Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ..действующие на пероксид водорода как акцептор (1.11) – C12N 9/08

Изобретение относится к области биохимии. Используют липосомы в качестве матрицы для активированного фермента - пероксидазы хрена. К 5 мг окисленной перйодатным методом пероксидазы хрена добавляют 1 мл суспензии липосом в 0,01 М растворе карбонатно-бикарбонатного буфера при рН 9,5. Подвергают ультразвуковой обработке в течение 1 мин. Инкубируют 1 ч. Иммобилизуют с иммуноглобулинами в концентрации 5 мг в течение 2 ч при температуре 22±4°С. Стабилизируют 5 мг боргидрида натрия с последующей гель-хроматографической очисткой. Изобретение позволяет получить липосомально-иммунопероксидазный конъюгат для индикации возбудителей инфекционных заболеваний в иммуноферментном анализе и увеличить срок годности препарата до 6 лет. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии и может быть использовано для лабораторного и промышленного производства пероксидазы высокого качества из корней хрена для диагностических целей. Измельченную биомассу корней хрена выдерживают в 0.1 М буферном растворе фосфата натрия рН 7.0, предварительно продутом азотом, в присутствии 5 мкМ раствора гемина и 5 мМ хлористого кальция. Экстракт отделяют декантацией с последующей фильтрацией и концентрированием ультрафильтрацией через ультрафильтры с размером пор менее 30 кДа. Экстракт фермента насыщают сульфатом аммония до 35% от насыщения и наносят на колонку с фенилсефарозой, после интенсивного промывания буфера с сульфатом активные фракции снимают градиентом сульфата аммония (35%-0%) и увеличением рН до 8.0. Фермент очищают гель-фильтрацией на Toyopearl HW55F, подвергают диализу и высушивают лиофилизацией. Использование геминсодержащих буферов на стадии экстракции и гель-фильтрации позволяет получать высокоактивный фермент с высоким выходом за счет 100% насыщения фермента гемином. Это позволяет ускорить процесс производства фермента и существенно улучшить его каталитические характеристики и стабильность. 6 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения пероксидазы хрена включает гомогенизацию корней хрена, экстракцию фермента, концентрирование ультрафильтрацией и осаждение белков сульфатом аммония. Осадок белков диализуют против воды и 0,01-0,03 М раствора TEA-HCl буфера, с последующей очисткой пероксидазы от балластных белков на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой в том же буфере. Затем продолжают очистку в 0,01-0,03 М растворе МОРS-NаОН буфера на колонке с КМ-целлюлозой при значениях pH и pK буферов 7,1-7,4 и 7,5-7,6 соответственно. Очищенный целевой продукт диализуют против воды и 0,01-0,03 М NaCl, а затем лиофилизируют. Способ обеспечивает упрощение получения высокоочищенной пероксидазы хрена и повышение ее выхода. 2 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии, а именно к микробиологическому получению ферментных препаратов - лакказ, и может быть использовано при модификации лигниносодержащих материалов и получении из них промышленно ценных соединений, отбеливании бумажной массы и текстильных материалов, очистке сточных вод и почвы от целого ряда ксенобиотиков, полимеризации фенолов и ряда других ароматических соединений, получении косметических препаратов для отбеливания кожи и окрашивания волос. Способ предусматривает выращивание гриба Steccherinum ochraceum LE (BIN) 1833 D на глюкозопептонной среде. Полученную культуральную жидкость отделяют от мицелия фильтрацией и центрифугируют. Полученный супернатант наносят на колонку с DE52 целлюлозой, уравновешенную 20 мМ натрий-ацетатным буфером (буфер А). Элюируют линейный градиентом 0-0,5 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют. Концентрируют. Обессоливают и наносят на колонку с ионообменным носителем Q-Sepharose, предварительно уравновешенную буфером А. Элюируют линейным градиентом 0-0,5 М NaCl в буфере А. Полученные две фракции с лакказной активностью концентрируют и обессоливают. Полученную первую фракцию с лакказной активностью концентрируют и наносят на колонку Superdex 75. Элюируют 0,1 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют и концентрируют с получением лакказы I. Полученную после хроматографии на колонке с Q-Sepharose вторую фракцию с лакказной активностью концентрируют и наносят на колонку с ионообменным носителем Resource Q. Элюируют линейным градиентом 1М NaCl в буфере А. Полученные две фракции с лакказной активностью концентрируют и обессоливают. Полученную после хроматографии на колонке с Resource Q первую фракцию с лакказной активностью наносят на колонку с Superdex 75. Элюируют 0,1 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют и концентрируют с получением лакказы II. Полученную после хроматографии на колонке с Resource Q вторую фракцию с лакказной активностью наносят на колонку с Superdex 75 и элюируют 0,1 М NaCl в буфере А. Полученные фракции с лакказной активностью объединяют и концентрируют с получением лакказы III. Изобретение позволяет повысить стабильность лакказы. 2 н.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл.

Ген липоксигеназы-1 ячменя, в котором гуанин в донорном сайте сплайсинга 5-го интрона гена липоксигеназы-1 ячменя мутирован в аденин, кодирует белок, лишенный активности липоксигеназы-1. Ячмень, лишенный активности липоксигеназы-1 ячменя, распознают посредством определения, является или не является гуанин в донорном сайте сплайсинга 5-го интрона гена липоксигеназы ячменя мутированным в другое основание. Такой ячмень, его семена, солод, продукты экстракции, расщепления или обработки такого ячменя представляют собой материал для получения солодовых алкогольных напитков. 9 н. и 2 з.п. ф-лы, 16 ил., 20 табл.

Изобретение относится к области производства гетерогенных катализаторов процессов жидкофазного окисления органических соединений - фенолов, поверхностно-активных веществ - перекисью водорода и может быть применено для каталитической очистки сточных вод от фенольных соединений. Описан гетерогенный катализатор окисления органических соединений, включающий полимерный носитель, модифицирующую добавку, активный компонент и сшивающий агент, в качестве которого используют глутаровый альдегид или карбодиимид, в качестве полимерного носителя катализатор содержит ионообменную смолу, в качестве модифицирующей добавки - альгинат натрия или хитозан, а в качестве активного компонента - экстракт корня хрена или редьки, при следующем соотношении компонентов в мас%: активный компонент - 1-2, модифицирующая добавка - 0,5-1,5, сшивающий агент - 3-6, носитель - 90-95. Технический эффект - увеличение активности катализатора, а также снижение потерь катализатора при производстве, хранении и применении. 3 ил.