Получение соединений, содержащих сахаридные радикалы: ....полинуклеотиды, например нуклеиновые кислоты, олигорибонуклеотиды – C12P 19/34

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения дрожжевого экстракта, содержащего биологически активную высокополимерную РНК. Способ получения дрожжевого экстракта, содержащего биологически активную высокополимерную РНК из сухих пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae, включающий суспендирование дрожжей в водном растворе олеата натрия, кипячение суспензии при периодическом перемешивании, центрифугирование охлажденного до комнатной температуры лизата, доведение объема дрожжевого экстракта до стандарта дистиллированной водой с последующим выделением из него высокополимерной РНК, добавлением его в мазь или разливом в виалы по 2-4 мл с дальнейшим замораживанием и лиофилизацией при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет увеличить выход высокополимерной РНК. 1 пр., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения свободного от белка биологически активного препарата высокополимерной РНК из сухих пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Способ включает суспендирование дрожжей в течение 3 мин в водном растворе олеиновой кислоты, с концентрацией олеиновой кислоты 15 г/л, оттитрованном 2,5 М NaOH, при температуре суспензии не ниже 98°C. Кипятят суспензию в течение 40 мин при 98-100°C при периодическом перемешивании. Через 10, 20 и 30 мин после суспендирования последней порции дрожжей в кипящую суспензию добавляют 2,5 М NaOH. Добавляют по окончании экстракции в суспензию кипяченую воду, перемешивают, отстаивают суспензию при комнатной температуре в течение 22 ч. Разливают слитый с помощью сифона супернатант в виалы с последующим замораживанием и лиофилизацией. Предложенное изобретение позволяет упростить получение препарата высокополимерной РНК из сухих пекарских дрожжей. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу и диагностическому набору для диагностики коклюша и определения авирулентных мутантов возбудителя коклюша. Способ предусматривает осуществление полимеразной цепной реакции в режиме реального времени и регистрацию продуктов амплификации с помощью гибридизации с флюоресцентными специфическими ДНК-зондами. Осуществляют полимеразную цепную реакцию с использованием ПЦР реакционной смеси, которая включает две пары праймеров, подходящих для амплификации фрагментов последовательностей IS481 и IS 1002, пару праймеров для амплификации последовательности, сформированной в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvgAS В.pertussis, два флуоресцентных зонда, специфичных к последовательностям IS481, IS 1002 и последовательностям, сформированным в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvgAS B.pertussis. Определяют количество бактериальных геномов в образце по наличию последовательностей IS481 и IS 1002 в хромосоме бактерий B.pertussis и определяют количество авирулентных мутантов возбудителя по наличию инсерции IS481 или IS 1002 в cctagg сайте оперона bvgAS B.pertussis. Диагностический набор содержит ПЦР-реакционную смесь, включающую две пары праймеров, подходящих для амплификации фрагментов последовательностей IS481 и IS 1002, пару праймеров для амплификации последовательности, сформированной в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvgAS, два флуоресцентных зонда, специфичных к последовательностям IS481, IS 1002 и последовательностям, сформированным в результате инсерции IS481 и IS 1002 в cctagg сайт оперона bvg. Предложенное изобретение позволяет диагностировать коклюш и определять авирулентные мутанты возбудителя коклюша. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биохимии. Дезоксирибонуклеиновую кислоту (ДНК) выделяют из молок лососевых рыб. Размораживают и измельчают используемое сырье. Обрабатывают его водным раствором трипсина в течение 3 ч при 45°С при содержании компонентов (масс.%): молоки лососевых рыб - 40,0, трипсин - 0,02-0,22, вода - остальное. Центрифугируют полученный гидролизат и фильтруют его через бельтинг-ткань. Проводят лиофильное или распылительное высушивание. Выход готовой продукции из молок лососевых рыб составляет 10,0-18,0% от количества исходного сырья при содержании ДНК в целевом продукте не менее 62-65%. Изобретение позволяет увеличить выход получаемой ДНК в 2,2-2,4 раза. 1 табл., 5 пр.

Группа изобретений относится к устройствам и способам управления температурой реакционной смеси, в частности к устройствам циклической термообработки для амплификации нуклеиновых кислот. Устройство управления температурой реакционной смеси, содержащейся внутри реакционного сосуда, содержит: источник инфракрасного излучения для воздействия на реакционный сосуд излучением для нагрева реакционной смеси, датчик температуры для измерения температуры, являющейся показателем температуры реакционной смеси, и контроллер для управления источником излучения в соответствии с температурой реакционной смеси с целью выборочного нагрева реакционной смеси. Способ управления температурой реакционной смеси включает определение температуры реакционной смеси с использованием информации, получаемой от датчика температуры, управление источником излучения, предназначенным для воздействия излучением на реакционный сосуд с последующим нагревом реакционной смеси, причем источником излучения управляет контроллер в соответствии с температурой реакционной смеси, в результате чего осуществляется управление этой температурой. Группа изобретений обеспечивает улучшение регулирования температурой реакционных смесей, позволяет в режиме реального времени осуществлять анализ реакции, происходящей в сосудах и с достаточно высоким КПД. 2 н. и 18 з.п. ф-лы, 12 ил.

Изобретение относится к области генной инженерии и может быть использовано в биотехнологии для получения представляющих практический интерес белков, являющихся продуктами молчащих генов или генов с низким уровнем экспрессии. Предложен способ продуцирования рекомбинантного белка реналазы 2 человека, предусматривающий а) получение полной последовательности кДНК и б) экспрессию полученной последовательности в E.coli, где стадию (а) осуществляют путем ПЦР-амплификации каждого из экзонов с использованием специфических пар праймеров и геномной ДНК в качестве матрицы, и последующего, не предполагающего предварительной очистки, попарного объединения тем же методом сначала соседних экзонов, а затем являющихся продуктами их объединения ампликонов. При этом подбор праймеров, число которых равно удвоенному количеству экзонов, проводят так, чтобы прямые праймеры содержали концевую последовательность предыдущего экзона и начальную последовательность копируемого экзона; обратные праймеры включали только последовательность, комплементарную концу амплифицируемого экзона, а фланкирующие полную кодирующую последовательность прямой и обратный праймеры содержали сайты рестрикции, необходимые для встраивания в плазмидный вектор. 2 табл., 6 ил., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к ДНК-технологиям. Предложены синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления Lactobacillus acidophilus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов. Предложенный способ включает проведение ПЦР. В случае выявления фрагмента ДНК размером 412 н.п. делают заключение о наличии в исследуемом биоматериале Lactobacillus acidophilus. Способ может быть использован в молокоперерабатывающей промышленности для выявления и идентификации штаммов и культур Lactobacillus acidophilus в заквасочных культурах, используемых при производстве кисломолочных продуктов. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу анализа частоты взаимодействия нуклеотидной последовательности-мишени с одной или несколькими представляющими интерес нуклеотидными последовательностями. Способ предусматривает (а) получение образца поперечно сшитой ДНК и (b) расщепление поперечно сшитой ДНК первым ферментом рестрикции. Далее проводят (с) лигирование поперечно сшитых нуклеотидных последовательностей, (d) удаление поперечных сшивок; (е) расщепление нуклеотидных последовательностей вторым ферментом рестрикции (f) лигирование одной или нескольких последовательностей ДНК, имеющих известный состав нуклеотидов, с доступным сайтом(ами) расщепления вторым ферментом рестрикции, который фланкирует одну или несколько представляющих интерес нуклеотидных последовательностей. Проводят (g) амплификацию одной или нескольких представляющих интерес нуклеотидных последовательностей с использованием по меньшей мере двух олигонуклеотидных праймеров, причем каждый праймер гибридизуется с последовательностями ДНК, которые фланкируют представляющие интерес нуклеотидные последовательности. Далее осуществляют (h) гибридизацию амплифицированной последовательности(ей) с чипом; и (i) определения частоты взаимодействия между последовательностями ДНК. 9 н. и 20 з.п. ф-лы, 19 ил., 2 табл., 8 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, молекулярной биологии. Предложены специфичные олигонуклеотидные праймеры для идентификации вариабельного фрагмента ДНК штаммов возбудителя сапа, обладающие активностью в реакции амплификации, имеющие следующую структуру:

5'-CCGTTGTCCTTCGTGTTCAT-3'-BmVAT5-Ch2s

5'-AGCACACATTCGCCGTCCT-3'-BmVAT5-Ch2as

Изобретение может быть использовано в медицине для детекции дифференцирующего фрагмента ДНК ВМАА0107 в составе схемы генотипирования возбудителя сапа Burkholderia mallei как для практического здравоохранения, службы Роспотребнадзора, так и для научных исследований. 3 ил, 3 пр.

Изобретение относится к области биологической химии и может быть использовано для определения соединений, связывающихся с биологической мишенью. Синтезируют соединение, содержащее функциональный компонент и кодирующий олигонуклеотид. Способ синтеза предусматривает присоединение к исходному функциональному компоненту дополнительного структурного фрагмента и ферментативное лигирование исходного олигонуклеотида с дополнительным олигонуклеотидом. Олигонуклеотид является двухцепочечным, связан с функциональным компонентом каждой своей цепью и определяет его структуру. Данный способ синтеза используют в способе получения библиотеки соединений, в которых структура функционального компонента определяется кодирующим олигонуклеотидом. Библиотеку соединений используют в способе поиска соединений, связывающихся с биологической мишенью. Изобретение позволяет расширить спектр химических реакций, используемых для конструирования молекул в присутствии химически немодифицированной олигонуклеотидной метки, с высокой точностью вводить олигонуклеотидные метки в химические структуры и получать библиотеки, содержащие множество копий каждого члена. 8 н. и 110 з.п. ф-лы, 13 ил., 7 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу гомогенной детекции со сниженным разбросом данных по меньшей мере одного продукта одноцепочечной амплификации. Способ включает получение реакционной смеси амплификации, содержащей по меньшей мере одну последовательность-мишень из нуклеиновой кислоты, праймер указанной последовательности, гибридизационный зонд указанной последовательности, флуоресцентный краситель ДНК и реагенты, необходимые для амплификации. Проводят амплификацию указанной последовательности-мишени из нуклеиновой кислоты с помощью указанного процесса несимметричной амплификации нуклеиновых кислот с образованием одноцепочечных и двухцепочечных ампликонов. Затем двухцепочечные ампликоны детектируют посредством флуоресцентного красителя ДНК, а по меньшей мере один указанный одноцепочечный ампликон детектируют посредством меченного флуорофором гибридизационного зонда при температуре ниже температуры отжига праймера последовательности-мишени. После чего нормализуют специфичный для последовательности флуоресцентный сигнал в виде рассчитанного отношения флуоресценции указанного одноцепочечного продукта к флуоресценции указанных двухцепочечных ампликонов. Предложенное изобретение позволяет осуществить гомогенную детекцию со сниженным разбросом данных продукта одноцепочечной амплификации процесса несимметричной амплификации нуклеиновых кислот. 8 з.п. ф-лы, 24 ил., 16 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и биохимии и может быть использовано в молекулярной диагностике, связанной с выявлением РНК-мишеней. Предложен способ повышения специфичности обратной транскрипции, включающий приготовление образца, предположительно содержащего хотя бы один вид подлежащей обратной транскрипции РНК (мишени) и хотя бы один вид РНК, отличной от мишени; обработку его полинуклеотидфосфорилазой Thermus thermophilus (Tth ПНФазой) при температуре 60-75°С и микромолярной концентрации магния, проводимую после отжига исследуемого образца с защитным олигонуклеотидом, располагающимся по 3'-сторону от участка, подлежащего обратной транскрипции, и образующим с мишенью гибрид, стабильный в условиях инкубации; и реакцию обратной транскрипции, которую проводят с полученной на стадии предварительной обработки реакционной смесью без ее дополнительной очистки. 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 11 пр.

Изобретение относится к области биологической химии. Предложен способ синтеза библиотек молекул, содержащих олигонуклеотидную метку. Полученные библиотеки молекул могут быть использованы для идентификации соединений, связывающихся с определенной биологической мишенью. 6 н. и 126 з.п. ф-лы, 13 ил., 6 табл., 10 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к ДНК-технологиям. Предложены синтетические олигонуклеотидные праймеры и способ выявления Streptococcus thermophilus в заквасочных культурах при производстве твердых сыров. Предложенный способ включает проведение ПЦР. В случае выявления фрагмента ДНК размером 655 н.п. делают заключение о наличии в исследуемом биоматериале Streptococcus thermophilus. Способ может быть использован в молокоперерабатывающей промышленности для выявления и идентификации штаммов и культур Streptococcus thermophilus в заквасочных культурах при производстве твердых сыров. 2 н.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу детектирования и типирования папилломавируса человека (HPV) в образце, а также к реакционному сосуду, набору и зонду для детектирования и типирования HPV. Способ включает проведение реакции амплификации нуклеиновых кислот в образце, причем реакция амплификации предназначена для амплификации мишеневой последовательности HPV неспецифическим для типа образом. Получают одноцепочечные олигонуклеотиды из любых продуктов амплификации. Осуществляют гибридизацию одноцепочечных олигонуклеотидов с множеством HPV-типоспецифических зондов, выбранных из группы, содержащей SEQ ID NO:1 - SEQ ID NO:133 и отобранных по типу, как указано в таблице 1, находящихся на твердом носителе, причем носитель расположен в реакционном сосуде, подходящем для этого образца. Детектируют гибридизованные олигонуклеотиды, если HPV присутствует в образце. Предложенное изобретение позволяет осуществлять специфическую идентификацию типов HPV, если HPV присутствует в образце. 4 н. и 59 з.п. ф-лы, 7 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и может быть использовано в диагностических тест-системах различного назначения. Предложен способ детекции нуклеиновых кислот (НК)-мишеней, предусматривающий а) обогащение образца НК последовательностями-мишенями за счет образования ДНК-РНК гибрида между НК-мишенью и комплементарным, по меньшей мере, ее участку зондом, связывания полученных гибридов с твердым носителем и удаления негибридизованных и/или не связавшихся с подложкой НК; б) амплификацию обогащенных НК-мишенями образцов и с) детекцию НК-мишеней в полученном множестве с помощью олигонуклеотида, комплементарного первому участку НК-мишени, и зонда, комплементарного второму участку НК-мишени, где последовательность олигонуклеотида и последовательность зонда образуют с НК-мишенью ДНК-РНК гибрид, который и определяется любым из множества известных методов. Новый способ является высокочувствительным и высокоспецифичным и обеспечивает возможность различать высокогомологичные последовательности НК. 3 н. и 19 з.п. ф-лы, 19 табл.

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ получения высокополимерной дрожжевой РНК из отработанных пивных дрожжей. Сконцентрированные центрифугированием отработанные пивные дрожжи суспендируют в водном растворе олеиновой кислоты, оттитрованной щелочью до рН 7-8. Суспензию выдерживают при 98-102°С в течение 40-60 мин. Отстаивают горячий лизат в течение 20-24 ч при комнатной температуре. Надосадочную жидкость сливают с помощью сифона. Затем к слитой жидкости добавляют NaCl до концентрации 2-3 М. Суспензию выдерживают 20-96 ч при комнатной температуре. Затем ее центрифугируют без охлаждения на низкоскоростной центрифуге. Полученный шрот промывают последовательно 2-3 М раствором NaCl и 92-96%-ным этанолом путем его ресуспендирования при комнатной температуре и низкоскоростного центрифугирования. Изобретение способствует расширению сырьевой базы и упрощению технологии производства высокополимерной РНК.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен препарат высокополимерной РНК из пекарских дрожжей. Высокополимерную РНК выделяют с помощью ДДС-Na. Высаливают РНК хлористым натрием. Затем осуществляют промывки при низкоскоростном центрифугировании при 1000-3000 g в течение 10 мин без охлаждения. Полученный препарат освобожден от примесных ассоциатов РНК с белками и полисахаридами и узконаправленно стимулирует гемопоэз. 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к бактерии, принадлежащей к роду Bacillus, обладающей способностью к продукции пуриновых нуклеозидов, способу получения пуринового нуклеозида и способу получения пуринового нуклеотида. В способе используют бактерию, принадлежащую к роду Bacillus, модифицированную таким образом, что в ней инактивирован ген, кодирующий 3-гексулозо-6-фосфатсинтазу. Способ включает культивирование данной бактерии в питательной среде. После чего осуществляют выделение указанного пуринового нуклеозида из культуральной жидкости. Предложенное изобретение позволяет увеличить продукцию пуриновых нуклеозидов, таких как инозин, ксантозин, гуанозин или аденозин. 3 н. и 6 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу амплификации специфичных фрагментов нуклеиновых кислот. Предложенное изобретение может использоваться при проведении ДНК-диагностики в медицине, ветеринарии, санитарно-эпидемиологических исследованиях, в криминалистике для идентификации преступников. При осуществлении способа амплификации специфичных фрагментов нуклеиновых кислот используют термостабильную ДНК-полимеразу, обладающую цепь-смещающей активностью. Кроме того, при проведении данного способа используют прямой и обратный праймеры, представляющие собой расположенные по типу «голова к хвосту» тандемно повторяющиеся последовательности основного праймера. Предложенное изобретение позволяет проводить амплификацию специфичных фрагментов ДНК или РНК с увеличивающимся с каждым циклом коэффициентом размножения. Благодаря этому быстрее происходит накопление целевых ампликонов, что ведет к сокращению времени реакции и увеличению ее чувствительности. 3 з.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу амплификации специфичных фрагментов нуклеиновых кислот с помощью полимеразной цепной реакции в конвекционной ячейке Бенара-Рэлея. Амплификация целевых продуктов ведется в специальном ДНК термоциклере, оснащенном особым реакционным термоблоком. Данный термоциклер обеспечивает в реакционных сосудах, которыми служат стандартные полипропиленовые пробирки, градиент температуры, ориентированный под углом к направлению действия силы тяжести. Время такой амплификации составляет 1-5 минут. Предложенное изобретение позволяет значительно ускорить с помощью конвекции ПЦР, а также упростить ее проведение с сохранением высокой специфичности. 3 з.п. ф-лы, 2 ил.

Изобретение относится к области диагностической медицины, а именно к молекулярной биологии. Предлагается способ постнатальной ДНК-диагностики муковисцидоза. Анализируют 14 наиболее значимых мутаций 1677delTA, W1282X (R), 2143delT, G542X, R553X, G551D, 2184InsA, N1303K, 394DelTT, R334W, R347P, CFTR del21kb, delF508 в гене муковисцидоза CFTR. Способ включает мультиплексную амплификацию популяций мутаций гена в клиническом образце ДНК «гнездовой» двухэтапной полимеразной цепной реакцией (ПЦР) с использованием подобранного набора праймеров. Изобретение позволяет диагностировать наличие муковисцидоза с высокой точностью за счет одновременного анализа сразу нескольких мутаций. 4 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения плазмидной ДНК из бактериальных клеток. Способ включает щелочной лизис бактериальных клеток и осаждение клеточных стенок центрифугированием. После чего проводят фильтрацию супернатанта и удаление из полученного фильтрата примеси РНК путем обработки фильтрата РНК-азой. Затем осуществляют осаждение плазмидной ДНК изопропиловым спиртом. Далее проводят дробное фракционирование плазмидной ДНК этиловым спиртом, при этом к раствору плазмидной ДНК сначала добавляют этиловый спирт до концентрации 45-53%, затем добавляют этиловый спирт до концентрации 55-58% и в конце добавляют этиловый спирт до концентрации 60-67%. После чего осуществляют удаление остатков липополисахаридов при помощи обращенно-фазового сорбента с гидрофобизованной поверхностью. Предложенное изобретение позволяет повысить чистоту и выход плазмидной ДНК. 2 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к выделению физиологически активных соединений, и может быть использовано в медицине. Сухие дрожжи суспендируют в водном 1-2%-ном растворе олеиновой кислоты, оттитрованной щелочью до рН 7-8, суспензию выдерживают при 99-102°С в течение 40-60 мин, охлажденный до 35-45°С лизат центрифугируют без охлаждения, надосадочную жидкость сливают, затем к слитой жидкости добавляют NaCl до концентрации 2-3 М, суспензию выдерживают 20-24 ч при комнатной температуре, центрифугируют без охлаждения, из полученного супернатанта извлекают низкополимерную РНК, а осадок-шрот промывают 2-мя порциями 2-3 М раствора NaCl и 4-мя порциями 92-97%-ного этанола путем последовательного его ресуспендирования при комнатной температуре и центрифугирования. Из полученного шрота высокополимерную РНК экстрагируют дистиллированной водой и высушивают обычным методом, а этанол регенерируют перегонкой. Из низкополимерной РНК методом гель-фильтрации на Сефарозе-4 В выделяют природные олигорибонуклеотиды. Изобретение позволяет получить высокополимерную РНК со значительно большей молекулярной массой в результате использования сухих пекарских дрожжей без предварительного их замачивания и использования высокой температуры. 4 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности, к олигонуклеотиду с двойной специфичностью, способу его получения и способам, в которых он используется. Олигонуклеотид с двойной специфичностью для синтеза молекулы нуклеиновой кислоты в реакции удлинения по матрице имеет следующую общую формулу: 5'-X _p-Y_q-Z_r-3'. Способ получения олигонуклеотида с двойной специфичностью предусматривает выбор последовательности целевой нуклеиновой кислоты. После чего осуществляют конструирование последовательности олигонуклеотида, содержащего гибридизующуюся последовательность и разделяющий участок, содержащий по меньшей мере три универсальных основания, так что разделяющий участок внедряется в гибридизующуюся последовательность, с получением в этом олигонуклеотиде трех участков. Далее проводят определение положения разделяющего участка в этом олигонуклеотиде. Представленное изобретение позволяет проводить матрично-зависимые реакции с намного более высокой специфичностью. 8 н. и 20 з.п. ф-лы, 10 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к выделению физиологически активных соединений. Предложенный способ получения высокополимерной РНК из дрожжей включает суспендирование дрожжей в водном 1-2%-ном растворе олеиновой кислоты, оттитрованной щелочью до pH 7-8, с последующим продолжительным кипячением суспензии. Далее отстаивают горячий лизат в течение 22 ч при комнатной температуре. После чего осаждают высокополимерную РНК из супернатанта хлористым натрием и промывают полученный шрот, содержащий высокополимерную РНК, последовательно 2 порциями 3 М раствора хлористого натрия и 5 порциями 94% этанола путем его ресуспендирования при комнатной температуре и низкоскоростного центрифугирования. Предложенное изобретение позволяет получить целевой продукт - высокополимерную РНК.

Способ предусматривает суспендирование дрожжей в водном 2-3%-ном растворе додецилсульфата натрия. Суспензию выдерживают при 98-102°С в течение 40-60 мин, отстаивают горячий лизат в течение 20-24 ч при комнатной температуре. К слитой надосадочной жидкости добавляют NaCl до концентрации 2-3 М. Суспензию выдерживают 20-24 ч при комнатной температуре. Центрифугируют на низкоскоростной центрифуге без охлаждения. Полученный шрот промывают последовательно двумя порциями 2-3 М раствора NaCl и двумя порциями 92-96%-ного этанола путем последовательного его ресуспендирования при комнатной температуре и низкоскоростного центрифугирования. Из полученного шрота РНК экстрагируют дистиллированной водой с последующим осветлением раствора путем фильтрования его через стеклянный пористый фильтр. Способ позволяет получить высокополимерную РНК, освобожденную от примесного высокомолекулярного рибопротеогликана. 4 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу очистки нуклеиновых кислот. Предложенный способ выделения и очистки ДНК и РНК с помощью центрифугирования предусматривает сорбцию нуклеиновых кислот на силикатном сорбенте - монодисперсных сферических частицах диоксида кремния размером 100-500 нм - с последующими промыванием от примесей и элюцией. Способ позволяет увеличить эффективность выделения нуклеиновых кислот. 4 ил.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и может быть использовано в медицинской генетике. Описан способ получения полиморфной области гена PAR1, которая может содержать замену Т на С в положении 3090 и/или замену А на С в положении 3329 полинуклеотидной последовательности гена дикого типа (NM_001992), с применением пары специфических праймеров, а также способ определения в названной области, полученной из ДНК-содержащего биологического образца, наличия или отсутствия указанных замен. Предложены полные наборы компонентов, применение которых обеспечивает как амплификацию полиморфной области гена PAR1 по изобретению, так и в случае необходимости, проведение дальнейшего анализа ее на наличие генетических модификаций в положениях 3090 и/или 3329. 6 с. и 1 з.п. ф-лы, 17 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу индикации бактерий рода Lactobacillus. Способ основан на проведении полимеразной цепной реакции ДНК бактерий рода Lactobacillus. Для проведения ПЦР используют оригинальные родовые праймеры, соответствующие консервативным участкам генома лактобактерий и амплифицирующие фрагмент генома, который в дальнейшем может быть использован для видовой идентификации бактерий рода Lactobacillus. Изобретение позволяет повысить специфичность способа индикации бактерий рода Lactobacillus на основе ПЦР фрагмента генетической детерминанты 16 S рРНК. 1 ил.