Пептиды на носителях или иммобилизованные пептиды, их получение: ..с носителем, являющимся синтетическим полимером – C07K 17/08

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к конъюгату варианта эксендина с молекулой ПЭГ, и может быть использовано в медицине. Указанный конъюгат включает эксендин с аминокислотной последовательностью SEQ ID NO: 4 и одну молекулу ПЭГ с молекулярным весом от 21 кДа до 29 кДа, конъюгированную с остатком цистеина в эксендине. Изобретение относится также к способу получения конъюгата эксендина, фармацевтической композиции и набору для снижения уровня глюкозы в крови, предусматривающим использование конъюгата эксендина. Изобретение позволяет получить конъюгат эксендина с ПЭГ с активностью агониста рецептора GLP-1 и с сохранением максимального эффекта в отношении стимуляции продукции цАМФ (E_max) при ПЭГилировании. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 44 ил., 5 табл., 26 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен ПЭГ-модифицированный эксендин или аналог эксендина, содержащий одно или более ПЭГ-производных (варианты). Одно или более ПЭГ-производных имеют разветвленную структуру (I) или (III), как указано в формуле. Молекулярная масса указанных одного или более ПЭГ-производных составляет от 5000 Да до 40000 Да. Также предложены композиция и способ лечения сахарного диабета с применением указанного ПЭГ-модифицированного эксендина или аналога эксендина. Предложенные ПЭГ-модифицированные эксендины или аналоги эксендинов имеют продолжительный период полужизни в крови, высокую биоактивность и низкую иммуногенность. 5 н. и 20 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению пептидного производного - миметика ЭПО, имеющего формулу (I):

и его фармацевтических солей, где R ₁, R₅ выбраны из циклических пептидов, имеющих последовательности SEQ ID NO:5, 6, 7 и 8; n₁, n ₂ представляют собой целые числа, независимо выбранные из 0-10; R₂, R₄ выбраны из -СО или -CH ₂; R₃ выбран из О, S, CH₂, N(CH ₂)_n3NHR₆, NCO(CH₂) _n4NHR₆, CHOCONH(CH₂)_n5 NHR₆, CHSCON(CH₂)_n5NHR₆ или CHNHCON(CH₂)_n5NHR₆; где n₃ представляет собой целое число, выбранное из 1-10, n₄ представляет собой целое число, выбранное из 2-10, n₅ представляет собой целое число, выбранное из 2-10, R₆ выбран из Н или производных метоксиполиэтиленгликоля. Полученный пептид или его фармацевтически приемлемую соль используют в составе фармацевтической композиции для лечения расстройств, характеризующихся недостаточностью ЭПО, низкой или дефектной популяцией эритроцитов. Изобретение позволяет получить агонист рецептора ЭПО, обладающий повышенной биологической активностью по сравнению с уже существующими миметиками ЭПО. 5 н. и 10 з.п. ф-лы, 2 ил., 5 табл., 19 пр.

Изобретение относится к области технологий изготовления биологических препаратов и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Способ получения пегилированного человеческого гормона роста предусматривает пегилирование указанного белка двухцепочечным полиэтиленгликолем в одном сайте при рН не ниже 6,0. Полученный пегилированный гормон роста подвергают электрофорезу в полиакриламидном геле в невосстанавливающих условиях и выделяют целевой продукт из полосы, соответствующей более низкой кажущейся молекулярной массе. Способ, предусматривающий пегилирование человеческого гормона роста при рН не ниже 8,0 и выделение полученного продукта, позволяет получить препарат, содержащий главным образом пегилированный человеческий гормон роста с более низкой кажущейся молекулярной массой. Пегилированный гормон роста с низкой кажущейся молекулярной массой и обогащенный им препарат применяют для изготовления медикамента для лечения заболевания, нуждающегося в лечении гормоном роста. Применение изобретения позволяет повысить биологическую активность гормона роста и увеличить период его метаболического полувыведения. 5 н. и 14 з.п. ф-лы, 10 ил., 3 табл., 6 пр.

Группа изобретений относится к области биохимии. Предложен пегилированный интерферон- 2b (IFN- 2b), имеющий структуру, как указано в формуле изобретения. Пегилированный интерферон- 2b получают соединением IFN- 2b с Y-образным разветвленным полиэтиленгликолем (YPEG), где YPEG связан с IFN- 2b с помощью амидной связи, сформированной -аминогруппой боковой цепи остатка Lys в IFN- 2b в положении 134 в SEQ ID No.1. Способ получения и очистки пегилированного IFN- 2b включает следующие этапы. В щелочной среде при рН 9,0 проводят реакцию Y-образного разветвленного PEG с IFN-a2b и получают пегилированный IFN- 2b. Извлекают полученные продукты реакции с помощью анионообменной смолы и элюируют данные продукты анионным градиентом, чтобы получить модифицированные продукты. В качестве анионообменной смолы используют Q Сефарозу FF, а в качестве анионного градиента используют хлорид-ионный градиент. Далее элюируют модифицированные продукты с помощью катионообменной смолы катионным градиентом. При этом в качестве катионообменной смолы используют SP Сефарозу FF, а в качестве катионного градиента используют натриевый ионный градиент. Далее собирают каждый пик в отдельности. Определяют активность продукта каждого пика и выбирают пик, соответствующий продукту реакции, обладающему наиболее высокой активностью. Также предложен состав для лечения заболевания, требующего применения IFN- 2b, который состоит из фармацевтически эффективного количества указанного пегилированного IFN- 2b и фармацевтически приемлемого носителя или неактивного вещества. Пегилированный IFN- 2b или указанный выше состав также применяют для получения лекарственного препарата для лечения различных заболеваний, требующих применения IFN- 2b. Предложенный пегилированный IFN- 2b обладает более высокой удельной активностью 2,65±0,185×10 ⁶ МЕ/мг и продолжительным временем полужизни в сыворотке. 5 н. и 21 з.п. ф-лы, 11 ил., 5 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу направленной доставки ДНК в опухолевые и стволовые клетки, экспрессирующие рецептор CXCR4. Представленное изобретение может быть использовано для направленной доставки генетических конструкций в стволовые и злокачественные опухолевые клетки с целью коррекции генных дефектов и предотвращения заболеваний. Способ включает подготовку носителей генетических конструкций путем включения в состав молекул носителя, представляющего собой ДНК-связывающую последовательность из восьми остатков аминокислоты лизина - КККККККК, сигнальных последовательностей. Присоединение сигнальной последовательности к ДНК-связывающей последовательности осуществляют с помощью линкерного участка из двух молекул -аминогексановой кислоты. После чего осуществляют формирование комплексов ДНК/носитель. Затем проводят трансфекцию in vitro. Предложенное изобретение позволяет повысить эффективность доставки гена интереса в опухолевые и стволовые клетки. 2 з.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения трехмерных матриц для тканеподобных структур из клеток животного происхождения. Данный способ предусматривает ковалентное связывание гистонов с поверхностью предварительно активированных биосовместимых полимерных микросфер из кристаллизованного декстрана. Затем проводят осаждение центрифугированием микросфер с ковалентно связанными гистонами. После чего микросферы, содержащие от 160 до 200 мкг белка на 1,0 г, наносят на поверхность субстрата в количестве от 0,5 до 1,0 мг на 1,0 см² и высушивают при комнатной температуре. Далее промывают буферным раствором рН 7,5 для удаления несвязанного с субстратом материала. Полученный слой микросфер на поверхности субстрата с нанесенными на него клетками используют в качестве основы для получения тканеподобных клеточных структур. Представленное изобретение позволяет повысить надежность структуры и стабильность белкового слоя трехмерной матрицы, а также упростить и удешевить способ получения трехмерных матриц для тканеподобных структур из клеток животного происхождения. 5 з.п. ф-лы, 11 ил.

Изобретение относится к области химии полимеров, биохимии и медицины, а именно к способу получения глюкозочувствительных полимерных гидрогелей, применяемых в качестве носителей для контролируемого выделения инсулина. Глюкозочувствительные полимерные гидрогели получают путем взаимодействия производного глюкозы с конканавалином А. Взаимодействие проводят сополимеризацией в водном растворе под действием окислительно-восстановительного инициатора 0,1-2,0 мас.% N-(2-D-глюкоз)акриламида, 1-5 мас.% акриламида и 0,01-0,075 мас.% N,N-метиленбисакриламида в присутствии 5-20 мас.% конканавалина А. Полученные полимерные гидрогели способны быть носителем инсулина, при этом никакие другие компоненты гидрогеля в окружающую среду не выделяются. 2 табл.

Изобретение относится к медицине, в частности, к гематологии. Предложен способ получения кровезаменителя и установка для осуществления способа. Способ получения кровезаменителя включает получение дезоксигенированного гемоглобина, его полимеризацию и очистку. Получение дезоксигенированного гемоглобина включает гемолиз добавлением воды к эритроцитарной массе, отделение стромы, осаждение негемовых белков и их удаление из полученного раствора гемоглобина. Полимеризация включает обработку полученного дезоксигенированного гемоглобина модифицированным глутаровым альдегидом и восстановление боргидридом натрия, а очистка включает ультрафильтрацию. Для получения дезоксигенированного гемоглобина используют свободную от лейкоцитов эритроцитарную массу, осаждение негемовых белков ведут путем добавления к раствору гемоглобина концентрированного раствора хлорида натрия, после удаления негемовых белков осуществляют концентрированно раствора гемоглобина ультрафильтрацией, процесс получения гемоглобина ведут в полимерных одноразовых контейнерах, а дезоксигенацию и полимеризацию проводят в газовихревом реакторе в атмосфере азота, причем дезоксигенацию осуществляют в течение 1-6 часов, полимеризацию - в течение 1-6 часов, очистку диафильтацией ведут в полимерных одноразовых контейнерах на отсекающих мембранах с получением готового продукта в диапазоне по молекулярной массе не более 450 кДа и не менее 100 кДа. Способ позволяет упростить процесс получения полигемоглобина, снизить его стоимость, повысить производительность. Установка для осуществления способа включает в себя последовательно соединенные участок получения гемоглобина, реактор для полимеризации гемоглобина и систему очистки конечного продукта. Участок получения гемоглобина содержит последовательно соединенные емкость для гемолиза с фильтрационным устройством для удаления стромы, емкость для осаждения негемовых белков с фильтрационным устройством для удаления осажденных негемовых белков. Система очистки готового продукта содержит емкости и устройства для ультрафильтрации с отсекающими мембранами. Все емкости участка для получения гемоглобина представляют собой полимерные одноразовые контейнеры. Емкость для осаждения негемовых белков соединена с емкостью, предназначенной для концентрированного раствора хлорида натрия. Реактор для полимеризации выполнен в виде устройства газовихревого типа, емкости системы очистки готового продукта представляют собой полимерные одноразовые контейнеры, а участок получения гемоглобина, реактор для полимеризации гемоглобина и система очистки конечного продукта, а также все емкости и устройства установки связаны между собой при помощи стерильных быстроразъемных соединений. Предложенная конструкция позволяет сократить материалоемкость установки, повысить ее производительность, обеспечить стерильность условий проведения технологического процесса. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к таким областям как биохимия, биофизика, медицинская диагностика и может быть использовано в качестве модели клеточной мембраны при исследовании механизма действия лекарственных мембранопротекторных препаратов, а также для создания активных элементов биосенсорных устройств. Сущность способа нанесения белковых пленок на твердую подложку основана на использовании в качестве иммобилизующего слоя для белковых молекул смешанного сложного эфира целлюлозы - ацетопивалината целлюлозы, который повышает степень упорядоченности молекул белка, увеличивает плотность заполнения белковой пленки и обеспечивает экономическую эффективность предлагаемого способа. 5 ил.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и биоорганической химии. Техническая задача - разработка способа изготовления гелевых биочипов с подложкой из немодифицированных полимерных материалов. Предложено применение ряда немодифицированных полимерных материалов, используемых без их предварительной модификации, для изготовления подложки биочипов, которая предназначена для иммобилизации на ее поверхности гидрогелей. Предложены также биочип, изготовленный на подложке из немодифицированных полимерных материалов, способ изготовления биочипа и способ иммобилизации гидрогелей на подложках из немодифицированных полимерных материалов. 4 н. и 51 з.п. ф-лы, 2 ил.

(56) (продолжение):

CLASS="b560m"co-polymerization. Nucleic Acids Research, 1999, Vol.27, No.2, p.649-655. FR 2867479 A, 16.09.2005. EP 0410323 A, 30.01.1991. DK 200387 A, 15.04.1987.

Изобретение относится к медицине, фармакологии и иммунологии. Вакцина включает полианионную матрицу и химически с ней связанные пептид и фармакофор Норборнен. В качестве полимерной матрицы вакцина содержит полианионную матрицу, в качестве пептида - пептид-имитатор химерного домена, представляющий собой пептидный фрагмент структурного белка р17/18/55 ВИЧ-1/2 с клеточным рецептором CD4. Вакцина обладает противовирусным, иммуномодулирующим действием и обеспечивает адресную доставку комплексного вакцинного препарата к месту инфекции ВИЧ-1/2 и подавляет специфическую вирусную инфекцию. Изобретение может быть использовано для профилактики и лечения ВИЧ-инфекции и СПИД. 1 ил., 2 табл.

Изобретение относится к иммунологии и биотехнологии. В изобретении описывается мышиное антитело и его гуманизированный вариант (CDP870), специфичные к фактору некроза опухоли альфа человека. Аминокислотная последовательность представлена в описании. Описаны также соединения с аффинностью в отношении фактора некроза опухоли альфа человека на основе гуманизированного антитела, у которых к одному из остатков цистеина на С-конце тяжелой цепи присоединена лизилмалеимидная группа, ковалентно связанная по лизильному остатку с одной или несколькими молекулами метоксиполи(этиленгликоля). Раскрыты последовательности ДНК, кодирующих антитела, специфичные к фактору некроза опухоли альфа человека, и варианты векторов экспрессии, содержащие указанные ДНК. Описаны варианты способа получения клетки-хозяина с использованием векторов экспрессии и варианты способа получения антител на основе полученных клеток-хозяев. Раскрыты терапевтические композиции для лечения патологии, опосредованной фактором некроза опухоли альфа, на основе антител. Изобретение обеспечивает антитела с высокой аффинностью: для мышиного антитела 0,85×10 ^-10 М, для его гуманизированного варианта 0,5×10 ^-10 М, и низкой иммуногенностью у человека - для гуманизированного антитела. Доля пациентнов с улучшенным ACR20 составила при введении 5 и 20 мг/кг CDP870 соответственно 75% и 75% через 8 недель. Полупериод существования в плазме CDP870 составил 14 дней. 21 н. и 37 з.п. ф-лы, 24 ил., 6 табл.

Группа изобретений относится к аналитической химии, точнее к устройству и технологии изготовления биочипов на основе монолитного макропористого полимера, предназначенных для анализа белков (протеинов). Изобретение может найти применение в аналитической химии, молекулярной биологии, биотехнологии, фармакологии, медицине. Биочип включает подложку с нанесенным на нее полимерным рабочим слоем, образованным из сополимера на основе производных метакриловой кислоты с иммобилизованными на нем биологическими макромолекулами - зондами, причем подложка выполнена из активированного или неактивированного стекла, металла или полимерного материала, а рабочий слой состоит из макропористого монолитного сополимера глицидилметакрилата и этиленгликольдиметакрилата при их массовом соотношении (50:70)-(50:30) с иммобилизованными на нем афинными биологическими зондами, при этом соотношение зонд - сополимер составляет для белка - 2-10 мг/г сополимера, для пептида - 1-20 мг/г сополимера и для олигонуклеотида, нуклеиновой кислоты - 0.5-3 мг/г сополимера, с радиусом пор 0,4-1,5 мкм, имеет толщину 50-700 мкм и выполнен в виде сплошного или дискретного микроячеистого слоя. Способ изготовления биочипа включает подготовку подложки, формирование рабочего слоя путем сополимеризации мономеров на основе производных метакриловой кислоты, иммобилизации на образующемся сополимере биологических макромолекул - зондов, отмывку, сушку полученного биочипа, причем для формирования рабочего слоя проводят радикальную сополимеризацию глицидилметакрилата и этиленгликольдиметакрилата при массовом соотношении мономеров (50:70)-(50:30) с использованием фото- или термического инициирования в среде порогенного растворителя, при соотношении суммы объемов мономеров к объему растворителя 6:9, при концентрации инициатора в реакционной среде 0,2-1,0 мас.%, указанную реакционную смесь наносят на подложку сплошным слоем или дискретно, при этом в результате сополимеризации на подложке образуется макропористый монолитный сплошной или дискретный микроячеистый слой, а затем проводят в порах указанного слоя ковалентную иммобилизацию биологических макромолекул или их прямой синтез на образующемся сополимере с использованием его нативных или модифицированных эпоксидных групп с получением биологического афинного зонда, при этом зонд вводят в сополимер в количестве: для белка - 2-10 мг/г сополимера, для пептида - 1-20 мг/г сополимера и для олигонуклеотида или нуклеиновой кислоты - 0,5-3 мг/г сополимера. Достигается возможность изготовления биочипа с заранее заданным контролируемым и воспроизводимым качеством и многоразового использования. 2 н. и 15 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к получению новых циклопептидов общей формулы цикло(R₁-Arg-Ile-Lys-Pro-His-R₂ ), выбранных из следующих соединений: P11: цикло(DPhe-Pro-Gln-Ile-Met-Arg-Ile-Lys-Pro-His-Gln-Gly-Gln-His-Ile-Gly-Glu) (SEQ ID NO: 5), P16: цикло (Arg-Ile-Lys-Pro-His-Gln-Gly) (SEQ ID NO: 8), P17: цикло(Pro-Arg-Ile-Lys-Pro-His-Gln-Gly) (SEQ ID NO: 9), P19: цикло(Gln-Ile-Met-Arg-Ile-Lys-Pro-His-Gln-Gly-Gln-His-Ile-Gly-Glu) (SEQ ID NO: 10), P20: цикло(DPhe-Pro-Gln-Ile-Met-Arg-Ile-Lys-Pro-His-Gln-Gly-Gln-His-Ile-Gly) (SEQ ID NO: 11), Р23: цикло (DPhe-Pro-Arg-Ile-Lys-Pro-His-Gln) (SEQ ID NO: 13), P24: цикло (Gly-Arg-Ile-Lys-Pro-His) (SEQ ID NO: 25), a также соединений P11, P20 и Р23, у которых DPhe заменен на DTyr. Циклопептиды применяют в системах для ингибирования ангиогенеза, включающих подложку, к которой присоединены циклопептиды посредством органической ножки, которая может содержать группировку, подверженную расщеплению какой-либо ферментативной системой. 8 н. и 15 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.