Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: .....действующие на пептидные связи (3.4) – C12N 15/57

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа мытья посуды. Охарактеризованный способ заключается в обеспечении композиции для мытья посуды и посуды, нуждающейся в очистке, приведении указанной посуды в контакт с указанной композицией для мытья посуды при условиях, эффективно обеспечивающих очистку указанной посуды, где указанная композиция для мытья посуды содержит модифицированный субтилизин, где указанный модифицированный субтилизин, по меньшей мере, на 70% гомологичен последовательности AQSVPWGISRVQAPAAHNRGLTGSGVKVAVLDTGISTHPDLNIRGGASFVPGEPSTQDGNGHGTHVAGTIAALNNSIGVLGVAPNAELYAVKVLGASGSGSVSSIAQGLEWAGNNGMHVANLSLGSPSPSATLEQAVNSATSRGVLVVAASGNSGAGSISYPARYANAMAVGATDQNNNRASFSQYGAGLDIVAPGVNVQSTYPGSTYASLNGTSMATPHVAGAAALVKQKNPSWSNVQIRNHLKNTATSLGSTNLYGSGLVNAEAATR и содержит (i) замену G116V и, по меньшей мере, одну дополнительную мутацию или (ii) замену S126R. Представленное изобретение позволяет удалять белковые загрязнения на посуде с высокой эффективностью, является безопасным для потребителей и окружающей среды. 5 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 ил., 6 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к полипептиду укороченной секретируемой аспартил-протеиназы 2, который способен эффективно вызывать опосредованные антителами и клеточные иммунные реакции на C.albicans и состоящему из аминокислотной последовательности, соответствующей SEQ ID NO:1; или функционально эквивалентному полипептиду, который имеет аминокислотную последовательность, полученную из SEQ ID NO:1 посредством одной или более консервативных замен аминокислот, причем указанный полипептид по меньшей мере на 80% идентичен аминокислотной последовательности SEQ ID NO:1 на протяжении всей длины SEQ ID NO:1. Также раскрыт полинуклеотид, кодирующий указанный полипептид, экспрессионный вектор, содержащий указанный полинуклеотид, клетка-хозяин для продукции указанного полипептида, содержащая указанный вектор. Раскрыты композиции для лечения или профилактики инфекции Candida albicans, содержащие указанный полипептид или полинуклеотид в эффективном количестве, а также способ лечения и профилактики инфекции Candida albicans с использованием указанных композиций. Также раскрыт набор для диагностирования инфекции Candida albicans, содержащий указанный полипептид и/или указанный полинуклеотид и реагент для определения комплексов, которые включают указанный полипептид. Изобретение позволяет эффективно вызывать опосредованные антителами и клеточные иммунные реакции на C.albicans и не имеет недостатков, которые присутствуют у полноразмерной аспартил-протеиназы дикого типа. 8 н. и 10 з.п. ф-лы, 7 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области иммунологии и генной инженерии. Предложена ферментативно неактивная IgA1 протеаза с заменой Ser267Ala для применения в качестве компонента поливалентной вакцины, предназначенной для защиты человека от менингококковой инфекции и других микроорганизмов, патогенность которых обусловлена IgA1 протеазой. Изобретение включает полинуклеотид, кодирующий названную мутантную форму IgA1 протеазы Neisseria meningitidis серогруппы В; содержащую данный полинуклеотид рекомбинантную плазмидную ДНК, штамм Escherichia coli - продуцент мутантной формы IgA1 протеазы по изобретению; способ получения рекомбинантной формы фермента с помощью технологии рекомбинантных ДНК и рекомбинантную инактивированную IgA1 протеазу, проявляющую повышенный в сравнении с ферментом дикого типа уровень иммуногенности. 5 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 ил., 7 пр.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Представлен выделенный полинуклеотид, кодирующий аминопептидазу, содержащий нуклеотидную последовательность, приведенную в описании. Также представлен полинуклеотид, гибридизующийся с указанным полинуклеотидом в условиях высокой жесткости. Описаны экспрессионный вектор, содержащий указанный полинуклеотид, и подходящая клетка-хозяин. Представлен полипептид, соответствующий последовательности, приведенной в описании, и являющийся аминопептидазой. Предложен способ получения обозначенного полипептида, предусматривающий стадии трансформации подходящей клетки-хозяина указанным полинуклеотидом или вектором, культивирования клетки в условиях, подходящих для экспрессии указанного полинуклеотида, и, необязательно, очистку полипептида из указанной клетки или культуральной среды. Кроме того, был описан способ диагностики Aspergillus-инфекции в организме, предусматривающий стадии: а) выделения биологического образца из указанного организма, который, как предполагается, инфицирован Aspergillus, b) выделения нуклеиновой кислоты из указанного образца, с) определения, содержит ли указанная выделенная нуклеиновая кислота полинуклеотиды, гибридизующиеся с полинуклеотидом, выделенным из Aspergillus niger. Изобретение позволяет диагностировать Aspergillus-инфекцию в организме. 7 н. и 6 з.п. ф-лы, 3 табл.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой эукариотическую клетку-хозяина для продуцирования гамма-карбоксилированного белка, содержащую вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, требующий гамма-карбоксилирования, и ассоциированные последовательности контроля экспрессии, и вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую витамин К-эпоксидоредуктазу и ассоциированные последовательности контроля экспрессии. При этом клетка-хозяин дополнительно содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую -глутамилкарбоксилазу и ассоциированные последовательности контроля экспрессии. Данное изобретение относится также к способу получения гамма-карбоксилированного белка и способу получения фармацевтической композиции, пригодной для индукции свертывания крови или стимуляции повышенного или пониженного свертывания крови, на основе полученного гамма-карбоксилированного белка. Изобретение позволяет получать гамма-карбоксилированный белок с высокой степенью эффективности. 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 2 ил., 9 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ получения модифицированного витамин К-зависимого полипептида, включающий модификацию активационного пептида, которая включает, по меньшей мере, часть последовательности аминокислот другого витамин К-зависимого полипептида и где указанная часть представляет собой, по меньшей мере, 3 смежных аминокислоты активационного пептида FVII, или 5 смежных аминокислот активационного пептида FX, или 5 смежных аминокислот активационного пептида FIX с условием, что пептид QSFNDFTR исключен, или 8 смежных аминокислот активационного пептида протромбина, или удлинение на смежные аминокислоты активационного пептида второго витамин К-зависимого полипептида, которое имеет длину, по меньшей мере, равную 15% полной длины последовательности аминокислот активационного пептида второго витамин К-зависимого полипептида, в котором второй витамин К-зависимый полипептид выбран из группы, состоящей из протеина Z, GAS 6 и протеина S, и где второй витамин К-зависимый полипептида имеет увеличенное время полужизни в плазме. Раскрыт модифицированный витамин К-зависимый полипептид, полученный описанным способом, обладающий коагуляционной активностью. Изобретение позволяет создавать модифицированные витамин К-зависимые полипептиды с увеличенным временем полужизни в плазме. 8 н. и 32 з.п ф-лы, 2 ил., 5 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой фермент карбоксипептидазу KПSB. Также изобретение относится к штамму Streptomyces bikiniensis ВКПМ Ас-1783-продуценту карбоксипептидазы KПSB и способу микробиологического синтеза карбоксипептидазы KПSB. Изобретение позволяет расширить арсенал карбоксипептидаз с широкой специфичностью и способных эффективно отщеплять аминокислотные остатки различной природы от С-конца белков и пептидов. 4 н.п. ф-лы, 4 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и представляет собой ген металлопротеиназы 1 с последовательностью нуклеотидов, приведенной на фиг.1. Изобретение позволяет при включении данного гена в состав вектора экспрессии обеспечивать высокий уровень экспрессии металлопротеиназы 1 в клетках. 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой ген металлопротеиназы 8 с последовательностью нуклеотидов, приведенной на чертеже. Изобретение позволяет при включении данного гена в состав вектора экспрессии обеспечивать высокий уровень экспрессии металлопротеиназы 8 в клетках. 3 ил.

Изобретение относится к области белковой и генной инженерии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Предложены новые варианты фактора VII свертывания крови с повышенной протеолитической активностью, которая является результатом замены аминокислотного остатка, занимающего в природной последовательности положение, соответствующее Met 298 фактора VII человека, остатком глутамина. Варианты фактора VII по изобретению могут включать дополнительные замены в некоторых других положениях протеазного домена и представлять многосайтовые мутантные формы, в частности [V158T/M298Q]-FVIIa, [V158D/M298Q]-FVIIa, [V158D/E296V/M298Q]-FVIIa и [V158D/E296V/M298Q/K337A]-FVIIa. Новые варианты фактора VII получены с помощью метода рекомбинантных ДНК, для реализации которого предложены кодирующие нуклеотидные последовательности, векторные конструкции и трансформированные клетки. Изобретение раскрывает возможность использования новых мутантных форм фактора VII для получения лекарственных препаратов с коагулянтной активностью. 7 н. и 13 з.п.ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в фармакологии и медицине. Клонирована и определена последовательность ДНК, кодирующая новый вид сериновой протеазы человека (DPRP-2), родственной дипептидилолигопептидазе IV, гомология между которыми на уровне выведенной аминокислотной последовательности определена как 39%. С помощью технологии рекомбинантных ДНК получена рекомбинантная форма DPRP-2 и исследованы кинетические свойства нового фермента (субстратная специфичность, значения Km, ингибиторы активности и т.п.). Осуществление изобретения обеспечивает новые возможности при поиске и создании новых терапевтических средств для лечения широкого круга заболеваний человека. 2 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и касается новых полинуклеотидов, которые кодируют полипептид с активностью трипептидилпептидазы. Для получения полипептида с активностью трипептидилпептидазы клетку-хозяина трансформировали полинуклеотидом или вектором, содержащим полинуклеотид, и культивировали в условиях, подходящих для экспрессии полинуклеотида. Изобретение позволяет получить новую протеазу из нитчатых грибов. 6 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены белки и полинуклеотиды, которые стимулируют ферментативное расщепление и высвобождение рецепторов TNF. Также предложены способы идентификации дополнительных соединений, которые влияют на выделение рецептора TNF из клеток. В качестве активного ингредиента в фармацевтической композиции продукты данного изобретения увеличивают или уменьшают трансдукцию сигнала TNF, ослабляя тем самым патологию заболевания. 16 с. и 11 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в легкой промышленности. Предложены варианты протеазы, которые получены путем замены в аминокислотной последовательности субтилизина из Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus subtilis. Bacillus licheniformis и Bacillus lentus аминокислотных остатков по положениям 103, 236 и/или 245 и по одному или нескольким другим положениям с последующим отбором тех мутантов, которые обладают более высоким моющим действием. Также раскрыты фрагменты ДНК, кодирующие указанные варианты протеазы и экспрессионный вектор. Использование изобретения позволяет получить очищающие композиции с улучшенными моющими свойствами. 9 н. и 15 з.п. ф-лы, 7 ил., 5 табл.

Изобретение относится к биологии, научно-практической фармакологии, биохимии и касается выделенного фрагмента ДНК с указанной последовательностью нуклеотидов, кодирующего белок, обладающий свойством внутримембранной эндопротеазы (IMPAS), а также способа получения указанного белка. Изобретение обеспечивает возможность разработки препаратов для диагностики болезней, связанных с протеолизом внутриклеточных рецепторов, а также позволяет расширить арсенал средств, полезных при лечении различных неврологических, сердечно-сосудистых и других заболеваний, связанных с нарушенным протеолизом белков. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области энзимологии и белковой инженерии и может быть использовано в различных отраслях народного хозяйства, которые производят продукцию, содержащую добавки фермента с протеолитической активностью. Предложены новые варианты субтилизина, получаемые путем введения замен в аминокислотную последовательность фермента дикого типа, сопровождающихся определенным изменением заряда в соответствующем сайте, а именно увеличением отрицательного (снижением положительного) или положительного (снижением отрицательного) заряда. Варианты субтилизина, образующиеся в результате замещений первого типа, демонстрируют более высокую эффективность очищающего действия в основном в системах с низкой концентрацией детергента. Варианты субтилизина с замещениями второго типа обычно более активны в системах с высокой концентрацией детергента. Среди полученных вариантов субтилизина представлены формы, эффективно действующие как в системах с низкой, так и в системах с высокой концентрацией детергента. Получение новых вариантов субтилизина предусматривает экспрессию мутантной последовательности ДНК в клетках штамма Bacillus. Мутеины субтилизина по изобретению могут применяться в составе очищающих композиций и композиций для обработки тканей, а также в виде добавки к корму животных, и обеспечивают при этом большую эффективность действия, чем нативные формы фермента. 4 с. и 14 з.п. ф-лы, 4 ил., 14 табл.

Изобретение относится к области генной и белковой инженерии и может быть использовано при создании новых моющих средств и очищающих составов. Предложены мутантные формы субтилизина Bacillus, являющиеся результатом определенной комбинации замен в аминокислотной последовательности нативного фермента, от которой они происходят, и отличающиеся от субтилизина-предшественника повышенной эффективностью очищающего действия. Все варианты субтилизина по изобретению характеризуются либо заменой валином остатка в положении, соответствующем положению 232 аминокислотной последовательности субтилизина Bacillus amyloliquifaciens, либо заменой пролином остатка в положении 212 указанной природной формы субтилизина. Для получения предложенных новых форм фермента соответствующие мутантные последовательности ДНК экспрессированы в клетках-хозяевах, предпочтительно в клетках штаммов Bacillus с пониженным уровнем активности протеаз. Приобретаемые вариантами субтилизина в результате модификации свойства обеспечивают возможность их успешного применения в составе любых очищающих композиций, предусматривающих включение протеаз. 5 с. и 1 з.п. ф-лы, 5 ил., 6 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной инженерии, и может быть использовано для модулирования действия лиганда FAS-R или TNF на клетки. Полипептид, способный связываться с MORT-1 и воздействовать на внутриклеточный процесс передачи сигнала, инициируемый связыванием FAS лиганда с его рецептором или связыванием TNF с р55-TNF-R, получают путем культивирования клеток, трансформированных вектором, содержащим ДНК, кодирующую полипептид. Модуляцию действия лиганда FAS-R или TNF на клетки или модуляцию индуцируемого MORT-1 действия осуществляют с помощью полипептида, связывающегося с MORT-1, или нуклеотидной последовательности, кодирующей его. Фармацевтическая композиция для модулирования действия лиганда FAS-R или TNF на клетки содержит полипептид, связывающийся с MORT-1. Изобретение позволяет разрабатывать средства для обработки опухолевых или ВИЧ-инфицированных клеток. 13 н. и 42 з.п. ф-лы, 37 ил., 4 табл.