с нежелательной пролиферацией клеток.
В настоящем описании изобретения представлены примеры пептидов соматостатина, подходящих для использования в настоящем изобретении. Другие примеры включают соединения, выраженные формулами или рассмотренные в приведенных ниже публикациях, которые полностью включены в настоящее описание изобретения в качестве ссылки.
Заявка согласно РСТ № WO 03/057214 (2003)
Заявка на патент США № 20030191134 (2003)
Заявка на патент США № 20030083241 (2003)
Патент США № 6316414 (2001)
Заявка согласно РСТ № WO 02/10215 (2002)
Заявка согласно РСТ № WO 99/22735 (1999)
Заявка согласно РСТ № WO 98/08100 (1998)
Заявка согласно РСТ № WO 98/44921 (1998)
Заявка согласно РСТ № WO 98/45285 (1998)
Заявка согласно РСТ № WO 98/44922 (1998)
Заявка на европейский патент № Р5 163 EU (Изобретатель G. Keri) Van Binst, G. et al, Peptide Research, 1992, 5:8; Horvath, A. et al., Abstract, "Conformations of Somatostatin Analogs Having Antitumor Activity", 22nd European peptide Symposium, September 13-19, 1992, Interlaken, Switzerland;
Заявка согласно РСТ № WO 91/09056 (1991)
Заявка на европейский патент № 0363589 А2 (1990)
Патент США № 4904642 (1990)
Патент США № 4871717 (1989)
Патент США № 4853371 (1989)
Патент США № 4725577 (1988)
Патент США № 4684620 (1987)
Патент США № 4650787 (1987)
Патент США № 4603120 (1986)
Патент США № 4585755 (1986)
Заявка на европейский патент № 0203031 А2 (1986)
Патент США № 4522813 (1985)
Патент США № 4486415 (1984)
Патент США № 4485101 (1984)
Патент США № 4435385 (1984)
Патент США № 4395403 (1983)
Патент США № 4369179 (1983)
Патент США № 4360516 (1982)
Патент США № 4358439 (1982)
Патент США № 4328214 (1982)
Патент США № 4316890 (1982)
Патент США № 4310518 (1982)
Патент США № 4291022 (1981)
Патент США № 4238481 (1980)
Патент США № 4235886 (1980)
Патент США № 4224199 (1980)
Патент США № 4211693 (1980)
Патент США № 4190648 (1980)
Патент США № 4146612 (1979)
Патент США № 4133782 (1979)
Патент США № 5506339 (1996)
Патент США № 4261885 (1981)
Патент США № 4728638 (1988)
Патент США № 4282143 (1981)
Патент США № 4215039 (1980)
Патент США № 4209426 (1980)
Патент США № 4190575 (1980)
Европейский патент № 0389180 (1990)
Заявка на европейский патент № 0505680 (1982)
Заявка на европейский патент № 0083305 (1982)
Заявка на европейский патент № 0030920 (1980)
Заявка согласно РСТ WO 88/05052 (1988)
Заявка согласно РСТ № WO 90/12811 (1990)
Заявка согласно РСТ № WO 97/01579 (1997)
Заявка согласно РСТ № WO 91/18016 (1991)
Заявка на патент Великобритании № GB 2095261 (1981)
Заявка на патент Франции № FR 2522655 (1983) и
Заявка согласно РСТ № WO 04/093807 (2004)
В настоящем описании изобретения представлены примеры пептидов бомбезина, являющихся подходящими для использования в настоящем изобретении. Другие примеры включают соединения, выраженные формулами или рассмотренные в приведенных ниже публикациях, которые полностью включены в настоящее описание изобретения в качестве ссылки.
Заявка на европейский патент № 0309297 (1989)
Заявка на европейский патент № 0339193 (1989)
Заявка на европейский патент № 0402852 (1990)
Заявка на европейский патент № 0434979 (1991)
Заявка на европейский патент № 0468497 (1992)
Заявка на европейский патент № 0835662 (1998)
Заявка на патент США № 2003050436 (2003)
Заявка на патент США № 2003166539 (2003)
Патент США № 5084555 (1992)
Патент США № 5100873 (1992)
Патент США № 5217955 (1993)
Патент США № 5369094 (1994)
Патент США № 5410018 (1995)
Патент США № 5620955 (1997)
Патент США № 5723578 (1998)
Патент США № 5843903 (1998)
Патент США № 5877277 (1999)
Патент США № 6156725 (2000)
Патент США № 6307017 (2001)
Заявка согласно РСТ № WO 90/03980 (1990)
Заявка согласно РСТ № WO 91/06563 (1991)
Заявка согласно РСТ № WO 91/17181 (1991)
Заявка согласно РСТ № WO 94/02018 (1994)
Заявка согласно РСТ № WO 94/21674 (1994)
Заявка согласно РСТ № WO 94/093807 (2004)
Способы синтеза пептидов соматостатина и бомбезина всесторонне описаны в научной литературе и известны специалисту в данной области (например, конкретные способы синтеза соединений, частей и промежуточных продуктов описаны в публикации заявки согласно РСТ № WO 04/093807, которая полностью включена в настоящее описание изобретения в качестве ссылки). Другие способы синтеза описаны в приведенных ниже примерах. Нижеследующие примеры иллюстрируют также способы синтеза цитотоксических соединений направленного действия по настоящему изобретению.
Примеры
Конъюгаты цитотоксических средств по настоящему изобретению включают цитотоксический агент, линкер и пептид, связанные в одной молекуле. Пептидная часть молекулы была синтезирована химическими методами твердофазного синтеза, в то время как цитотоксический агент и линкер были присоединены химическими методами на основе раствора. Конъюгат был образован путем связывания цитотоксического агента с N-концевой частью полипептида при помощи линкера. Конечный продукт был получен в результате расщепления полимера и окисления неочищенного пептида с последующей очисткой ВЭЖХ. Ниже дано более подробное описание синтеза конъюгатов цитотоксических средств по настоящему изобретению.
Пример 1. Получение камптотецин-rvCha-Suc-(Dос)4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Стадия А. Синтез поли-Н-(Dос)4 -Aepa-D-Phe-Cys (Trt)-Тyr(tBu)-D-Trp(Вое)-Lys(Boc)-Abu-Cys(Trt)-Thr(tBu)
Защищенный полипептид был автоматически синтезирован в синтезаторе пептидов Applied Biosystems® модели 433А (компании Applied Biosystems, Foster City, California, U.S.A.) с использованием флуоренилметилоксикарбонила (Fmoc). Полимер Rink Amide МВНА® (4-метилбензгидриламин) (компании Nova Biochem, La Jolla, California, U.S.A.) использовали по шкале концентрации 1 ммоль, заменяемой 0,72 ммоль/г.
Fmoc-8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота (Fmoc-Doc-OH) была приобретена в компании Chem-Impex International® (Wood Dale, IL). Fmoc-4-(2-аминоэтил)-1-карбоксиметилпиперазин 2НСl (Fmoc-Aepa-OH) был приобретен в компании Neosystem® (Strasbourg, France). Fmoc-D-Phe-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-D-Trp(Boc)-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Abu-OH и Fmoc-Thr(tBu)-OH были приобретены в компании AnaSpec® (San Jose, California, U.S.A.).
До выполнения связывания группы Fmoc удаляли путем обработки 20% пиперидина в N-метилпирролидоне (NMP) в течение 30 минут. На каждой стадии связывания Fmoc-аминокислоту (3 эквивалента, 3 ммоль) сначала предварительно активировали, используя 6 мл 0,45 М раствора гексафторфосфата 2-(1-Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,2,3-тетраметилурония/1-гидроксибензотриазола (HBTU/HOBT) в ДМФА. К полимеру добавляли сложный эфир активированной аминокислоты, 3 мл 2 М раствора дииэопропилэтиламина (DIEA) и 3 мл NMP. Синтезатор пептидов ABI 433А® был запрограммирован на выполнение следующего цикла реакций:
(1) промывка N-метилпирролидоном (NMP);
(2) удаление защитной Fmoc группы путем обработки 20% пиперидина в NMP в течение 30 минут;
(3) промывка N-метилпирролидоном (NMP);
(4) дважды выполняемое двойное связывание с предварительно активированной аминокислотой (каждая реакция в течение 1 часа).
Защищенный полипептид, то есть H-D-Phe-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Lys(Boc)-Abu-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Rink Amid МВНА, затем вручную связывали с Fmoc-Aepa-OH и Fmoc-Doc-OH. Связывание с Fmoc-Aepa-OH выполняли, растворяя 2 эквивалента Fmoc-Aepa-OH, 1,8 эквивалента HATU, 2 эквивалента НОАТ и 24 эквивалента DIEA в ДМФА и перемешивали в течение двух минут; смесь сложного эфира активированной аминокислоты/ДМФА встряхивали с защищенным полипептидом в течение 2 часов. Аликвоту полимера тестировали нингидрином, при этом результаты анализа свидетельствовали об окончании реакции. Полимер промывали ДМФА и удаляли защитные Fmoc группы при помощи 25% пиперидина в ДМФА в течение 30 минут. После промывки ДМФА полимер связывали с Fmoc-Doc-OH, используя DIC/HOBT в качестве связующего реагента. При каждом связывании с Fmoc-Doc-OH полимер смешивали с раствором, содержащим 3,2 эквивалента Fmoc-Doc-OH в 0,4 н. растворе HOBT/NMP и 5,3 эквивалента DIC в 0,4 н. растворе DIC/ДМФА, в течение одного часа; реакцию связывания повторяли один раз. Полимер промывали ДМФА и обрабатывали 25% пиперидина/ДМФА для удаления защитной Fmoc группы. После промывки ДМФА и DCM полипептид был готов для связывания с требуемой цитотоксической частью.
Стадия В. Синтез камптотецин-rvCha-янтарной кислоты
В-1. Синтез камптотецин-rvCha-Boc (2)
К охлаждаемой льдом суспензии камптотецина ((1); 1,669 г, 4,79 ммоль) добавляли Вос-L-Cha-OH.H2 O (4,9952 г, 30,995 ммоль), (Cf3SO3) 3Sc (1,6972 г, 3,4485 ммоль) и DMAP (2,119 г, 17,24 ммоль) в DCM (162 мл) и затем DIC (2,958 мл, 18,87 ммоль). Реакционный раствор перемешивали под слоем N2 на бане со смесью соли со льдом в течение 1 часа. Баню со смесью соли со льдом удаляли, реакционную суспензию перемешивали в течение ночи с образованием прозрачного раствора, который затем разбавляли DCM, и последовательно промывали 10% лимонной кислотой (50 мл × 3 промывки), насыщенным раствором NaHCO3 (50 мл × 3 промывки) и насыщенным раствором соли (50 мл × 3 промывки), сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт (2,28 г) отделяли хроматографией на силикагеле и элюировали раствором, содержащим DCM/MeOH, 8/0,2, об./об. Фракции, содержащие чистый продукт, собирали и упаривали в вакууме, получая при этом 1,45 г желтого порошка с выходом 50%. Действительная молекулярная масса камптотецин-rvCha-Boc, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 602,5, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 601,7.
В-2. Синтез соли камптотецин-rvCha-трифторуксусной кислоты (3)
1,45 г (2,41 ммоль) аликвоту камптотецин-rvCha-Boc перемешивали в растворе смеси 16 мл DCM и 16 мл ТФУ в течение 45 минут при комнатной температуре. Смесь упаривали в вакууме. Образовавшийся остаток растирали в простом эфире и полученное твердое вещество отфильтровывали (1,92 г). Действительная молекулярная масса соли камптотецин-rvCha-трифторуксусной кислоты, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 502,7, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 501,7.
В-3. Синтез камптотецин-rvCha-янтарной кислоты
К 40 мл раствора соли камптотецин-rvCha-трифторуксувной кислоты в ДМФА (1,07 г, 1,74 ммоль) добавляли янтарный ангидрид (0,28 г, 2,77 ммоль) и затем TEA (1,16 мл, 8,31 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре и выполняли анализ ВЭЖХ, который свидетельствовал об окончании реакции. Раствор упаривали в вакууме, образовавшийся остаток перемешивали в воде в течение одного часа и осадок собирали фильтрованием. Было получено примерно 0,8642 г продукта. Действительная молекулярная масса камптотецин-rvCha-янтарной кислоты, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 602,7, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 601,1. Выход равен 83%.
Стадия С. Синтез камптотецин-rvCha-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
0,6 ммоль аликвоту полимера, полученного на стадии (А), смешивали с 20 мл раствора ДМФА/DCM (1:1, об./об.), содержащего камптотецин-rvCha-янтарную кислоту (0,397 г, 0,66 ммоль, 1,1 эквивалента), DIC (0,75 мл, 8 эквивалентов), HOAt (0,163 г, 2 эквивалента) и DIEA (3 мл, 20 эквивалентов) в течение 48 часов. Полимер осушали и последовательно промывали ДМФА, МеОН и DCM. Полимер подвергали воздушной сушке и расщепляли в смеси ТФУ, Н2О и TIS (24 мл/2,2 мл/1,92 мл) в течение 2 часов. Полимер отфильтровывали и фильтрат выливали в 300 мл холодного простого эфира. Образовавшийся остаток центрифугировали и собирали. Неочищенный продукт с линейной цепью растворяли в системе растворителей, содержащей 300 мл 5% АсОН и 30 мл CH3CN, в которую по каплям добавляли 0,25 н. раствор иода в МеОН до окрашивания раствора в желтый цвет. Реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа, гасили несколькими каплями 10% водного раствора Na 2SSO3 и фильтровали. Фильтрат очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, используя колонку 4×43 см Cis DYNAMAX-100 ® A° (Varian®, Walnut Creek, California, U.S.A.). Колонку элюировали линейным градиентом от 20% А до 45% В в течение 50 минут, где А означает 0,1% раствор ТФУ в воде и В означает 0,1% раствор ТФУ в СН3СN. Фракции анализировали масс-спектрометрией, и фракции, содержащие требуемый продукт, собирали и подвергали солевому обмену. Собранные фракции анализировали масс-спектрометрией и ВЭЖХ, и фракции, содержащие чистый продукт, собирали и лиофилизовали досуха. Действительная молекулярная масса камптотецин-rvCha-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 2365,6, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 2365,74. Выход равен 99,9%.
Пример 2. Получение камптотецин-rvGlу-Glut-(Dос)6-Lys-D-Туr-D-Tyr-c(Cys-3-(I)Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 3. Получение камптотецин-rvGly-Glut-(Dос)4-Lys-P-Tyr-D-Tyr-c(Cys-3-(I)Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 4. Получение камптотецин-rvGly-Glut-(Dос)4-Lys-D-Tyr-D-Tyr-c(Cys-Phe-Phe-P-Trp-Lys-Thr-Cys)-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 5А. Получение смеси камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Dос) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанный в заголовке конъюгат по существу был синтезирован способом, описанным в примере 1, за исключением получения цитотоксической части молекулы. После синтеза камптотецин-rvAsp(tBu)Вос группу n-boc избирательно удаляли в присутствуии сложного -COOtBu-эфира, используя AcOtBu/BuOH с 4 М раствором НС1 в диоксане. Действительная молекулярная масса, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), приведена в таблице 1 В.
Было установлено, что продукт является смесью примерно 44,2% камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 и 55,8% камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2. Было установлено, что продукт, полученный в результате выполнения второй реакции синтеза, содержит примерно 58,2% камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и 41,8% камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2.
Квалифицированному специалисту должно быть известно, что для последующего выделения форм rvL-Asp или rvD-Asp двух конъюгированных пептидов может быть использована очистка в колонке для хиральной хроматографии.
Пример 5В. Получение смеси камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Dос) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvAsp-Suc-(Dос)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанный в заголовке конъюгат по существу был синтезирован способом, описанным в примере 1, за исключением получения цитотоксической части молекулы. После синтеза камптотецин-rvAsp(tBu)Воc группу N-Boc избирательно удаляли в присутствии сложного -COOtBu-эфира, используя AcOtBu/BuOH с 4 М раствором НСl в диоксане и до конъюгирования с белковой частью выбирали форму rvD-Asp молекулы (пик 1). Действительная молекулярная масса, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной) приведена в таблице 1В.
Было установлено, что продукт является смесью примерно 87,8% камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и 13,2% камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2. Было установлено, что продукт, полученный при выполнении второй реакции, является смесью примерно 87,3% камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и 12,7% камптотецин-rvAsp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2.
Квалифицированному специалисту должно быть известно, что для последующего выделения форм rvL-Asp или rvD-Asp двух конъюгированных пептидов может быть использована очистка в колонке для хиральной хроматографии.
Пример 5С. Получение камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Dос)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Стадия А. Синтез поли-Н-(Dос)4-Aepa-D-Phe-Cys(Trt)-Тyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Lys(Вое)-Abu-Cys(Trt)-Thr(tBu)
Защищенный полипептид был автоматически синтезирован в синтезаторе пептидов Applied Biosystems® модели 433А (Foster City, СА) с использованием флуоренилметилоксикарбонила (Fmoc). Полимер Rink Amide MBHA® (4-метилбензгидриламин; Nova Biochem, La Jolla, CA) использовали по шкале концентрации 1 ммоль, заменяемой 0,72 ммоль/г. Fmoc-8-амино-3,6-диоксаоктановая кислота (Fmoc-Doc-OH) была приобретена в компании Chem-Impex International® (Wood Dale, IL). Fmoc-4-(2-аминоэтил)-1-карбоксиметилпиперазин. 2HCl (Fmoc-Aepa-OH) был приобретен в компании Neosystem® (Strasbourg, France). Fmoc-D-Phe-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-D-Trp(Boc)-OH, Fmoc-Lys(Boc)-OH, Fmoc-Abu-OH и Fmoc-Thr(tBu)-OH были приобретены в компании AnaSpec® (San Jose, CA).
До выполнения связывания группы Fmoc удаляли путем обработки 20% пиперидина в N-метилпирролидоне (NMP) в течение 30 минут. На каждой стадии связывания Fmoc-аминокислоту (3 экв., 3 ммоль) сначала предварительно активировали, используя 6 мл 0,45 М раствора гексафторфосфата 2-(1-Н-бензотриазол-1-ил)-1,1,2,3-тетраметилурония/1-гидроксибензотриазола (HBTU/HOBT) в ДМФА. К полимеру добавляли сложный эфир активированной аминокислоты, 3 мл 2 М раствора диизопропилэтиламина (DIEA) и 3 мл NMP. Синтезатор пептидов ABI 433A® был запрограммирован на выполнение следующего цикла реакций: (1) промывка N-метилпирролидоном (NMP), (2) удаление защитной Fmoc группы при помощи 20% пиперидина в NMP в течение 30 минут, (3) промывка N-метилпирролидоном (NMP) и (4) дважды выполняемое двойное связывание с предварительно активированной аминокислотой при осуществлении каждой реакции в течение 1 часа.
Защищенный полипептид, то есть H-D-Phe-Cys(Trt)-Tyr(tBu)-D-Trp(Boc)-Lys(Boc)-Abu-Cys(Trt)-Thr(tBu)-Rink Amid МВНА, затем вручную связывали с Fmoc-Aepa-OH и Fmoc-Doc-OH. Связывание с Fmoc-Aepa-OH выполняли, растворяя 2 эквивалента Fmoc-Aepa-OH, 1,8 эквивалента HATU, 2 эквивалента НОАТ и 24 эквивалента DIEA в ДМФА и перемешивая в течение двух минут; смесь сложного эфира активированной аминокислоты/ДМФА встряхивали с защищенным полипептидом в течение 2 часов. Аликвоту полимера тестировали нингидрином, при этом результаты анализа свидетельствовали об окончании реакции. Полимер промывали ДМФА и удаляли защитные Fmoc группы при помощи 25% пиперидина в ДМФА в течение 30 минут. Полимер промывали ДМФА и связывали с Fmoc-Doc-OH, используя DIC/HOBT в качестве связующего реагента. При каждом связывании с Fmoc-Doc-OH полимер смешивали с раствором, содержащим 3,2 эквивалента Fmoc-Doc-OH в 0,4 н. растворе HOBT/NMP и 5,3 эквивалента DIC в 0,4 н. растворе DIC/ДМФА, в течение одного часа; реакцию связывания повторяли один раз. Полимер промывали ДМФА и обрабатывали 25% пиперидина/ДМФА для удаления защитной Fmoc группы. После промывки ДМФА и DCM полипептид был готов для связывания с требуемой цитотоксической частью.
Стадия В. Синтез камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-янтарной кислоты
В-1. Синтез камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-NHBoc (2)
К охлаждаемой льдом суспензии камптотецина (1) (1,006 г, 2,889 ммоль) добавляли Boc-D-Asp(OtBu)-OH (2,51 г, 8,67 ммоль), (Cf3SO3)3Sc (0,855 г, 1,733 ммоль) и DMAP (1,061 г, 8,667 ммоль) в DCM (20 мл) и затем DIC (9,1 мл, 1,424 ммоль). Реакционный раствор перемешивали под слоем N2 на бане со смесью соли со льдом в течение 0,5 часа. Баню со смесью соли со льдом удаляли и реакционную суспензию перемешивали в течение 20 минут до образования прозрачного раствора. Выполненный через 1 час анализ ТСХ (DCM/MeOH, об./об. 9/1) свидетельствовал об окончании реакции. Реакционную смесь разбавляли DCM и последовательно промывали 10% лимонной кислотой (50 мл × 3), насыщенным раствором NaHCO3 (50 мл × 3) и насыщенным раствором соли (50 мл × 3), сушили над Na2SO4 и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт (3,19 г) очищали кристаллизацией из 20 мл МеОН, получая при этом 1,4642 г чистого продукта. Выход равен 82%. Действительная молекулярная масса камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-NHBoc, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), равна 620, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 619,7.
В-2. Синтез камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-NH2 .HCl (3)
К суспензии камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-NHBoc (4,89 г, 7,9 ммоль) в трет-BuOH (48 мл) при перемешивании добавляли 4 М раствор HCl в диоксане (59 мл, 30 экв.). После превращения суспензии в прозрачный раствор реакционную смесь продолжали перемешивать в течение 10 минут. Реакционный раствор разбавляли 450 мл простого эфира и перемешивали еще 5 минут. Реакционный раствор фильтровали. Фильтровальный осадок тщательно промывали простым эфиром. Выход равен 100%. Молекулярная масса, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 520 (М+1), 464,2 (М-56), 1039,2 (2М+1), 1557,6 (М+1), что соответствовало вычисленной молекулярной массе, равной 519,9. По результатам ВЭЖХ чистота продукта была равна 92% при наличии 8% камптотецин-rvAsp-NH 2.
В-3. Синтез камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-янтарной кислоты (4)
К раствору камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-NH 2.HCl (4,48 г, 8,05 ммоль) в ДМФА (95 мл) последовательно добавляли янтарный ангидрид (1,2 г, 12 ммоль) и TEA (7,456 мл, 53,85 ммоль). Смесь перемешивали в течение 2 часов при комнатной температуре и выполняли анализ ВЭЖХ, который свидетельствовал об окончании реакции. Раствор упаривали в вакууме. Образовавшийся остаток перемешивали в воде в течение 1 часа и осадок собирали фильтрацией. Продукт сушили в сушильном шкафу (60°С) в вакууме в течение ночи, в результате чего было получено 1,84 г продукта. Действительная молекулярная масса камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-янтарной кислоты (4), определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 620,1, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 619,7. Выход равен 47%.
Стадия С. Синтез камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
0,8 ммоль аликвоту полимера, полученного на стадии (А), смешивали с 20 мл смеси ДМФА/DCM (1:1, об./об.), содержащей камптотецин-rvD-Asp(OtBu)-янтарную кислоту (4) (0,544 г, 0,88 ммоль, 1,1 эквивалента), DIC (1 мл, 8 эквивалентов), HOAt (0,217 г, 2 эквивалента) и DIEA (4 мл, 20 эквивалентов) в течение 48 часов. Полимер осушали и последовательно промывали ДМФА, МеОН и DCM. Полимер подвергали воздушной сушке и расщепляли в смеси ТФУ, Н2О и TIS (24 мл/2,2 мл/1,92 мл) в течение 2 часов. Полимер отфильтровывали и фильтрат выливали в 300 мл холодного простого эфира. Образовавшийся осадок центрифугировали и собирали. Неочищенный продукт с линейной цепью растворяли в системе растворителей, содержащей 350 мл 5% АсОН и 60 мл CH 3CN, по каплям добавляли 0,25 н. раствор иода в МеОН до окрашивания в желтый цвет. Реакционный раствор перемешивали в течение 1 часа, гасили несколькими каплями 10% водного раствора Na2SSO3 и фильтровали. Фильтрат очищали препаративной ВЭЖХ с обращенной фазой, используя колонку 4×43 см C18 DYNAMAX-100® A° (Varian, Walnut Creek, CA). Колонку элюировали линейным градиентом от 20% А до 45% В в течение 50 минут, где А означает 0,1% ТФУ в воде и В означает 0,1% ТФУ в СН3CN. Фракции анализировали масс-спектрометрией, и фракции, содержащие требуемый продукт, собирали и подвергали солевому обмену. Собранные фракции анализировали масс-спектрометрией и ВЭЖХ, и фракции, содержащие чистый продукт, собирали и лиофилизовали досуха. Действительная молекулярная масса камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 2327,3, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 2327,6 (см. таблицу 1В). Выход равен 13,9%.
Пример 6. Получение смеси камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Dос) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и камптотецин-rvGlu-Suc-(Dос)4-Aepa-D-Phe-c(Суs-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1. Было установлено, что полученный продукт является смесью примерно 17% камптотецин-rvD-Glu-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2 и примерно 83% камптотецин-rvGlu-Suc-(Doc)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2.
Пример 7. Получение камптотецин-rvArg-Suc-(Doc) 4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 8. Получение камптотецин-rvDap(Z)-Sue-(Doc)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 9. Получение камптотецин-rvD-Dap(Z)-Sue-(Dос)4 -Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 10. Получение камптотецин-rvPhe-Suc-(Dос)4-Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 11. Получение камптотецин-rvАрn-Suc-(Dос)4-Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 12. Получение камптотецин-rvАpbu-Suc-(Dос)4 -Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 13. Получение камптотецин-rvP-Val-Suc-(Dос)4 -Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 14. Получение камптотецин-rvAla-Suc-(Dос)4-Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 15. Получение камптотецин-rvVal-Suc-(Dос)4-Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 16. Получение камптотецин-Glut-(Dос)4-Aepa-D-Phe-с(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 17. Получение камптотецин-rvAnc-Suc-(Dос)4-Aepa-D-Phe-цикло(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 18. Получение камптотецин-rvAhp-Suc-(Dос)4-Aepa-D-Phe-цикло(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 19. Получение SN38-rvGly-Suc-(Dос)4-Aepa-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2
Указанный в заголовке конъюгат по существу был синтезирован способом, описанным для синтеза по примеру 1. Bz-SN38 был использован в качестве цитотоксической части. Часть BZ-SN38-rvGly-янтарной кислоты молекулы была синтезирована способом, описанным на стадии В для синтеза камптотецин-гуСпа-янтарной кислоты. Защитную Bz группу удаляли гидрированием и SN38-rvGly-янтарную кислоту связывали с требуемым полипептидом. В результате выполнения анализа ВЭЖХ было установлено, что конечный продукт является гомогенным. Действительная молекулярная масса, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 2315,6, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 2315,7.
Пример 20. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос)4-Aepa-Nle-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:4)
Указанный в заголовке конъюгат по существу был синтезирован способом, описанным для синтеза по примеру 1. В результате выполнения высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) было установлено, что продукт является гомогенным. Действительная молекулярная масса, определенная масс-спектрометрией (электрораспылительной), была равна 2286,5, что соответствует вычисленной молекулярной массе, равной 2286,6.
Пример 21. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Doc) 4-Aepa-Ahx-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:5)
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 22. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос)4-Aepa-Leu-Gaba-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:6)
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 23. Получение камптотецин-rvGly-Suc- (Dос)4-Aepa-Gaba-Asn-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2 (SEQ ID NO:7)
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 24. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос)4-Аера-Арn-Asn-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NHg (SEQ ID NO:8)
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 25. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос) 4-Lys-D-Ser-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 26. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос) 4-Arg-P-Ala-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 27. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос) 4-Аера-D -Ser-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val- -Ala-His-Leu-Nle-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 28. Получение камптотецин-rvGly-Suc-(Dос) 4-Aepa-Gaba-D-Ser-D-Tyr-Gln-Trp-Ala-Val-P-Ala-His-Leu-Nle-NH 2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 29. Получение камптотецин-rvD-Asp-Suc-(Реg3)3 -Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 30. Получение камптотецин-rvD-Аsp-Suc-Реg11 -Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
Пример 31. Получение камптотецин-rvP-Glu-Suc-(Dос)4 -Аера-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH2
Указанное в заголовке соединение по существу было синтезировано способом, описанным в примере 1.
В таблицах 1А, 1В и 1С приведены значения вычисленной молекулярной массы, действительной молекулярной массы и чистоты соединений по примерам 1-31.
| Таблица 1А | |||
| Пример | Чистота (%) | Действительная молекулярная масса | Вычисленная молекулярная масса |
| 1 | 99 | 2364,6 | 2365,74 |
| 2 | 99 | 2837,9 | 2837,93 |
| 3 | 99 | 2547,6 | 2547,61 |
| 4 | 99 | 2467,8 | 2467,79 |
| 6 | 94,2 | 2340,8 | 2341,63 |
| 7 | 92,3 | 2367,9 | 2368,71 |
| 8 | 99 | 2431,9 | 2432,75 |
| 9 | 99 | 2431,9 | 2432,75 |
| 10 | 99 | 2358,6 | 2359,70 |
| 11 | 99 | 2310,8 | 2311,65 |
| 12 | 99 | 2296,9 | 2297,62 |
| 13 | 99,9 | 2310,9 | 2311,65 |
| 14 | 99,9 | 2282,9 | 2283,60 |
| 15 | 99 | 2310,9 | 2311,65 |
| 16 | 96,8 | 2226,0 | 2226,55 |
| 17 | 99 | 2367,1 | 2367,76 |
| 18 | 99 | 2339,2 | 2339,71 |
| 19 | 98,6 | 2313,2 | 2313,62 |
| 20 | 99 | 2286,5 | 2286,60 |
| 21 | 99 | 2286,5 | 2286,60 |
| 22 | 99 | 2372,0 | 2371,71 |
| 23 | 99 | 2372,8 | 2372,69 |
| 24 | 99 | 2386,7 | 2386,68 |
| 25 | 99,9 | 2382,1 | 2382,64 |
| 26 | 97,6 | 2394,2 | 2394,66 |
| 27 | 99,9 | 2423,3 | 2423,69 |
| 28 | 99,9 | 2508,5 | 2508,50 |
| Таблица 1В | ||||
| Пример | Чистота (%) | Действительная молекулярная масса | Вычисленная молекулярная масса | Соотношение D/L изомеров |
| 5А | 99,9 | 2327,5 | 2327,61 | 58,2:41,8 |
| 5В | 97,8 | 2327,3 | 2327,61 | 87,8:13,2 |
| 5С | 99,0 | 2327,3 | 2327,61 | 96,8:3,2 |
| Таблица 1С | |||
| Пример | Чистота (%) | Действительная молекулярная масса | Вычисленная молекулярная масса |
| 29 | 99,9 | 2314,40 | 2314,61 |
| 30 | 99,9 | 2346,60 | 2346,69 |
| 31 | 100 | 2341,80 | 2341,63 |
Биологические анализы
Определение периодов полувыведения
Образцы, содержащие от около 50 мкг/мл до около 500 мкг/мл включительно испытуемого соединения формулы IA, IB или II, добавляли к 450 мкл плазмы человека или мыши, интенсивно перемешивали в течение короткого периода времени и инкубировали при 37°С. Через разные периоды времени, например через 0, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 24, 36 и 48 часов, к 150 мкл ацетонитрила в микроцентрифужной пробирке добавляли 50 мкл смеси соединения с плазмой. Смесь интенсивно перемешивали, центрифугировали в течение 5 минут со скоростью 10000 оборотов/мин и 135 мкл супернатанта переносили в ампулу для инъекций. Полученный супернатант анализировали в системе для выполнения жидкостной хроматографии и масс-спектрофотометрии (ЖХ-МС), состоящей из масс-спектрометра Finnigan Deca XP® и зонда для электрораспылительной ионизации (ESI), действующего в режиме положительно заряженных ионов. Разделение методом ВЭЖХ выполняли в колонке Luna 3 мкм С8 (2)® 3 × 50 мм с градиентом, уменьшающимся с 100% А до 80% В в течение 10 минут, при скорости потока 0,25 мл/мин. Буфер А представлял собой 0,1% раствор уксусной кислоты в воде и буфер В представлял собой 0,1% раствор уксусной кислоты в ацетонитриле. Данные для периодов полувыведения приведены в таблицах 2А и 2В.
| Таблица 2А | |||
| Пример | Период полувыведения в плазме мыши (часы) | Период полувыведения в плазме человека (часы) | Значение РК Т1/2 мыши in vivo (часы) |
| 1 | 2,0 | 4,7 | 1,5 |
| 2 | 4,6 | 2,2 | |
| 3 | 5,7 | 3,8 | |
| 4 | 4,4 | 3,2 | |
| 6 | 13,1 | 10,7 | |
| 7 | 1,2 | 1,5 | |
| 8 | 2,2 | 0,7 | |
| 9 | 1,7 | 0,7 | |
| 10 | 2,4 | 0,3 | |
| 11 | 3,7 | 5,0 | |
| 12 | 6,0 | 0,7 | |
| 13 | 7,7 | 0,3 | |
| 14 | 4,6 | 1,3 | |
| 15 | 5,0 | 0,4 | |
| 16 | 4,2 | 3,6 | |
| 17 | 15,6 | 28,6 | |
| 18 | 16,2 | 8,0 | |
| 19 | 2,6 | 6,9 | 1,2 |
| 20 | 2,8 | 4,8 | |
| 21 | 5,4 | 3,2 | |
| 22 | 2,1 | 1,8 | |
| 23 | 2,9 | 4,2 | |
| 24 | 2,6 | 4,6 | |
| 25 | 2,6 | 2,4 | |
| 26 | 1,8 | 1,4 | |
| 27 | 3,8 | 4,5 | |
| 28 | 2,9 | 1,9 |
| Таблица 2В | |||
| Пример | Период полувыведения в плазме мыши (часы) | Период полувыведения в плазме человека (часы) | Соотношение D/L изомеров |
| 5А | 20,8 | 10,8 | 58,2:41,8 |
| 5В | 27,5 | 10,3 | 87,8:13,2 |
| Таблица 2С | ||
| Пример | Период полувыведения в плазме мыши (часы) | Период полувыведения в плазме человека (часы) |
| 29 | 44,1 | 9,3 |
Анализы связывания радиолиганда с рецепторами соматостатина
Мембраны для анализов связывания с рецепторами in vitro были получены путем гомогенизации (устройство Polytron с установкой 6, 15 сек) клеток СНО-К1, экспрессирующих рецепторы соматостатина человека подтипов hSSTR-1, hSSTR-2, hSSTR-3, hSSTR-4 или hSSTR-5, в 50 мМ охлаждаемого льдом трис-буфера с HCl. Гомогенизированные клетки дважды центрифугировали с ускорением 39000 g в течение 10 минут, производя промежуточное ресуспендирование в свежем буфере. Конечные дебрис ресуспендировали в 10 мМ трис-буфера с HCl, получив при этом гомогенат клеточных мембран, предназначенный для использования при выполнении анализа связывания.
При выполнении анализов hSSTR-1, hSSTR-3 и hSSTR-4 аликвоты мембранных препаратов инкубировали в течение 90 минут при 25°С с 0,05 нМ [125I-Tyr11]SRIF-14 в 50 мМ буфера на основе HEPES (рН 7,4), содержащего 0,2% BSA и 5 мМ MgCl2. Конечный объем анализируемой смеси был равен 0,3 мл. При выполнении анализов hSSTR-2 и hSSTR-5 в качестве радиолигандов использовали соответственно [125I]-[4-(2-гидроксиэтил)]-1-пиперазинилацетил-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 (0,05 нМ) и [125I]-D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Val-Cys)-Thr-NH 2.
Гомогенат клеточных мембран инкубировали с радиолигандами в течение 90 минут при 25°С. Инкубацию прекращали путем быстрого фильтрования через фильтры GF/C, предварительно пропитанные 0,3% полиэтиленимином, с использованием фильтрующего коллектора Brandel® (Gaithersberg, MD, U.S.A.). Все пробирки и фильтры трижды промывали 5 мл аликвотами охлаждаемого льдом буфера. Удельное связывание определяли в виде общего количества связанного радиолиганда за вычетом радиолиганда, связанного в присутствии 1000 нМ SRIF-14 (для hSSTR-1, hSSTR-3, hSSTR-4 или hSSTR-5) или 1000 нМ D-Phe-c(Cys-Tyr-D-Trp-Lys-Abu-Cys)-Thr-NH 2 для hSSTR-2. Данные удельного связывания приведены в таблицах 3А и 3В.
| Таблица 3А | |||||
| № примера | Ki (нМ) hSSTR1± (SEM)* | Ki (нМ) hSSTR2± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR3± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR4± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR5± (SEM) |
| 1 | 1000** | 0,54 (0,04) | 155,5 (56,4) | 1000 | 211 |
| 2 | 1000 | 0,36 (0,25) | 125 | 1000 | 3 (0,47) |
| 3 | 1000 | 0,10 (0,02) | 94 | 1000 | 3,86 (1,27) |
| 4 | 1000 | 9,38 (5,03) | 1000 | 1000 | 480,9 (96) |
| 6 | 1000 | 4,70 (0,17) | 781,5 (218,5) | 1000 | ND |
| 7 | 1000 | 1,09 (0,24) | 479,5 (366,5) | 1000 | ND |
| 8 | 1000 | 1,83 (0,80) | 420,5 (295,5) | 1000 | ND |
| 9 | 1000 | 2,35 (0,72) | 892 (108) | 1000 | ND |
| 10 | 1000 | 1,73 (0,90) | 235 (83) | 1000 | ND |
| 11 | 1000 | 1,89 (1,17) | 1090,5 (537,5) | 1000 | ND |
| 12 | 1000 | 1,23 (0,11) | 909,3 (217,8) | 1000 | ND |
| 13 | 1000 | 0,92 (0,11) | 510 (128,8) | 1000 | ND |
| 14 | 1000 | 1,20 (0,10) | 1000 | 1000 | ND |
| 15 | 1000 | 1,03 (0,01) | 850 (150) | 1000 | ND |
| 16 | 1000 | 0,75 (0,28) | 915,2 (84,8) | 1000 | ND |
| 17 | 1000 | 0,38 (0,02) | 576,5 (423,5) | ND | 1000 |
| 18 | 1000 | 0,37 (0,16) | 682,5 (317,5) | ND | 1000 |
| 19 | 1000 | 1,78 | 627 | 188 | 4,33 |
| * SEM = стандартная ошибка | |||||
| ** значение, равное 1000, определяет значение, равное по меньшей мере 1000 | |||||
| ND = определение не производилось |
| Таблица 3В | |||||
| № примера | Ki (нМ) hSSTR1± (SEM)* | Ki (нМ) hSSTR2± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR3± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR4± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR5± (SEM) |
| 5А' | 1000** | 2,94 (2,44) | 1000 | 1000 | 842 |
| * SEM = стандартная ошибка | |||||
| ** значение, равное 1000, определяет значение, равное по меньшей мере 1000 | |||||
| А' = определяемые компоненты рацемической смеси |
| Таблица 3С | |||||
| № примера | Ki (нМ) hSSTR1± (SEM)* | Ki (нМ) hSSTR2±(SEM) | Ki (нМ) hSSTR3± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR4± (SEM) | Ki (нМ) hSSTR5± (SEM) |
| 29 | 1000** | 3,32 (0,67) | ND | ND | ND |
| 30 | 1000** | 3,04 (0,94) | ND | ND | ND |
| 31 | 1000** | 0,27 (0,08) | ND | ND | ND |
| * SEM = стандартная ошибка | |||||
| ** значение, равное 1000, определяет значение, равное по меньшей мере 1000 | |||||
| ND = определение не производилось |
Связывание радиолиганда с бомбезином/GRP
Мембраны для выполнения исследований по связыванию радиолигандов были получены путем гомогенизации клеток поджелудочной железы крысы AR42J, экспрессирующих нативный рецептор бомбезина/GRP, в 20 мл 50 мМ охлаждаемого льдом трис-буфера с HCl в устройстве Brinkman Polytron® (Westbury, NY, U.S.A.) с установкой 6 в течение 15 секунд. Гомогенаты дважды промывали центрифугированием (ускорение 39000 g/10 минут) и конечный осадок ресуспендировали в 50 мМ трис-буфера с HCl, содержащего 2,5 мМ MgCl2 и 0,1% BSA. При выполнении анализа аликвоты мембранного гомогената (0,4 мл) инкубировали с 0,05 нМ [125I-Tyr4]бомбезина (2200 Ci/ммоль) (New England Nuclear®, Boston, MA, U.S.A.) в присутствии и отсутствии 0,05 мл немеченых конкурирующих испытуемых пептидов. После инкубации в течение 30 минут при 4°С связанный [125I-Tyr4]бомбезин отделяли от свободного бомбезина путем быстрой фильтрации через фильтры GF/B (Brandel®, Gaithersburg, MD, U.S.A.), которые предварительно пропитывали 0,3% полиэтиленимином. Затем фильтры трижды промывали 5 мл аликвотами 50 мМ охлаждаемого льдом трис-буфера с HCl. Связанную радиоактивность, задержанную фильтрами, подсчитывали при помощи гамма-спектрометра (Wallac LKB®, Gaithersburg, MD, U.S.A.). Удельное связывание определяли в виде общего количества связанного [125I-Tyr4]бомбезина за вычетом количества, связанного в присутствии 1000 нМ бомбезина (Bachem®, Torrence, CA, U.S.A.). Данные удельного связывания приведены в таблице 4.
| Таблица 4 | |
| № примера | Ki (нМ) рецептора бомбезина ± (SEM) |
| 20 | 4,57 (0,82) |
| 21 | 1,90 (0,41) |
| 22 | 18,22 (3,59) |
| 23 | 7,65 (2,58) |
| 24 | 4,07 (1,15) |
| 25 | 1,45 (0,37) |
| 26 | 1,10 (0,32) |
| 27 | 3,96 (0,69) |
| 28 | 4,82 (1,77) |
Анализы роста in vitro
При выполнении анализов пролиферации in vitro культивируемые клетки СНО-К1 или клетки СНО-К1, экспрессирующие рецептор hSSTR-2, высевали на пластиковые 24-луночные планшеты в среду RPMI 1640 (DMEM), содержащую 10% фетальной телячьей сыворотки (FBS), с плотностью, равной примерно 104 клеткам/лунку/1,0 мл. Испытуемые пептиды добавляли в требуемой концентрации и выдерживали в культуре (5% СО2, 37°С, увлажненный воздух) в течение одного-трех дней. Клетки промывали бессывороточной средой RPMI, обрабатывали трипсином, ресуспендировали в RPMI 1640 (+10% FBS) и подсчитывали при помощи счетчика Coulter при разведении 1:20.
Анализы роста in vivo
Самки голых мышей NCr в возрасте 6-8 недель получали по потребности воду (обратный осмос, 0,17% Cl) и автоклавированный стандартный корм для грызунов (NIH31®; 18% белков, 5% жиров, 5% клетчатки, 8% золы и 3% минералов). Мышей помещали в микроизоляторы с 12-часовым циклом чередования света и темноты при 22°С (72°F) и влажности 40%-60%.
Опухоли, предназначенные для имплантации, были выделены из клеток NCI-H69 человека, представляющих собой линию клеток опухоли мелкоклеточного рака легкого, экспрессирующую рецепторы соматостатина типа 2. Мышам имплантировали подкожно в бок 5×106 клеток NCI-H69 с одинаковым объемом матрикса Matrigel® (BD Biosciences, San Jose, CA, U.S.A.), солюбилизованного препарата базальных мембран, экстрагированного из саркомы мышей EHS, которая представляет собой опухоль с высоким содержанием белков ЕСМ. Опухоли сначала контролировали дважды в неделю и затем ежедневно, когда неоплазмы достигли требуемого размера, равного примерно 100 мм3 (100 мг). В 1-й день после достижения опухолями мелкоклеточного рака легкого требуемого размера в соответствии с вычисленной массой опухоли животных попарно распределяли в разные экспериментальные группы. Предполагаемую массу опухоли вычисляли по формуле:
где w = ширина и l = длина, измеренные в мм, опухоли мелкоклеточного рака легкого.
Животных, имеющих опухоли, подвергали следующим воздействиям: одни мыши не получали никакого лечения, другим мышам вводили контрольный носитель (физиологический раствор или воду), только контрольный камптотецин (7,5 мг/кг) или соединение вышеуказанных формул I или II. Все вещества вводили внутривенно. Результаты исследования опухолей in vivo приведены в таблице 5 и на фигуре 1.
При выполнении других экспериментов животным имплантировали ксенотрансплантаты человека, полученные из клеток NCI-H345 (мелкоклеточный рак легкого человека; см. фигуру 2), клеток А549 (немелкоклеточный рак легкого), клеток MDA-MB-231 (рак молочной железы) и клеток К562 (хронический миелогенный лейкоз человека; см. фигуру 3), и затем вводили соединения формул I или II и соответствующие контрольные вещества, представленные в настоящем описании изобретения. Как показано на фигурах 2 и 3, соединение по примеру 5С подавляло у мышей рост ксенотрансплантатов мелкоклеточного рака легкого и хронического миелогенного лейкоза.
| Таблица 5А Клетки NCI-H69 | |||
| № примера | Концентрация вводимого соединения (мг/кг) | По сравнению с введением камптотецина (7,5 мг/кг) | По сравнению с введением носителя |
| 1 | 112 мг/кг | 9-кратное уменьшение | 16-кратное уменьшение |
| 2 | определение не производилось | определение не производилось | определение не производилось |
| 3 | определение не производилось | определение не производилось | определение не производилось |
| 4 | определение не производилось | определение не производилось | определение не производилось |
| 6 | 111 мг/кг | 1,5-кратное уменьшение | 2,5-кратное уменьшение |
| 7 | 27,75 мг/кг | 3,5-кратное уменьшение | 8-кратное уменьшение |
| 8 | определение не производилось | определение не производилось | определение не производилось |
| 9 | определение не производилось | определение не производилось | определение не производилось |
| 10 | определение не производилось | определение не производилось | определение не производилось |
| 11 | 109,8 мг/кг | 1,5-кратное увеличение** | 1,3-кратное увеличение |
| 12 | 109,2 мг/кг | 18-кратное уменьшение | 32-кратное уменьшение |
| 13 | 109,8 мг/кг | 4-кратное увеличение | аналогичный результат |
| 14 | 27,15 мг/кг | 4-кратное уменьшение | 16-кратное уменьшение |
| 15 | 109,8 мг/кг | 2-кратное увеличение | 2-кратное уменьшение |
| 16 | 26,5 мг/кг | 3-кратное увеличение | аналогичный результат |
| 17 | 112,2 мг/кг | 3,5-кратное увеличение | аналогичный результат |
| 18 | 55,5 мг/кг | 3,5-кратное увеличение | 1-кратное уменьшение |
| * примерное кратное уменьшение размера опухоли по сравнению с введением камптотецина или носителя | |||
| ** примерное кратное увеличение размера опухоли по сравнению с введением камптотецина или носителя |
| Таблица 5В Клетки NCI-H69 | ||||
| № примера | Концентрация вводимого соединения (мг/кг) | По сравнению с введением камптотецина (7,5 мг/кг) | По сравнению с введением носителя | Соотношение D/L изомеров |
| 5A' | 110,4 мг/кг | 2-кратное уменьшение* | 4-кратное уменьшение | - |
| 5В | 165 мг/кг | 5-кратное уменьшение | 20-кратное уменьшение | 87,8:13,2 |
| 5С | 165 мг/кг | 5-кратное уменьшение | 20-кратное уменьшение | 96,8:3,2 |
| * примерное кратное уменьшение размера опухоли по сравнению с введением камптотецина или носителя | ||||
| ** примерное кратное увеличение размера опухоли по сравнению с введением камптотецина или носителя | ||||
| A' = компоненты рацемической смеси, подлежащие определению |
Как показано на фиг.1 и в таблице 5В, вышеуказанное соединение по примеру 5 уменьшает рост подвергнутых воздействию опухолевых клеток NCI-H69.
Некоторые соединения по настоящему изобретению имеют по меньшей мере один асимметричный центр. В зависимости от характера разных заместителей в молекуле могут присутствовать дополнительные асимметричные центры. Каждый такой асимметричный центр образует два оптических изомера, при этом считается, что в объем настоящего изобретения входят все такие оптические изомеры в виде разделенных, чистых или частично очищенных оптических изомеров, смесей или диастереомерных смесей.
Соединения по настоящему изобретению обычно могут быть получены в форме фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей, в частности солей, полученных из неорганических и органических кислот. Примерами таких кислот являются хлористоводородная, азотная, серная, фосфорная, муравьиная, уксусная, трифторуксусная, пропионовая, малеиновая, янтарная, D-винная, L-винная, малоновая, метансульфоновая и подобные кислоты. Кроме того, некоторые соединения, содержащие кислотную функциональную группу, такую как карбокси, могут быть выделены в форме неорганической соли, в которой противоион может быть выбран из ионов натрия, калия, лития, кальция, магния и тому подобных, а также из органических оснований.
Фармацевтически приемлемые соли могут быть получены в результате контактирования примерно 1 эквивалента соединения по настоящему изобретению примерно с 1 или более эквивалентами приемлемой соответствующей кислоты, требуемой для получения данной соли. Специалистам в данной области хорошо известны способы обработки и выделения полученной соли.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить при помощи перорального, парентерального (например, в виде внутримышечной, внутрибрюшинной, внутривенной или подкожной инъекции или имплантата), назального, вагинального, ректального, подъязычного или местного способов введения, при этом соединения по настоящему изобретению могут быть объединены с фармацевтически приемлемыми носителями для получения лекарственных форм, подходящих для каждого способа введения. Таким образом, настоящее изобретение относится к фармацевтических композициям, содержащим в качестве активного ингредиента по меньшей мере одно соединение по настоящему изобретению в сочетании с фармацевтически приемлемым носителем.
Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах активное соединение находится в смеси по меньшей мере с одним инертным фармацевтически приемлемым носителем, таким как сахароза, лактоза или крахмал. Такие лекарственные формы могут также включать в соответствии с обычной практикой дополнительные вещества, отличные от таких инертных разбавителей, например смазывающие вещества, такие как стеарат магния. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственные формы могут также включать буферы. Таблетки и пилюли могут быть дополнительно получены с энтеросолюбильными покрытиями.
Жидкие лекарственные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы, эликсиры, содержащие инертные разбавители, обычно используемые в данной области, такие как вода. Помимо таких инертных разбавителей композиции могут также включать адъюванты, такие как смачивающие вещества, эмульгирующие и суспендирующие вещества, а также подсластители, ароматизаторы и отдушки.
Препараты по настоящему изобретению, предназначенные для парентерального введения, включают стерильные водные или неводные растворы, суспензии или эмульсии. Примерами неводных растворителей или носителей являются пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла, такие как оливковое масло и кукурузное масло, желатин и инъецируемые органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Такие лекарственные формы могут также содержать адъюванты, такие как консерванты, смачивающие, эмульгирующие и диспергирующие вещества. Указанные лекарственные формы могут быть стерилизованы, например, фильтрованием через бактериальный фильтр, путем введения стерилизующих агентов в композиции, облучения композиций или нагревания композиций. Препараты по настоящему изобретению могут быть также получены в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены в стерильной воде или какой-либо другой стерильной инъекционной среде непосредственно перед применением.
Композиции, предназначенные для ректального или вагинального введения, предпочтительно являются суппозиториями, которые, помимо активного вещества, могут содержать наполнители, такие как масло какао или воск для суппозиториев.
Композиции, предназначенные для назального или подъязычного введения, могут быть также получены с использованием стандартных наполнителей, хорошо известных в данной области.
Как правило, терапевтически эффективная доза активного ингредиента в композициях по настоящему изобретению может изменяться; однако количество активного ингредиента должно быть достаточным для получения приемлемой лекарственной формы. Выбранная доза зависит от желаемого терапевтического эффекта, способа введения и продолжительности лечения и должна быть определена специалистом в данной области на основании вышеуказанных факторов. Доза, вводимая человеку и другим животным, например млекопитающим, обычно составляет от 0,0001 до 100 мг/кг массы тела в сутки.
Предпочтительные дозы составляют от 0,01 до 10,0 мг/кг массы тела. Такие дозы можно вводить ежедневно, например, в виде однократной дозы или нескольких разделенных доз.
Другие варианты осуществления изобретения
Специалистам в данной области должны быть очевидны разные модификации и варианты описанного способа и системы по настоящему изобретению, не выходящие за пределы объема и существа изобретения. Несмотря на то, что настоящее изобретение было описано со ссылкой на конкретные варианты осуществления, должно быть понятно, что заявленное изобретение не должно быть необоснованно ограничено такими конкретными вариантами осуществления. Действительно в объем настоящего изобретения входят разные модификации описанных вариантов осуществления изобретения, которые должны быть очевидны специалистам в области медицины, иммунологии, фармакологии, эндокринологии или родственных областей.
Все публикации, приведенные в настоящей заявке, включены в настоящее описание изобретения в качестве ссылки в объеме, соответствующем полному содержанию всех представленных здесь независимых публикаций.
Класс C07K14/655 соматостатины
Класс C07K7/06 содержащие от 5 до 11 аминокислот
Класс C07D491/22 в которых конденсированная система содержит четыре или более гетероциклических кольца
Класс A61K38/08 пептиды, содержащие 5-11 аминокислот
Класс A61P35/00 Противоопухолевые средства
