Микроорганизмы: ...Escherichia coli – C12R 1/19

Изобретение относится к области микробиологии. Готовят две взвеси. Клинические полиантибиотикорезистентные штаммы Escherichia coli добавляют в изотонический раствор NaCl до достижения концентрации 30-40 тыс. КОЕ/мл. Добавляют наночастицы меди в раствор NaCl до достижения концентрации 0,01-0,05 мг/мл. Приготавливают суспензию этилендиаминтетрауксусной кислоты - ЭДТА путем ее разведения в дистиллированной воде из расчета 0,1-0,2:1 соответственно. Добавляют в приготовленную суспензию NaOH до получения раствора ЭДТА с рН=7,6-8. Соединяют приготовленные взвеси и раствор ЭДТА в следующих соотношениях, мас.%: взвесь наночастиц меди - 70-85, взвесь микроорганизмов - 10-20, раствор ЭДТА - 5-10. Инкубируют в шейкере при 100-150 об/мин и температуре 36-38°C в течение 40-60 минут. Высевают полученную биомассу на твердую питательную среду объемом 20-25 мл в количестве 0,1-0,12 мл. Инкубируют в термостате при температуре 36-38°C в течение 18-24 часов. Определяют чувствительность штаммов E.coli к антибиотикам. Изобретение позволяет увеличить чувствительность штаммов бактерий E.coli к антибиотикам гентамицину и ампицилину. 2 табл., 1 з.п. ф-лы, 1 пр.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Рекомбинантная плазмидная ДНК pPA-OPRF-ETA размером 8007 пар оснований кодирует синтез рекомбинантного белка OprF-ETA Pseudomonas aeruginosa. Плазмида содержит следующие фрагменты: Xba I-Hind III фрагмент ДНК размером 177 пар оснований; Hind III-Hind III фрагмент ДНК размером 1059 пар оснований; Hind III-Xho I фрагмент ДНК размером 1598 пар оснований; Sph I-Hind III фрагмент ДНК размером 425 пар оснований; EcoR I - BamH I фрагмент ДНК размером 57 пар оснований. Предложены также штамм бактерий Еscherichia coli PA-OPRF-ETA, продуцирующий белок OprF-ETA и полученный путем трансформации родительского штамма бактерий Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК рРА-OPRF-ETA и способ получения указанного белка OprF-ETA. Группа изобретений позволяет получить целевой продукт с массой около 100 кДа. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены варианты рекомбинантных штаммов бактерий Escherichia coli, являющихся продуцентами янтарной кислоты и содержащих ген, кодирующий пируваткарбоксилазу. Штамм бактерий Escherichia coli SGM1.0 [pPYC] обладает инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE. Штамм бактерий Escherichia coli SGM1.1 [pPYC] обладает инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE и iclR. Штамм бактерий Escherichia coli SGM2.0 [pPYC] обладает инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE и усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA. Штамм бактерий Escherichia coli SGM2.1 [pPYC] обладает инактивированными генами ackA, pta, poxB, ldhA, adhE, iclR и усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA. Штамм бактерий Escherichia coli SGM3.0 [pPYC] обладает инактивированными генами ackA, pta, рохВ, ldhA, adhE, pflB и усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA. Штамм бактерий Escherichia coli SGM3.1 [pPYC] обладает инактивированными генами ackA, pta, рохВ, ldhA, adhE, pflB, iclR и усиленной экспрессией генов асеЕ, aceF и lpdA. Предложен также способ получения янтарной кислоты с использованием указанных штаммов. Группа изобретений обеспечивает увеличение выхода янтарной кислоты. 7 н. и 10 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано для регулирования проницаемости метан-продуцирующей клетки. Получают полипептид, который способен проникать в метан-продуцирующую клетку и повышать ее проницаемость, характеризующийся аминокислотной последовательностью SEQ ID NO:117, 118 или 119 или по меньшей мере 90% идентичностью к указанной последовательности или по меньшей мере 15 последовательно расположенными аминокислотами указанной последовательности. Также получают полинуклеотид, кодирующий указанный полипептид, клонирующий и экспрессирующий векторы, которые используют для получения клеток-хозяев, продуцирующих полипептид или предназначенных для репликации вектора. Полипептид может содержать флуоресцентную метку на N-концевом аминокислотном остатке. Изобретение позволяет повысить проницаемость метанпродуцирующей клетки. 14 н. и 4 з.п. ф-лы, 35 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма бактерий Escherichia coli - продуцента биологически активного флагеллина. Охарактеризованный штамм получен трансформацией культуры клеток E. coli BL21[DE3] рекомбинантной плазмидной ДНК рЕТ151FliC, полученной на основе вектора рЕТ151FliC, в который был встроен ген fliC, кодирующий биологически активный флагеллин, имеющий нуклеотидную последовательность, представленную в Seq ID No 3. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИГенетика под № В-11369. Представленное решение обладает более высокой продуцирующей способностью в отношении рекомбинантного флагеллина, являющегося эффективным адъювантом. 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано для рекомбинантного получения 1,2-пропандиола (1,2-PD). В клетку E.coli вводят ген, кодирующий пропандиолоксидоредуктазу, что позволяет продуцировать высокие уровни 1,2-пропандиола, по существу без 1,3-пропандиола, при выращивании на глицерине как единственном источнике углерода. Дополнительно могут быть введены гены глицеролдегидрогеназы (gldA), дигидроксиацетонкиназы (dhaK) и/или метилглиоксальсинтазы (mgsA) с тем, чтобы экспрессировать указанные ферменты вместе с пропандиолоксидоредуктазой (fucO), а также ген глицеролдегидратазы или альдокеторедуктазы, с тем, чтобы экспрессировать указанную глицеролдегидратазу или альдокеторедуктазу вместе с пропандиолоксидоредуктазой. Клетка E.coli, трансформированная геном, кодирующим пропандиолоксидоредуктазу, может быть дефектна по метаболизму арабинозы, метилглиоксаля и/или дигидроксиацетонфосфата. 8 н. и 1 з.п. ф-лы, 4 ил., 9 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии и касается рекомбинантного штамма E. coli TG1(pRV_Moscow3253 G-L) для получения ПЦР-стандартов для количественного определения кДНК вируса бешенства штамма «Москва 3253». Рекомбинантный штамм создан на основе штамма E. coli TG1 путем трансформирования плазмидой pRV_Moscow3253G-L. Плазмида получена лигированием фрагмента G-L области генома фиксированного вируса бешенства штамма «Москва 3253», имеющего последовательность SEQ ID NO1, в плазмиду pGem-T. Также предложен набор ПЦР-стандартов для количественного определения кДНК вируса бешенства штамма «Москва 3253» в рабическом антигене. Набор содержит растворы ДНК плазмиды pRV_Moscow3253G-L в концентрациях 10⁸, 10⁷, 10⁵, 10³ ГЭ/мл. Определение концентрации осуществляют методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов. Изобретение способствует стандартизации этапа приготовления рабического антигена в производстве гетерологичного антирабического иммуноглобулина. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 2 пр.

Изобретение относится к биохимии и молекулярной биологии. Проводят консервацию клеток Escherichia coli в присутствии забуференного 80-90% глицерина. Снимают клеточные оболочки 3% тритоном Х-100. Последовательно экстрагируют клеточные супрамолекулярные структуры возрастающими концентрациями солей: 0,14 М (бактериоплазма), 0,35 М (непрочно связанные с клеточным остатком), 2 М NaCl (прочно связанные с клеточным остатком), 6 М гуанидин гидрохлоридом с 0,1% -меркаптоэтанолом (клеточный остаток). Проводят кислотный гидролиз в вышеперечисленных фракциях. Проводят антроновый метод, предварительно очистив препарат антрон. Строят калибровочный график и определяют количество гексоз с помощью расчетной формулы. Изобретение позволяет определить количество гексоз в супрамолекулярных структурах бактериальной клетки Escherichia coli. 3 ил., 3 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и микробиологической промышленности и может быть использовано для обнаружения колиформных бактерий и Е.coli в образцах пищевых продуктов и воды при проведении бактериологических исследований. Питательная среда содержит в качестве источника азота мясной пептон или панкреатический гидролизат рыбной муки, натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузамещенный, калий фосфорнокислый однозамещенный, натрий пировинограднокислый, L-триптофан, натрий додецилсульфат, 6-хлор-3-индолил- -D-галактопиранозид (Salmon - GAL), 5-бром-4-хлор-3-индолил- -D-глюкуронид (X-GLUC), изопропил- -D1-тиогалактопиранозид и микробиологический агар в заданном соотношении. Изобретения позволяет сократить время идентификации, повысить точность дифференциации колиформных бактерий и Е.coli и упростить способ приготовления питательной среды.2 н.з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к санитарной и клинической микробиологии и может быть использовано для обнаружения и учета Е.coli и колиформных бактерий в воде, пищевых продуктах, клиническом материале и т.д. Питательная среда содержит панкреатический гидролизат рыбной муки, высушенный с тергитолом 7 из расчета 0,1 г тергитола 7 на 6 г сухого панкреатического гидролизата рыбной муки, дрожжевой экстракт, Д (+) лактозу, 1- водную, бромтимоловый синий, натрий додецилсульфат, 2,3,5-трифенилтетразолия хлорид, натрий углекислый и микробиологический агар в заданном соотношении. Изобретение позволяет сохранить стерильность питательной среды в течение 10 суток, повысить точность дифференциации колиформных бактерий и Е.coli и упростить способ приготовления питательной среды. 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, сельскому хозяйству и зоотехнии и может быть использовано для промышленного выращивания бройлеров высокопродуктивных кроссов. Симбиотический препарат Пролизэр на основе штамма Escherichia coli VL-613 активируют ресуспендированием охлажденной кипяченой водой или стерильным физическим раствором при температуре от 25°C до 37°C. В растворенном виде препарат впаивают цыплятам - бройлерам в течение 1 часа после активации препарата по следующей схеме. С 8-го дня с даты рождения цыпленка и до 22-го препарат дается из расчета по 100 млн. микробных клеток в день на одного цыпленка кроссов Кобб-500 и Авиан-48 и по 50 микробных клеток в день на одного цыпленка кросса Смена-7. С 22-го дня и до окончания выращивания цыплят - бройлеров препарат дается из расчета 75 млн. микробных клеток в день на одного цыпленка кроссов Кобб-500 и Авиан-48 и по 50 млн. микробных клеток в день на одного цыпленка кросса Смена-7. Препарат вводят перорально, желательно в утренний прием пищи. При этом концентрация Escherichia coli VL-613 составляет 1,75-3,05 млрд. микробных клеток препарата на весь цикл выращивания одного бройлера. Изобретение позволяет полностью заменить при выпаивании бройлеров синтетический лизин, повысить среднесуточные привесы птиц, повысить выход мяса 1 - категории и сократить концентрацию клеток Escherichia coli VL-613. 4 табл.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения L-аргинина с использованием бактерии, принадлежащей к роду Escherichia, которая модифицирована таким образом, что оперон astCADBE в указанной бактерии инактивирован. Указанную бактерию выращивают в питательной среде, после чего L-аргинин выделяют из культуральной жидкости. Данный способ позволяет повысить продуктивность бактерий-продуцентов L-аргинина и получить L-аргинин с большим выходом. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 14 пр.

Изобретение относится к биохимии и молекулярной биологии. Предложен способ препаративного выделения основных белков из надмолекулярных структур растущей популяции Escherichia coli. Проводят консервацию клеток Escherichia coli в забуференном 80-90% глицерине при -25°С. Затем осадок клеток промывают 3% тритоном Х-100. Далее осуществляют экстракцию осадка возрастающими концентрациями солей: 0,14 М, 0,35 М; 2 М NaCl, 6 М гуанидин гидрохлоридом с 0,1% -меркаптоэтанолом. Выделяют из полученных фракций основные белки с помощью ионообменной хроматографии с амберлитом ИРЦ-50 в прерывистом градиенте гуанидин гидрохлорида: 6%, 8,9%, 10,6%, 13% на 0,1 М калий-фосфатном буфере рН 6,8. Способ позволяет получать фракции, обогащенные основными белками, при использовании микроколичества белка клеточных супраструктур Escherichia coli. 7 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Представлен способ получения 4-гидрокси-L-лейцина или его соли методом ферментативной конверсии L-лейцина или его соли в присутствии бактериальной диоксигеназы, выбранной из группы, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов. Раскрыт способ получения 4-гидрокси-L-лейцина или его соли в содержащей L-лейцин или его соль среде в присутствии первой бактерии, трансформированной молекулой ДНК, кодирующей диоксигеназу, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов. Представлена бактерия-продуцент 4-гидрокси-L-лейцина или его соли, трансформированная молекулой ДНК, кодирующей бактериальную диоксигеназу, выбранную из группы, состоящей из диоксигеназ с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 54, SEQ ID NO: 62 или их вариантов, в среде, содержащей L-лейцин или его соль. Изобретение позволяет получить 4-гидрокси-L-лейцин или его соль с высокой степенью эффективности. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 24 ил., 5 табл., 11 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии. Предложен штамм E.coli продуцент рекомбинантного белка р30 вируса Африканской чумы свиней (АЧС). Штамм однороден, стабилен при пассировании и культивировании в жидких и твердых питательных средах, устойчив к хлорамфениколу. Изобретение может быть использовано для получения рекомбинантного белка р30 вируса АЧС для диагностических целей. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению белков, обладающих нейромодуляторным действием по отношению к никотиновым ацетилхолиновым рецепторам человека, и может быть использовано в медицине. Пептид SLURP-1 получают путем трансформации компетентных клеток Escherichia coli BL21(DE3) рекомбинантной плазмидной ДНК pET22b(+)/SLURP-1. Изобретение позволяет повысить эффективность синтеза белка SLURP-1 в клетках Escherichia coli. 2 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 6 пр.

Способ получения симбиотического препарата на основе Escherichia coli VL-613 предусматривает засев, культивирование бактерий в жидкой питательной среде на основе перевара Хоттингера, концентрирование бактериальной суспензии с последующим смешиванием со стабилизатором, расфасовку и лиофилизацию препарата. При этом в процессе культивирования Escherichia coli VL-613 сразу после засева окислительно-восстановительный потенциал бактериальной культуры снижают до минус (80-100) мВ. До окончания процесса культивирования рО₂ поддерживают на уровне 20±5% от насыщения кислородом воздуха, рН регулируют на уровне 7,0-7,4. Дробную подачу глюкозы осуществляют дозами до концентрации 0,1-0,2% при лимитировании роста Escherichia coli VL-613 глюкозой. Длительность процесса культивирования при этом составляет 4-6 ч. Изобретение обеспечивает повышение качества и стабильности симбиотического препарата на основе Escherichia coli VL-613. Препарат содержит 80-85% жизнеспособных клеток и позволяет полностью заменить синтетический лизин в полноценных рационах при выращивании бройлеров. 3 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области микробиологии. Центрифугируют биологическую или искусственную жидкую среду, содержащую выбранный определенный микроорганизм. Проводят фильтрацию надосадочной жидкости. Получают серию разбавленных образцов, соответствующих увеличению разбавления фильтрата до 10^-15. Воздействуют на образцы электрическим, магнитным и/или электромагнитным полем возбуждения. Анализируют электрические сигналы, обнаруженные с помощью соленоида, и цифровую запись указанного электрического сигнала после его аналого-цифрового преобразования. Выбирают разбавленные образцы, для которых получены характеристические электрические сигналы, имеющие амплитуду в 1,5 раза больше, чем сигналы фонового шума, испускаемые водой. Размещают пробирки с разбавленными образцами одинаковых объемов в защитных оболочках для защиты разбавленных растворов от внешних электромагнитных полей. Раствор, содержащийся в пробирке Т1, используют в качестве эталонного раствора. Пробирку Т2 размещают в непосредственной близости от образца или приводят в контакт с образцом X, который предположительно содержит указанный выбранный определенный микроорганизм (например, E.coli). Сравнивают полученные электромагнитные сигналы: подавление сигнала указывает на присутствие микроорганизма в образце X. Группа изобретений позволяет получить реагенты, систему, предназначенные для проведения теста на выявление микроорганизмов в образце, и обнаружить инфекции у людей или животных. 3 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 пр., 8 ил.

На перевиваемых клетках культуры ткани клеток почки зеленой африканской мартышки BGM определяют индекс адгезивной активности (А), индекс инвазивной активности (I) и индекс токсической активности (Т) патогенных бактерий. Вносят в культуральный монослой клеток BGM дозу, содержащую 10⁷ колоний бактериальных клеток, и выдерживают при 37°С в течение 24 ч. Промывают клетки монослоя физиологическим раствором рН=7,2 в количестве 10 мл 8 раз. Определяют индекс (А) по формуле, предварительно подсчитав визуально в камере Горяева живые и мертвые клетки, адгезированные бактериальным ростом и окрашенные 0,1% раствором трипанового синего. Определяют индекс (I) по формуле, предварительно питательную среду во флаконах заменяют средой, содержащей антибиотик в концентрации 50 мкг/мл и инкубируют в термостате 1 ч при 37°С. Отмывают клетки BGM от бактерий 8 раз физиологическим раствором по 10 мл, лизируют их 0,1% Triton X-100. Из полученной суспензии делают высевы по 0,1 мл с учетом необходимых разведений на чашки со средой Эндо. Инкубируют в течение 24 ч в термостате при 37°С и подсчитывают число выросших бактериальных клеток. Определяют индекс (Т) по формуле, предварительно 1 сут. инкубируют бактерии в монослое клеток BGM. Центрифугируют и фильтруют суспензию через мембранные фильтры с диаметром пор 0,22 мкм. Помещают полученный субстрат в чистый монослой перевиваемых клеток и через 1 сут. подсчитывают количество живых и мертвых клеток BGM. Изобретение позволяет определить степень эпидемической опасности патогенных бактерий, выделенных из воды: она считается высокой при значениях: А>4,00, I>50%, Т>4,00. 3 табл., 4 пр.

В изобретении раскрыта нуклеотидная последовательность (фиг.2), кодирующая иммуногенный полипептид LcrV(G113), на основе которой сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pETV-I-3455, имеющая размер 6538 п.н., кодирующая иммуногенный полипептид LcrV(G113). Плазмида состоит из репликона плазмиды pBR322, гена -лактамазы, определяющего устойчивость к ампициллину, Т7-промотора, 1ас-оператора, fl-репликона и фрагмента ДНК, фланкированного сайтами для рестриктаз Ndel и HindIII, кодирующего синтез белка LcrV(G113), начинающегося с инициирующего кодона ATG. Описан рекомбинантный штамм бактерий Е. coli BL21(DE3)/pETV-I-3455 - продуцент иммуногенного полипептида LcrV(G113) с аминокислотной последовательностью, представленной на фиг.3, где триптофан в позиции 113 (W113) заменен на глицин. Раскрыт способ получения указанного полипептида путем культивирования штамма Е. coli BL21(DE3)/pETV-I-3455. Клетки разрушают в буферном растворе ультразвуком и выделяют полипептид последовательно гель-проникающей хроматографией с использованием носителя TSK HW-40, анионообменной и гидрофобной хроматографией. Изобретение позволяет получить продукт с высокой иммуногенной и протективной активностью. 5 н.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл.

Видоспецифический вирулентный штамм бактериофага Acinetobacter baumannii AP22 семейства Myoviridae выделен из клинического материала и депонирован в коллекции музея микроорганизмов ФГУН «Государственный научный центр прикладной микробиологии и биотехнологии» под номером Ph-42. Бактериофаг обладает выраженной литической активностью, лизирует 68% штаммов A. baumannii, выделенных из клинического материала, и использован для идентификации микроорганизмов этого вида при бактериологическом анализе клинического материала, а также для разработки комплексных лечебных препаратов против A. baumannii-инфекций. Изобретение обеспечивает широкий спектр активности в пределах данного вида. 2 ил., 1 табл.

Проводят подготовку пробы: навеску исследуемых форм наноуглерода диспергируют в 1 мл органических растворителей с меньшей, чем у воды, степенью полярности - диметилсульфоксиде или этаноле. Затем перемешивают и обрабатывают ультразвуком в течение 30 мин. Переносят полученную суспензию наноуглерода в водную среду до конечной концентрации использованного растворителя 2,5%. Вносят в созданную и контрольную пробы жизнеспособный сенсорный рекомбинантный люминесцирующий штамм Escherichia coli К12 с клонированными luxCDABE генами люминесцентной системы Photobacterium leiognathi. Инкубируют 60-180 мин, измеряют интенсивность свечения и параллельно определяют оптические свойства тестируемой суспензии. Определяют индекс токсичности (Т), при этом рассчитывают истинную интенсивность свечения штамма (I_ист) по сравнению с контролем с той же концентрацией растворителя, учитывающую светопоглощающие свойства исследуемой суспензии (D) и определенного в эксперименте уровня свечения бактериального люминесцирующего биосенсора (I _опр). Изобретение позволяет повысить точность и чувствительность определения биотоксичности наноуглерода за счет введения поправочной величины - истинной интенсивности свечения штамма (I_ист ), учитывающей закономерности распространения излучаемого света в исследуемой суспензии.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению рекомбинантных биомаркеров полипептидной природы, и может быть использовано в диагностике рассеянного склероза. Для получения белка PS-CFP2/TurboYFP_MBP7 конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК PS-CFP2/TurboYFP_MBP7 размером 4916 п.о., кодирующую гибридный белок, содержащий последовательность белков PS-CFP2 и Turbo YFP, соединенных фрагментом основного белка миелина 80-104. В состав плазмидной ДНК также входит промотор транскрипции Т5 РНК-полимеразы, участок связывания рибосомы; фрагмент ДНК плазмиды ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость клеток Escherichia coli к ампициллину, в качестве генетического маркера. Полученной плазмидной ДНК трансформируют клетки штамма Escherichia coli BL21(DE3) с получением штамма-продуцента гибридного белка PS-CFP2/TurboYFP_MBP7. Для получения белка PS-CFP2/TurboYFP_MBP7 проводят культивирование штамма-продуцента Escherichia coli BL21(DE3)/pQe30_PS-CFP2/TurboYFP_MBP7, разрушают клетки и очищают целевой белок методом аффинной и гель-фильтрационной хроматографии. Изобретение позволяет повысить чувствительность и стабильность биосенсора, а также расширить его специфичность в отношении пула каталитических антител. 3 н.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл.

РЕКОМБИНАНТНАЯ БЕЛКОВАЯ КОНСТРУКЦИЯ ДСД-сп- -ГАЛ, ОБЛАДАЮЩАЯ АКТИВНОСТЬЮ ФЕРМЕНТА ТЕРМОСТАБИЛЬНОЙ -ГАЛАКТОЗИДАЗЫ (ЛАКТАЗЫ) И СПОСОБНОСТЬЮ АФФИННО СВЯЗЫВАТЬСЯ С ДЕКСТРАНОМ, ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pGD-10, ОПРЕДЕЛЯЮЩАЯ БИОСИНТЕЗ ДСД-сп- -ГАЛ, И ШТАММ-ПРОДУЦЕНТ Escherichia coli DH5 /PGD-10

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения белка ДСД-сп- -ГАЛ в клетках Е.соli. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК pGD-10, кодирующую химерную белковую конструкцию ДСД-сп- -ГАЛ, содержащую декстрансвязывающий домен ДСД из микроорганизма Leuconostoc mesenteroides, который генно-инженерным путем объединен через глицин-сериновый спейсер с термостабильной бета-галактозидазой из термофильного микроорганизма Thermoanaerobacter ethanolicus. Для получения штамма Escherichia coli DH5 /pGD-10 - продуцента рекомбинантной белковой конструкции ДСД-сп- -ГАЛ, клетки родительского штамма Escherichia coli DH5 трансформируют рекомбинантной плазмидной ДНК pGD-10. Изобретение позволяет получить белок ДСД-сп- -ГАЛ, обладающий активностью фермента термостабильной бета-галактозидазы (лактазы) и способностью аффинно связываться с декстраном. 3 н.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения рекомбинантного интерлейкина-11 (рИЛ-11) человека. Рекомбинантную плазмидную ДНК pET32M/mTrx-rhIL-11 получают способом, который включает синтез четырех фрагментов гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека из олигонуклеотидных праймеров, клонирование каждого фрагмента в рестрицированный эндонуклеазой EcoRV плазмидный вектор pGEM5z, трансформацию каждой из 4-х плазмид клеток E.coli штамма DH5a, отбор кодирующих соответствующие фрагменты гена интерлейкина-11 человека клонов, отбор плазмид с фрагментами гена интерлейкина-11 человека без мутаций, объединение всех фрагментов гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека в плазмидном векторе pUC19, конструирование вектора рЕТ32М на основе плазмиды pET32b, переклонирование гена рекомбинантного интерлейкина-11 человека в экспрессионный вектор рЕТ32М, кодирующий тиоредоксин 1 E.coli с заменой Asn84/Gln. Полученной ДНК трансформируют клетки штамма E.coli BL21(DE3) с получением штамма E.coli BL21(DE3)/pET32M/mTrx-rhIL-11 - продуцента рекомбинантного интерлейкина-11 человека в составе растворимого слитного белка mTrx-rhIL-11. Изобретение обеспечивает эффективную продукцию рИЛ-11 в клетках E.coli. 3 н.п. ф-лы, 5 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к методам идентификации и дифференциации культур с использованием бактериофага. Штамм бактериофага Escherichia coli V32 депонирован в коллекции музея микроорганизмов ФГУН ГНЦ ПМБ под номером Ph25, является специфичным и вирулентным для бактериофага, и используют его как дополнительное средство при идентификации бактерий Escherichia coli серогруппы O157 на стадии анализа бактериальных колоний. Использование штамма является простым и общедоступным средством, не требующим больших затрат времени и материалов. 1 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к рекомбинантной продукции онкофетальных белков человека, и может быть использовано для получения фрагмента с 404 по 609 аминокислоту альфа-фетопротеина человека. Путем трансформации клеток Escherichia coli штамма BL21(DE3) плазмидной ДНК pAFP11D3 получают штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pAFP11D3 - продуцент фрагмента с 404 по 609 аминокислоту альфа-фетопротеина человека. Изобретение позволяет уменьшить возможность загрязнения вирусами человека при получении рекомбинантным путем указанного фрагмента альфа-фетопротеина, обладающего сродством к рецептору альфа-фетопротеина (АФП) и подвергающегося рецептор-опосредованному эндоцитозу. 1 з.п. ф-лы, 7 ил.

Изобретение относится к ветеринарной медицине и биотехнологии. Штамм получают путем встраивания в геном Escherichia coli, изолированной от клинически здорового представителя семейства псовых, генов, детерминирующих синтез микроцина С51, В-субъединицы токсина, а также вакцинного варианта elt-оперона и А-субъединицы, усиливающий иммунный ответ. Штамм обладает выраженной адгезией к слизистой оболочке кишечника животных семейства псовых. Лиофилизированная высушенная культура Escherichia coli ЕВ387 представляет собой пробиотический препарат для защиты животных семейства псовых от токсикозов, вызванных цитотоническими токсинами типа A ₁B₅. Изобретение обеспечивает нормализацию и стабилизацию качественного и количественного состава микрофлоры желудочно-кишечного тракта представителей семейства псовых. 2 н.п. ф-лы, 1 табл.

Настоящее изобретение относится к микробиологии и биотехнологии. Предложен способ определения антимикробной активности дефенсинов и их производных. В качестве тест штамма в данном способе используется штамм Escherichia coli К12 TG 1 (lux+) с клонированными генами luxCDABE Photobacterium leiognathi 54D10 («Эколюм-9»). Изобретение позволяет расширить спектр штаммов микроорганизмов для определения биологической (антимикробной) активности дефенсинов и их производных. 2 ил.

Изобретение относится к генетической инженерии и может быть использовано для получения гамма-интерферона человека. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК pTrcIFdL, кодирующую полипептид с активностью гамма-интерферона человека мол. массой 3,06 Md (4,642 т.п.о.) и имеющую физическую карту, приведенную на фиг.1. С помощью плазмидной ДНК pTrcIFdL получают штамм BL21(DE3)/pTrcIFdL - продуцент полипептида с активностью гамма-интерферона человека. Изобретение позволяет получить полипептид с биологической активностью гамма-интерферона человека и повышенной термоустойчивостью, а также увеличить уровень его биосинтеза до 40% от суммарного клеточного белка. 2 н.п. ф-лы, 2 ил.