Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ...плазмин, т.е. фибринолизин – C12N 9/68

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой иммобилизованную на матрице стрептокиназу, активирующую плазминоген в плазмин. Такая стрептокиназа устойчива к расщеплению плазмином по сравнению с соответствующей ей стрептокиназой дикого типа и содержит аминокислотную последовательность, имеющую аспарагин в положениях, соответствующих положениям 85 и 412 в SEQ ID NO:1. Изобретение относится также к иммобилизованной указанной стрептокиназой матрице, способу получения плазмина и набору для получения плазмина. Изобретение позволяет сохранить функциональные характеристики стрептокиназы с одновременным повышением устойчивости к расщеплению плазмином при иммобилизации ее на матрицу. 4 н. 3 з.п. ф-лы, 7 ил, 8 пр., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для выделения плазминогена или плазмина. Смесь, содержащую фибриноген и плазминоген или плазмин, наносят на хроматографическую колонку, содержащую нерастворимую матрицу для аффинной хроматографии, ковалентно сшитую с транексамовой кислотой. Затем проводят элюирование плазминогена или плазмина с матрицы для аффинной хроматографии водным раствором, содержащим достаточное количество лиганда, конкурирующего с плазмином или плазминогеном за связывающие участки указанной матрицы, связанной с транексамовой кислотой. При этом транексамовая кислота ковалентно связана с указанной матрицей через линкер, который находится между матрицей и транексамовой кислотой и длина которого составляет более трех атомов углерода. Изобретение позволяет повысить эффективность выделения плазминогена или плазмина в присутствии фибриногена из смеси. 9 з.п. ф-лы, 13 табл., 1 ил., 6 пр.

Изобретение относится к области медицины. Способ определения фибринолитической активности микроорганизмов у больных с урогенитальными и гнойно-септическими заболеваниями, заключается в определении факторов патогенности микроорганизмов in vitro и причем в качестве основного компонента используют препарат лиофизированной плазмы кроличьей цитратной. Способ отличается доступностью расходных материалов, что позволяет проводить исследования в условиях лабораторий клинической микробиологии лечебно-профилактических учреждениях. 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению аналогов плазминогена человека, и может быть использовано в медицине. Генно-инженерным путем получают в клетках Escherichia coli рекомбинантные полипептиды со свойствами плазминогена человека, содержащие каталитический домен плазминогена, 5-ый крингл-домен плазминогена и видоизмененный фрагмент аминокислотной последовательности, предшествующий 5-му крингл-домену плазминогена. Изобретение позволяет получить полипептиды с высокой фибринолитической активностью плазминогена человека и выходом 50-80% при экспрессии в клетках Escherichia coli. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению аналогов плазминогена человека, и может быть использовано в медицине. Генно-инженерным путем получают в клетках Escherichia coli рекомбинантные полипептиды со свойствами плазминогена человека, содержащие каталитический домен плазминогена, 5-й и 4-й крингл-домены плазминогена и видоизмененный фрагмент аминокислотной последовательности, предшествующий 4-му крингл-домену плазминогена. Изобретение позволяет получить полипептиды с высокой фибринолитической активностью плазминогена человека и выходом 40-60 мг в пересчете на 1 л культуры при экспрессии в клетках Escherichia coli. 4 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретения относятся к области биотехнологии и предназначены для получения рекомбинантных плазминогена и микроплазминогена в системе экспрессии ряски. Способ получения высоких уровней стабильного плазминогена в ряске включает культивирование растения, клетки или клубенька ряски, трансформированного нуклеиновой кислотой, кодирующей плазминоген, и сбор экспрессированного плазминогена. Также предложены аналогичные способы получения микроплазминогена и фрагмента плазминогена. Также предложены стабильно трансформированные растения ряски, клетки растения ряски или клубеньки ряски, которые трансформированы экспрессионными кассетами для экспрессии плазминогена, микроплазминогена или фрагмента плазминогена. Изобретения обеспечивают получение высоких уровней плазминогена, микроплазминогена или фрагмента плазминогена, которые являются стабильными и могут быть активированы с получением полипептида, имеющего протеазную активность. 7 н. и 45 з.п. ф-лы, 8 ил., 2 табл.

Изобретение относится к получению высокоочищенных высокоактивных ферментных препаратов-активаторов плазминогена, которые могут быть использованы в биохимии и медицине. Способ предусматривает растворение ферментного препарата «Морикраза» в трис-хлоридном буфере с рН 7,2-7,5 до концентрации его в растворе не менее 2,5%. Полученный раствор фракционируют с помощью ионообменной хроматографии на сорбенте ДЭАЭ - Тойоперл. Проводят элюцию протеиназы в градиенте концентрации NaCl 0,1-1,5 М. Затем при помощи ультрафильтрации на мембране, пропускающей пептиды с молекулярной массой менее 10 кДа, осуществляют концентрирование и обессоливание полученного раствора активатора плазминогена. После чего осуществляют очистку активатора плазминогена гель-хроматографией на Сефадексе G 50 в 0,1 М аммоний-ацетатном буфере с рН 6,3-6,5, содержащем 1,0-1,2 М хлорида натрия. Изобретение позволяет упросить способ получения и сократить сроки проведения процесса. 3 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано в фармацевтической промышленности для очистки смесей природного происхождения, содержащих плазминоген и фибриноген, от плазминогена. Плазминоген удаляют из смеси, содержащей плазминоген и фибриноген, с помощью нерастворимой матрицы для хроматографии, ковалентно сшитой с транексамовой кислотой через аминогруппу с помощью линкера, длина которого составляет более трех атомов углерода. Для этого указанную смесь наносят на хроматографическую колонку, содержащую указанную нерастворимую матрицу. Затем колонку промывают нейтральным раствором, содержащим соли, и собирают несвязавшийся материал. Применение изобретения позволяет расширить технические возможности очистки смесей природного происхождения, содержащих плазминоген и фибриноген, от плазминогена с сохранением при этом исходного количества фибриногена в смеси. 2 н. и 13 з.п. ф-лы, 1 ил., 13 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения слитых белков - ингибиторов ангиогенеза. Слитый белок представляет собой гомодимер, в котором область Fc иммуноглобулина гамма слита с целевым белком, включающим одну или более молекул с активностью ингибитора ангиогенеза, которая происходит от ангиостатина или эндостатина. Вариант гомодимерного слитого белка включает также второй целевой белок, содержащий одну или более молекул, имеющих активность ингибитора ангиогенеза, выбранных из ангиостатина, эндостатина, фрагмента плазминогена, обладающего активностью ангиостатина, и фрагмента коллагена XVIII, обладающего активностью эндостатина. Молекулы в составе гомодимерного слитого белка связаны с областью Fc иммуноглобулина гамма и между собой непосредственно или с помощью полипептидного мостика. Гомодимерный слитый белок получают путем трансфекции клетки млекопитающего вектором, содержащим молекулу ДНК, кодирующую целевой белок, культивирования клетки млекопитающего для продуцирования слитого белка и выделения слитого белка. Изобретение обеспечивает эффективную продукцию и секрецию ингибиторов ангиогенеза в разнообразных хозяевах – клетках млекопитающих, 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 6 ил.