композиции и способы получения слаборастворимых в воде лекарственных средств с увеличенной стабильностью

Формула изобретения

1. Фармацевтическая композиция, содержащая наночастицы, включающие доцетаксел, где доцетаксел, используемый для получения композиции, находится в безводной форме, и композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый эксципиент.

2. Композиция по п.1, где композиция является стерильной.

3. Композиция по п.1, где композиция подходит для парентерального введения.

4. Композиция по п.1, где композиция дополнительно включает биосовместимый полимер.

5. Композиция по п.4, где биосовместимым полимером является белок-носитель.

6. Композиция по п.5, где белок-носитель является альбумином.

7. Композиция по п.5, где наночастицы, включающие доцетаксел, покрыты белком-носителем.

8. Композиция по п.7, где белком-носителем является альбумин.

9. Композиция по п.8, где массовое соотношение доцетаксела и альбумина в композиции составляет примерно 18:1 или менее.

10. Композиция по п.1, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

11. Композиция по п.8, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

12. Композиция по п.9, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

13. Композиция по п.1, где композиция дополнительно включает поверхностно-активное вещество.

14. Композиция по п.13, где поверхностно-активным веществом является Tween 80.

15. Композиция по п.13, где поверхностно-активное вещество является безводным.

16. Композиция по п.1, где композиция является лиофилизированной композицией.

17. Композиция по п.1, где композиция является жидкой суспензией.

18. Композиция по п.17, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела в концентрации по меньшей мере примерно 1 мг/мл.

19. Композиция по п.18, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела в концентрации по меньшей мере примерно 15 мг/мл.

20. Композиция по п.1, дополнительно содержащая сахар.

21. Композиция по п.20, где сахар представляет собой сахарозу.

22. Композиция по п.1, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

23. Композиция по п.1, дополнительно содержащая стабилизирующий агент.

24. Композиция по п.23, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

25. Композиция по п.23, где стабилизирующим агентом является комплексообразующий агент.

26. Композиция по п.25, где комплексообразующий агент является выбранным из группы, состоящей из цитрата, эдетата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей.

27. Композиция по п.26, где комплексообразующим агентом является цитрат.

28. Композиция по п.27, где цитрат представляет собой лимонную кислоту.

29. Композиция по п.27, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

30. Композиция по п.27, где цитрат представляет собой цитрат натрия.

31. Композиция по п.27, где pH композиции имеет значение не менее чем приблизительно 7.

32. Композиция по п.27, где композиция дополнительно включает хлорид натрия.

33. Композиция по п.32, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

34. Композиция по п.32, где композиция включает примерно 200 мМ цитрата натрия и примерно 300 мМ хлорида натрия.

35. Композиция по п.34, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

36. Композиция по п.23, где стабилизирующим агентом является пирофосфат натрия или глюконат натрия.

37. Композиция по п.1, где композиция является пригодной для стерильного фильтрования.

38. Композиция по любому из пп.6, 8, 9, 11 или 12, где альбумином является человеческий альбумин сыворотки.

39. Фармацевтическая композиция, содержащая наночастицы, включающие доцетаксел, где по меньшей мере приблизительно 10% доцетаксела в композиции присутствует в безводной форме, и композиция дополнительно содержит фармацевтически приемлемый эксципиент.

40. Композиция по п.39, где композиция дополнительно включает биосовместимый полимер.

41. Композиция по п.40, где биосовместимым полимером является белок-носитель.

42. Композиция по п.41, где белок-носитель является альбумином.

43. Композиция по п.41, где наночастицы, включающие доцетаксел, покрыты белком-носителем.

44. Композиция по п.43, где белком-носителем является альбумин.

45. Композиция по п.44, где массовое соотношение доцетаксела и альбумина в композиции составляет примерно 18:1 или менее.

46. Композиция по п.39, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

47. Композиция по п.44, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

48. Композиция по п.45, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

49. Композиция по п.39, где композиция дополнительно включает поверхностно-активное вещество.

50. Композиция по п.49, где поверхностно-активным веществом является Tween 80.

51. Композиция по п.49, где поверхностно-активное вещество является безводным.

52. Композиция по п.39, где композиция является лиофилизированной композицией.

53. Композиция по п.39, где композиция является жидкой суспензией.

54. Композиция по п.53, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела в концентрации по меньшей мере примерно 1 мг/мл.

55. Композиция по п.54, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела в концентрации по меньшей мере примерно 15 мг/мл.

56. Композиция по п.39, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

57. Композиция по п.39, дополнительно содержащая стабилизирующий агент.

58. Композиция по п.57, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

59. Композиция по п.57, где стабилизирующим агентом является комплексообразующий агент.

60. Композиция по п.59, где комплексообразующий агент является выбранным из группы, состоящей из цитрата, эдетата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей.

61. Композиция по п.60, где комплексообразующим агентом является цитрат.

62. Композиция по п.61, где цитрат представляет собой лимонную кислоту.

63. Композиция по п.61, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

64. Композиция по п.61, где цитрат представляет собой цитрат натрия.

65. Композиция по п.61, где pH композиции имеет значение не менее чем приблизительно 7.

66. Композиция по п.61, где композиция дополнительно включает хлорид натрия.

67. Композиция по п.66, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

68. Композиция по п.66, где композиция включает примерно 200 мМ цитрата натрия и примерно 300 мМ хлорида натрия.

69. Композиция по п.68, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

70. Композиция по п.57, где стабилизирующим агентом является пирофосфат натрия или глюконат натрия.

71. Композиция по п.39, дополнительно содержащая сахар.

72. Композиция по п.71, где сахар представляет собой сахарозу.

73. Композиция по п.39, где композиция является пригодной для стерильного фильтрования.

74. Композиция по любому из пп.42, 44, 45, 47 или 48, где альбумином является человеческий альбумин сыворотки.

75. Фармацевтическая композиция, включающая наночастицы, содержащие доцетаксел, где композиция дополнительно содержит цитрат.

76. Композиция по п.75, где композиция является физически стабильной и не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере приблизительно 8 ч после повторного восстановления или повторной гидратации.

77. Композиция по п.75, где композиция является стерильной.

78. Композиция по п.75, где композиция подходит для парентерального введения.

79. Композиция по п.75, где композиция дополнительно включает биосовместимый полимер.

80. Композиция по п.79, где биосовместимый полимер является белком-носителем.

81. Композиция по п.80, где белком-носителем является альбумин.

82. Композиция по п.79, где наночастицы, включающие доцетаксел, покрыты биосовместимым полимером.

83. Композиция по п.82, где биосовместимый полимер является белком-носителем.

84. Композиция по п.83, где белком-носителем является альбумин.

85. Композиция по п.84, где массовое соотношение доцетаксела и альбумина в композиции составляет примерно 18:1 или менее.

86. Композиция по п.75, где наночастицы имеют средний или усредненный диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

87. Композиция по п.84, где наночастицы имеют средний диаметр не более чем приблизительно 200 нм.

88. Композиция по п.75, где композиция является лиофилизированной композицией.

89. Композиция по п.75, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела.

90. Композиция по п.89, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела в концентрации по меньшей мере примерно 1 мг/мл.

91. Композиция по п.90, где композицией является жидкая суспензия доцетаксела в концентрации по меньшей мере примерно 15 мг/мл.

92. Композиция по любому из пп.75-91, где цитрат представляет собой цитрат натрия.

93. Композиция по любому из пп.75-91, где pH композиции имеет значение не менее чем приблизительно 7.

94. Композиция по любому из пп.75-91, где композиция дополнительно включает хлорид натрия.

95. Композиция по п.94, где композиция включает примерно 200 мМ цитрата натрия и примерно 300 мМ хлорида натрия.

96. Композиция по любому из пп.75-91, дополнительно содержащая сахар.

97. Композиция по п.96, где сахар представляет собой сахарозу.

98. Композиция по любому из пп.75-91, где композиция является пригодной для стерильного фильтрования.

99. Композиция по любому из пп.75-91, где цитрат представляет собой лимонную кислоту.

100. Композиция по любому из пп.81, 84, 85 или 87, где альбумином является человеческий альбумин сыворотки.

101. Герметичная ампула, содержащая композицию по любому из предшествующих пунктов.

102. Набор, содержащий композицию по любому из пп.1-100 для применения при лечении рака, дополнительно содержащий инструкции.

103. Применение композиции по любому из пп.1-100 для получения лекарственного средства для лечения рака.

104. Применение композиции по п.103, где раком является любой из: рака предстательной железы, рака толстой кишки, рака молочной железы, рака головы и шеи, рака поджелудочной железы, рака легкого и рака яичника.

105. Способ получения фармацевтической композиции, содержащей наночастицы, включающие доцетаксел и биосовместимый полимер, где способ включает комбинирование безводного доцетаксела с биосовместимым полимером.

106. Способ по п.105, где способ включает: 1) растворение безводного доцетаксела в органическом растворителе; 2) добавление раствора доцетаксела в водный раствор, содержащий биосовместимый полимер, и 3) подвергание смеси раствора доцетаксела и водного раствора, содержащего биосовместимый полимер, гомогенизации под высоким давлением.

107. Способ по п.106, дополнительно включающий отделение органического растворителя из смеси за счет выпаривания.

108. Способ по любому из пп.105-107, где белком-носителем является альбумин.

109. Способ по любому из пп.105-107, дополнительно включающий введение стабилизирующего агента в композицию.

110. Способ по п.108, дополнительно включающий введение стабилизирующего агента в композицию.

111. Способ по п.108, где альбумин является человеческим альбумином сыворотки.

112. Способ получения фармацевтической композиции, включающей a) наночастицы, содержащие доцетаксел, и b) поверхностно-активное вещество, где способ включает комбинирование безводного доцетаксела с поверхностно-активным веществом.

113. Способ по п.112, дополнительно включающий введение стабилизирующего агента в композицию.

114. Способ по п.112, где поверхностно-активное вещество является безводным.

115. Способ по любому из пп.112-114, где поверхностно-активным веществом является Tween 80.

116. Способ стабилизации доцетаксела в композиции, содержащей наночастицы, включающие доцетаксел, где способ включает комбинирование композиции, включающей доцетаксел, с цитратом.

Описание изобретения к патенту

ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА НА РОДСТВЕННЫЕ ЗАЯВКИ

Эта заявка испрашивает приоритет предварительной заявки на патент США № 60/712865, поданной 31 августа 2005 г, предварительной заявки на патент США № 60/736962, поданной 14 ноября 2005 г, и предварительной заявки на патент США № 60/736931, поданной 14 ноября 2005 г, все из которых приведены здесь в качестве ссылки в полном объеме.

ПРЕДШЕСТВУЮЩИЙ УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Существует постоянно увеличивающееся число получаемых фармацевтических лекарственных средств, которые являются слаборастворимыми или нерастворимыми в водных растворах. Такие лекарственные средства порождают сложные проблемы при доставке их в инъецируемой форме, такой как путем парентерального введения. Хорошо подобранная композиция должна как минимум обеспечивать терапевтически эффективное количество слаборастворимого лекарственного средства в желаемом участке абсорбции в абсорбируемой форме. Кроме того, эти композиции проявляют тенденцию к нестабильности с образованием осадка и/или осаждением, происходящим меньше чем за 24 часа после повторной гидратации или повторного восстановления.

Таксаны, в частности, два пригодных в настоящее время таксановых лекарственных средства, паклитаксел и доцетаксел, являются сильнодействующими противоопухолевыми агентами. Паклитаксел очень слабо растворим в воде (менее чем 10 мкг/мл) и в результате не может быть практически получен в водной среде для внутривенного введения. В настоящее время паклитаксел получен для внутривенного введения пациентам с раком в растворе с полиоксиэтилированным касторовым маслом (Polyoxyl 35 или Cremophor ^®) как исходным растворителем/поверхностно-активным веществом с высокими концентрациями этанола, используемого как вспомогательный растворитель. Одной из больших трудностей при введении паклитаксела является проявление аллергических реакций. Эти реакции, которые включают тяжелые кожные сыпи, крапивницу, прилив крови к лицу, одышку, тахикардию и другие, могут быть объяснены, по крайней мере частично, высокими концентрациями этанола и Cremophor, используемыми как растворители в композиции. Доцетаксел, аналог паклитаксела, полусинтетически получают из 10-деацетилбаккатина III, нецитотоксического предшественника, экстрагированного из хвои Taxus baccata и этерифицированного с химически синтезированной боковой цепью (Cortes и Pazdur, 1995, J. Clin. Oncol. 13(10):2643-55). Подобно паклитакселу доцетаксел очень слабо растворим в воде. В настоящее время наиболее предпочтительный растворитель/поверхностно-активное вещество, используемое для растворения доцетаксела, представляет собой полисорбат 80 (Tween 80) (Bissery с сотр. 1991. Cancer Res . 51(18):4845-52; Tomiak с сотр. 1992). Подобно Cremophor Tween часто вызывает аллергические реакции у пациентов. Далее, Tween 80 не может быть использован с устройством для доставки PVC вследствие его тенденции к обесцвечиванию диэтилгексилфталата, который является высокотоксичным.

Очистка полусинтетического паклитаксела и доцетаксела является сложной проблемой вследствие формирования ряда продуктов деградации по ходу синтетического способа. Кроме того, обнаружено, что очищенные таксаны подвергаются деградации даже в контролируемых условиях хранения. Поэтому становится ясным желание разработать стабильные формы этих молекул, которые сохраняют желаемые противоопухолевые свойства. Предшествующие попытки получения приемлемого доцетаксела были сфокусированы на способах получения тригидратированных форм доцетаксела, которые, можно полагать, имеют существенно большую стабильность, чем таковые безводного продукта. См., например, Патент США № 6022985; 6838569.

Для того чтобы добиться ожидаемых терапевтических эффектов слаборастворимых в воде агентов, таких как паклитаксел и доцетаксел, обычно необходимо, чтобы солюбилизированная форма или нанодиспергированная форма агента была введена пациенту.

Таким образом, был разработан ряд способов, которые основаны на использовании: вспомогательных растворителей; поверхностно-активных веществ; растворимых форм лекарственного средства, например солей и сольватов; химически модифицированных форм лекарственного средства, например пролекарств; растворимых комплексов полимер-лекарственное средство; специальных лекарственных носителей, таких как липосомы; и других. Действительно, использование амфифильных блок-сополимерных мицелл привлекает большое внимание в качестве потенциально эффективного лекарственного носителя, который способен солюбилизировать гидрофобное лекарственное средство в водной окружающей среде.

Проведение каждого из вышеупомянутых способов затруднено одной или несколькими специфическими проблемами. Например, проблемы способа, основанного на использовании поверхностно-активных мицелл с солюбилизацией гидрофобных лекарственных средств, состоят в том, что некоторые поверхностно-активные вещества являются относительно токсичными и осаждение гидрофобных лекарственных средств происходит при их разведении.

Ранее были разработаны основанные на фосфолипидах липосомные композиции для паклитаксела, Taxotere и других активных таксанов (Straubinger с сотр. 1993, J. Natl. Cancer Inst. Monogr. (15):69-78; Straubinger с сотр. 1994; Sharma с сотр. 1993, Cancer Res. 53(24):557-81; Sharma и Straubinger 1994, Pharm. Res. 11(6):889-96; A. Sharma с сотр. 1995, J. Pharm. Sci. 84(12):1400-4) и были изучены физические свойства этих и других таксановых композиций (Sharma и Straubinger 1994, Pharm. Res. 11(6):889-96; США Sharma с сотр. 1995, J. Pharm. Sci. 84(10):1223-30; Balasubramanian и Straubinger 1994, Biochemistry 33(30):8941-7; Balasubramanian с сотр. 1994, J. Pharm. Sci. 83(10):1470-6. Главной полезностью этих композиций является устранение токсичности, ассоциированной с Cremophor EL эксципиентом, и снижение токсичности самого таксана, как продемонстрировано на некоторых животных опухолевых моделях (Sharma с сотр. 1993, Cancer Res. 53(24):557-81; A. Sharma с сотр. 1995, J. Pharm. Sci. 84(12):1400-4; Sharma с сотр. 1996, Cancer Lett. 107(2):265-272). Это наблюдение распространяется на некоторые таксаны в дополнение к паклитакселу (A. Sharma с сотр. 1995, J. Pharm. Sci. 84(12):1400-4). В некоторых случаях противоопухолевая активность лекарственного средства оказывается немного большей в основанных на липосомах композициях (Sharma с сотр. 1993, Cancer Res. 53(24):557-81).

Эти липосомные композиции включают фосфолипиды и другие добавки в дополнение к таксану и могут храниться в высушенном состоянии. При добавлении водной фазы в смесь частицы формируются спонтанно и могут иметь форму липосом (Straubinger с сотр. 1993). Липосомы представляют собой замкнутые везикулярные структуры, состоящие из ограниченной двухслойной мембраны, окружающей водную сердцевину. Предпочтительный состав композиции (Sharma и Straubinger, 1994) содержит нейтральный (цвиттер-ионный) фосфолипид, такой как лецитин (фосфатидилхолин, 80-90% по молярному отношению) наряду с отрицательно заряженным фосфолипидом, таким как фосфатидилглицерин (10-20%). Последний предотвращает агрегацию частиц посредством электростатического отталкивания. Содержание наиболее стабильного таксана находится в диапазоне 3-4 мол.% (относительно общего содержания фосфолипида); такие липосомы могут быть физически и/или химически стабильны в течение 2 месяцев после гидратации. При большинстве условий паклитаксельные композиции, содержащие более высокие (например, 8 мол.%) концентрации лекарственного средства, являются очень нестабильными и могут осаждаться в течение нескольких минут после получения (Sharma и Straubinger, 1994).

Наибольшую озабоченность в этих композициях вызывало относительно низкое содержание таксана в допустимых стабильных композициях (3-5 мол.%), которое вызывает необходимость введения большого количества фосфолипида (5-10 г) пациентам, для того чтобы дать рассчитанную дозу лекарственного средства. Хотя людям часто дают большие количества липидов внутривенно для Полного Парентерального Питания (TPN), главной целью разработки было получение таксановых липосом, имеющих высокое содержание таксана.

Другие подходы к разработке слаборастворимого лекарственного средства для оральной или парентеральной доставки включают, например, композиции, в которых слаборастворимое лекарственное средство представляет собой эмульсию типа масло в воде, микроэмульсию или раствор мицелл, или другие мультиламеллярные переносящие частицы. Так как такие подходы могут быть предназначены для некоторых ионизируемых, а также неионизируемых гидрофобных терапевтических агентов, они не имеют преимущества в виде уникальных кислотно-щелочных химических свойств и ассоциированных растворяющих свойств ионизируемых соединений.

Лекарственные средства, которые являются нерастворимыми в воде, могут иметь достаточные преимущества при получении стабильной суспензии субмикронных частиц. Точный контроль размера частиц является важным для безопасного и эффективного применения этих композиций. Частицы должны быть менее чем семь микрон в диаметре для безопасности прохождения через капилляры без вызывания эмболии (Allen с сотр., 1987; Davis и Taube, 1978; Schroeder с сотр., 1978; Yokel с сотр., 1981, Toxocol. Lett . 9(2):165-70).

Другой подход раскрыт в Патенте США № 5118528, который раскрывает способ получения наночастиц. Способ включает стадии: 1) получение жидкой фазы вещества в растворителе или смеси растворителей, в которую могут быть добавлены один или несколько поверхностно-активных веществ; 2) получение второй жидкой фазы нерастворителя или смеси нерастворителей, нерастворитель смешивается с растворителем или смесью растворителей для вещества; 3) соединение вместе растворов (1) и (2) с перемешиванием и 4) удаление лишних растворителей с получением коллоидной суспензии наночастиц. Патент '528 раскрывает, что получают частицы вещества меньше чем 500 нм без подачи энергии. В частности, патент '528 указывает, что нежелательно использовать высокоэнергетическое оборудование, такое как ультразвуковые аппараты и гомогенизаторы.

Патент США № 4826689 раскрывает способ получения частиц однородного размера из водонерастворимых лекарственных средств или других органических соединений. Сначала приемлемое твердое органическое соединение растворяют в органическом растворителе и раствор может быть разведен в нерастворителе. Затем вливают водную осаждающую жидкость, осаждая неагрегированные частицы с существенно однородным средним диаметром. Частицы затем отделяют от органического растворителя. В зависимости от органического соединения и желаемого размера частиц параметры температуры, отношение нерастворителя к органическому растворителю, скорость вливания, скорость перемешивания и объем могут варьировать в соответствии с патентом. Патент '689 раскрывает, что этот способ формирует лекарственное средство в метастабильном состоянии, которое является термодинамически нестабильным и которое, в конечном счете, превращается в более стабильное кристаллическое состояние. Патент '689 раскрывает систему ловушки лекарственного средства в метастабильном состоянии, в котором свободная энергия сохраняется между таковой исходного лекарственного раствора и стабильной кристаллической формой. Патент '689 раскрывает применение ингибиторов кристаллизации (например, поливинилпирролидон) и поверхностно-активных агентов (например, поли(оксиэтилен-ко-оксипропилен)), делая осадок стабильным даже при выделении путем центрифугирования, мембранного фильтрования или обратимого осмоса.

Другой подход с предоставлением нерастворимых лекарственных средств для парентеральной доставки раскрыт в Патенте США № 5145684. Патент '684 раскрывает влажный размол нерастворимого лекарственного средства в присутствии поверхностного модификатора с предоставлением лекарственной частицы, имеющей в среднем эффективный размер частицы менее чем 400 нм. Патент '684 раскрывает, что поверхностный модификатор адсорбируется на поверхности лекарственной частицы в количестве, достаточном для предотвращения агломерации в большие частицы. Наночастицы нерастворимых лекарственных средств, полученные в условиях интенсивных сдвиговых усилий (например, разрушение ультразвуком, гомогенизация при высоком давлении или подобное) с биосовместимыми полимерами (например, альбумин), раскрыты, например, в Патентах США № 5916596, 6506405 и 6537579 и также в Публикации Патента США 2005/0004002 A1.

С учетом вышеупомянутого существует потребность в фармацевтических композициях, включающих слаборастворимые в воде лекарственные средства с увеличенной физической и химической стабильностью, что устраняет применение физиологически вредных растворителей и эксципиентов, и способах их получения. Желательно, чтобы такие фармацевтические композиции не деградировали, оставались стабильными в условиях хранения и оставались физически и/или химически стабильными после повторной гидратации. Также было бы желательно иметь фармацевтическую композицию, включающую безводную форму слаборастворимого в воде лекарственного средства, которая имеет увеличенную растворимость в традиционно используемых растворителях и эксципиентах, а также в растворителях и эксципиентах, которые не являются физиологически вредными. Настоящее изобретение представляет такие фармацевтические композиции и способы.

Раскрытие всех публикаций, патентов, патентных заявок и ссылки на опубликованные патентные заявки в данном описании настоящим включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте.

КРАТКОЕ ИЗЛОЖЕНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Изобретение представляет композиции и способы получения стабильных фармацевтических композиций доцетаксела. В одном варианте осуществления изобретения изобретение представляет фармацевтические композиции доцетаксела, включающие цитрат или его производные. Во втором варианте осуществления изобретения изобретение представляет фармацевтические композиции доцетаксела, включающие пирофосфат натрия. В третьем варианте осуществления изобретения изобретение представляет фармацевтические композиции доцетаксела, включающие ЭДТА или его производные. В четвертом варианте осуществления изобретения изобретение представляет фармацевтические композиции доцетаксела, включающие глюконат натрия. В пятом варианте осуществления изобретения изобретение представляет фармацевтические композиции доцетаксела, включающие цитрат и хлорид натрия. В шестом варианте осуществления изобретения изобретение представляет композицию доцетаксела, включающую поверхностно-активное вещество, где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму перед его включением в композицию.

Соответственно, в одном аспекте изобретение представляет композиции (такие, как фармацевтические композиции), включающие слаборастворимый в воде фармацевтический агент (такой, как доцетаксел) и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиции далее включают биосовместимый полимер (такой, как белки-носители, описанные в данном описании). Стабилизирующий агент включает, например, комплексообразующие агенты (такие, как цитрат, яблочная кислота, эдетат и пентетат), пирофосфат натрия и глюконат натрия.

В другом аспекте представляются различные композиции (такие, как фармацевтические композиции), включающие доцетаксел, где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму (например, доцетаксел может быть безводным перед включением в композицию). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, описанный в данном описании). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент (как, например, стабилизирующие агенты, описанные в данном описании). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает биосовместимый полимер (такой, как белки-носители, описанные в данном описании), и стабилизирующий агент. В некоторых вариантах осуществления изобретение предоставляет композиции (такие, как фармацевтические композиции), включающие доцетаксел и поверхностно-активное вещество, где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму (например, доцетаксел может быть безводным перед включением в композицию). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент (такой, как стабилизирующие агенты, описанные в данном описании).

Также представляются стандартные лекарственные формы композиций, описанных в данном описании, изделия, включающие композиции согласно изобретению или стандартные лекарственные формы в приемлемой упаковке, и наборы, включающие композиции. Изобретение также предоставляет способы получения и применения этих композиций, как описано в данном описании.

Следует понимать, что один, несколько или все признаки различных вариантов осуществления изобретения, описанные в данном описании, могут быть комбинированы с формированием других вариантов осуществления по настоящему изобретению.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ФИГУР

Фиг.1 показывает потерю массы тела крыс в дозе 5 мг/кг доцетаксела для композиции доцетаксела c наночастицами альбумина (Nab-доцетаксел) и Tween 80-доцетаксела (Taxotere^®). Введение доз происходило в дни 0, 4 и 8.

Фиг.2 показывает сравнение нейтропении у крыс в дозе 5 мг/кг для Nab-доцетаксела и Tween 80-доцетаксела(Taxotere^®). Введение доз происходило в дни 0, 4 и 8.

Фиг.3A-3D показывают фармакокинетическое сравнение Nab-доцетаксела и Taxotere. Фиг.3A-3C показывают концентрацию в плазме Nab-доцетаксела и Taxotere^® в дозах 10 мг/кг, 20 мг/кг и 30 мг/кг соответственно. Фиг.3D показывает линейную связь между AUC (область под кривой) и дозой Nab-доцетаксела и нелинейную связь между AUC и дозой Taxotere. Nab-доцетаксел показывает линейную связь, соответствующую уравнению AUC=218*Доза; Taxotere показывает экспоненциальную кривую, соответствующую уравнению AUC=722*exp(0,10*Доза).

Фиг.4 показывает ингибирование связывания лекарственного средства с альбумином в присутствии поверхностно-активного вещества Tween 80 и Cremophor EL^® /EtOH.

Фиг.5A и 5B показывают противоопухолевую активность (5A) и потерю массы тела (5B) с Nab-доцетакселом у мышей с ксентотрансплантатом H29 рака толстой кишки. Мышам вводили Nab-доцетаксел в дозе 15 мг/кг, q4dx3.

Фиг.6A и 6B показывают противоопухолевую активность (6A) и потерю массы тела (6B) у мышей с ксентотрансплантатом HCT116 рака толстой кишки, которым вводили физиологический раствор, Nab-доцетаксел (22 мг/кг) и Taxotere (15 мг/кг).

Фиг.7A и 7B показывают потерю массы тела (7A) и противоопухолевую активность (7B) у мышей с ксентотрансплантатом PC3 рака предстательной железы, которым вводили физиологический раствор, Nab-доцетаксел (10, 15, 20, 30 мг/кг) и Tween 80-доцетаксел (10 мг/кг).

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение в одном из своих вариантов осуществления изобретения предоставляет композиции и способы получения доцетаксела и других слаборастворимых в воде фармацевтических агентов или лекарственных средств, которые сохраняют желательные терапевтические эффекты и остаются физически и/или химически стабильными при выдерживании в определенных условиях, таких как длительное хранение, повышенная температура или разведение для парентерального введения.

Стабильная композиция представляет собой, например, такую композицию, которая остается физически и/или химически стабильной и поэтому не проявляет признаков осаждения или выпадения в осадок в течение по меньшей мере примерно 8 часов, включая, например, по меньшей мере примерно любые из 24 часов, 48 часов или вплоть до примерно 96 часов после повторного восстановления или повторной гидратации. Например, композиции могут оставаться стабильными в течение по меньшей мере 24 часов после повторного восстановления или повторной гидратации.

Стабильность суспензии обычно (но не обязательно) оценивают в обычных условиях транспортировки и хранения в ожидании сбыта продукта (таких, как комнатная температура (такая, как 20-25°C) или в условиях охлаждения (таких, как 4°C). Например, суспензия является стабильной при температуре хранения, если она не проявляет флоккуляции или агломерации частиц, видимой невооруженным глазом или видимой под оптическим микроскопом при увеличении в 1000 раз (или другие приемлемые методики характеристики частиц) в течение примерно пятнадцати минут после получения суспензии. Стабильность может быть также оценена в особо неблагоприятных условиях температуры, влажности, света и/или других с тестированием стабильности композиций в ускоренном тестировании. Например, стабильность может быть оценена при температуре, которая выше чем примерно 40°C. Стабильность композиции также может быть оценена, например, по способности композиции оставаться суспендированной без проявления признаков оседания или расслоения или по способности композиции оставаться без изменения (то есть без видимых различий) цвета или консистенции.

Стабильность сухой (такой, как лиофилизированная) композиции может быть оценена на основе поведения жидкой суспензии, полученной из повторно восстановленной или повторно гидратированной сухой суспензии.

Целью изобретения является предоставление фармацевтических композиций, способных поддерживать физически и/или химически стабилизированные, терапевтически эффективные количества слаборастворимых в воде фармацевтических агентов. Другой целью изобретения является предоставление фармацевтических композиций, способных поддерживать физически и/или химически стабилизированные, слаборастворимые в воде фармацевтические агенты при разведении для введения пациенту. Дальнейшей целью изобретения является предоставление фармацевтических композиций, способных поддерживать физически и/или химически стабилизированные, терапевтически эффективные количества слаборастворимых в воде фармацевтических агентов с уменьшенной токсичностью. Дальнейшей целью изобретения является предоставление стабильных фармацевтических композиций с использованием безводного доцетаксела, а также композиций, полученных при использовании безводного доцетаксела.

Дальнейшей целью изобретения является предоставление усовершенствованных способов получения фармацевтических композиций, способных поддерживать физически и/или химически стабилизированные, терапевтически эффективные количества слаборастворимых в воде фармацевтических агентов. Дальнейшей целью изобретения является предоставление усовершенствованных способов получения фармацевтических композиций, способных поддерживать физически и/или химически стабилизированный слаборастворимый в воде фармацевтический агент при разведении для введения пациенту. Дальнейшей целью изобретения является предоставление усовершенствованных способов получения фармацевтических композиций, способных поддерживать физически и/или химически стабилизированные, терапевтически эффективные количества слаборастворимых в воде фармацевтических агентов с уменьшенной токсичностью.

В одном варианте осуществления изобретение представляет стерильную фармацевтическую композицию для парентерального введения, включающую слаборастворимый в воде фармацевтический агент, который физически и/или химически стабилизирован путем добавления эксципиентов в композицию. До настоящего изобретения относительная стабильность определенных слаборастворимых фармацевтических агентов ограничивалась их использованием в парентеральных фармацевтических композициях вследствие деградации в условиях хранения и/или осаждения при разведении. Множество различных фармацевтических агентов не могут быть удовлетворительно получены как парентеральные средства вследствие отсутствия стабильной композиции.

Настоящее изобретение приводит к удивительному открытию, что обычные эксципиенты, такие как цитрат, способны стабилизировать слаборастворимые в воде фармацевтические агенты, такие как доцетаксел. Поэтому первичной целью изобретения является предоставление композиций, включающих доцетаксел (и другие слаборастворимые в воде фармацевтические агенты) и эксципиенты с получением стабильных парентеральных фармацевтических композиций. Поэтому в одном варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию, включающую доцетаксел и цитрат. В другом варианте осуществления изобретение предоставляет фармацевтическую композицию, включающую доцетаксел, цитрат и хлорид натрия.

Различные варианты осуществления по изобретению

Изобретение предоставляет композиции (такие, как фармацевтические композиции), включающие слаборастворимый в воде фармацевтический агент и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. Например, композиция может включать доцетаксел и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиции далее включают биосовместимый полимер. В некоторых вариантах осуществления изобретения биосовместимый полимер представляет собой белок-носитель (такой, как альбумин, например человеческий сывороточный альбумин (HSA)). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабильность композиции по меньшей мере в 1,5 раза (включая, например, по меньшей мере примерно любой из: 2х, 3х, 4х, 5х, 6х, 7х, 8х, 9х, 10х, 15х, 20х, 25х, 30х или более) больше по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент является нестабильным в композиции, не включающей стабилизирующий агент.

В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется композиция, включающая слаборастворимый в воде фармацевтический агент и стабилизирующий агент, где стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется композиция, включающая доцетаксел и стабилизирующий агент, где стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает биосовместимый полимер. В некоторых вариантах осуществления изобретения биосовместимый полимер представляет собой белок-носитель (такой, как альбумин, например HSA). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой полидентат комплексообразующий агент. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент включает одну или несколько групп карбоновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления изобретения комплексообразующий агент не является дефероксамином (то есть иной, чем дефероксамин). В некоторых вариантах осуществления изобретения комплексообразующий агент представляет собой любой из (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) эдетата, цитрата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой цитрат или его производное (такое, как цитрат натрия, и в некоторых вариантах осуществления изобретения лимонную кислоту). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает цитрат натрия и хлорид натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает примерно 200 мМ цитрата и примерно 300 мМ хлорида натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой эдетат или его производное (такое, как ЭДТА).

В некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется композиция, включающая слаборастворимый в воде фармацевтический агент и стабилизирующий агент, где стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется композиция, включающая доцетаксел и стабилизирующий агент, где стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает биосовместимый полимер. В некоторых вариантах осуществления изобретения биосовместимый полимер представляет собой белок-носитель (такой, как альбумин, например HSA).

В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется композиция, включающая слаборастворимый в воде фармацевтический агент и стабилизирующий агент, где стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется композиция, включающая доцетаксел и стабилизирующий агент, где стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает биосовместимый полимер. В некоторых вариантах осуществления изобретения биосовместимый полимер представляет собой белок-носитель (такой, как альбумин, например HSA).

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает слаборастворимый в воде фармацевтический агент, альбумин и стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту в композиции составляет от примерно 0,01:1 до примерно 100:1 и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает слаборастворимый в воде фармацевтический агент, альбумин и стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту в композиции составляет примерно 18:1 или менее (включая, например, любое из: от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1) и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел, альбумин и стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина к доцетакселу в композиции составляет примерно 18:1 или менее (включая, например, любое из: от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1) и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент, такой как любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) эдетата, цитрата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой цитрат или его производное (такое, как цитрат натрия). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает цитрат натрия и хлорид натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой эдетат или его производное (такое, как ЭДТА). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия.

В некоторых вариантах осуществления изобретения белок/фармацевтический агент находится в форме(ах) частиц, которые в различных вариантах осуществления изобретения могут быть среднего диаметра, как описано в данном описании.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает белок-ассоциированный слаборастворимый в воде фармацевтический агент и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает белок-ассоциированный доцетаксел и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент, такой как любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) эдетата, цитрата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой цитрат или его производное (такое, как цитрат натрия). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает цитрат натрия и хлорид натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой эдетат или его производное (такое, как ЭДТА). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает: 1) частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из) слаборастворимый в воде фармацевтический агент и биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, который может быть альбумином, таким как HSA); и 2) стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из): 1) доцетаксел и биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, который может быть альбумином, таким как HSA); и 2) стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения доцетаксел покрыт биосовместимым полимером (таким, как белок/носитель). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент, такой как любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) эдетата, цитрата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой цитрат или его производное (такое, как цитрат натрия). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает цитрат натрия и хлорид натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой эдетат или его производное (такое, как ЭДТА). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой яблочную кислоту. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает: 1) частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из) слаборастворимый в воде фармацевтический агент и альбумин; и 2) стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту в композиции составляет от примерно 0,01:1 до примерно 100:1 и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент покрыт альбумином. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает: 1) частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из) слаборастворимый в воде фармацевтический агент и альбумин; и 2) стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту в композиции составляет примерно 18:1 или менее (включая, например, любое из: от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1) и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент покрыт альбумином.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает: 1) частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из) доцетаксел и альбумин; и 2) стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина и доцетаксела в композиции составляет от примерно 0,01:1 до примерно 100:1 и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает: 1) частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из) доцетаксел и альбумин; и 2) стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина и доцетаксела в композиции составляет примерно 18:1 или менее (включая, например, любое из: от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1) и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения доцетаксел покрыт альбумином. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция существенно свободна (такая, как свободная) от поверхностно-активных веществ. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает стабильную водную суспензию частиц (таких, как наночастицы), включающую доцетаксел и альбумин (таких, как частицы доцетаксела, покрытые альбумином), где композиция далее включает стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина и доцетаксела в композиции составляет примерно 18:1 или менее (включая, например, от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1) и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает сухую (такую, как лиофилизированная) композицию, которая может быть повторно восстановлена, повторно суспендирована или повторно гидратирована с формированием обычно стабильной водной суспензии частиц (таких, как наночастицы), включающей доцетаксел и альбумин (такой, как доцетаксел, покрытый альбумином), где композиция далее включает стабилизирующий агент, где массовое отношение альбумина и доцетаксела в композиции составляет примерно 18:1 или менее (включая, например, любое из: от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1) и где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент, такой как любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) эдетата, цитрата, яблочной кислоты, пентетата, трометамина, их производных и их смесей. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой цитрат или его производное (такое, как цитрат натрия). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает цитрат натрия и хлорид натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой эдетат или его производное (такое, как ЭДТА). В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия.

В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы (такие, как наночастицы) в композиции имеют средний или усредненный диаметр не более чем примерно любой из: 1000, 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200 и 100 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения средний или усредненный диаметр частиц находится между от примерно 20 до примерно 400 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения средний или усредненный диаметр частиц находится между от примерно 40 до примерно 200 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы или капли являются пригодными для стерильного фильтрования.

Композиции, раскрытые в данном описании, могут быть стабильной водной суспензией слаборастворимого в воде фармацевтического агента, такой как стабильная водная суспензия слаборастворимого в воде фармацевтического агента в концентрации любой из: от примерно 0,1 до примерно 100 мг/мл, включая, например, от примерно 0,1 до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,1 до примерно 20 мг/мл, от примерно 1 до примерно 15 мг/мл, от примерно 1 до примерно 10 мг/мл, от примерно 2 до примерно 8 мг/мл, от примерно 4 до примерно 6 мг/мл и примерно 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента составляет по меньшей мере примерно любую из: 1 мг/мл, 1,3 мг/мл, 1,5 мг/мл, 2 мг/мл, 3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл, 6 мг/мл, 7 мг/мл, 8 мг/мл, 9 мг/мл, 10 мг/мл, 15 мг/мл, 20 мг/мл, 25 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл и 50 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является сухой (такой, как лиофилизированная) композицией, которая может быть повторно восстановлена, повторно суспендирована или повторно гидратирована с формированием стабильной водной суспензии слаборастворимого в воде фармацевтического агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является жидкой (такой, как водная) композицией, полученной путем повторного восстановления или повторного суспендирования сухой композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является интермедиатом жидкой (такой, как водная) композиции, которая может быть высушена (такой, как лиофилизированная).

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является приемлемой для парентерального (такое, как внутривенное) введения. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является приемлемой для многократного введения. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является пригодной для стерильного фильтрования. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция не вызывает значительных побочных эффектов у индивидуума (такого, как человек) при введении индивидууму. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиции, описанные в данном описании, являются существенно свободными (такая, как свободная) от поверхностно-активных веществ. Содержащие стабилизирующий агент композиции, описанные в данном описании, могут далее включать сахар (включая, например, сахарозу, маннит, фруктозу, лактозу, мальтозу и трегалозу) или другие вспомогательные средства лиофилизации или повторного восстановления.

В некоторых вариантах осуществления изобретения количество стабилизирующего агента в композиции находится ниже уровня, который индуцирует токсический эффект (то есть выше клинически допустимого уровня токсичности) или находится на уровне, где потенциальный побочный эффект может быть контролируемым или переносимым пациентом, когда композицию вводят индивидууму.

В другом аспекте предлагаются композиции (такие, как фармацевтическая композиция), включающие доцетаксел, где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму (например, доцетаксел может быть безводным перед включением в композицию). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент (такой, как стабилизирующие агенты, описанные в данном описании). Композиции, которые включают применение безводного доцетаксела, далее описаны в разделе ниже.

В некоторых вариантах осуществления композиция включает доцетаксел и биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, например альбумин), где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие доцетаксел и биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, например альбумин), где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает наночастицы, включающие доцетаксел и альбумин, где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение альбумина и доцетаксела в композиции составляет меньше чем примерно 18:1, включая, например, любое из: от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1 и примерно 9:1. В некоторых вариантах осуществления изобретения доцетаксел покрыт альбумином. В некоторых вариантах осуществления изобретения наночастицы в композиции имеют средний или усредненный размер частицы не более чем примерно 200 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы в композиции являются пригодными для стерильного фильтрования. В некоторых вариантах осуществления изобретения наночастицы в композиции имеют два или более этих свойств.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел и поверхностно-активное вещество, где доцетаксел, используемый для получения композиции, представляет собой безводную форму. В некоторых вариантах осуществления изобретения поверхностно-активное вещество, используемое для получения композиции, является безводным. В некоторых вариантах осуществления изобретения поверхностно-активное вещество представляет собой полисорбат (такой, как Tween 80). В некоторых вариантах осуществления изобретения поверхностно-активное вещество представляет собой Cremophor. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент (такой, как стабилизирующие агенты, описанные в данном описании).

Композиции, полученные с безводным доцетакселом, могут быть сухими (такие, как лиофилизированные) композициями. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является жидкой (такой, как водная) композицией, полученной путем повторного восстановления или повторного суспендирования сухой композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является интермедиатом жидкой (такой, как водная) композиции, которая может быть высушена (такой, как лиофилизированная).

Также представляются композиции стандартных лекарственных форм, описанные в данном описании, изделия, включающие композиции по изобретению или стандартные лекарственные формы в приемлемой упаковке (такой, как ампулы или пробирки (включая герметичные ампулы или пробирки и стерильные герметичные ампулы или пробирки)), и наборы, включающие композиции. Изобретение также предоставляет способы получения композиций, как описано в данном описании.

Также представляются способы стабилизации слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется способ стабилизации слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции (такой, как композиция наночастиц), включающий комбинирование композиции (такой, как композиция наночастиц), включающей слаборастворимый в воде фармацевтический агент, со стабилизирующим агентом, где полученная в результате композиция является стабильной при тех же условиях, при которых композиция является нестабильной перед добавлением стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения способ далее включает идентификацию и отбор композиции, которая нестабильна при одном или нескольких условиях. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для отбора включает слаборастворимый в воде фармацевтический агент и белок-носитель (такой, как альбумин).

Также представляются способы применения композиций, описанных в данном описании. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется способ лечения рака у индивидуума (такого, как человек), включающий введение индивидууму эффективного количества композиции, включающей слаборастворимый в воде антибластомный агент, белок-носитель (такой, как альбумин) и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется способ лечения рака у индивидуума (такого, как человек), включающий введение индивидууму эффективного количества композиции, включающей доцетаксел, белок-носитель (такой, как альбумин) и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие доцетаксел и белок-носитель. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие доцетаксел и альбумин (такие, как альбумин-содержащие наночастичные композиции доцетаксела или Nab-доцетаксела). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает Nab-доцетаксел и цитрат. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает Nab-доцетаксел, цитрат и хлорид натрия (такой, как 200 мМ хлорида натрия и примерно 300 мМ цитрата натрия). В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой любой из: рака предстательной железы, рака толстой кишки, рака головы и шеи, рака молочной железы, рака поджелудочной железы, рака легкого и рака яичника. В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой солидную опухоль. В некоторых вариантах изобретения композицию вводят по меньшей мере примерно любым из способов: один раз каждые три недели, один раз каждые две недели, один раз в неделю, два раза в неделю, три раза в неделю, четыре раза в неделю, пять раз в неделю, шесть раз в неделю или ежедневно. В некоторых вариантах осуществления изобретения композицию вводят (с перерывами или без перерывов) в течение по меньшей мере примерно любого из следующих интервалов: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 или более месяца(ев). В некоторых вариантах осуществления изобретения композицию вводят при посредстве любого из способов: внутривенного, внутриартериального, орального, топического или ингаляционного способов применения.

Общая ссылка на «композиции» или «композицию» включает и применима к композициям по изобретению. Изобретение также представляет фармацевтические композиции, включающие компоненты, описанные в данном описании.

Ссылка на доцетаксел в данном описании применяется к доцетакселу или его производным (или аналогам) и, таким образом, изобретение рассматривает и включает оба эти варианта. Ссылка на «доцетаксел» упрощает описание и является иллюстративной. Производные или аналоги доцетаксела включают, но не ограничиваются ими, соединения, которые структурно подобны доцетакселу или находятся в том же общем химическом классе, что и доцетаксел, например таксаны. В некоторых вариантах осуществления изобретения производное или аналог доцетаксела сохраняет аналогичное биологическое, фармакологическое, химическое и/или физическое свойство (включая, например, функциональность) доцетаксела. Примеры производных доцетаксела или аналогов включают паклитаксел и ортатаксел. Тот же самый принцип описания применяют к другим агентам, предоставленным в данном описании, таким как, включая, например, стабилизирующие агенты и слаборастворимые в воде фармацевтические агенты (такие, как таксан (включая паклитаксел, ортатаксел или другие таксаны), гельданамицин, 17-аллиламиногельданамицин, тиоколхицин и его димеры, рапамицин, циклоспорин, эпотилон, радицикол и комбретастатин).

Следует понимать, что аспекты и варианты осуществления по изобретению, описанные в данном описании, включают «состоящие» и/или «состоящие в основном из» аспекты и варианты осуществления изобретения.

Стабилизирующие агенты

Различные композиции, описанные в данном описании, включают стабилизирующий агент. Термин «стабилизирующий агент», использованный в данном описании, относится к агенту, который усиливает стабильность композиции по сравнению с композицией без добавления стабилизирующего агента. В подобных вариантах осуществления изобретения стабильность содержащей стабилизирующий агент композиции является по меньшей мере примерно в 1,5х (включая, например, по меньшей мере примерно любой из: 2х, 3х, 4х, 5х, 6х, 7х, 8х, 9х, 10х, 15х, 20х, 25х, 30х или более) большей по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента.

Как описано выше, стабильность композиции может быть оценена по способности слаборастворимого в воде фармацевтического агента оставаться неосажденным или не выпадать в осадок (например, на основе визуального наблюдения и/или наблюдения с помощью микроскопа) в жидкой суспензии свыше определенного периода времени. Стабильность сухой (такой, как лиофилизированная) композиции может быть оценена на основе поведения жидкой суспензии, полученной после повторного восстановления или повторной гидратации сухой композиции.

В некоторых вариантах изобретения стабилизирующий агент замедляет или предотвращает осаждение или выпадение в осадок слаборастворимого в воде фармацевтического агента в жидкой суспензии. В некоторых вариантах изобретения стабилизирующий агент замедляет или предотвращает кристаллизацию слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения, когда композиция включает частицы слаборастворимых в воде агентов, стабилизирующий агент может предотвращать или замедлять изменение размера частиц в композиции.

Стабилизирующие агенты, в частности, применяют для композиций, которые будут в ином случае проявлять значительную нестабильность. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения композиция перед добавлением стабилизирующего агента является стабильной в течение менее чем примерно 24 часов (включая, например, менее чем примерно любые из 12, 10, 8, 6, 4 или 2 часа). В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент в жидкой суспензии перед добавлением стабилизатора осаждают или переводят в осадок по меньшей мере примерно 24 часа (включая, например, менее чем примерно любые из: 12, 10, 8, 6, 4 или 2 часа). В некоторых вариантах осуществления изобретения композицию перед добавлением стабилизирующего агента осаждают или переводят в осадок по меньшей мере примерно 24 часа, когда концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента составляет более чем примерно 0,1 мг/мл (включая, например, более чем примерно любые из: 0,5 мг/мл, 1 мг/мл, 1,3 мг/мл, 1,5 мг/мл, 2 мг/мл, 3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл или 10 мг/мл). В некоторых вариантах осуществления изобретения композицию перед добавлением стабилизирующего агента осаждают или переводят в осадок при разведении композиции для парентерального введения. Добавление стабилизирующего агента в такие композиции позволяет композициям оставаться стабильными (например, не выпадать в осадок или не отстаиваться) в сходных условиях. Соответственно, в некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется композиция, включающая слаборастворимый в воде фармацевтический агент и стабилизирующий агент, где композиция (такая, как композиция наночастиц) стабилизируется в тех же условиях, в которых композиция без стабилизирующего агента является нестабильной. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент замедляет или предотвращает осаждение или выпадение в осадок слаборастворимого в воде фармацевтического агента в жидкой суспензии композиции при условиях, когда слаборастворимый в воде фармацевтический агент будет в ином случае выпадать в осадок или отстаиваться.

Приемлемые стабилизирующие агенты включают, но не ограничиваются ими, цитрат натрия (все формы, 0,01-20% масса/объем), пирофосфат натрия (0,1-10% масса/объем), ЭДТА (все формы, 0,01-20%), пентетат (все формы, 0,01-20%), глюконат натрия (0,1-10% масса/объем) и их приемлемые комбинации. Массовый процент (w/v) относится к проценту стабилизирующего агента в жидкой композиции или в случае твердой композиции к массовому проценту (w/v) стабилизирующего агента при повторном восстановлении или повторной гидратации. Стабилизирующий агент должен быть использован в количестве, достаточном для увеличения стабильности композиции. Предпочтительно, количество используемого стабилизирующего агента будет обеспечивать стабильную композицию, которая не проявляет признаков осаждения или образования осадка в течение по меньшей мере примерно 8 часов, более предпочтительно по меньшей мере примерно 24 часов после повторного восстановления или повторной гидратации, более предпочтительно по меньшей мере примерно 48 часов, наиболее предпочтительно в течение по меньшей мере примерно 72 часов.

В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой комплексообразующий агент. Эти комплексообразующие агенты являются специфичными к конкретному иону металла (такой, как кальций, цинк, магний и т.п.) или проявляют специфичность к широкому спектру ионов металла. В некоторых вариантах осуществления изобретения комплексообразующий агент представляет собой полидентат. В некоторых вариантах осуществления изобретения комплексообразующий агент включает одну или несколько групп карбоновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления изобретения комплексообразующий агент не является дефероксамином. Приемлемые комплексообразующие агенты включают, но не ограничиваются ими, эдетат, цитрат, яблочную кислоту, пентетат, трометамин и их производные.

Один стабилизирующий агент, рассматриваемый в данном описании, представляет собой эдетат, т.е. этилендиаминтетрауксусную кислоту (ЭДТА) и ее производные. Приемлемые эдетаты включают эдетат динатрия, эдетат тринатрия, эдетат тетранатрия и эдетат динатрия кальция. В некоторых вариантах изобретения эдетат представляется в композициях в концентрации от примерно 0,01 мг/мл до примерно 200 мг/мл, включая, например, от примерно 0,05 мг/мл до примерно 150 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 0,2 мг/мл до примерно 50 мг/м, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 20 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 10 мг/мл и от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл. В некоторых вариантах изобретения массовое отношение эдетата и слаборастворимого в воде фармацевтического агента (такого, как доцетаксел) в композиции составляет от примерно 0,002:1 до примерно 40:1, включая, например, от примерно 0,01:1 до примерно 30:1, от примерно 0,02:1 до примерно 20:1, от примерно 0,04:1 до примерно 10:1, от примерно 0,1:1 до примерно 4:1, от примерно 0,2:1 до примерно 2:1, от примерно 0,2:1 до примерно 1:1.

Другой стабилизирующий агент, рассматриваемый в данном описании, представляет собой цитрат или его производное (т.е. лимонная кислота или ее производные), такое как цитрат натрия. Приемлемые концентрации цитрата включают, например, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 200 мг/мл, включая, например, любую из: от примерно 0,2 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 0,3 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 10 мг/мл и от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация цитрата составляет менее чем примерно 200 мг/мл, такая как менее чем примерно любая из: 100; 50; 30; 20; 10; 9; 8; 7; 6; 5; 4; 3; 2; 1; 0,9; 0,8; 0,7; 0,6; 0,5; 0,4; 0,3 или 0,2 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение цитрата и слаборастворимого в воде фармацевтического агента (такого, как доцетаксел) в композиции составляет от примерно 0,02:1 до примерно 40:1, включая, например, любое из: от примерно 0,04:1 до примерно 20:1, от примерно 0,06:1 до примерно 10:1, от примерно 0,1:1 до примерно 2:1 и от примерно 0,2:1 до примерно 1:1. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое отношение цитрата и слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции составляет менее чем примерно любое из: 20:1; 10:1; 8:1; 5:1; 2:1; 1:1; 0,8:1; 0,5:1; 0,2:1 и 0,1:1.

Любая форма цитрата приемлема для применения по настоящему изобретению и включает, например, лимонную кислоту и цитрат натрия. Цитрат натрия является особенно предпочтительным. Когда применяют цитрат натрия, приемлемые концентрации включают от примерно 1 до 600 мМ. Когда применяют цитрат и хлорид натрия, приемлемые концентрации включают от примерно 1 до 600 мМ и 1-1000 мМ соответственно. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрации цитрата и хлорида натрия составляют от примерно 50 до примерно 200 мМ и от примерно 300 до примерно 500 мМ соответственно. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает примерно 50 мМ цитрата (такого, как цитрат натрия) и примерно 500 мМ хлорида натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает примерно 200 мМ цитрата (такого, как цитрат натрия) и примерно 300 мМ хлорида натрия. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является сухой (такой, как лиофилизированная) композицией, где массовое отношение цитрата к доцетакселу в композиции составляет примерно 17:1, и когда присутствует хлорид натрия, массовое отношение хлорида натрия к доцетакселу составляет примерно 3,5:1. В других вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент не является цитратом (т.е. иной, чем цитрат).

Стабилизирующий агент также может быть пентетатом (включая пентетат кальция тринатрия). В некоторых вариантах осуществления изобретения количество пентетата находится в концентрации от примерно 0,01 мг/мл до примерно 200 мг/мл, включая, например, любую из: от примерно 0,05 мг/мл до примерно 150 мг/мл, от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл, от примерно 0,2 мг/мл до примерно 50 мг/м, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 20 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 10 мг/мл и от примерно 1 мг/мл до примерно 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение пентетата и слаборастворимого фармацевтического агента (такой, как доцетаксел) в композиции составляет от примерно 0,002:1 до примерно 40:1, включая, например, любое из: от примерно 0,01:1 до примерно 30:1, от примерно 0,02:1 до примерно 20:1, от примерно 0,04:1 до примерно 10:1, от примерно 0,1:1 до примерно 4:1, от примерно 0,2:1 до примерно 2:1, от примерно 0,2:1 до примерно 1:1.

Другой стабилизирующий агент, рассматриваемый в данном описании, представляет собой трометамин. Трометамин, как использовано в данном описании, относится к 2-амино-2-гидроксиметил-1,3-пропандиолу, также известному как TRIS. В некоторых вариантах осуществления изобретения трометамин находится в концентрации от примерно 0,1 мг/мл до примерно 100 мг/мл, включая, например, от примерно 0,5 мг/мл до примерно 50 мг/мл, от примерно 1 мг/мл до примерно 10 мг/мл и от примерно 2 мг/мл до примерно 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение трометамина и слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции составляет от примерно 0,02:1 до примерно 20:1, включая, например, от 0,1:1 до примерно 10:1, от примерно 0,2:1 до примерно 2:1 и от примерно 0,4:1 до примерно 1:1.

Другие приемлемые металлкомплексообразующие стабилизирующие агенты и их примерные количества включают, но не ограничиваются ими, сорбат калия (0,5 мг/мл), аскорбат натрия (1 мг/мл), формальдегид сульфоксилат натрия (0,1 мг/мл) и монотиоглицерин (5 мг/мл).

В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой пирофосфат натрия. Приемлемая концентрация пирофосфата натрия включает любую из: от примерно 0,1 до примерно 10% (масса/объем), от примерно 0,5 до примерно 5% и от примерно 1 до примерно 2%. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение пирофосфата натрия и слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции составляет любое из: от примерно 0,2:1 до примерно 20:1, от примерно 1:1 до примерно 10:1, от примерно 2:1 до примерно 4:1.

В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент представляет собой глюконат натрия. Приемлемая концентрация глюконата натрия включает любую из: от примерно 0,1 до примерно 10% (масса/объем), от примерно 0,5 до примерно 5% и от примерно 1 до примерно 2%. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение глюконата натрия и слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции составляет любое из: от примерно 0,2:1 до примерно 20:1, от примерно 1:1 до примерно 10:1, от примерно 2:1 до примерно 4:1.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиции, описанные в данном описании, включают по меньшей мере два (включая, например, по меньшей мере любой из: 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10) различных стабилизирующих агента (такие, как стабилизирующие агенты, описанные в данном описании).

Слаборастворимые в воде фармацевтические агенты

Композиции, раскрытые в данном описании, включают слаборастворимые в воде фармацевтические агенты. Например, растворимость в воде слаборастворимого в воде фармацевтического агента при 20-25°C может быть менее чем примерно 10 мг/мл, включая, например, менее чем примерно любую из: 5; 2; 1; 0,5;, 0,2; 0,1; 0,05; 0,02 и 0,01 мг/мл.

Слаборастворимые в воде фармацевтические агенты, рассматриваемые для применения на практике по настоящему изобретению, включают слаборастворимые в воде фармацевтически активные агенты, диагностические агенты, агенты, имеющие питательную ценность и подобное. Слаборастворимые в воде фармацевтические агенты могут быть, например, анальгетиками/антипиретиками; анестетиками; противоастматическими агентами; антибиотиками; антидепрессантами; противодиабетическими агентами; противогрибковыми агентами; антигипертензивными агентами; противовоспалительными агентами; антибластомными агентами; анксиолитическими агентами; иммуносупрессорными агентами; агентами против мигрени; седативными агентами; антиангинальными агентами; антипсихотическими агентами; агентами для лечения маниакальных состояний; противоаритмическими агентами; противоартритными агентами; агентами против подагры; антикоагулянтами; тромболитическими агентами; антифибринолитическими агентами; гемореологическими агентами; антитромбоцитарными агентами; антиконвульсантами; агентами против болезни Паркинсона; антигистаминами/противозудными агентами; агентами, используемыми для регуляции кальция; антибактериальными агентами; антивирусными агентами; противомикробными агентами; противоинфекционными агентами; бронходилататорами; гормонами, гипоглицемическими агентами; гиполипидемическими агентами; противоязвенными/противорефлюксными агентами; агентами против тошноты/рвоты; растворимыми в масле витаминами (например, витамины A, D, E, K и подобное).

В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой антибластомный агент. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой химиотерапевтический агент.

Приемлемые слаборастворимые в воде фармацевтические агенты включают, но не ограничиваются ими, таксаны (такие, как паклитаксел, доцетаксел, ортатаксел и другие таксаны), эпотилоны, камптотецины, колхицины, гельданамицины, амиодароны, гормоны щитовидной железы, амфотерицин, кортикостероиды, пропофол, мелатонин, циклоспорин, рапамицин (сиролимус) и производные, такролимус, микофеноловые кислоты, ифосфамид, винорелбин, ванкомицин, гемцитабин, SU5416, тиотепа, блеомицин, диагностические радиоконтрастные агенты и их производные. Другие слаборастворимые в воде фармацевтические агенты, которые применяют в композициях по изобретению, описаны, например, в Патентах США № 5916596, 6096331, 6749868 и 6537539. Дополнительные примеры слаборастворимых в воде фармацевтических агентов включают те соединения, которые слабо растворимы в воде и которые перечислены в Therapeutic Category and Biological Activity Index of The Merck Index (12^th Edition, 1996).

В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) паклитаксела, доцетаксела, ортатаксела или другого таксана или аналога таксана, 17-аллиламиногельданамицина (17-AAG), 18-производного гельданамицина, камптотецина, пропофола, амиодарона, циклоспорина, эпотилона, радицикола, комбретастатина, рапамицина, амфотерицина, лиотиронина, эпотилона, колхицина, тиоколхицина и его димеров, гормона щитовидной железы, вазоактивного кишечного пептида, кортикостероидов, мелатонина, такролимуса, микофеноловых кислот, эпотилонов, радициколов, комбретастатинов и их аналога или производного. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) паклитаксела, доцетаксела, ортатаксела или других таксанов, гельданамицина, 17-аллиламиногельданамицина, тиоколхицина и его димеров, рапамицина, циклоспорина, эпотилона, радицикола и комбретастатина. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой рапамицин. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой 17-AAG. В некоторых вариантах изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой тиоколхициновый димер (такой, как IDN5404).

В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой таксан или его производное, которое включает, но не ограничиваются ими, паклитаксел, доцетаксел и IDN5109 (ортатаксел) или их производное. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает некристаллический и/или аморфный таксан (такой, как паклитаксел или его производное). В некоторых вариантах осуществления изобретения композицию получают путем применения безводного таксана (такого, как безводный доцетаксел или его производное).

В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой доцетаксел или его производное. В некоторых вариантах осуществления доцетаксел в композиции является некристаллическим или аморфным. В некоторых вариантах осуществления изобретения доцетаксел находится в любой одной или нескольких следующих формах: безводной, полугидратированной, дигидратированной и тригидратированной формах. Был предоставлен безводный доцетаксел с получением более стабильной композиции, чем таковой, полученный с гидратированным доцетакселом, таким как тригидрат или полугидрат доцетаксела, и особенно полезный для получения композиций доцетаксела, описанных в данном описании.

Биосовместимые полимеры и белки-носители

Композиции, раскрытые в данном описании, могут также включать биосовместимые полимеры, такие как белки-носители, далее описанные в данном описании.

Как использовано в данном описании, термин «биосовместимый» описывает вещество, которое существенно не изменяет или не влияет любым вредным путем на биологическую систему, в которую его вводят. Биосовместимый полимер включает встречающиеся в природе или синтетические биосовместимые материалы, такие как белки, полинуклеотиды, полисахариды (например, крахмал, целлюлоза, декстраны, альгинаты, хитозан, пектин, гиалуроновая кислота и подобное), и липиды. Приемлемые биосовместимые полимеры включают, например, встречающиеся в природе или синтетические белки, такие как альбумин, инсулин, гемоглобин, лизозим, иммуноглобулины, -2-макроглобулин, фибронектин, витронектин, фибриноген, казеин и подобное, а также комбинации двух любых из них или более. Синтетические полимеры включают, например, полиалкиленгликоли (например, линейная или разветвленная цепь), поливиниловый спирт, полиакрилаты, полигидроксиэтилметакрилат, полиакриловую кислоту, полиэтилоксазолин, полиакриламиды, полиизопропиловые акриламиды, поливинилпирролидон, полилактид/гликолид и подобное и их комбинации.

Термин «белки» относится к полипептидам или полимерам аминокислот любой длины (включая полную длину или фрагменты), которые могут быть линейными или разветвленными, включая модифицированные аминокислоты, и/или являются прерванными неаминокислотами. Термин также охватывает аминокислотный полимер, который был модифицирован по природе или путем вмешательства; например, формирование дисульфидной связи, гликозилирование, липидизация, ацетилирование, фосфорилирование или любая другая манипуляция или модификация. Также включенными в этот термин являются, например, полипептиды, содержащие один или несколько аналогов аминокислоты (включая, например, неприродные аминокислоты и так далее), а также другие модификации, известные в данной области. Белки, описанные в данном описании, могут быть встречающимися в природе, то есть полученными из или происходящими из природного источника (такого, как кровь) или синтезированными (такими, как химически синтезированные или синтезированные с помощью технологии рекомбинантной ДНК).

Примеры приемлемых белков включают белки, находящиеся при нормальных условиях в крови или плазме, которые включают, но не ограничиваются ими, альбумин, иммуноглобулин, включая IgA, липопротеины, аполипопротеин B, -кислый гликопротеин, -2-макроглобулин, тироглобулин, трансферрин, фибронектин, фактор VII, фактор VIII, фактор IX, фактор X и подобное. В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель представляет собой некровяной белок, такой как казеин, -лактальбумин, -лактоглобулин. Белки могут быть природными по своему происхождению или полученными синтетически. В некоторых вариантах осуществления изобретения белок представляет собой альбумин, такой как HSA. HSA представляет собой высокорастворимый глобулярный белок с M_r 65K и состоит из 585 аминокислот. HSA является наиболее распространенным белком в плазме и объясняет 70-80% коллоидного осмотического давления человеческой плазмы. Аминокислотная последовательность HSA содержит всего 17 дисульфидных мостиков, один свободный тиол (Cys 34) и единственный триптофан (Trp 214). Было показано внутривенное использование раствора HSA для профилактики и лечения гиповолемического шока (см., например, Tullis, JAMA , 237, 355-360, 460-463, (1977)) и Houser с сотр., Surgery, Gynecology and Obstetrics, 150, 811-816 (1980)) и в сочетании с обменным переливанием крови для лечения неонатальной гипербилирубинемии (см., например, Finlayson, Seminars in Thrombosis and Hemostasis , 6, 85-120, (1980)). Рассматриваются другие альбумины, такие как бычий сывороточный альбумин. Применение таких не относящихся к человеку альбуминов может быть предназначено, например, в контексте применения этих композиций для нечеловекообразных млекопитающих, таких как домашний скот (включая домашних питомцев и сельскохозяйственных животных).

Человеческий сывороточный альбумин (HSA) имеет многочисленные гидрофобные сайты связывания (всего восемь для жирных кислот, эндогенный лиганд HSA) и связывает разнообразный набор фармацевтических агентов, особенно нейтральных и отрицательно заряженных гидрофобных соединений (Goodman с сотр., The Pharmacological Basis of Therapeutics, 9^th ed, McGraw-Hill New York (1996)). Были предложены два высокоаффинных сайта связывания в субдоменах IIA и IIIA HSA, которые представляют собой очень вытянутые гидрофобные карманы с заряженными остатками лизина и аргинина около поверхности, которая функционирует как точки связывания полярных элементов лигандов (см., например, Fehske с сотр., Biochem. Pharmacol., 30, 687-92 (1981), Vorum, Dan. Med. Bull., 46, 379-99 (1999), Kragh-Hansen, Dan. Med.Bull., 1441, 131-40 (1990), Curry с сотр., Nat. Struct. Biol., 5, 827-35 (1998), Sugio с сотр., Protein Eng., 12, 439-46 (1999), He с сотр., Nature, 358, 209-15 (1992) и Carter с сотр., Adv. Protein. Chem., 45, 153-203 (1994)). Было показано, что паклитаксел и пропофол связывают HSA (см., например, Paal с сотр., Eur. J. Biochem., 268(7), 2187-91 (2001), Purcell с сотр., Biochim. Biophys. Acta , 1478(1), 61-8 (2000), Altmayer с сотр., Arzneimittelforschung , 45, 1053-6 (1995) и Garrido с сотр., Rev. Esp. Anesthesiol. Reanim., 41, 308-12 (1994)). Кроме того, было показано, что доцетаксел связывается с белками плазмы человека (см., например, Urien с сотр., Invest. New Drugs, 14(2), 147-51 (1996)).

С предоставлением примера белки-носители далее описаны ниже. Следует понимать, что это описание обычно относится к биосовместимым полимерам.

Белок-носитель (такой, как альбумин) в композиции обычно служит носителем для слаборастворимого в воде фармацевтического агента, то есть белок-носитель в композиции делает слаборастворимый в воде фармацевтический агент более легко суспендируемым в водной среде или способствует поддержанию суспензии по сравнению с композициями, которые не включают белок-носитель. Это помогает избежать применения токсических растворителей для солюбилизации слаборастворимого в воде фармацевтического агента и поэтому может уменьшать один или несколько побочных эффектов от введения слаборастворимого в воде фармацевтического агента индивидууму (такому, как человек). Так, в некоторых вариантах осуществления изобретения композиция, описанная в данном описании, существенно свободна (такая, как свободная) от поверхностно-активных веществ (такого, как Tween 20). Композиция является «существенно свободной от поверхностно-активного вещества», если количество поверхностно-активного вещества в композиции недостаточно для вызывания одного или нескольких побочных эффектов у индивидуума, когда композицию вводят индивидууму.

В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель ассоциирован со слаборастворимым в воде фармацевтическим агентом, то есть композиция включает ассоциированный с белком-носителем слаборастворимый в воде фармацевтический агент. «Ассоциация» или «ассоциированный» применяется в данном описании в общем смысле и относится к белку-носителю, влияющему на поведение и/или свойство слаборастворимого в воде фармацевтического агента в водной композиции. Например, белок-носитель и слаборастворимый в воде фармацевтический агент считаются «ассоциированными», если белок-носитель делает слаборастворимый в воде фармацевтический агент более легко суспендируемым в водной среде по сравнению с композицией без белка-носителя. В другом примере белок-носитель и слаборастворимый в воде фармацевтический агент ассоциированы, если белок-носитель стабилизирует слаборастворимый в воде фармацевтический агент в водной суспензии. Например, белок-носитель и слаборастворимый в воде фармацевтический агент могут быть представлены в частице или наночастице, которые далее описаны в данном описании.

Слаборастворимый в воде фармацевтический агент является «стабилизированным» посредством белка-носителя в водной суспензии, если он остается суспендированным в водной среде (такой, как без видимого осаждения или образования осадка) в течение протяженного периода времени, такого как в течение по меньшей мере примерно любого из: 0,1; 0,2; 0,25; 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11; 12; 24; 36; 48; 60 или 72 часа. Суспензия обычно, но не обязательно, приемлема для введения индивидууму (такому, как человек). Как описано выше, стабильность суспензии является в некоторых вариантах осуществления изобретения увеличенной при комнатной температуре (такой, как 20-25°C) или в условиях охлаждения (таких, как 4°C). Стабильность также может быть оценена в условиях ускоренного тестирования, таких как температура, которая выше чем примерно 40°C. Как описано выше, стабильность суспензии может быть далее увеличена путем добавления стабилизирующих агентов, описанных в данном описании.

Белок-носитель и слаборастворимый в воде фармацевтический агент могут быть ассоциированы различным образом. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель смешивают со слаборастворимым в воде фармацевтическим агентом. В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель инкапсулирует в или захватывает слаборастворимый в воде фармацевтический агент. В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель связан (такой, как нековалентно связанный) со слаборастворимым в воде фармацевтическим агентом. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция может проявлять один или несколько вышеуказанных аспектов.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие, в основном, из) слаборастворимый в воде фармацевтический агент и белок-носитель. Когда слаборастворимый в воде фармацевтический агент находится в жидкой форме, частицы или наночастицы также упоминаются как капли или нанокапли. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент покрыт белком-носителем. Частицы (такие, как наночастицы) слаборастворимого в воде фармацевтического агента были раскрыты, например, в Патентах США № 5916596, 6506405 и 6537579, а также в Патентной публикации США № 2005/0004002A1.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы) со средним или усредненным диаметром не более чем примерно 1000 нанометров (нм), таким как менее чем примерно любой из: 900, 800, 700, 600, 500, 400, 300, 200 и 100 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения средний или усредненный диаметр частиц составляет не более чем примерно 200 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения средний или усредненный диаметр частиц находится между от примерно 20 до примерно 400 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения средний или усредненный диаметр частиц находится между от примерно 40 до примерно 200 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения наночастицы в композиции имеют средний или усредненный размер частицы не более чем 200 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы являются пригодными для стерильного фильтрования.

Частицы (такие, как наночастицы), описанные в данном описании, могут быть представлены в сухой композиции (такой, как лиофилизированная композиция) или суспендированы в биосовместимой среде. Приемлемая биосовместимая среда включает, но не ограничивается ими, воду, забуференную водную среду, физиологический раствор, необязательно забуференные растворы аминокислот, необязательно забуференные растворы белков, необязательно забуференные растворы сахаров, необязательно забуференные растворы витаминов, необязательно забуференные растворы синтетических полимеров, липидсодержащие эмульсии и подобное.

Количество белка-носителя в композиции, описанной в данном описании, будет варьировать в зависимости от слаборастворимого в воде фармацевтического агента и других компонентов в композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает белок-носитель в количестве, достаточном для стабилизации слаборастворимого в воде фармацевтического агента в водной суспензии, например, в форме стабильной коллоидной суспензии (такой, как стабильная суспензия наночастиц). В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель находится в количестве, которое уменьшает скорость образования осадка слаборастворимого в воде фармацевтического агента в водной среде. Для содержащих частицы композиций количество белка-носителя также зависит от размера и плотности частиц слаборастворимого в воде фармацевтического агента.

В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель представлен в количестве, которое достаточно для стабилизации слаборастворимого в воде фармацевтического агента в водной суспензии в определенной концентрации. Например, концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента в композиции составляет от примерно 0,1 до примерно 100 мг/мл, включая, например, любую из: от примерно 0,1 до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,1 до примерно 20 мг/мл, от примерно 1 до примерно 10 мг/мл, от примерно 2 до примерно 8 мг/мл и от примерно 4 до примерно 6 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента составляет по меньшей мере примерно любую из: 1,3 мг/мл, 1,5 мг/мл, 2 мг/мл, 3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл, 6 мг/мл, 7 мг/мл, 8 мг/мл, 9 мг/мл, 10 мг/мл, 15 мг/мл, 20 мг/мл, 25 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл и 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель представлен в количестве, которое позволяет избежать применения поверхностно-активных веществ (таких, как Tween 80 или Cremophor), так что композиция является свободной или существенно свободной от поверхностно-активного вещества (такого, как Tween 80 или Cremophor).

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция в жидкой форме включает от примерно 0,1% до примерно 50% (масса/объем) (например, примерно 0,5% (масса/объем), примерно 5% (масса/объем), примерно 10% (масса/объем), примерно 15% (масса/объем), примерно 20% (масса/объем), примерно 30% (масса/объем), примерно 40% (масса/объем), примерно 50% (масса/объем)) белка-носителя. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция в жидкой форме включает от примерно 0,5% до примерно 5% (масса/объем) белка-носителя.

В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое отношение белка-носителя, например альбумина, к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту является таким, что достаточное количество слаборастворимого в воде фармацевтического агента связывается с или транспортируется клеткой. Хотя массовое отношение белка-носителя к фармацевтическому агенту будет оптимизировано для различных комбинаций белка-носителя и лекарственного средства, обычно массовое отношение белка-носителя, например альбумина, к фармацевтическому агенту (масса/масса) составляет от примерно 0,01:1 до примерно 100:1, включая, например, любое из: от примерно 0,02:1 до примерно 50:1, от примерно 0,05:1 до примерно 20:1, от примерно 0,01:1 до примерно 20:1, от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1, от примерно 5:1 до примерно 9:1 и примерно 9:1. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое отношение белка-носителя к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту составляет примерно любое из 18:1 или менее, такое как примерно любое из: 15:1 или менее, 14:1 или менее, 13:1 или менее, 12:1 или менее, 11:1 или менее, 10:1 или менее, 9:1 или менее, 8:1 или менее, 7:1 или менее, 6:1 или менее, 5:1 или менее, 4:1 или менее и 3:1 или менее.

В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель обеспечивает композицию для введения индивидууму (такому, как человек) без значительных побочных эффектов. В некоторых вариантах осуществления изобретения белок-носитель (такой, как альбумин) находится в количестве, которое является эффективным с уменьшением одного или нескольких побочных эффектов введения слаборастворимого в воде фармацевтического агента человеку. Термин «уменьшение одного или нескольких побочных эффектов введения слаборастворимого в воде фармацевтического агента» относится к уменьшению, облегчению, элиминации или избежанию одного или нескольких нежелательных эффектов, вызванных слаборастворимым в воде фармацевтическим агентом, а также побочных эффектов, вызванных доставляющими переносчиками (такими, как растворители, которые делают слаборастворимые в воде фармацевтические агенты приемлемыми для инъекции), используемыми для доставки слаборастворимого в воде фармацевтического агента. Такие побочные эффекты включают, например, миелосупрессию, нейротоксичность, гиперчувствительность, воспаление, венозное раздражение, флебит, боль, кожное раздражение, периферическую невропатию, нейтропеническую лихорадку, анафилактическую реакцию, венозный тромбоз, экстравазацию и их комбинации. Эти побочные эффекты, однако, являются просто иллюстративными и другие побочные эффекты или комбинации побочных эффектов, ассоциированные с различными фармацевтическими агентами, могут быть уменьшены.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие из или состоящие в основном из) слаборастворимый в воде фармацевтический агент и альбумин, где массовое отношение альбумина к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту в композиции (масса/масса) составляет от примерно 0,01:1 до примерно 100:1, включая, например, любое из: от примерно 0,02:1 до примерно 50:1, от примерно 0,05:1 до примерно 20:1, от примерно 0,1:1 до примерно 20:1, от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1, от примерно 4:1 до примерно 10:1, от примерно 5:1 до примерно 9:1 и примерно 9:1. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое отношение белка-носителя к слаборастворимому в воде фармацевтическому агенту составляет примерно любое из: 18:1 или менее, 15:1 или менее, 14:1 или менее, 13:1 или менее, 12:1 или менее, 11:1 или менее, 10:1 или менее, 9:1 или менее, 8:1 или менее, 7:1 или менее, 6:1 или менее, 5:1 или менее, 4:1 или менее и 3:1 или менее. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент покрыт альбумином. В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы (такие, как наночастицы), включающие слаборастворимый в воде фармацевтический агент и альбумин, суспендированы в водной среде (такой, как водная среда, содержащая альбумин). Например, композиция может быть коллоидной суспензией частиц слаборастворимого в воде фармацевтического агента (таких, как наночастицы). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является сухой (такой, как лиофилизированная) композицией, которая может быть повторно восстановлена или повторно суспендирована в стабильную суспензию частиц или описана в данном описании. Концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента в жидкой композиции или повторно восстановленной композиции может быть разведена (0,1 мг/мл) или концентрирована (100 мг/мл), включая, например, любую из: от примерно 0,1 до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,1 до примерно 20 мг/мл, от примерно 1 до примерно 10 мг/мл, от примерно 2 до примерно 8 мг/мл, от примерно 4 до примерно 6 мг/мл и 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента (такого, как доцетаксел) является большей, чем примерно 0,1 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация слаборастворимого в воде фармацевтического агента является большей, чем примерно любая из: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 25, 30, 35, 40, 45 или 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения слаборастворимый в воде фармацевтический агент представляет собой таксан или его производное (такой, как доцетаксел или его производное).

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие доцетаксел, такие как наночастицы со средним или усредненным диаметром между от примерно 20 до примерно 400 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы имеют средний или усредненный диаметр между от примерно 40 до примерно 200 нм. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает частицы (такие, как наночастицы), включающие (в различных вариантах осуществления изобретения состоящие в основном из) доцетаксел и альбумин. В некоторых вариантах осуществления изобретения доцетаксел покрыт альбумином. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое отношение альбумина к доцетакселу (масса/масса) в композиции составляет от примерно 0,01:1 до примерно 100:1, включая, например, любое из: от примерно 0,02:1 до примерно 50:1, от примерно 0,05:1 до примерно 20:1, от примерно 1:1 до примерно 18:1, от примерно 2:1 до примерно 15:1, от примерно 3:1 до примерно 12:1. В некоторых вариантах осуществления изобретения отношение альбумина к доцетакселу (масса/объем) составляет примерно любое из: 18:1 или менее, 15:1 или менее, 14:1 или менее, 13:1 или менее, 12:1 или менее, 10:1 или менее, 9:1 или менее, 8:1 или менее, 7:1 или менее, 6:1 или менее, 5:1 или менее, 4:1 или менее и 3:1 или менее.

В некоторых вариантах осуществления изобретения частицы (такие, как наночастицы), включающие доцетаксел и альбумин, суспендированы в водной среде (такой, как водная среда, содержащая альбумин). Например, композиция может быть коллоидной суспензией доцетакселсодержащих частиц (таких, как наночастицы). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является сухой (такой, как лиофилизированная композиция), которая может быть повторно восстановлена в водную суспензию доцетакселсодержащих частиц. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация доцетаксела в композиции находится между примерно 0,1 мг/мл и примерно 100 мг/мл, включая, например, любую из: от примерно 0,1 до примерно 50 мг/мл, от примерно 0,1 до примерно 20 мг/мл, от примерно 1 до примерно 10 мг/мл, от примерно 2 до примерно 8 мг/мл, от примерно 4 до примерно 6 мг/мл и примерно 5 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления изобретения концентрация доцетаксела составляет по меньшей мере примерно любую из: 1,3 мг/мл, 1,5 мг/мл, 2 мг/мл, 3 мг/мл, 4 мг/мл, 5 мг/мл, 6 мг/мл, 7 мг/мл, 8 мг/мл, 9 мг/мл, 10 мг/мл, 15 мг/мл, 20 мг/мл, 25 мг/мл, 30 мг/мл, 40 мг/мл и 50 мг/мл.

Безводный доцетаксел

В дополнение к применению стабилизирующих агентов, раскрытых в данном описании (таких, как цитрат натрия и цитрат натрия/хлорид натрия), было обнаружено, что применение безводного доцетаксела приводит к получению более стабильной композиции, чем та, которая могла быть получена с гидратированным доцетакселом, таким как тригидрат или полугидрат доцетаксела. Композиции безводного доцетаксела по настоящему изобретению далее улучшают стабильность водных суспензий наночастиц, так что стабильность суспензий до или после лиофилизации превышает 1 день. Кроме того, преимущество приобретенной стабильности безводного доцетаксела также распространяется на стандартные композиции, такие как композиции с Tween 80, Cremophor или другие известные поверхностно-активные вещества.

Так, в соответствии с настоящим изобретением доцетаксел может быть растворен в фармацевтически приемлемом растворителе или растворителях в конечной концентрации в диапазоне примерно 1-99% объем/объем, более предпочтительно в диапазоне примерно 5-25% объем/объем. Растворители включают, например, хлорированные растворители, этилацетат, этанол, тетрагидрофуран, диоксан, ацетонитрил, ацетон, диметилсульфоксид, диметилформамид, метилпирролидинон, масла, такие как соевое масло, сафлоровое масло, и другие пригодные для инъекции масла и подобное.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел, где доцетаксел, используемый для получения композиции, находится в безводной форме. В некоторых вариантах осуществления изобретения изобретение представляет композицию, включающую доцетаксел, где по меньшей мере некоторое количество доцетаксела в композиции находится в безводной форме. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере примерно 10% (такое, как по меньшей мере примерно любое из: 20%, 30%, 40% и 50%) доцетаксела в композиции находится в безводной форме. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент (такой, как стабилизирующий агент, описанный в данном описании).

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел и биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, описанный в данном описании, например альбумин), где доцетаксел, используемый для получения композиции, находится в безводной форме. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел, биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, описанный в данном описании, например альбумин) и стабилизирующий агент (такой, как стабилизирующий агент, описанный в данном описании), где доцетаксел, используемый для получения композиции, находится в безводной форме. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является существенно свободной (такой, как свободная) от поверхностно-активных веществ. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает поверхностно-активное вещество.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел и биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, например альбумин), где по меньшей мере некоторое количество доцетаксела в композиции находится в безводной форме. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере примерно 10% (такое, как по меньшей мере примерно любое из: 20%, 30%, 40% и 50%) доцетаксела в композиции находится в безводной форме. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент (такой, как стабилизирующий агент, описанный в данном описании).

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция включает доцетаксел и поверхностно-активное вещество (такое, как безводное поверхностно-активное вещество), где доцетаксел, используемый для получения композиции, находится в безводной форме. В некоторых вариантах осуществления изобретения поверхностно-активное вещество, используемое для получения композиции, находится в безводной форме. Приемлемые поверхностно-активные вещества включают, например, полисорбат (такой, как Tween) и Cremophor. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция может далее включать стабилизирующий агент, описанный в данном описании. В некоторых вариантах осуществления изобретения изобретение представляет композицию, включающую доцетаксел и поверхностно-активное вещество, где по меньшей мере некоторое количество доцетаксела в композиции находится в безводной форме. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения по меньшей мере примерно 10% (такое, как по меньшей мере примерно любое из: 20%, 30%, 40% и 50%) доцетаксела в композиции находится в безводной форме.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция, раскрытая в данном описании, является сухой (такой, как лиофилизированная) композицией, которая может быть повторно восстановлена, повторно суспендирована или повторно гидратирована обычно с формированием стабильной водной суспензии доцетаксела. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является жидкой (такой, как водная) композицией, полученной посредством повторного восстановления или повторного суспендирования сухой композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция является интермедиатом жидкой (такой, как водная) композиции, которая может быть высушена (такой, как лиофилизированная).

В некоторых вариантах осуществления изобретения предоставляется способ получения композиций, включающих доцетаксел и поверхностно-активное вещество, где способ включает комбинирование безводного доцетаксела с поверхностно-активным веществом. В некоторых вариантах осуществления изобретения поверхностно-активное вещество, используемое для получения композиции, является безводным. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ получения композиции, включающей доцетаксел и биосовместимый полимер (такой, как белки-носители, например альбумин), где способ включает комбинирование безводного доцетаксела с биосовместимым полимером (таким, как белок-носитель, например альбумин). Также представляются композиции, полученные с помощью способов, описанных в данном описании.

Другие компоненты в композициях

Композиции, раскрытые в данном описании, могут включать другие агенты, эксципиенты или стабилизаторы с улучшением свойств композиции. Примеры приемлемых эксципиентов и растворителей включают, но не ограничиваются ими, лактозу, декстрозу, сахарозу, сорбит, маннит, крахмал, аравийскую камедь, фосфат кальция, альгинаты, трагакант, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, физиологический раствор, патоку, метилцеллюлозу, метил- и пропилгидроксибензоаты, тальк, стеарат магния и минеральное масло. Композиции могут дополнительно включать смазывающие агенты, увлажняющие агенты, эмульгирующие и суспендирующие агенты, консервирующие агенты, подслащивающие агенты или ароматизирующие агенты. Примеры эмульгирующих агентов включают сложный эфир токоферола, такой как полиэтиленгликольсукцинат токоферола и подобное, плуроник ^® (блок-сополимер полиоксиэтилена и полиоксипропилена), эмульгаторы, основанные на соединениях полиоксиэтилена, Span 80 и родственные соединения, и другие эмульгаторы, известные в данной области и утвержденные для применения у животных и человека лекарственные формы. Композиции могут быть составлены так, чтобы обеспечить быстрое, непрерывное или замедленное высвобождение активного ингредиента после введения пациенту посредством применения процедур, хорошо известных в данной области.

Предпочтительные композиции для введения путем инъекции включают такие композиции, которые содержат слаборастворимый в воде фармацевтический агент как активный ингредиент в ассоциациии с поверхностно-активным агентом (или увлажняющий агент, или поверхностно-активное вещество) или в форме эмульсии (например, эмульсии типа вода в масле или масло в воде). Могут быть добавлены другие ингредиенты, например маннит, или другие фармацевтически приемлемые переносчики, если необходимо.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция приемлема для введения человеку. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция приемлема для введения млекопитающему, такому как, в ветеринарном контексте, включая домашний скот и сельскохозяйственных животных. Существует широкий ряд приемлемых композиций по изобретению (см., например, Патенты США № 5916596 и 6096331). Следующие композиции и способы являются просто типичными и никоим образом не ограничены. Композиции, приемлемые для орального введения, могут состоять из: а) жидких растворов, таких как эффективное количество соединения, растворенного в разбавителях, таких как вода, физиологический раствор или апельсиновый сок; б) капсул, саше или таблеток, где каждая содержит заранее определенное количество активного ингредиента как твердое вещество или гранулы; в) суспензий в соответствующей жидкости; г) приемлемых эмульсий и д) порошков. Таблетизированные формы могут включать одну или несколько из: лактозы, маннита, кукурузного крахмала, картофельного крахмала, микрокристаллической целлюлозы, камеди, желатина, коллоидной двуокиси кремния, кроскармелозы натрия, талька, стеарата магния, стеариновой кислоты и других эксципиентов, красителей, разбавителей, забуферивающих агентов, увлажняющих агентов, консервантов, ароматизирующих агентов и фармакологически совместимых эксципиентов. Формы для рассасывания могут включать активный ингредиент в ароматизатор, обычно сахарозу и камедь или трагакант, а также пастилки, включающие активный ингредиент в инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и камедь, эмульсии, гели и подобное, содержащие в добавление к активному ингредиенту такие эксципиенты, как известные в данной области.

Композиции, приемлемые для парентерального введения включают водные и безводные, изотонические стерильные инъекционные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, которые делают композицию совместимой с кровью предполагаемого реципиента, и водные и безводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты, солюбилизаторы, загущающие агенты, стабилизаторы и консерванты. Композиции могут быть представлены в герметичных контейнерах, содержащих лекарственное средство в дозах на один прием или для многократного приема, таких как ампулы и пробирки, и могут храниться в высушенном-замороженном (лиофилизированном) состоянии, требующем только добавления стерильного жидкого эксципиента, например воды для инъекций, непосредственно перед использованием. Экстемпоральные инъекционные растворы и суспензии могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток типа, описанного ранее. Инъецируемые композиции являются предпочтительными.

Композиции, приемлемые для аэрозольного введения, включают композицию по изобретению, включающую водные и безводные изотонические стерильные растворы, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и растворенные вещества, а также водные и безводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты, солюбилизаторы, загущающие агенты, стабилизаторы и консерванты индивидуально или в комбинации с другими приемлемыми компонентами, которые могут быть получены в аэрозольных композициях для введения посредством ингаляции. Эти аэрозольные композиции могут быть помещены в находящиеся под давлением приемлемые пропелленты, такие как дихлордифторметан, пропан, азот и подобное. Они также могут быть получены как фармацевтические продукты для не находящихся под давлением препаратов, такие как ингалятор или пульверизатор.

В некоторых вариантах осуществления изобретения композицию составляют с pH в диапазоне от примерно 4,5 до примерно 9,0, включая, например, pH в диапазонах любого из: от примерно 5,0 до примерно 8,0; от примерно 6,5 до примерно 7,5 и от примерно 6,5 до примерно 7,0. В некоторых вариантах осуществления изобретения pH композиции составляют не менее чем примерно 6, включая, например, не менее чем примерно любой из: 6,5; 7 или 8 (такой, как примерно 7,5 или примерно 8). Композиция также может быть получена изотоничной с кровью путем добавления приемлемого модификатора тоничности, такого как глицерин.

Также представляются изделия, включающие композиции, раскрытые в данном описании, в приемлемой упаковке. Приемлемая упаковка для композиций, описанная в данном описании, известна в данной области и включает, например, пробирки (такие, как герметичные пробирки), сосуды (такие, как герметичные сосуды), ампулы, банки, гибкие упаковки (например, герметичная полиэфирная пленка майлар или пластиковые контейнеры) и подобное. Эти изделия далее могут быть стерилизованы и/или герметично закрыты. Также представляются стандартные лекарственные формы, включающие композиции, раскрытые в данном описании. Эти стандартные лекарственные формы могут храниться в приемлемой упаковке в разовой стандартной лекарственной форме или в многократной стандартной лекарственной форме и также могут быть далее стерилизованы и/или герметично закрыты.

Настоящее изобретение также представляет наборы, включающие композиции (или стандартные лекарственные формы и/или изделия), описанные в данном описании, и могут далее включать инструкцию(и) по способам применения композиции, такую как использованная далее в данном описании. В некоторых вариантах осуществления изобретения набор по изобретению включает описанную выше упаковку. В другом варианте осуществления изобретения набор по изобретению включает упаковку, описанную выше, и вторую упаковку, включающую буфер. Он может далее включать другие материалы, желательные с точки зрения промышленности и пользователя, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы, шприцы и листовки-вкладыши в упаковке с инструкциями по выполнению любых способов, описанных в данном описании.

Также могут представляться наборы, которые содержат достаточные дозы слаборастворимого в воде фармацевтического агента (такого, как доцетаксел), как описано в данном описании, с обеспечением эффективного лечения индивидуума в течение продолжительного периода времени, такого как любой из: неделя, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 6 недель, 8 недель, 3 месяца, 4 месяца, 5 месяцев, 6 месяцев, 7 месяцев, 8 месяцев, 9 месяцев или более. Наборы могут также включать множество стандартных доз слаборастворимого в воде фармацевтического агента и фармацевтические композиции и инструкции по применению и упакованные в количестве, достаточном для хранения и использования в аптеках, например в больничных аптеках и смешанных аптеках.

Способ получения и применения композиций

Также представляются способы получения и применения композиций, раскрытых в данном описании. Например, представляется способ получения композиции, включающей слаборастворимый в воде фармацевтический агент (такой, как таксан, например паклитаксел, доцетаксел или ортатаксел), необязательно биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель например, альбумин) и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента, включающий комбинирование (такое, как смешивание) композиции, содержащей слаборастворимый в воде фармацевтический агент и необязательно биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель), со стабилизирующим агентом.

Также представляются способы формирования наночастиц доцетаксела, полученные в условиях интенсивных сдвиговых усилий (например, разрушение ультразвуком, гомогенизация при высоком давлении или подобное). Препарат наночастиц из биосовместимых полимеров (например, альбумин) раскрыт, например, в Патентах США № № 5916596, 6506405 и 6537579 и также в публикации Патента США 2005/0004002 A1, включенного в данное описание посредством ссылки.

Вкратце, слаборастворимый в воде фармацевтический агент (такой, как доцетаксел) разводят в органическом растворителе и раствор может быть добавлен в водный раствор альбумина. Смесь подвергают гомогенизации при высоком давлении. Органический растворитель затем может быть удален путем выпаривания. Полученная дисперсия может быть далее лиофилизирована. Приемлемые органические растворители включают, например, кетоны, сложные эфиры, простые эфиры, хлорированные растворители и другие растворители, известные в данной области. Например, органический растворитель может быть метиленхлоридом или хлороформом/этанолом (например, в отношении 1:9, 1:8, 1:7, 1:6, 1:5, 1:4, 1:3, 1:2, 1:1, 2:1, 3:1, 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1 или 9:1).

Было удивительно обнаружить, что композиции доцетаксела, такие как те, что получены в вышецитированных ссылках, имеют стабильность, сохраняющуюся менее чем 1 день. Действительно, при тестировании многие композиции были стабильны в течение только 4-8 часов. Настоящее изобретение предусматривает увеличение жидкой стабильности и стабильности после повторного восстановления путем добавления определенных стабилизаторов перед формированием наночастиц или после того, как наночастицы сформированы.

Поэтому представляются способы стабилизации композиции, включающей слаборастворимый в воде фармацевтический агент, включающие комбинирование композиции со стабилизирующим агентом, где полученная в результате композиция является стабильной в тех же условиях, при которых композиция является нестабильной перед добавлением стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения способ далее включает идентификацию и отбор композиции, которая является нестабильной при определенных условиях. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для отбора включает слаборастворимый в воде фармацевтический агент и белок-носитель (такой, как альбумин). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция для отбора включает частицы (такие, как наночастицы), включающие слаборастворимый в воде фармацевтический агент и белок-носитель (такой, как альбумин).

Фармацевтически приемлемые эксципиенты также могут быть добавлены в композицию. Фармацевтически приемлемые эксципиенты могут быть раствором, эмульсией или суспензией. Например, эмульсия пропофола в масле и стабилизированная лецитином хорошо известна в данной области. Также можно получить другие эмульсионные или наночастичные композиции по изобретению. Эмульсию формируют путем гомогенизации при высоком давлении и интенсивных сдвиговых усилиях. Такую гомогенизацию удобно выполнять в гомогенизаторе высокого давления, обычно работающем при давлении в диапазоне от примерно 3000 до 30000 пси. Предпочтительно такие способы выполняют при давлении в диапазоне от примерно 6000 до 25000 пси. Полученная в результате эмульсия включает очень маленькие нанокапли безводного растворителя, содержащего растворенный фармакологически активный агент, и очень маленькие нанокапли белок-стабилизирующего агента. Приемлемые способы гомогенизации включают способы, обеспечивающие высокое усилие сдвига и кавитацию, такие как, например, гомогенизация при высоком давлении, смесители с большими сдвиговыми усилиями, разрушение ультразвуком, импеллеры с большими сдвиговыми усилиями и подобное.

Коллоидные системы, полученные в соответствии с настоящим изобретением, могут быть далее превращены в порошковую форму путем удаления воды, например путем лиофилизации при приемлемом профиле температура/время. Белок (например, HSA) сам действует как криопротектор и порошок легко повторно восстанавливается путем добавления воды, физиологического раствора или буфера без необходимости применения стандартных криопротекторов, таких как маннит, сахароза, глицин и подобное. Пока это не требуется, следует конечно понимать, что стандартные криопротекторы могут быть добавлены в фармацевтические композиции по желанию.

Стабилизирующий агент может быть смешан со слаборастворимым в воде фармацевтическим агентом и/или белком-носителем во время получения композиции слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель или добавлен после получения композиции слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель. Например, стабилизирующий агент может быть представлен в белковом растворе до формирования композиции слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель. Стабилизирующий агент также может быть добавлен вместе с водной средой, используемой для повторного восстановления/суспендирования композиции слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель или добавлен в водную суспензию ассоциированного с белком-носителем слаборастворимого в воде фармацевтического агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент смешивают с композицией слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель до лиофилизации. В некоторых вариантах осуществления изобретения стабилизирующий агент добавляют как сухой компонент в лиофилизированную композицию слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель. В некоторых вариантах осуществления изобретения, когда композиция включает частицы (такие, как наночастицы), стабилизирующий агент может быть добавлен до или после формирования частиц.

В некоторых вариантах осуществления изобретения, когда добавление стабилизирующего агента изменяет pH композиции, pH в композиции обычно (но не обязательно) регулируют до желаемого pH. Примерные значения pH композиций включают, например, от примерно 5 до примерно 8,5. В некоторых вариантах осуществления изобретения pH композиции регулируют до не менее чем примерно 6, включая, например, не менее чем примерно любой из: 6,5; 7 или 8 (такой, как примерно 7,5 или 8).

Также представляются способы получения фармацевтических композиций, включающие комбинирование любой из композиций, описанных в данном описании (включая вышеупомянутые), с фармацевтически приемлемым эксципиентом.

Также представляются в данном описании способы применения композиций по настоящему изобретению. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ лечения заболевания или состояния, которое реагирует на слаборастворимый в воде фармацевтический агент, включающий введение композиции, включающей эффективное количество слаборастворимого в воде фармацевтического агента, необязательно биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель) и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. Например, в некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ лечения рака у индивидуума (такого, как человек), включающий введение индивидууму композиции, включающей эффективное количество слаборастворимого в воде антибластомного агента (такого, как доцетаксел), необязательно белка-носителя и стабилизирующего агента, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. В некоторых вариантах осуществления изобретения количество стабилизирующего агента в композиции не вызывает каких-либо токсических эффектов, когда композицию вводят индивидууму (такому, как человек). В некоторых вариантах осуществления изобретение представляется способ лечения рака у индивидуума (такого, как человек), включающий введение индивидууму эффективного количества доцетаксела, где доцетаксел, используемый для получения композиции, находится в безводной форме. Например, доцетаксел может быть безводным до включения в композицию.

Термин «эффективное количество», используемый в данном описании, относится к количеству соединения или композиции, достаточному для лечения специфического нарушения, состояния или заболевания, такого как улучшение, временное ослабление проявлений болезни, уменьшение и/или задержка развития одного или нескольких его симптомов. Что касается рака или другой нежелательной клеточной пролиферации, эффективное количество включает количество, достаточное, чтобы вызвать сокращение объема опухоли и/или уменьшение скорости роста опухоли (такое, как подавление опухолевого роста). В некоторых вариантах осуществления изобретения эффективное количество представляет собой количество, достаточное для замедления развития опухоли. В некоторых вариантах осуществления изобретения эффективное количество представляет собой количество, достаточное для предотвращения проявления и/или рецидива опухоли. Эффективное количество может быть введено одним или несколькими способами введения.

Раковые заболевания для лечения с помощью композиций, описанных в данном описании (такой, как композиция, включающая слаборастворимый в воде фармацевтический агент, такой как доцетаксел, рапамицин и 17AAG), включают, но не ограничиваются ими, карциному, лимфому, бластому, саркому и лейкоз. Примеры раковых заболеваний, которые могут быть вылечены с помощью композиций, раскрытых в данном описании, включают, но не ограничиваются ими, плоскоклеточный рак, рак легкого (включая мелкоклеточный рак легкого, немелкоклеточный рак легкого, аденокарциному легкого и плоскоклеточную карциному легкого), рак брюшной полости, гепатоклеточный рак, рак области желудка или рак желудка (включая рак желудочно-кишечного тракта), рак поджелудочной железы, глиобластому, рак шейки матки, рак яичника, рак печени, рак мочевого пузыря, гепатому, рак молочной железы, рак толстой кишки, меланому, эндометриальную или маточную карциному, карциному слюнной железы, рак почки или ренальный рак, рак печени, рак предстательной железы, рак вульвы, рак щитовидной железы, карциному печени, рак головы и шеи, рак ободочной и прямой кишки, рак прямой кишки, саркому мягких тканей, саркому Капоши, B-клеточную лимфому (включая низкозлокачественную/фолликулярную неходжкинскую лимфому (NHL), мелкоклеточную лимфоцитарную (SL) NHL, промежуточной стадии злокачественности/фолликулярную NHL, промежуточной стадии злокачественности/диффузную NHL, высокозлокачественную иммунобластную NHL, высокозлокачественную лимфобластную NHL, высокозлокачественную с нерасщепленными ядрами NHL, NHL с массивным поражением, мантелевидноклеточную лимфому, СПИД-родственную лимфому и макроглобулинемию Вальденстрема), хронический лимфоцитарный лейкоз (CLL), острый лимфобластный лейкоз (ALL), миелому, лейкоз ворсистых клеток, хронический миелобластный лейкоз и пост-трансплантационное лимфопролиферативное нарушение (PTLD), а также аномальную сосудистую пролиферацию, ассоциированную с факоматозом, отеком (такую, как ассоциированная с опухолями головного мозга), и синдром Мейгса. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ лечения метастазирующего рака (такого, как рак, который метастазирует из первичной опухоли). В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ уменьшения уровня клеточной пролиферации и/или клеточной миграции. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ лечения гиперплазии.

В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ лечения рака в прогрессирующей стадии(ях). В некоторых вариантах осуществления изобретения представляются способы лечения рака молочной железы (который может быть HER2-положительным или HER2-отрицательным), включая, например, прогрессирующий рак молочной железы, рак молочной железы стадии IV, локально прогрессирующий рак молочной железы и метастазирующий рак молочной железы. В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой рак легкого, включая, например, немелкоклеточный рак легкого (NSCLC, такой как прогрессирующий NSCLC), мелкоклеточный рак легкого (SCLC, такой как прогрессирующий SCLC) и прогрессирующую солидную злокачественную опухоль в легком. В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой рак яичника, рак головы и шеи, злокачественные опухоли желудка, меланому (включая метастазирующую меланому), рак ободочной и прямой кишки, рак поджелудочной железы и солидные опухоли (такие, как прогрессирующие солидные опухоли). В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) рака молочной железы, рака ободочной и прямой кишки, рака прямой кишки, немелкоклеточного рака легкого, неходжкинской лимфомы (NHL), почечно-клеточного рака, рака предстательной железы, рака печени, рака поджелудочной железы, саркомы мягких тканей, саркомы Капоши, карциноидной саркомы, рака головы и шеи, меланомы, рака яичника, мезотелиомы, глиом, глиобластом, нейробластом и множественной миеломы. В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой солидную опухоль. В некоторых вариантах осуществления изобретения рак представляет собой любой из: (и в некоторых вариантах осуществления изобретения выбранный из группы, состоящей из) рака предстательной железы, рака толстой кишки, рака молочной железы, рака головы и шеи, рака поджелудочной железы, рака легкого и рака яичника.

Индивидуумы, приемлемые для получения этих композиций в зависимости от природы слаборастворимого в воде фармацевтического агента, а также заболевания/состояния/нарушения получают лечение и/или профилактику. Соответственно, термин индивидуум включает любого из позвоночных, млекопитающих и людей в зависимости от предполагаемого приемлемого применения. В некоторых вариантах осуществления изобретения индивидуум представляет собой млекопитающее. В некоторых вариантах осуществления изобретения индивидуум представляет собой любого одного или нескольких людей, крупный рогатый скот, лошадей, кошек, собак, грызунов или приматов. В некоторых вариантах осуществления изобретения индивидуум представляет собой человека.

В другом аспекте представляется способ лечения карциномы (такой, как карцинома толстой кишки) у индивидуума, где способ включает введение индивидууму композиции, включающей эффективное количество доцетаксела и белка-носителя (такого, как альбумин). В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция далее включает стабилизирующий агент, описанный в данном описании, такой как цитрат. В некоторых вариантах осуществления изобретения доцетаксел, используемый для получения композиции, которую вводят индивидууму, находится в безводной форме. Доцетаксел и белок-носитель могут быть представлены в формах наночастиц (таких, как наночастицы, описанные в данном описании).

Композиции, раскрытые в данном описании, могут быть введены индивидуально или в комбинации с другими фармацевтическими агентами, включая слаборастворимые в воде фармацевтические агенты. Например, когда композиция включает таксан (такой, как доцетаксел), она может быть совместно введена с одним или несколькими другими химиотерапевтическими агентами, включающими, но не ограничивающимися ими, карбоплатин, навелбин ^® (винорелбин), антрациклин (Doxil), лапатиниб (GW57016), герсептин, гемцитабин (Gemzar^®), капецитабин (Xeloda^®), алимта, цисплатин, 5-фторурацил, эпирубицин, циклофосфамид, авастин, велкад^® и так далее. В некоторых вариантах осуществления изобретения таксановую композицию совместно вводят с химиотерапевтическим агентом, выбранным из группы, состоящей из антиметаболитов (включая нуклеозидные аналоги), основанных на платине агентов, алкилирующих агентов, ингибиторов тирозинкиназ, антрациклиновых антибиотиков, алкалоидов барвинка, ингибиторов протеасом, макролидов и ингибиторов топоизомераз. Эти другие фармацевтические агенты могут быть представлены в той же композиции, что и лекарственное средство (такое, как таксан), или в отдельной композиции, которая вводится одновременно или последовательно с лекарственным средством (таким, как таксансодержащая композиция). Способы комбинированной терапии с использованием наночастичных композиций таксана с другими агентами (или терапевтические способы) были описаны в Международной Патентной Заявке № PCT/US2006/006167.

Доза композиции по изобретению, вводимая индивидууму (такому, как человек), будет варьировать в зависимости от конкретной композиции, способа введения и конкретного заболевания, которое лечат. Доза должна быть достаточной для обеспечения желательного ответа, такого как терапевтический или профилактический ответ против конкретного заболевания или состояния. Например, доза вводимого доцетаксела может быть от примерно 1 до примерно 300 мг/м², включая, например, от примерно 10 до примерно 300 мг/м², от примерно 30 до примерно 200 мг/м² и от примерно 70 до примерно 150 мг/м². Обычно дозировка доцетаксела в композиции может быть в диапазоне от примерно 50 до примерно 200 мг/м ², когда дается по 3-х недельной схеме, или от примерно 10 до примерно 100 мг/м², когда дается по еженедельной схеме. Кроме того, если дается по метрономной схеме приема (например, ежедневно или несколько раз в неделю), дозировка может быть в диапазоне примерно 1-50 мг/м².

Частота дозированного введения для композиции включает, но не ограничиваясь ими, по меньшей мере примерно любую из: один раз каждые три недели, один раз каждые две недели, один раз в неделю, два раза в неделю, три раза в неделю, четыре раза в неделю, пять раз в неделю, шесть раз в неделю или ежедневно. В некоторых вариантах осуществления изобретения интервал между каждым введением составляет менее чем примерно неделю, такой как менее чем примерно любой из: 6, 5, 4, 3, 2 или 1 день. В некоторых вариантах осуществления изобретения интервал между каждым введением является постоянным. Например, введение может выполняться ежедневно, каждые два дня, каждые три дня, каждые четыре дня, каждые пять дней или еженедельно. В некоторых вариантах осуществления изобретения введение может выполняться дважды в день, три раза в день или чаще.

Введение композиции может быть продолжено на длительный период времени, такой как от примерно месяца до примерно трех лет. Например, схема введения доз может быть продолжена на период любой из примерно 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18, 24, 30 и 36 месяцев. В некоторых вариантах осуществления изобретения отсутствует перерыв в схеме введения доз. В некоторых вариантах осуществления изобретения интервал между каждым введением составляет не более чем примерно неделю.

Композиции, раскрытые в данном описании, могут быть введены индивидууму (такому, как человек) через различные пути, включая, например, внутривенный, внутриартериальный, внутрибрюшинный, оральный, ингаляционный, внутрипузырный, внутримышечный, внутритрахеальный, подкожный, внутриглазной, внутриоболочечный, чресслизистый и чрескожный. Например, композиция по изобретению может быть введена путем ингаляции с лечением состояний дыхательных путей. Композиция может быть использована для лечения дыхательных состояний, таких как фиброз легких, облитерирующий бронхиолит, рак легкого, бронхоальвеолярная карцинома и подобное. В одном варианте осуществления изобретения наночастицы (такие, как альбуминовые наночастицы) соединений по изобретению могут быть введены любым приемлемым путем, включающим, но не ограничиваясь ими, оральный, внутримышечный, чрескожный, внутривенный, через ингалятор или другие системы доставки по воздуху и подобное.

При получении композиции для инъекции, особенно для внутривенной доставки, непрерывная фаза предпочтительно включает водный раствор модификаторов тоничности, забуференных при pH в диапазоне от примерно 5 до примерно 8,5. pH может быть также ниже 7 или ниже 6. В некоторых вариантах осуществления изобретения pH композиции составляет не менее чем примерно 6, включая, например, не менее чем на примерно любой из: 6,5; 7 или 8 (такой, как 7,5 или 8).

Наночастицы по этому изобретению могут быть заключены в твердую или мягкую капсулу, могут быть спрессованы в таблетки или могут быть включены в напитки или продукты питания, или иное, включенное в диету. Капсулы могут быть составлены путем смешивания наночастиц с инертным фармацевтическим разбавителем и введения смеси в твердую желатиновую капсулу желаемого размера. Если желательны мягкие капсулы, густая суспензия наночастиц с приемлемым растительным маслом, легким петролейным эфиром или другим инертным маслом может быть включена с помощью машины в желатиновую капсулу.

Также в данном описании предоставляются способы уменьшения побочных эффектов, ассоциированных с введением слаборастворимого в воде фармацевтического агента человеку, включающие введение человеку фармацевтической композиции, включающей слаборастворимый в воде фармацевтический агент, биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель) и стабилизирующий агент, где стабильность композиции увеличивается по сравнению с таковой композиции без стабилизирующего агента. Например, изобретение представляет способы уменьшения различных побочных эффектов, ассоциированных с введением слаборастворимого в воде фармацевтического агента, включающие, но не ограничиваясь ими, миелосупрессию, нейротоксичность, гиперчувствительность, воспаление, венозное раздражение, флебит, боль, кожное раздражение, периферическую невропатию, нейтропеническую лихорадку, анафилактическую реакцию, гематологическую токсичность и церебральную или неврологическую токсичность и их комбинации. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ уменьшения гиперчувствительных реакций, ассоциированных с введением слаборастворимого в воде фармацевтического агента, включая, например, тяжелые кожные сыпи, крапивницу, прилив крови к лицу, одышку, тахикардию и другие.

Кроме того, представляется способ увеличения стабилизации композиции, включающей слаборастворимый в воде фармацевтический агент и необязательно биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель), включающий добавление в композицию стабилизирующего агента в количестве, которое является эффективным для увеличения стабильности композиции. В некоторых вариантах осуществления изобретения представляется способ получения композиции, включающей слаборастворимый в воде фармацевтический агент (такой, как доцетаксел), биосовместимый полимер (такой, как белок-носитель, например альбумин) и стабилизирующий агент, включающий комбинирование (такое, как смешивание) слаборастворимого в воде фармацевтического агента и биосовместимого полимера со стабилизирующим агентом. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция представляет собой жидкую композицию. В некоторых вариантах осуществления изобретения композиция представляет собой композицию после повторного восстановления.

Стабилизирующий агент можно смешивать со слаборастворимым в воде фармацевтическим агентом и/или белком-носителем во время получения композиции слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель или добавлять индивидуально с водной средой, используемой для повторного восстановления композиции слаборастворимый в воде фармацевтический агент/белок-носитель.

В дальнейшем аспекте изобретения представляется применение композиций, описанных в данном описании, для изготовления лекарственного средства. Особенно изготовления лекарственного средства для применения в лечении состояний, описанных в данном описании. Далее фармацевтическая композиция такового, по-разному описанная в данном описании, также предназначается для применения при изготовлении лекарственного средства, используемого для лечения состояний и в соответствии со способами, описанными в данном описании, если не указано иное.

Специалисты в данной области признают, что некоторые вариации возможны в объеме и сущности этого изобретения. Изобретение поэтому не будет описано более подробно путем ссылки на следующие неограниченные примеры. Если не указано иное, стабильность композиций в примерах ниже оценивают при 25°C или 4°C.

ПРИМЕР 1

Этот пример демонстрирует нестабильность препарата фармацевтических композиций, включающих доцетаксел и альбумин, полученных, как описано в патентной публикации США 2005/0004002 A1.

30 мг доцетаксела растворяли в 2 мл хлороформа/этанола. Раствор затем добавляли в 27,0 мл раствора HSA (3% масса/объем). Смесь гомогенизировали в течение 5 минут при низких об/мин (Vitris гомогенизатор модель Tempest I.Q.) для того, чтобы сформировать сырую эмульсию, и затем переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 9000-40000 пси. Полученную в результате систему переносили в Rotavap и растворитель быстро удаляли при пониженном давлении. Полученная в результате дисперсия была полупрозрачной и типичный средний диаметр полученных в результате частиц находился в диапазоне 50-220 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Дисперсию далее лиофилизировали в течение 48 часов. Полученный в результате осадок на фильтре легко повторно восстанавливался в исходную дисперсию путем добавления стерильной воды или физиологического раствора. Размер частиц после повторного восстановления был таким же, как до лиофилизации. Когда жидкую суспензию перед лиофилизацией хранили, обнаружили, что в то время как суспензия была стабильной при примерно 4-8 часах после получения, при 24 часах наблюдали некоторое образование осадка, указывающее на нестабильность. Аналогично для лиофилизированной повторно восстановленной суспензии с удивлением обнаружили, что в то время как суспензия была стабильной при примерно 4-8 часах после получения, при 24 часах наблюдали некоторое образование осадка, указывающее на нестабильность. Эта нестабильность при 24 часах, ранее не наблюдаемая изобретателями в качестве мониторируемого периода после первоначального получения композиции и повторного восстановления, обычно составляла только 4-8 часов.

ПРИМЕР 2

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем обработки ультразвуком.

25,9 мг доцетаксела добавляли в пробирку для сцинтилляции на 20 мл и растворяли в 0,3 мл хлороформа. 4,7 мл HSA (3,0%, масса/объем) добавляли в смесь с растворенным доцетакселом. Композицию обрабатывали ультразвуком (Sonic Dismembrator, модель 550, Fisher Scientific Company, Pittsburg, PA 155275) при 50% мощности в течение 1 мин. Смесь переносили в роторный испаритель и хлороформ-этанол быстро удаляли при 45°C при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял 250-300 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Суспензия выпадала в осадок менее чем за 1 день.

ПРИМЕР 3

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем обработки ультразвуком с тестированием соевого масла как стабилизатора.

18,0 мг доцетаксела добавляли в пробирку для сцинтилляции на 20 мл и растворяли в 0,1 мл смеси хлороформ-этанол. 0,05 мл соевого масла и 2,35 мл HSA (5,0%, масса/объем) добавляли в вышеупомянутый органический растворитель. Образец обрабатывали ультразвуком (Sonic Dismembrator, модель 550, Fisher Scientific Company, Pittsburg, PA 155275), течение 2 мин. Смесь переносили в роторный испаритель и хлороформ-этанол быстро удаляли при 45°C при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял приблизительно 270 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Суспензия выпадала в осадок менее чем за 1 день.

ПРИМЕР 4

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем обработки ультразвуком с использованием смеси этилацетат-н-бутилацетат.

22,7 мг доцетаксела добавляли в пробирку для сцинтилляции на 20 мл и растворяли в 1,0 мл смеси этилацетат-н-бутилацетат. 2,4 мл HSA (5,0%, масса/объем) добавляли в доцетаксел, растворенный в органическом растворителе. Образец обрабатывали ультразвуком (Sonic Dismembrator, модель 550, Fisher Scientific Company, Pittsburg, PA 155275) при 50% мощности в течение 1 мин. Смесь переносили в роторный испаритель и этилацетат и н-бутилацетат удаляли при 45°C при пониженном давлении. Композиция выпадала в осадок в течение часа.

ПРИМЕР 5

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем гомогенизации при высоком давлении.

49,0 мг доцетаксела растворяли в 0,56 мл хлороформа. Раствор добавляли в 9,6 мл HSA (5,0%, масса/объем). Смесь предварительно гомогенизировали с формированием сырой эмульсии и затем переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 18000-20000 пси. Полученную в результате систему переносили в роторный испаритель и хлороформ и трет-бутиловый спирт удаляли при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял 160-175 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Осаждение наблюдали в течение <1 дня. При микроскопическом исследовании наблюдали кристаллические осадки.

ПРИМЕР 6

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем гомогенизации при высоком давлении с использованием лецитина.

55,3 мг доцетаксела и 48,8 мг яичного лецитина растворяли в 0,56 мл смеси хлороформа и трет-бутилового спирта. Раствор добавляли в 9,6 мл HSA (5,0%, масса/объем). Смесь предварительно гомогенизировали с формированием сырой эмульсии и переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 18000-20000 пси. Полученную в результате систему переносили в роторный испаритель и хлороформ и трет-бутиловый спирт удаляли при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял 190-220 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Осаждение наблюдали в течение <24 часов.

ПРИМЕР 7

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем гомогенизации при высоком давлении с тестированием полимолочно-гликолевой кислоты (PLGA).

56,3 мг доцетаксела и 40,8 мг PLGA (50:50) растворяли в 0,56 мл хлороформа. Раствор добавляли в 9,6 мл HSA (5,0%, масса/объем). Смесь предварительно гомогенизировали с формированием сырой эмульсии и переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 18000-20000 пси. Полученную в результате систему переносили в роторный испаритель и хлороформ и трет-бутиловый спирт удаляли при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял 575 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Осаждение наблюдали в течение <24 часов.

ПРИМЕР 8

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем гомогенизации при высоком давлении с тестированием бензойной кислоты.

50,3 мг доцетаксела и 3,0 мг бензойной кислоты растворяли в 0,56 мл смеси хлороформа и трет-бутилового спирта. Раствор добавляли в 10,0 мл HSA (5,0%, масса/объем). Смесь предварительно гомогенизировали с формированием сырой эмульсии и переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 18000-20000 пси. Полученную в результате эмульсию переносили в роторный испаритель и хлороформ и трет-бутиловый спирт удаляли при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял 160 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Композиция выпадала в осадок в течение <24 часов.

ПРИМЕР 9

Этот пример демонстрирует нестабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем гомогенизации при высоком давлении с тестированием холестерина.

51,0 мг доцетаксела и 16,5 мг холестерина растворяли в 0,56 мл смеси хлороформа и трет-бутилового спирта. Раствор добавляли в 10,0 мл HSA (5,0%, масса/объем). Смесь предварительно гомогенизировали с формированием сырой эмульсии и переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 18000-20000 пси. Полученную в результате эмульсию переносили в роторный испаритель и хлороформ и трет-бутиловый спирт удаляли при пониженном давлении. Осаждение происходило в течение <24 часов.

ПРИМЕР 10

Этот пример демонстрирует стабильность наночастиц доцетаксела, полученных путем гомогенизации при высоком давлении с тестированием цитрата натрия.

50,0 мг доцетаксела растворяли в 0,56 мл смеси хлороформа и трет-бутилового спирта (10,2:1 (объем/объем)). Раствор добавляли в 9,6 мл HSA (5,0%, масса/объем), содержащий 100 мМ (2,94% масса/объем) тринатриевого цитрата. Смесь предварительно гомогенизировали с формированием сырой эмульсии и переносили в гомогенизатор высокого давления (Avestin). Эмульгирование выполняли при 18000-20000 пси. Полученную в результате эмульсию переносили в роторный испаритель и хлороформ и трет-бутиловый спирт удаляли при пониженном давлении. Диаметр полученных в результате частиц доцетаксела составлял 150-225 нм (Z-среднее, Malvern Zetasizer). Композиция была удивительно стабильна >24 часов без видимого осадка.

ПРИМЕР 11

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом (3,9%, 133 мМ) и хлоридом натрия (1,75%, 300 мМ). Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе), цитрата натрия (3,9% по массе) и хлорида натрия (1,75% по массе) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (7% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали на роторно-статорном смесителе. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Хлороформ и этанол в эмульсии затем удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией (1,2 мкм, 0,8 мкм и 0,45 мкм) и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия является гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер 165,6 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили при 4°C и 25°C. Удивительно, что суспензия была стабильной вплоть до 3 дней при 4°C и >1 дня при 25°C. Суспензия не проявляла какого-либо расслоения или осаждения и не изменяла цвет или консистенцию. Кроме того, лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. После повторного восстановления частицы имели средний размер 164,6 нм. Повторно восстановленная суспензия хранилась при 4°C и она к удивлению оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 12

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом (2,9%, 100 мМ) и хлоридом натрия (1,75%, 300 мМ).

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе), цитрата натрия (2,9% по массе) и хлорида натрия (1,75% по массе) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (7% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Хлороформ и этанол в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией (1,2 мкм, 0,8 мкм и 0,45 мкм) и лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер 157,1 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили при 4°C и 25°C. Удивительно, что суспензия была стабильной вплоть до 3 дней при 4°C и >1 дня при 25°C. Суспензия не проявляла какого-либо образования осадка или расслоения и не изменяла цвет или консистенцию.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. После повторного восстановления частицы имели средний размер частицы 150,9 нм. Повторно восстановленная суспензия хранилась при 4°C и она оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 13

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом (3,9%, 133 мМ).

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (3,9% по массе) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Хлороформ и этанол в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией (1,2 мкм, 0,8 мкм, 0,45 мкм и 0,22 мкм) и лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер 131 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Удивительно, что суспензия наночастиц оставалась стабильной в течение >1 дня.

ПРИМЕР 14

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом (11,7%, 400 мМ).

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (11,7% по массе) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Хлороформ и этанол в эмульсии затем удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией (1,2 мкм, 0,8 мкм, 0,45 мкм и 0,22 мкм) и лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер 143,5 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили при 4°C и 25°C. Удивительно, что суспензия была стабильной вплоть до 3 дней при 4°C и >1 дня при 25°C. Суспензия не проявляла какого-либо образования осадка или расслоения и не изменяла цвет или консистенцию.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. После повторного восстановления частицы имели средний размер частиц 151,8 нм. Удивительно, что повторно восстановленная суспензия хранилась при 4°C и оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 15

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом (7,7%, 200 мМ).

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (7,7% по массе) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Хлороформ и этанол в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией (1,2 мкм, 0,8 мкм, 0,45 мкм и 0,22 мкм) и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер 226,4 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили при 4°C и 25°C. Удивительно, что суспензия была стабильной вплоть до 3 дней при 4°C и >1 дня при 25°C. Суспензия не проявляла какого-либо образования осадка или расслоения и не изменяла цвет или консистенцию.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. После повторного восстановления частицы имели средний размер частиц 211,4 нм. Повторно восстановленная суспензия хранилась при 4°C и оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 16

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе), цитрата натрия (5,88%, 200 мМ) и NaCl (1,75%, 300 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили и к удивлению суспензия была стабильной без осадков или отстоя >1 дня.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. Повторно восстановленная суспензия хранилась и к удивлению оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 17

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (2,94%, 100 мМ) и NaCl (2,9%, 500 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили и к удивлению суспензия была стабильной без осадков или отстоя >1 дня.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. Повторно восстановленная суспензия хранилась и оставалась удивительно стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 18

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по весу) и цитрата натрия (2,94%, 100 мМ) и NaCl (3,5%, 600 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили и к удивлению суспензия была стабильной без осадков или отстоя >1 дня.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. Повторно восстановленная суспензия хранилась и к удивлению оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 19

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (1,47%, 50 мМ) и NaCl (2,9%, 500 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 20 мл. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили и к удивлению суспензия была стабильной без осадков или отстоя >1 дня.

Лиофилизированный продукт представлял собой твердый осадок на фильтре. Повторное восстановление лиофилизированного осадка на фильтре занимало <5 мин. Повторно восстановленная суспензия хранилась и к удивлению оставалась стабильной >1 дня.

ПРИМЕР 20

Этот пример демонстрирует эффект препарата наночастиц безводного против гидратированного доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (200 мМ) и NaCl (300 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу для трех различных композиций получали путем растворения безводного доцетаксела, тригидрата доцетаксела или полугидрата доцетаксела (частично гидратированный) (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Три суспензии хранили и к удивлению суспензия, содержащая безводный доцетаксел, была более стабильной без осадков или отстоя в течение >1 дня. Оба препарата гидратированного доцетаксела показали осадок или отстой в течение <1 дня. Такое же явление наблюдали для лиофилизированной суспензии при повторном восстановлении. Так определили, что безводная форма доцетаксела была наиболее приемлемой для препарата наночастиц доцетаксела.

ПРИМЕР 20A

Этот пример представляет сравнение безводного доцетаксела, тригидрата доцетаксела и полугидрата доцетаксела посредством дифференциальной сканирующей калориметрии (DSC).

Три различных типа доцетаксела подвергали DSC с использованием стандартной методики. Все показали эндотерм плавления при примерно 162-166°C. Однако только 2 гидратированных материала показали эндотерм водной дегидратации между примерно 74-80°C.

ПРИМЕР 20B

Этот пример представляет сравнение безводного доцетаксела тригидрата доцетаксела и полугидрата доцетаксела посредством рентгеновской порошковой дифрактометрии (XDR).

Три различных типа доцетаксела подвергали XDR с использованием стандартной методики. Все три материала показали разнообразие острых пиков, указывающих на кристалличность. Однако безводный материал показал отличающийся спектр по сравнению с двумя гидратированными материалами. В особенности имелся пик, встречающийся в 2-тэта 7-8 для безводного образца, который отсутствовал в гидратированном материале. Это указывает на различную кристаллическую структуру безводного доцетаксела по сравнению с гидратированными доцетакселами.

ПРИМЕР 21

Этот пример демонстрирует, что степень гидратации влияет на растворимость доцетаксела и предоставляет сравнение растворимости безводного доцетаксела, тригидрата доцетаксела и полугидрата доцетаксела.

Чтобы сравнить, имели ли различные типы материала доцетаксела различные профили растворимости в результате своих различных структур, скорости их растворимости сравнивали в растворителе ацетонитриле. Ацетонитрил добавляли к фиксированному количеству доцетаксела из различных источников с получением концентрации 5 мг/мл (безводная основа). Отмечали скорость, при которой происходило растворение различных доцетакселей. Отметили, что безводные доцетаксели (из двух различных источников) растворялись полностью менее чем за 1 минуту. С другой стороны, гидратированные материалы (тригидрат и частичный гидрат из двух различных источников) нелегко растворялись и дополнительный растворитель добавляли до конечной концентрации 2,5 мг/мл. При этих других условиях растворения время растворения было между 5 и 10 минутами для гидратированных материалов. Аналогичное наблюдение сделали при использовании растворителя хлороформа. Таким образом, с удивлением обнаружили, что степень гидратации или безводное состояние могут существенно влиять на растворимость доцетаксела.

ПРИМЕР 22

Этот пример демонстрирует, что степень гидратации доцетаксела влияет на стабильность и представляет сравнение композиций тригидрата доцетаксела, полугидрата и безводного доцетаксела в Tween 80.

Хорошо известно, что доцетаксел получают с Tween 80 как солюбилизатором или эмульгатором для коммерческого продукта Taxotere. Различные доцетаксели растворяли в Tween 80 в концентрации 40 мг/мл (на безводной основе). Отмечали стабильность 2 мл этих растворов с течением времени. С удивлением обнаружили, что через несколько дней отстой или осадок наблюдали для гидратированного доцетаксела, но не наблюдали осаждения безводного доцетаксела. Таким образом, безводный доцетаксел является предпочтительным в композиции Tween. Кроме того, может быть полезным использование Tween 80 или эквивалентного поверхностно-активного вещества, которое является безводным или имеет очень низкое содержание воды, так как безводная форма доцетаксела может абсорбировать воду с формированием гидратированной формы, которая могла бы приводить к осаждению.

ПРИМЕР 23

Этот пример демонстрирует стабильность препарата наночастиц доцетаксела с безводным доцетакселом без добавленных стабилизаторов.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) в воду для инъекции. Органическую фазу получали путем растворения безводного доцетаксела (5% по массе) в смеси растворителей (6% по объему), содержащей хлороформ и этанол, и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Сырую эмульсию гомогенизировали при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Образец также исследовали с помощью микроскопа и большинство частиц было <0,5 мкм. Суспензию хранили и к удивлению суспензия была стабильной без осадков или отстоя в течение приблизительно 1 дня. Таким образом, в отсутствие стабилизаторов Nab-доцетаксел, полученный с безводным доцетакселом, является более стабильным, чем когда получен с гидратированной формой доцетаксела, для которой стабильность составляет значительно менее чем 1 день, обычно только несколько часов.

ПРИМЕР 24

Этот пример демонстрирует получение препарата наночастиц безводного доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (8,5% по массе) и цитрата натрия (200 мМ) и NaCl (300 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения безводного доцетаксела (133 мг/мл) в смеси растворителей, содержащей хлороформ и этанол (1:1), и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу (6% по объему) добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 200 мл. Сырую эмульсию подвергали гомогенизации при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер <200 нм. Суспензию хранили и к удивлению не обнаружили осадков или отстоя в течение >1 дня. Такое же явление наблюдали для лиофилизированной суспензии при повторном восстановлении.

ПРИМЕР 25

Этот пример демонстрирует получение препарата наночастиц безводного доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (200 мМ) и NaCl (300 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения безводного доцетаксела (160 мг/мл) в смеси растворителей, содержащей хлороформ и этанол (1:1), и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу (8% по объему) добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 200 мл. Сырую эмульсию подвергали гомогенизации при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер менее чем 200 нм. Суспензию хранили и к удивлению не обнаружили осаждения или образования осадка в течение более чем одного дня. Такое же явление наблюдали для лиофилизированной суспензии при повторном восстановлении.

ПРИМЕР 26

Этот пример демонстрирует получение препарата наночастиц безводного доцетаксела с цитратом/NaCl.

Водную фазу получали путем добавления HSA (5% по массе) и цитрата натрия (200 мМ) и NaCl (300 мМ) в воду для инъекции и перемешивали до растворения. Органическую фазу получали путем растворения безводного доцетаксела (160 мг/мл) в смеси растворителей, содержащей хлороформ и этанол (1:1), и перемешивали до растворения. Медленно органическую фазу (8% по объему) добавляли в водную фазу и смешивали с использованием роторно-статорного смесителя. Объем серии составлял 200 мл. Сырую эмульсию подвергали гомогенизации при высоком давлении в 20000 пси. Растворители в эмульсии удаляли с использованием роторного испарителя при пониженном давлении. Дополнительно альбумин добавляли к упаренной суспензии с увеличением отношения альбумин:лекарственное средство до 8:1 по массе. Суспензию фильтровали серийной фильтрацией и затем лиофилизировали (FTS Tray Freeze Dryer).

Жидкая суспензия была гомогенной и кремовой. Анализ размера частиц выполняли с использованием Malvern Zetasizer. Частицы имели средний размер менее чем 200 нм. Суспензию хранили и к удивлению не обнаружили осадков или отстоя в течение более чем одного дня. Такое же явление наблюдали для лиофилизированной суспензии при повторном восстановлении.

ПРИМЕР 27

Этот пример демонстрирует влияние pH на стабильность суспензии наночастиц, а также на химическую деградацию доцетаксела.

Композиции наночастиц доцетаксела получали, как описано в вышеупомянутых примерах. Влияние pH на эти композиции проверяли при pH между pH 4 и pH 9. Обнаружили, что увеличение pH свыше pH 6 увеличивает физическую стабильность, измеренную в терминах размера наночастицы и образования осадка композиции, тогда как в то же самое время увеличивается уровень деградации доцетаксела в 7-эпидоцетаксел при комнатной температуре. Оптимальный диапазон pH, при котором допустимы физическая стабильность и химическая стабильность, таким образом, находился между 6-8,5. Более предпочтительный диапазон pH составлял 6,5-8 и обнаружено, что наиболее предпочтительный диапазон pH составлял 7,25-7,75.

ПРИМЕР 28

Этот пример сравнивает стабильность Nab-доцетаксела, полученного с гидратированными формами доцетаксела или с безводным доцетакселом в присутствии или в отсутствие приемлемых стабилизаторов.

Стабильность этих препаратов исследовали визуально перед лиофилизацией и также при повторном восстановлении лиофилизированных препаратов. Кроме того, стабильность лиофилизированных препаратов (содержащих стабилизаторы) при повторном восстановлении оценивали в различных концентрациях доцетаксела в повторно восстановленной суспензии. Результаты изложены в Таблицах 1-3 ниже.

Таблица 1 Оценка стабильности суспензии наночастиц Nab-доцетаксела перед лиофилизацией
Состояние гидратации доцетаксела	Наблюдения стабильности Nab-доцетаксела без стабилизаторов	Наблюдения стабильности Nab-доцетаксела со стабилизатором (цитрат 200мМ/NaCl 300 мМ)
Полугидрат (Объем I)	Промежуточное образования осадка (<15 мин) суспензии наночастиц, сформированной однажды	Данные отсутствуют
Тригидрат (Объем I)	Выпадение в осадок суспензии наночастиц приблизительно 1 час	Выпадение в осадок суспензии наночастиц около 1 дня при 4°C
Безводный (Объем I)	Выпадение в осадок фильтрата наночастиц около 1 дня при 4°C	Отсутствие образования осадка фильтрата наночастиц в течение 2 дней при 4°C
Безводный (Объем II)	Выпадение в осадок фильтрата наночастиц около 1 дня при 4°C	Отсутствие образования осадка фильтрата наночастиц в течение 2 дней при 4°C

Как показано в Таблице 1, стабильность Nab-доцетаксела, полученного с использованием безводного доцетаксела, была значительно лучше чем Nab-доцетаксела, полученного с использованием гидратированных форм доцетаксела со стабилизаторами или без в композиции.

Добавление стабилизаторов (200 мМ цитрата/300 мМ NaCl) значительно улучшает стабильность препаратов Nab-доцетаксела, не содержащих стабилизатор.

Добавление стабилизаторов улучшает стабильность препаратов Nab-доцетаксела, полученных из тригидрата доцетаксела.

Таблица 2 Восстановленная стабильность лиофилизированного порошка, Nab-доцетаксела, содержащего стабилизатор (цитрат 200 мМ/ NaCl 300 мМ), повторно восстановленного в 5 мг/мл доцетаксела в воде для инъекции
Тип доцетаксела: тригидрат/безводный	15 мин	1 ч	2 ч	4 ч	6 ч	24 ч
Тригидрат (25°C)	1	2	2	3	4	4
Безводный (25°C)	1	1	1	1	1	1
Тригидрат (40°C)	1	2	4	4	4	4
Безводный (40°C)	1	1	1	1	1	1
Код: 1 - отсутствие образования осадка 2 - слабое образование осадка 3 - большее образование осадка 4 - обильное образование осадка 5 - полное выпадение в осадок

Таблица 3 Восстановленная стабильность лиофилизированного порошка Nab-доцетаксела, содержащего стабилизатор (цитрат 200 мМ/ NaCl 300 мМ), повторно восстановленного в 1 мг/мл доцетаксела в воде для инъекции
Тригидрат/Безводный	15 мин	1 ч	2 ч	4 ч	6 ч	24 ч
Тригидрат (4°C)	2	3	5	5	5	5
Безводный (4°C)	1	3	5	5	5	5
Тригидрат (25°C)	2	3	5	5	5	5
Безводный (25°C)	1	3	5	5	5	5
Тригидрат (40°C)	3	3	5	5	5	5
Безводный (40°C)	2	3	5	5	5	5
Код: 1 - отсутствие образования осадка 2 - слабое образование осадка 3 - большее образование осадка 4 - обильное образование осадка 5 - полное выпадение в осадок

Как показано в Таблицах 2 и 3, стабильность повторно восстановленного Nab-доцетаксела, содержащего стабилизаторы, значительно улучшается при более высокой концентрации 5 мг/мл доцетаксела по сравнению с более низкой концентрацией примерно 1 мг/мл доцетаксела. Стабильность повторно восстановленной композиции Nab-доцетаксела, содержащего стабилизаторы, полученного с безводным доцетакселом, значительно лучше, чем Nab-доцетаксела, полученного с тригидратом доцетаксела.

ПРИМЕР 29

Этот пример демонстрирует профили токсичности наночастичной альбуминовой композиции доцетаксела (Nab-доцетаксел) по сравнению с Taxotere.

Предельно допустимую дозу (MTD) для Nab-доцетаксела и Taxotere^® (Tween 80-доцетаксел) определяли во время исследования повышения дозы у мышей nude (бестимусная мышь с мутацией по гену nude). Мышей nude, размер группы 10 на группу, обрабатывали с увеличением дозы Taxotere (0 мг/кг, 7 мг/кг, 15 мг/кг, 22 мг/кг, 33 мг/кг и 50 мг/кг) с использованием схемы q4dx3. Мышей nude, размер группы 6 на группу, обрабатывали с увеличением дозы Nab -доцетаксела (0 мг/кг, 15 мг/кг, 22 мг/кг, 33 мг/кг, 50 мг/кг и 75 мг/кг) с использованием схемы q4dx3. Животных взвешивали каждый второй день. Максимальную потерю массы тела наносили против дозы и аппроксимировали с использованием уравнения Хилла. MTD, определенную как потеря массы, равная 20%, рассчитывали с использованием аппроксимирующих данных. MTD была в 2,3 раза выше для Nab -доцетаксела по сравнению с Taxotere (Tween 80-доцетаксел). MTD составляла 47,2 мг/кг и 20,6 мг/кг для Nab-доцетаксела и Taxotere соответственно.

ПРИМЕР 30

Этот пример демонстрирует противоопухолевую эффективность наночастицы доцетаксела по изобретению (Nab-доцетаксел) со стабилизатором по сравнению с Taxotere.

Эффективность Nab-доцетаксела (полученного с 200 мМ цитрата и 300 мМ NaCl) сравнивали с Taxotere на опухолевой модели мышей nude c ксенотрансплантатом, полученным из клеток линии HCT-116 опухоли толстой кишки человека. Для исследования использовали 10 мышей на группу. Taxotere применяли в дозе 15 мг/кг и Nab-доцетаксел применяли в дозе 22 мг/кг, оба по схеме q4dx3. Nab-доцетаксел (22 мг/кг) был более эффективным в опухолевой супрессии чем Taxotere (15 мг/кг, MTD) с p <0,0001. Кроме того, Nab-доцетаксел показал больший терапевтический индекс, чем Taxotere, так как максимальная потеря массы в группе Taxotere составляла 20%, тогда как таковая для Nab-доцетаксела составляла примерно 17%, несмотря на 50% максимальную дозу.

ПРИМЕР 31

Этот пример демонстрирует исследование вливания Nab-доцетаксела (200 мМ цитрата/300 мМ NaCl).

Исследование на крысах проводили с 5 мин вливанием Nab-доцетаксела с увеличением скоростей вливания композиции Nab-доцетаксела, содержащего приблизительно 200 мМ цитрата/300 мМ NaCl. 5 мин вливание у крыс может считаться эквивалентом 30 мин вливания у людей.

Максимально безопасная скорость вливания составляла приблизительно 0,5 мл/мин. Она эквивалентна 0,23 ммоль/кг/мин или 68 мг/кг/мин доцетаксела в течение 5 мин вливания у крыс. В переводе на человеческую дозу она эквивалентна приблизительно 170 мг доцетаксела/м² при 30 мин вливания.

ПРИМЕР 32

Этот пример демонстрирует биосовместимость крови с 5 мг/мл Nab-доцетаксела (200 мМ цитрата/300 мМ NaCl).

In vitro исследование гемолиза крови крыс проводили с использованием композиции плацебо (все компоненты за исключением доцетаксела) и композиции Nab -доцетаксела. Плацебо не вызывал гемолиза даже при наивысшем соотношении кровь крысы:плацебо 1:1. Композиция Nab-доцетаксела мешала снятию показаний абсорбции благодаря характеристическому светорассеянию посредством наночастиц, но когда выполняли соответствующие определения фона/контролей, отсутствие гемолиза регистрировали при наивысшем соотношении кровь крысы:Nab-доцетаксел 1:1. Это демонстрирует, что Nab-доцетаксел со стабилизатором, как показано, совместим с кровью крысы.

ПРИМЕР 33

Этот пример представляет предварительное исследование многократного повышения доз у крыс. Все композиции Nab-доцетаксела, описанные в данном описании, содержат 200 мМ цитрата и 300 мМ NaCl.

Чтобы сравнить безопасность композиции Nab-доцетаксела с композицией Taxotere, крысам давали дозы Tween 80 доцетаксела (такая же композиция, как и Taxotere) или Nab-доцетаксела 5,0; 10,0; 15,0; 30,0 и 50 мг/кг с использованием 10 мин вливания через постоянные катетеры в яремную вену в дни 0, 4 и 8 для всех трех курсов обработки. Физиологический раствор (1 мл/кг/мин) использовали как контроль.

Каждое животное наблюдали и ежедневно взвешивали в течение дней 0-25. Массу тела регистрировали ежедневно у каждого обработанного животного. Симптомы клинического дистесса регистрировали ежедневно. Кровь собирали в дни 13, 16 и день 25 в ЭДТА-обработанные пробирки и подвергали дифференциальному анализу. Аутопсию проводили в день 25.

Результаты исследования показаны в Таблице 4. Как показано в таблице, животные во всех дозовых группах переносили первую обработку с отсутствием острой или ассоциированный с вливанием токсичности даже в максимальной дозе 50 мг/кг. Однако только при введении наиболее низкого уровня дозы 5 мг/кг и контрольного физиологического раствора животные выживали вплоть до конца эксперимента (все три обработки). Все животные, получавшие наивысшие дозы, погибали между второй и третьей дозами или после третьей дозы.

Таблица 4 Потеря массы и смертность в исследовании повышения доз
Группы	Максимальная потеря массы, %	Наблюдения смертности
Tween 80-доцетаксел
50 мг/кг	N/A	3/3 погибли между 2-й и 3-й дозой
30 мг/кг	N/A	3/3 погибли между 2-й и 3-й дозой
15 мг/кг	N/A	3/3 погибли между 2-й и 3-й дозой
10 мг/кг	N/A	2/3 погибли между 2-й и 3-й дозой; 1/3 после 3-й дозы
5 мг/кг	24%	0/3 погибли
Nab-доцетаксел
50 мг/кг	N/A	3/3 погибли между 2-й и 3-й дозой
30 мг/кг	N/A	3/3 погибли между 2-й и 3-й дозой
15 мг/кг	N/A	3/3 погибли между 2-й и 3-й дозой
10 мг/кг	N/A	2/3 погибли между 2-й и 3-й дозой; 1/3 после 3-й дозы
5 мг/кг	15%	0/3 погибли
Контроль - физиологический раствор	3%	0/3 погибли

Потеря массы обработанных животных показана на Фиг.1. Сравнение нейтропении в дозе 5 мг/кг доцетаксела для Nab-доцетаксела и Tween 80-доцетаксела показано на Фиг.2. Потеря массы для 5 мг/кг Nab-доцетаксела в выжившей группе была значительно меньшей, чем таковая для 5 мг/кг Tween-доцетаксела группы (p=0,02+, ANOVA). Она была параллельной при значительно более тяжелой нейтропении для группы Tween-доцетаксела (5 мг/кг) против группы Nab-доцетаксела (5 мг/кг), p<0,0001, ANOVA, Фиг.2) в день 13. Аутопсия в конце эксперимента (день 25) выживших при 5 мг/кг групп выявила аномалии у 2/3 животных группы Tween-доцетаксела (один случай накопления хилезной жидкости в грудной полости и один случай аномального прикрепления селезенки к брюшной стенке, желудку и поджелудочной железе). Животные, которым вводили Nab-доцетаксел (5 мг/кг) и физиологический раствор, были нормальными.

Это предварительное исследование показало значительное улучшение безопасности Nab-доцетаксела в терминах общей потери массы тела. Нейтропения была значительно выше для Tween-доцетаксела.

ПРИМЕР 34

Этот пример демонстрирует кинетику крови Nab-доцетаксела. Все композиции Nab-доцетаксела, описанные в данном описании, содержат 200 мМ цитрата и 300 мМ NaCl.

Крыс разделили на шесть групп (3 на группу). В день 1 каждое животное взвешивали и вводили внутривенно индивидуальную дозу соответствующего пункта, приведенного ниже:

Группа A: Taxotere, 10 мг/кг

Группа B: Taxotere, 20 мг/кг

Группа C: Taxotere, 30 мг/кг

Группа D: Nab-доцетаксел, 10 мг/кг

Группа E: Nab-доцетаксел, 20 мг/кг

Группа F: Nab-доцетаксел, 30 мг/кг

Тестируемые пункты вводили в течение периода 10 ± 1 минута. Образцы крови (200 мкл) собирали из хвостовой вены каждой крысы в следующие интервалы: перед вливанием (базовая линия); во время вливания (5 минут вливания, t = -5 минут); и при завершении вливания (t = 0). Кровь также собирали в следующие временные точки после завершения вливания: 5, 10 и 20 минут; 40 ± 3 минуты; 2 часа ± 5 минут; 3 часа ± 10 минут; 4 часа ± 10 минут; 8 часов ± 10 минут; 24 ± 1 час; 48 ± 1 час; и 120 ± 2 часа. Образцы крови собирали в пробирки с зеленой крышкой (натрия гепарин) и обрабатывали для сбора плазмы путем центрифугирования при приблизительно 2000 об/мин в течение приблизительно 10 минут. Образцы плазмы хранили замороженными до погружения в сухой лед в ALTA Analytical (el Dorado Hills, CA) для LC/MS анализа уровней доцетаксела.

Результаты экспериментов показаны на Фиг.3 и в Таблице 5. Не выявлено значимых различий между PK профилями Nab -доцетаксела против Taxotere при 10 мг/кг. Однако различия между Nab-доцетакселом и Taxotere были значимыми при 20 мг/кг с Cmax и AUС, 53% и 70% Taxotere соответственно и Vz и Vss составляли 177% и 243% Taxotere соответственно. При 30 мг/кг снова различия были значимыми с Cmax и AUС для Nab-доцетаксела, 46% и 47% Taxotere соответственно, и Vz и Vss составляли 225% и 375% Taxotere соответственно.

Таблица 5 PK параметры Nab-доцетаксела и Taxotere
PK параметры	Nab-доцетаксел	Taxotere	p-значение
ДОЗА: 10 мг/кг
HL (ч) Tmax (ч) Cmax (нг/мл) AUС влив. (ч*/нг/мл) Vz (л/кг) Cl (л/ч/кг) Vss (л/кг)	8,3 + 0,3 0,11 + 0,05 4330 + 358 1588 + 77 76 + 6 6,3 + 0,3 28 + 1	9,0 + 3,2 0,14 + 0,05 4953 + 1014 2069 + 615 63 +14 5,1 + 1,5 26 + 9	ns ns ns ns ns ns ns
ДОЗА: 20 мг/кг
HL (ч) Tmax (ч) Cmax (нг/мл) AUС влив. (ч*/нг/мл) Vz (л/кг) Cl (л/ч/кг) Vss (л/кг)	6,3 + 1,8 0,11 + 0,05 8546 + 1545 3953 + 419 46 + 10 5,1 + 0,5 17 + 4	5,1 + 0,31 0,14 + 0,05 16167 + 2804 5664 + 500 26 +1 3,5 + 0,3 7 + 1	ns ns 0,01 0,01 0,02 0,01 0,01
ДОЗА: 30 мг/кг
HL (ч) Tmax (ч) Cmax (нг/мл) AUС влив. (ч*/нг/мл) Vz (л/кг) Cl (л/ч/кг) Vss (л/кг)	7,3 + 1,0 0,17 + 0,00 15800 + 5408 7049 + 896 45 + 10 4,3 + 0,5 15 + 4	6,9 + 2,9 0,14 + 0,05 34467 + 14221 14881 + 1169 20 +8 2,0 + 0,2 4 + 1	ns ns 0,1 0,0008 0,03 0,002 0,01

Когда AUС наносили против дозы, нелинейность для Taxotere была очевидна, с Nab-доцетакселом AUС является линейным по отношению к дозе (Фиг.3D). Это может быть объяснено мицелла-формирующими свойствами Tween 80, высокой растворимостью доцетаксела в гидрофобной сердцевине мицелл и соответствующей секвестрацией доцетаксела в плазме (6). Кроме того, быстрое распространение в тканях Nab-доцетаксела также может быть объяснено утилизацией опосредованного альбумином/кавеолами трансцитоза посредством эндотелиальных клеток, процесс, ранее описанный для Abraxane (Nab-паклитаксел).

Данные PK приводят к выводу, что Tween 80 в Taxotere проявляет секвестрацию доцетаксела в плазме, аналогичную таковой, которую наблюдали с Cremophor EL в случае Таксола. Это приводит к более высоким Cmax и AUС и сниженным объемам распределения для Taxotere, чем для Nab-доцетаксела. PK Nab-доцетаксела является линейной, тогда как для Tween 80-доцетаксела (Taxotere) является нелинейной по отношению к дозе. Дозировки, описанные в данном описании, то есть 10 мг/кг, 20 мг/кг и 30 мг/кг, являются эквивалентыми человеческим дозировкам примерно 60 мг/м² , примерно 120 мг/м² и примерно 180 мг/м² . Обычно линейный диапазон PK Nab-доцетаксела составляет примерно 10-180 мг/м².

ПРИМЕР 35

Этот пример демонстрирует ингибирование взаимодействия лекарственное средство-альбумин посредством поверхностно-активного вещества, такого как Tween 80. Эксперимент проводили с использованием флуоресцентно-меченого паклитаксела (Flutax) как суррогата паклитаксела/доцетаксела. Показано, что Flutax имеет аналогичное связывание с альбумином как паклитаксел.

HSA иммобилизовывали на 96-луночном пластиковом микропланшете. Иммобилизованный альбумин реагировал в течение 1 часа при постоянной концентрации Flutax и увеличенной концентрации растворителей (Cremophor EL/EtOH, Tween 80 и TPGS). Несвязанные лиганды вымывали буфером. Связанные лиганды количественно определяли с использованием флуорометра. IC50 определяли с использованием уравнения экспоненциального затухания.

Результаты эксперимента показаны на Фиг.4. Как показано на Фиг.4, взаимодействие альбумин-паклитаксел ингибировалось растворителем, обычно используемым в композиции нерастворимого в воде лекарственного средства, таким как Cremophor EL/EtOH, Tween 80 и TPGS (IC50 0,009%, 0,003% и 0,008% соответственно). Полное ингибирование происходило при 0,02% или 0,2 мкл Tween 80. Оно является клинически релевантным Taxotere-обработанным пациентам, показывающим 0,07-0,41 мкл Tween 80 крови в конце вливания лекарственного средства.

Этот эксперимент демонстрирует, что Tween 80 в композиции Taxotere может ингибировать связывание доцетаксела с альбумином и предотвращать его эндотелиальный трансцитоз посредством gp60/кавеолярного механизма. Данные PK в вышеупомянутых исследованиях также поддерживают это наблюдение.

ПРИМЕР 36

Этот пример представляет оценку противоопухолевой активности Nab-доцетаксела против ксенотрансплантата H29 карциномы толстой кишки у атимических мышей nude. Мышей делили на контрольную группу и группу Nab-доцетаксела (N = 4 на группу, каждая с билатеральными опухолями). Все композиции Nab-доцетаксела, описанные в данном описании, содержат 200 мМ цитрата и 300 мМ NaCl.

Вкратце, опухоли H29 имплантировали подкожно атимическим мышам nude с обеспечением роста 100 мм³ и затем обрабатывали контролем (без лекарственного средства) или Nab-доцетакселом (15 мг/кг, q4dx3, в/в болюсно). Измерение размера опухоли и массы тела проводили три раза в неделю и строили график на Фиг.5.

Как показано на Фиг.5, имелось значимое ингибирование опухоли HT29 in vivo, p<0,0001 по сравнению с контролем, ANOVA. В дозе 15 мг/кг Nab-доцетаксела средняя потеря массы между 10-20% наводила на мысль о том, что эта доза может быть близкой к MTD для Nab-доцетаксела. Было сообщено, что MTD для Taxotere составляет 15 мг/кг по этой схеме.

ПРИМЕР 37

Этот пример сравнивает противоопухолевую активность Nab-доцетаксела и Taxotere с использованием ксенотрансплантата HCT116 карциномы толстой кишки у атимических мышей nude c 50% высшей дозой Nab-доцетаксела по сравнению с Taxotere. Мышей делили на контрольную группу, группу Nab -доцетаксела и группу Taxotere (N = 10 мышей на группу). Все композиции Nab-доцетаксела, описанные в данном описании, содержат 200 мМ цитрата и 300 мМ NaCl.

Вкратце, противоопухолевую активность Nab-доцетаксела и Taxotere сравнивали в дозе 22 мг/кг q4x3 и 15 мг/кг q4x3 соответственно в ксенотрансплантате HCT116 карциномы толстой кишки. Результаты экспериментов показаны на Фиг.6.

Как показано на Фиг.6, Nab-доцетаксел и Taxotere показывали ингибирование опухоли по отношению к соответствующему контролю. Как показано ниже, ингибирование опухоли улучшалось с Nab-доцетакселом против Taxotere (p=0,03, ANOVA) и небольшое снижение потери общей массы было меньше, но статистически существенно (p=ns, ANOVA) между двумя группами.

В этом предварительном исследовании противоопухолевая активность Nab-доцетаксела превосходила таковую Taxotere. Мыши переносили на 50% более высокую дозу доцетаксела для Nab-доцетаксела с небольшим снижением потери общей массы тела по сравнению с Taxotere.

ПРИМЕР 38

Этот пример сравнивает токсичность препарата Nab-доцетаксела со стабилизатором (цитрат/NaCl) против Taxotere (Tween-доцетаксел) у крыс, получавших индивидуальную дозу каждого препарата.

Самцам крыс Sprague-Dawley (160-180 г, n=3/группу) вливали Taxotere или Nab-доцетаксел (цитрат/NaCl). Время вливания составляло 10 минут и использовали следующие уровни доз доцетаксела: 25, 50, 75, 100 и 125 мг/кг. Животных взвешивали и мониторировали ежедневно на симптомы токсичности/смертности. Процент смертности (%) в течение 7 дней после обработки показан в Таблице 6.

Таблица 6 Процент смертности у крыс, обработанных Taxotere и Nab-доцетакселом
	Доза (мг/кг)
	125	100	75	50	25
Taxotere	100%	100%	100%	100%	100%
Nab-доцетаксел (+ цитрат)	66%	66%	100%	33%	0%

Как показано в таблице 6, композиция Nab-доцетаксела была значительно менее токсичной, чем Taxotere (Tween-доцетаксел). Этот эффект частично выражен в дозах 25 и 50 мг/кг. Раcсчитанная LD50 составляет 63 мг/кг для Nab-доцетаксела против приблизительно 12,5 мг/кг для Tween-доцетаксела.

ПРИМЕР 39

Этот пример показывает эффективность Nab -доцетаксела в лечении рака предстательной железы на опухолевой модели ксенотрансплантата PC3 рака предстательной железы.

Опухоль PC3 имплантировали подкожно атимическим мышами nude с обеспечением роста 100 мм³ и затем обрабатывали q4 Ч 3 в/в физиологическим раствором или Nab-доцетакселом (10, 15, 20 или 30 мг/кг), или Tween-доцетакселом (10 мг/кг). Оценивали шесть мышей в каждой группе.

Результаты исследования показаны на Фиг.7. Все шесть мышей, обработанных Tween-доцетакселом, погибли во время исследования. С другой стороны, Nab-доцетаксел хорошо переносился на всех уровнях доз. Была только одна гибель при 15 мг/кг и ни одной гибели не наблюдали на более высоких уровнях доз 20 мг/кг и 30 мг/кг. Опухолевую супрессию наблюдали на всех уровнях доз Nab-доцетаксела. В частности, при 30 мг/кг наблюдали шесть из шести полных регрессий.

Хотя вышеизложенное изобретение было описано довольно подробно посредством иллюстрации и примера в целях ясности понимания, для специалистов в данной области очевидно, что определенные незначительные изменения и модификации будут осуществлены практически. Поэтому описание и примеры не должны толковаться как ограничивающие объем изобретения.