азотсодержащие гетероциклические соединения в виде рацемата или отдельных энантиомеров, являющиеся ингибиторами биосинтеза лейкотриена

Формула изобретения

Азотсодержащие гетероциклические соединения общей формулы



где Х кислород или сера;

Y углерод или азот;

Z углерод или азот, причем Y и Z одновременно не означают азот;

R₁ и R₂ независимы друг от друга, водород, C₁ - C₆-алкил, галоид, трифторметил, циано, нитро, C₁ - C₆-алкокси, группа -CO₂R₇, где R₇ водород или C₁ C₆-алкил, группа -C(O)NR₈R₉, где R₈ и R₉ независимы друг от друга, водород, C₁ C₃ или вместе с азотом образуют морфолин, группы -NHC(O)R₁₀, где R₁₀ C₁ C₆- алкил, -NHSO₂R₁₀, где R₁₀ имеет указанное значение, или -SO₂NR₁₁R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ независимы друг от друга, водород или C₁ - C₆-алкил;

R₃ циклогексил, фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей галоид, C₁ C₄-алкоксил, группа -NHSO₂R₁₀, где R₁₀ имеет указанное значение; нитрогруппа, 1-пиперидинил, 2-, 3- или 4-пиридин, морфолин, тиоморфолин, имидазол, замещенный у азота C₁ C₄-алкилом, 2-тиазол, 2-метил-4-тиазол, диалкиламин с 1 4 атомами углерода в каждой алкильной группе или C₁

C₄-алкиловый эфир;

R₄ сложный эфир формулы -CO₂R₁₃, где R₁₃ - C₁ C₄-алкил, амид формулы -C(O)NR₁₄R₁₅, где R₁₄ и R₁₅ независимы друг от друга, водород, C₁ - C₃-алкил, метокси или вместе с азотом образуют пиперидин; фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей галоид и C₁ C₄-алкокси, 3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил, 2- или 3-тиенил, 2-, 3- или 4-пиридил, 4-пиразолил, 2-тиазол, незамещенный или замещенный в положении 4 метилом, кетон формулы C(O)R₁₆, где R₁₆ C₁ - C₃-алкил, фенил или 1-метилимидазол-2-ил; простой эфир формулы -CH₂OR₁₇, где R₁₇ C₁ C₃-алкил; тиоэфир формулы CH₂SR₁₇, где R₁₇ имеет указанное значение; группа -CH₂SO₂CH₃; амин формулы -CH₂N(R₁₇)₂, где R₁₇ имеет указанное значение; остаток формулы -CH₂NHC(O)R₁₈, где R₁₈ метил или амино; группа -CH₂NHSO₂Me₂, где Me метил; карбамат формулы -CH₂OC(O)NHCH₃;

R₅ и R₆ независимы друг от друга, водород или метил;

n 0, 1 или 2,

при условии, что указанные заместители одновременно не имеют следующие значения: Y и Z углерод, R₁ или R₂ водород, галоид, C₁ C₄-алкила, C₁ C₄-алкокси, циано, нитро, трифторметил, R₃ незамещенный фенил и R₄ группа -CO₂R₁₃, где R₁₃ C₁ C₄-алкил; группа -C(O)N(R₁₄)(R₁₅), где R₁₄ и R₁₅ водород, C₁ C₃-алкил, фенил, метокси или вместе с азотом образуют пиперидин, или же Y и Z углерод, R₄-C(O)OCH₃, R₁ и R₂ водород и R₃ незамещенный фенил,

в виде рацемата или отдельных энантиомеров, являющиеся ингибиторами биосинтеза лейкотриена.

Приоритет по признакам:

24.09.91 при Х кислород или сера, Y углерод или азот, Z углерод, или азот, R₁ и R₂ независимы друг от друга, водород, C₁ C₆-алкил, галоид, трифторметил, циано, нитро, C₁ - C₆-алкокси, группа -CO₂R₇, где R₇ водород или C₁ C₆-алкил; группа -C(O)NR₈R₉, где R₈ и R₉ независимы друг от друга, водород, C₁ C₃-алкил, или вместе с азотом образуют морфолин; группы -NHC(O)R₁₀, где R₁₀ C₁ C₆-алкил, -NHSO₂R₁₀, R₁₀ имеет указанное значение, или -SO₂NR₁₁R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ независимы друг от друга, водород или C₁ - C₆-алкил, R₃ циклогексил, фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей галоид, C₁ C₄-алкоксил, группа -NHSO₂R₁₀, где R₁₀ имеет указанное значение; нитрогруппа, 1-пиперидинил, 2-, 3- или 4-пиридин, морфолин, имидазол, замещенный у азота C₁ C₄-алкилом, R₄ сложный эфир формулы CO₂R₁₃, где R₁₃ C₁ C₄-алкил; амид формулы -С(O)NR₁₄R₁₅, где R₁₄ и R₁₅ независимы друг от друга, водород, C₁ C₃-алкил, метокси или вместе с азотом образуют пиперидин; фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей галоид и C₁ C₄-алкокси с 1-4; 3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил, 2- или 3-тиенил, 2-, 3- или 4-пиридил, кетон формулы C(O)R₁₆, где R₁₆ C₁ C₃-алкил, фенил или 1-метилимидазол-2-ил, R₅ и R₆ независимы друг от друга, водород или метил, n 0, 1 или 2, в виде рацемата или отдельных энантиомеров;

04.09.92. при Х кислород или сера, Y углерод или азот, Z углерод или азот, R₁ и R₂ независимы друг от друга, водород, C₁ C₆-алкил, галоид, трифторметил, циано, нитро, C₁ - C₆-алкокси, группа -CO₂R₇, где R₇ водород или C₁ C₆-алкил; группа -C(O)NR₈R₉, где R₈ и R₉ независимы друг от друга, водород, C₁ C₃-алкил или вместе с азотом образуют морфолин; группы -NHC(O)R₁₀, где R₁₀ - C₁ C₆-алкил; -NHSO₂R₁₀, где R₁₀ имеет указанное значение; или -S₂NR₁₁R₁₂, где R₁₁ и R₁₂ независимы друг от друга, водород или C₁ C₆-алкил, R₃ тиоморфолин, 2-тиазол, 2-метил-4-тиазол, диалкиламин с 1 4 атомами углерода в каждой алкильной группе или C₁ - C₄-алкиловый эфир, R₄ 2-тиазол, незамещенный или замещенный в положении 4 метилом, простой эфир формулы -CH₂OR₁₇, где R₁₇ C₁ C₃-алкил; тиоэфир формулы -CH₂SR₁₇, где R₁₇ имеет указанное значение; группа -CH₂SO₂CH₃, амин формулы -CH₂N(R₁₇)₂, остаток формулы -CH₂NHC(O)R₁₈, где R₁₈- метил; группа -CH₂NHSO₂Me₂, где Me - метил; карбамат формулы -CH₂OC(O)NHCH₃, R₅ и R₆ - независимы друг от друга, водород или метил, n 0, 1 или 2, в виде рацемата или отдельных энантиомеров;

23.09.92 при R₄ 4-пиразол или группа -CH₂NHC(O)R₁₈, где R₁₈ амино.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к новым химическим веществам, имеющим ценные фармакологические свойства, более конкретно к азотсодержащим гетероциклическим соединениям общей формулы I



где X кислород или сера;

Y углерод или азот;

Z углерод или азот, причем Y и Z одновременно не означают азот;

R₁ и R₂ независимы друг от друга и означают водород, алкил с 1 6 атомами углерода, галоид, трифторметил, нитрил, алкокси с 1 6 атомами углерода, группу CO₂R₇, где R₇ означает водород или алкил с 1 6 атомами углерода, группу -C(O)NR₈R₉, где R₈ и R₉ не зависимы друг от друга и означают водород, алкил с 1 3 атомами углерода, метокси- или вместе с азотом образуют морфолин-, пирролидин-или пиперидиногруппу -NR₁₀R₁₁, где R₁₀ и R₁₁ означают водород или алкил с 1 6 атомами углерода, группу -C(O)R₁₂, где R₁₂ означает алкил с 1 6 атомами углерода, группы -SO₂R₁₂, где R₁₂ имеет указанное значение, -NHC(O)R₁₂, где R₁₂ имеет указанное значение, -NHSO₂R₁₂, где R₁₂ имеет указанное значение, и -SO₂NR₁₃R₁₄, где R₁₃ и R₁₄ независимы друг от друга и означают водород или алкил с 1 6 атомами углерода;

R₃ метил, циклогексил, фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей галоид, трифторметил, алкил с 1 4 атомами углерода и алкоксил с 1 4 атомами углерода, группы SO₂R₁₂, где R₁₂ имеет указанное значение, -NHC(O)R₁₂, где R₁₂ имеет указанное значение, -NHSO₂R₁₂, где R₁₂ имеет указанное значение, -SO₂NR₁₃R₁₄, где R₁₃ и R₁₄ имеют указанное значение, нитрогруппу, 1-пиперидинил, 2-, 3- или 4-пиридин, морфолин, тиоморфолин, пирролидин, имидазол, незамещенный или замещенный у азота алкилом с 1 4 атомами углерода, 2-тиазол, 2-метил-4-тиазол, диаклкиламин с 1 4 атомами углерода в каждой алкильной группе или алкиловый эфир с 1 4 атомами углерода;

R₄ сложный эфир формулы -CO₂R₁₆, где R₁₆ означает алкил с 1 4 атомами углерода, амид формулы C(O)NR₁₇R₁₈, где R₁₇ и R₁₈ независимы друг от друга и означают водород, алкил с 1 2 атомами углерода, метокси или вместе с азотом образуют морфолин, пиперидин или пирролидин, фенил, незамещенный или замещенный остатками из группы, включающей галоид, алкил с 1 4 атомами углерода и алкокси с 1 4 атомами углерода, 3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил, 2- или 3-тиенил, 2-, 3- или 4-пиридил, 4-пиразолил, 2-имидазол, незамещенный или замещенный у азота метильной группой, 2-имидазол, незамещенный или замещенный в положении 4 метилом, кетон формулы C(O)R_19", где R₁₉ означает алкил с 1 -3 атомами углерода, фенил или 1-метилимидазол-2-ил, простой эфир формулы -CH₂OR₂₀, где R₂₀ означает алкил с 1 3 атомами углерода, тиоэфир формулы -CH₂SR₂₀, где R₂₀ имеет указанное значение, группу CH₂SO₂CH₃, амин формулы -CH₂N(R₂₀)₂, где R₂₀ имеет указанное значение, остаток формулы -CH₂NHC(O)R₂₁, где R₂₁ означает метил, амино- или метиламино- группу -CH₂NHSO₂Me₂, где Me означает метил, карбамат формулы CH₂OC(O)NHCH₃;

R₅ и R₆ независимы друг от друга и означают водород или метил;

n 0,1 или 2,

При условии, что указанные заместители одновременно не имеют следующие значения: Y и Z углерод, R₁ или R₂ водород, галоид, алкил с 1 4 атомами углерода, алкокси с 1 4 атомами углерода, циано, нитро, трифторметил, R₃ незамещенный фенил и R₄ группа -C(O)OR_16", где R_16" означает водород, алкил, алкенил или алкинил, группа -C(O)N(R_18")(R_19"), где R_18" и R_19" означают водород, алкил с 1 6 атомами углерода, фенил, алкокси или вместе с азотом образуют пирролидин, пиперидин или морфолин, циано или -C(S)NH₂, или же Y и Z углерод, R₂ группа С(O)OCH₃, R₁ и R₂ водород и R₃ 4-оксифенил, незамещенный фенил и 4-имидазол,

в виде рацемата или индивидуальным энантиомерам и их солям, являющимся ингибиторами биосинтеза лейкотриена.

Новые соединения можно получать известными в литературе методами. Так, например, соединения можно получать путем взаимодействия замещенного 2-хлорбензоксазола, 2-хлорбензотиазола, 2-хлороксазолопиридина или 2-хлортиазолопиридина с амином, аминокислотой или сложным эфиром аминокислоты. Такой синтез иллюстрируется следующей схемой А



Реакция согласно схеме А может осуществляться в среде инертного растворителя такого, как, например хлористый метилен, толуол или диметилсульфоксид, в присутствии основного катализатора такого, как, например триэтиламин или гидидроокись натрия. Оптимальный выбор растворителя и катализатора зависит от вида реагентов.

Кроме того, для получения соединения общей формулы (I) можно также применять модификацию известного в литературе способа получения 2-аминобензотиазолов. Такой синтез иллюстрируется следующей схемой Б.

Согласно схеме Б осуществляют взаимодействие замещенного изотиоцианата с амином или сложным эфиром аминокислоты в среде подходящего инертного растворителя такого, как, например простой диэтиловый эфир, с последующей циклизацией получаемой промежуточной тиомочевины сульфурилхлоридом или бромом в среде другого инертного растворителя такого, как, например простой диэтиловый эфир или же хлорбензол.

Синтез согласно схеме В можно применять для получения таких соединений общей формулы I, у которых X означает серу, а Z азот. При этом галоидаминопиридин превращают до изотиоцианата, например путем взаимодействия с тиофосгеном в присутствии основания такого, как, например карбонат натрия, в среде инертного растворителя. В результате взаимодействия изотиоцианата с амином в среде инертного растворителя получают тиазолопиридин. В случае применения 2-хлор-3-аминопиридина с определенными дополнительными заместителями получают промежуточную тиомочевину после завершения реакции с изотиацианатом. В этом случае циклизацию до тиазолопиридина можно осуществлять путем нагрева в среде инертного растворителя в присутствии кислотного или основного катализатора, например в присутствии этанольной хлористоводородной кислоты или же карбоната калия, в среде диметилформамида.

Изомерные тиазолопиридины можно получать путем циклизации пиридина, замещенного в положении 3 галоидом и в положении 2 тиомочевины. Другой синтез протекает по следующей схеме Г.

Согласно схеме Г исходный замещенный пиридин в среде инертного растворителя в присутствии основного катализатора, например в среде диметилформамида в присутствии карбоната калия. Промежуточный 2-амино-3-галоидпиридин можно получать, например путем бромирования незамещенного или замещенного 2-аминопиридина. Изотиоцинат можно получать согласно вышеприведенной схеме В.

Соединение общей формулы I, у которой R₄ означает кислотный остаток или сложный эфир, можно переводить в соединение общей формулы I, у которой R₄ означает амид, метилоксадиазол, кетон, простой эфир или тиоэфир. Возможности такого перевода иллюстрируются схемой Д.

Используемые в схеме Д условные сокращения обозначают: CDI карбонилдиимид, DMF диметилформамид, THF тетрагидрофуран, Et этил.

Реакции, включенные в схему Д, широко известны специалисту.

Что касается стереохимии получаемых вышеописанными методами соединений формулы I, то указывается следующее. Если исходные амины, используемые согласно схемам А и Б, представляют собой чистые энантиомеры, то получают целевой продукт в виде единственного энантиомера. При этом целевой продукт имеет либо конфигурацию R, либо конфигурацию S у асимметричного углерода. Если же исходный амин представляет собой рацемат, то есть смесь изомеров R и S, то целевой продукт получают в виде рацемата. Рацемические исследования можно разделять на индивидуальные энантиомеры известными в литературе способами, например путем растворения диастеромерной соли, хроматографии на хиральной колонке и т.д.

В данном описании для обозначения энантиомеров аминокислот используют буквы D и L, а рацематы обозначают DL.

Получение новых соединений общей формулы (I) иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. 3,82 г (32,1 ммоль) тионилхлорида каплями добавляют к 3,2 г(10,7 ммоль) гидрохлорида DL-N-(бензотиазол-2-ил) фенилаланина, суспендированного в 200 мл этанола. Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение 4 ч, после чего сушат, остаток растворяют в 75 мл этилацетата, два раза экстрагирают 50 мл насыщенного раствора карбоната натрия и еще раз 50 мл насыщенного раствора хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Продукт перекристаллизовывают из этанола. Получают 2,25 г (6,9 ммоль) продукта с т.пл. 137 139^oC. (Выход: 64%).

Пример 2. Сложный этиловый эфир DL-N-(6-изопропилбензотиазол-2-ил)-4-хлорфенилаланина.

5 г (18,9 ммоль) гидрохлорида сложного этилового эфира DL-4-хлорфенилаланина переводят в свободное основание с применением триэтиламина. Раствор свободного основания в 75 мл простого диэтилового эфира добавляют к раствору 4-изопропилфенилизотиоцианата в 150 мл простого диэтилового эфира и реакционную смесь охлаждают на солевой ледяной бане. Температуру держат примерно при 0^oC во время процесса добавления. Реакционную смесь перемешивают в течение 4,5 ч при температуре 12^oC, после чего фильтруют, фильтрат сгущают и получаемый пенистый остаток размешивают с пейтролейным эфиром при охлаждении льдом. Получают 6,1 г (15,1 ммоль, 80%) N-(4-изопропилфенил)-N"-[2-(4-хлорфенил)-1-(этоксикарбонил)этил] тиомочевины с т.пл. 73 75^oC.

6 г (14,8 ммоль) промежуточного продукта растворяют в 25 мл хлорбензола и охлаждают до температуры 0^oC на ледяной бане. Каплями добавляют 2,76 г (20,4 ммоль) сульфурилхлорида в 5 мл хлорбензола. Через 5,5 ч реакционную смесь сгущают, остаток растворяют в 150 мл этилацетата, промывают сначала насыщенным раствором карбоната натрия и затем насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Продукт кристаллизуют из этанола. Получают 4,07 г (10,1 ммоль), 68%) продукта с т.пл. 105 107^oC.

Аналогично получают соединения, сведенные в таблицах 1 5.

Пример 3. N"-метиламид L-N-(5- метилбензоксазол-2-ил)циклогексилаланина.

Раствор 1,08 г (3,6 ммоль) L-N-(5- метилбензоксазол-2-ил)циклогексилаланина в 15 мл метиленхлорида охлаждают на ледяной бане. Порциями добавляют 0,88 г (5,4 ммоль) карбонилдиимидазола. Через час в реакционную смесь подают газообразный метиламин в течение 45 мин. Реакционную смесь разбавляют метиленхлоридом, промывают водой, насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Получаемый продукт очищают путем хроматографии на силикагеле с применением в качестве элюента смеси метилехлорида и метанола в соотношении 99 1. В результате перекристаллизации из изопропанола получают 0,2 г целевого продукта с т. пл. 202 204^oC.

Аналогично получают соединения, сведенные в таблице 6.

Пример 4. 2-(2-циклогексил-1- фенил)этиламинобензоксазол.

Смесь 1,12 г (7,3 ммоль) 2-хлорбензоксазола, 1,48 г (7,3 ммоль) 2-циклогексил-1-фенилэтиламина и 0,88 г (8,8 ммоль) триэтиламина в 305 мл хлористого метилена нагревают с обратным холодильником в течение 31 ч. Реакционную смесь разбавляют 50 мл хлористого метилена, последовательно экстрагируют 50 мл воды, 50 мл 1N хлористоводородной кислоты, 50 мл насыщенного хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Полученное твердое вещество перекристаллизовывают из этанола. Получают 1,4 г (4,4 ммоль, 60%) целевого продукта с т. пл. 129 131^oC.

Аналогично получают соединения, сведенные в таблице 7.

Пример 5. L-2-[2-циклогексил-1-(3-метил-1,2,4-оксадиазол-5-ил)этил]амино-5-метилбензоксазол.

Дисперсию 0,47 г 60% -ного гидрида натрия в минеральном масле (0,28 г 11,8 ммоль гидрида натрия) смешивают с 0,39 г (5,3 ммоль) ацетамидоксима, 1,48 г (4,7 ммоль) сложного метилового эфира N-(5-бензоксазол-2- ил)циклогексилаланина и несколькими молекулярными ситами в среде 20 мл тетрагидрофурана и реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение двух часов в атмосфере азота. Реакционную смесь вливают в воду и экстрагируют этилацетатом. Этилацетатную фазу сушат над сульфатом натрия и сгущают. Получаемый продукт очищают хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента смеси хлористого метилена и метанола в соотношении 99 1. После размешивания с петролейным эфиром получают 70 мг целевого продукта в качестве белого твердого вещества с т. пл. 118 119^oC.

Пример 6. 3-[(6-изопропилбензотиазол-2-ил) амино]-4-фенилбутан-2-он.

Раствор 2 г (5,9 ммоль) N-(6- изопропилбензотиазол-2-ил) фенилаланина в 60 мл тетрагидрофурана охлаждают до температуры -5^oC на солевой ледяной бане в атмосфере азота. Затем добавляют раствор 26 мл (36,4 ммоль) метиллития в диэтиловом эфире. Через два часа быстро добавляют 10 мл (78 ммоль) хлортриметилсилана и реакционную смесь нагревают до комнатной температуры. Затем реакционную смесь обрабатывают 1N хлористоводородной кислотой и продукт экстрагируют диэтиловым эфиром, сушат над сульфатом натрия и сгущают. В результате очистки хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента хлористого метилена и перекристаллизации из этанола получают 0,75 г (2,2 ммоль, 38%) целевого продукта с т. пл. 107 110^oC.

Аналогично получают соединения, сведенные в таблицах 8 13.

Пример 7. 2-[(2-циклогексил-1-фенилэтил)амино]тиазоло[5,4-b]пиридин.

Смесь 1,28 г (10 ммоль) 3-амино-2-хлорпиридина, 2,1 г (20 ммоль) карбоната натрия и 1,38 г (12 ммоль) тиофосгена в 50 мл метиленхлорида перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь вливают в воду и экстрагируют хлористым метиленом. Объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Получаемое масло очищают хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента петролейного эфира. Получают 1,6 (9,4 ммоль, 94%) тиозоцианата.

0,516 г (3,02 ммоль) тиозоцианата добавляют к смеси 0,66 г (2,75 ммоль) гидрохлорида 2-циклогексил-1-фенилэтиламина и 0,278 г (2,75 ммоль) триэтиламина в 25 мл тетрагидрофурана. Реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение двух часов, вливают воду и экстрагируют диэтиловым эфиром. Органические экстракты промывают насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом магния и сгущают. В результате перекристаллизации остатка из смеси хлористого метилена и петролейного эфира получают 0,625 г (1,84 ммоль, 67%) продукта с т.пл. 146-148^oC.

Пример 8. 2-[(2-циклогексил-1-(2-пиридил)этил]амино]-6-метилтиазоло-[4,5-b] пиридин.

3,19 г брома каплями добавляют к раствору 2-амино-5-пиколина в 75 мл хлористого метилена при температуре 0^oC. Примерно через два часа при комнатной температуре реакционную смесь последовательно экстрагируют насыщенным раствором карбоната натрия и раствором тиосульфата натрия. Объединенные водные экстракты промывают хлористым метиленом и объединенные органические экстракты промывают насыщенным раствором хлористого натрия, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Получают 3,59 г сырого продукта, который очищают хроматографией на силикагеле с применением в качестве элюента петролейного эфира, к которому добавляют повышающиеся количества хлористого метилена (0-40%). Получают 3,05 г амино-3-бром-5-пиколина с т.пл. 68-70^oC.

К 2,84 г (15 ммоль) вышеуказанного продукта в 50 мл хлористого метилена с добавкой 3,18 г (30 ммоль) карбоната натрия добавляют 2,07 г (18 ммоль) тиофосгена. Реакционную смесь размешивают при комнатной температуре в течение ночи, после чего ее экстрагируют водой, водную фазу экстрагируют хлористым метиленом, объединенные органические экстракты промывают раствором поваренной соли, сушат над сульфатом магния и сгущают. Получают изотиоцианат, который кристаллизует при стоянии. Получают 3,9 г продукта (ИК 2050 см^-1).

К раствору 1,0 г (4,3 ммоль) изотиоцианата и 1,04 г (4,3 ммоль) 2-циклогексил-1-фенилэтиламина в 50 мл сухого тетрагидрофурана добавляют 438 мг (4,3 ммоль) триэтиламина. Получаемую реакционную смесь нагревают с обратным холодильником в течение двух часов. Гидрохлорид триэтиламина фильтруют и фильтрат сгущают. Получают 1,6 г тиомочевины, которая кристаллизует при стоянии.

Смесь 540 мг (1,15 ммоль) тиомочевины и 317 мг (2,3 ммоль) карбоната калия в 10 мл диметилформамида нагревают с обратным холодильником в течение ночи, после чего ее вливают в воду и экстрагируют три раза диэтиловым эфиром и один раз хлористым метиленом. Органические экстракты промывают раствором поваренной соли, сушат над сульфатом натрия и сгущают. Получают 450 мг продукта, который перекристаллизовывают из смеси хлористого метилена, диэтилового эфира и петролейного эфира. Получают 210 мг продукта с т.пл. 213-214^oC.

Аналогично получают соединения, сведенные в таблице 14.

Фармакология.

Торможение биосинтеза лейкотриена в полиморфо-ядерных лейкоцитах человека.

Торможение биосинтеза лейкотриена определяют за счет того, что измеряют способность исследуемых соедине- ний к торможению производства лейкотриена из эндогенной арахидоновой кислоты в лейкоцитах из периферической крови человека.

В чашки с 48 ячейками подают раствор исследуемого соединения с последующим до- бавлением полиморфоядерных лейкоцитов человека в количестве 1,5x10⁶ клеток/ячеек из периферической крови. Чашки предвари- тельно инкубируют при температуре 28^oC в течение 15 минут при взбалтывании. Клетки стимулируют кальциевым йонофором А23187 при ко- нечной концентрации 2,5 мкмоль в течение 10 мин. Реакцию прекращают путем добавления раствора этиленгликольтетрауксусной кислоты (конечная концентрация 10 ммоль) с последующим центрифугированием со скоростью 1500 об/мин при температуре 10^oC. Надосадочные жидкости хранят при температуре -70^oC. Концентрацию лейкотриена определяют известными методами. Значение КТ₅₀ (= концентрация торможения, т. е. кон-центрация исследуемого соединения, при которой биосинтез лейкотриена тормозится на 50%) рассчитывают с помощью нелинейного регрессионного анализа.

Результаты опыта сведены в таблицах 15 и 16.

Вызываемое антигеном сужение бронхов в морских свинках

Данный опыт позволяет выявить способность соединения к торможению лейкотриенового компонента при вызываемом антигеном сужении бронхов. Самцы морских свинок активно сенсибилизировались в отношении яичного альбумина, после чего им дали мепирамин и индометацин (для блокады гистамина и компонентов метаболита циклооксигеназы), а также исследуемое соединение (в виде содержащего фреон и этанол аэрозоля). Морские свинки заряжались антигеном (путем ингаляции яичного альбумина). Функция легких измерялась при помощи осциллографии. Результаты опыта выражались в качестве процентного торможения сужения бронхов морских свинок, которым дали исследуемое соединение, по сравнению с контрольными животными, которым дали плацебо.

Результаты опыта сведены в таблице 17.

Вызываемое антигеном высвобождение медиатора в приматах.

Данный опыт позволяет определять способность соединения к торможению образования лейкотриена C₄ в легких страдающих аллергией обезьян после заряжения антигеном. После анестезии животных проводилась интубация, после чего животным давался экстракт Ascaris suum в виде аэрозоля. Через 20 мин осуществлялась бронхоальвеолярная промывка и количество лейкотриена C₄ определялось радиоиммунным анализом. Исследуемые соединения довались в виде аэрозоля за 10 мин до заряжения антигеном. Их действие определялось как процентное торможение образования лейкотриена C₄ по сравнению с контрольными животными, которым дали плацебо. Результаты опыта сведены в таблице 18.1