Микроорганизмы, например простейшие, их композиции, способы размножения, содержания или консервирования микроорганизмов или их композиций, способы приготовления или выделения композиций, содержащих микроорганизмы, питательные среды: ..модифицированные введением чужеродного генетического материала – C12N 1/15

Изобретение относится к области молекулярной биологии, биохимии и генной инженерии. Предложены нуклеиновая кислота, характеризующаяся нуклеотидной последовательностью, кодирующей белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7 и обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты, соответствующий белок, рекомбинантный вектор, клетка для экспрессии белка и способ получения композиции жирной кислоты. Изобретение может быть использовано для получения полиненасыщенных жирных кислот в пищевой промышленности. 8 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 7 ил., 8 пр.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в пищевой промышленности. Из Mortierella alpina получен новый ген, который кодирует фосфатазу фосфатидной кислоты (ЕС 3.1.3.4), определена открытая рамка считывания и выведена аминокислотная последовательность фермента, названного MaPAP1. Описано получение рекомбинантного белка путем трансформации клеток-хозяев, где при использовании в этом качестве дрожжевых клеток или клеток липидпродуцирующих грибков обеспечивается не только увеличение общего содержания жирных кислот (ЖК), но и изменение жирнокислотного состава клетки, выражающееся, в частности, в повышении отношения количества арахидоновой кислоты к общему количеству ЖК. 8 н.п. ф-лы, 7 табл., 2 ил., 8 пр.

Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии и генетической инженерии и может быть использовано в пищевой промышленности. Из нитчатого гриба Mortierella alpina получены новые гены ацилтрансферазы лизофосфатидной кислоты (АТЛК). Определена кодирующая фермент нуклеотидная последовательность, описано конструирование содержащих ее экспрессионных векторов и включающих векторные конструкции по изобретению клеток-хозяев, а также получение рекомбинантных форм АТЛК, кодируемых новыми генами. 4 н.п. ф-лы, 14 табл., 6 ил., 9 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к клетке-хозяину Trichoderma reesei для получения целлюлолитической белковой композиции, целлюлолитической белковой композиции, способам получения и применения композиции. Клетка-хозяин Trichoderma reesei содержит полинуклеотиды, кодирующие гетерологичный полипептид GH61, слитый белок бета-глюкозидазы, целлюлолитические ферменты. Способ получения композиции включает культивирование клетки-хозяина Trichoderma reesei и выделение композиции. Композиция содержит полипептид GH61, слитый белок бета-глюкозидазы и один или более целлюлолитических ферментов. Способ разложения материала, содержащего целлюлозу, характеризуется обработкой материала целлюлолитической белковой композицией. Способ получения продукта ферментации включает осахаривание материала, ферментацию осахаренного материала сбраживающими микроорганизмами и выделение продуктов ферментации. Представленные изобретения могут быть использованы для разложения или преобразования материала, содержащего целлюлозу. 5 н. и 7 з.п. ф-лы, 14 ил., 23 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу продукции требуемого полипептида (варианты), способу получения фармацевтической композиции, клетке СНО для получения требуемого белка, клетке СНО-реципиенту ДНК, кодирующей требуемый полипептид, способу продукции требуемого полипептида. Способ продукции требуемого полипептида включает культивирование клетки СНО, которая является трансформированной ДНК, кодирующей аланинаминотрансферазу, и ДНК, кодирующей требуемый полипептид. В частном случае клетки СНО культивируют в содержащей -кетоглутарат среде. Способ получения фармацевтической композиции включает получение требуемого полипептида указанным выше способом. Смешивают полипептид с фармацевтически приемлемыми носителями или добавками. Готовят препарат. Клетка СНО для получения требуемого белка обладает перенесенной в нее ДНК, кодирующей аланинаминотрансферазу, и перенесенной в нее ДНК, кодирующей требуемый полипептид. Предложенное изобретение позволяет получать требуемый полипептид с высоким выходом. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 22 ил., 3 пр.

Настоящее изобретение относится к области молекулярной биологии и генной инженерии и может быть использовано в процессе синтеза жирных кислот. Из штамма липидпродуцирующего грибка Mortierella alpina получен новый ген, кодирующий фермент глицерин-3-фосфатацилтрансферазы; определена его полная нуклеотидная последовательность, а также ее часть, кодирующая зрелый белок; выведена аминокислотная последовательность нового фермента. Путем трансформации штаммов Mortierella и дрожжевых штаммов кодирующей фермент нуклеотидной последовательностью получены трансформанты с измененным в сравнении с организмом-хозяином долевым соотношением жирных кислот. 4 н.п. ф-лы, 6 табл., 1 ил., 8 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к исследованию рецептору, сопряженному с G-белком, и может быть использовано в медицине. Получен белковый комплекс, обладающий сродством GPCR _1L к лиганду, включающий GPCR _1L и полипептид с последовательностью аминокислот SEQ ID NO:1. Связывание указанного рецептора, сопряженного с G-белком, с полипептидом изменяет сродство к лиганду рецептора. Также предложены методы скрининга агонистов или антагонистов рецептора, сопряженного с G-белком, с использованием трансформанта, в котором экспрессируется указанный измененный рецептор, сопряженный с G-белком. Заявленное изобретение обеспечивает проведение анализа функции многих предполагаемых рецепторов, сопряженных с G-белком, структура которых еще не известна. 8 н. и 4 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа биологического получения н-бутанола и микроорганизма Clostridia acetobutylicum, используемого в таком способе. Представленный способ заключается в культивировании микроорганизма Clostridia acetobutylicum, у которого делетирован кодирующий бутираткиназу ген buk, в соответствующей культуральной среде, содержащей источник углерода, и извлечения н-бутанола из культуральной среды. Используемый в способе микроорганизм может также содержать инактивирующие мутации в эндогенных генах, кодирующих полипептид с лактатдегидрогеназной активностью, полипептид с фосфотрансацетилазной или лактаткиназной активностью и иметь ослабление в гене, кодирующем полипептид с гидрогеназной активностью. Представленное изобретение позволяет получать н-бутанол с высоким выходом из недорогого углеродного субстрата, такого как глюкоза или другие сахара, под действием генетически стабильных культур Clostridia acetobutylicum. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 ил., 7 табл., 8 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к генной инженерии и касается штамма дрожжей Pichia angusta - продуцента рекомбинантного белка L1 вируса папилломы человека (HPV) типа 18. Штамм был получен путем введения в клетки дрожжей последовательности ДНК, кодирующей капсидный белок L1 HPV типа 18 под контролем промотора гена DAK. Представленное изобретение обеспечивает высокий выход рекомбинантного белка L1 HPV типа 18 при более простых способах получения культур высокой плотности и может быть использовано для микробиологического получения рекомбинантного белка L1 HPV типа 18, обладающего иммуногенными свойствами природного белка. 5 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к генной инженерии, и касается штамма дрожжей Pichia angusta - продуцента рекомбинантного белка L1 вируса папилломы человека (HPV) типа 16. Штамм был получен путем введения в клетки дрожжей последовательности ДНК, кодирующей капсидный белок L1 HPV типа 16 под контролем промотора гена DAK. Представленное изобретение обеспечивает высокий выход рекомбинантного белка L1 HPV типа 16 при более простых способах получения культур высокой плотности и может быть использовано для микробиологического получения рекомбинантного белка L1 HPV типа 16, обладающего иммуногенными свойствами природного белка. 5 пр.

Настоящее изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности, к способу получения 1-бутанола с помощью бактерий. Предложена клетка бактерий, в которой повышена активность ферментов -окисления жирных кислот по сравнению с немодифицированным организмом. В частности, в ней повышена активность: ацил-СоА-дегидрогеназы, еноил-СоА-гидратазы, 3-гидроксиацил-СоА дегидрогеназы и 3-кетоацил-СоА-тиолазы. Бутанол получают посредством культивирования этой клетки в питательной среде и выделения произведенного и накопленного 1-бутанола из культуральной жидкости. Предложенные бактерии могут использоваться для крупномасштабной продукции 1-бутанола для промышленного применения. 2 н. и 21 з.п.ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и генной инженерии и касается ферментативного способа получения 1-бутанола с использованием бактериальной клетки. Данная клетка содержит гетерологичные молекулы ДНК, кодирующие ферменты пути биосинтеза 1-бутанола: ацетил-СоА-ацетилтрансферазу, 3-гидроксибутирил-СоА-дегидрогеназу, кротоназу, бутирил-СоА-дегидрогеназу, бутиральдегиддегидрогеназу и, необязательно, бутанолдегидрогеназу. Бутанол получают посредством ферментативного выращивания рекомбинантной бактериальной клетки в среде с глюкозой или сахарозой. Изобретение позволяет получать 1-бутанол в виде единственного продукта безопасным для окружающей среды и экономичным способом. 2 н. и 16 з.п. ф-лы, 1 ил., 15 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной и белковой инженерии, и может быть использовано для получения делеционного варианта рекомбинантного тканевого фактора человека. Данный полипептид содержит внеклеточный и трансмембранный домены тканевого фактора человека. На основе фрагмента ДНК, кодирующего этот полипептид и плазмиды рЕТ28а(+) была получена генетическая конструкция, обеспечивающая биосинтез рекомбинантного тканевого фактора человека. Также предложен штамм Е. coli BL21[DE3]/p6E-tTF, продуцент рекомбинантного тканевого фактора человека. Использование предложенной генетической конструкции или штамма продуцента Е. coli BL21[DE3]/p6E-tTF позволяет увеличить выход рекомбинантного белка и упростить его выделение и очистку. 2 н.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ включает культивирование рекомбинантных плесневых грибков коджи в жидкой среде, сбор рекомбинантного белка из полученного продукта. Среда для культивирования содержит в качестве сырьевого вещества, по меньшей мере, одно, выбранное из группы, состоящей из ячменя и пшеницы, поверхность которого полностью или частично покрыта, по меньшей мере, оболочкой, в концентрации от 1 до 20% (масса/объем) и в качестве питательных веществ, по меньшей мере, одну неорганическую соль. Рекомбинантные плесневые грибки коджи получают тем, что ген, кодирующий целевой белок, лигируют ниже промотора гена, кодирующего фермент, подвергающийся катаболитной репрессии вследствие концентрирования питательных веществ, таких как сахариды и аминокислоты, для получения тем самым продукта лигирования и продукт лигирования вводят в плесневые грибки коджи в качестве организма-хозяина. Изобретение позволяет повысить эффективность получения белка. 3 з.п. ф-лы, 3 табл.

Настоящее изобретение относится к фитазе, полученной из бактерии Buttiauxella sp., и ее модифицированным формам. Данные ферменты обладают улучшенными характеристиками по сравнению с ферментом дикого типа, выбранными из высокой термической стабильности, активности в широком диапазоне рН, высокой специфической активности, широкой субстратной специфичности и протеолитической стабильности. Кроме того, предлагаются нуклеиновые кислоты, кодирующие данные ферменты, вектор, содержащий данные нуклеиновые кислоты, клетка-хозяин, несущая вектор, и способ получения предложенных фитазных ферментов из клеток-хозяев. Настоящее изобретение также относится к пищевому продукту или корму для животных и к способу получения пищевого продукта или корма для животных, который включает в себя добавление фитазного фермента по настоящему изобретению к одному или нескольким ингредиентам приготовляемого продукта или корма. Использование фитазных ферментов по настоящему изобретению в качестве добавок к кормам для животных позволяет улучшить доступность органического фосфора и снизить загрязнение фосфатом окружающей среды. 11 н. и 17 з.п. ф-лы, 3 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой клетку мицелиального гриба, принадлежащего к роду Penicillium, трансформированную плазмидой. Плазмида содержит фрагмент ДНК, кодирующий лакказу С1 лигнинолитического гриба Trametes hirsuta или фрагмент ДНК, который гибридизуется с SEQ ID NO:1 в жестких условиях, под контролем промотора, функционирующего в указанной клетке. Полученная клетка является продуцентом лакказы С1. Изобретение относится также к способу получения лакказы с использованием указанной клетки. Изобретение позволяет эффективно получать лакказу с высокой каталитической активностью. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 ил.

Настоящее изобретение относится к модифицированной ксиланазе 11-го Семейства. Предложенная ксиланаза содержит последовательность функционального консенсусного сайта гликозилирования. Неограничивающие примеры вводимых сайтов гликозилирования включают замену аминокислоты в положении (34, 131, 180, 182), или в их комбинации, на аспарагин. Указанное положение аминокислоты в ксиланазе 11-го Семейства определяют выравниванием последовательности, представляющей интерес ксиланазы с аминокислотной последовательностью ксиланазы II Trichoderma reesei. Введенный консенсусный сайт гликозилирования обеспечивает повышенную эффективность экспрессии модифицированной ксиланазы по сравнению с эффективностью экспрессии не модифицированной ксиланазы при использовании аналогичных штаммов-хозяев и условий выращивания. 7 н. и 11 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой полипептид, обладающий -L-арабинофуранозидазной активностью, выбранный из следующих полипептидов: полипептид с SEQ ID No.2, полипептид, аминокислотная последовательность которого находится между положениями 28 и 400 SEQ ID No.2, фрагмент полипептида с SEQ ID No.2, обладающий активностью -L-арабинофуранозидазы, полипептид, обладающий активностью -L-арабинофуранозидазы В и проявляющий, по меньшей мере, 80% идентичность с полипептидом SEQ ID No.2. Изобретение также относится к полинуклеотиду, кодирующему данный полипептид, экспрессионной кассете и вектору, содержащим полинуклеотид, и организму-хозяину, содержащему данный полипептид. Изобретение позволяет расширить арсенал средств для гидролиза -L-арабинофуранозильных связей в арабинофуранозилолигосахаридных соединениях. 7 н. и 2 з.п. ф-лы, 6 ил, 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой способ получения фермента, предпочтительно целлюлазы или ксиланазы, расщепляющих целлюлозу или ксиланы соответственно, путем культивирования штамма гриба Penicillium verruculosum. При этом указанный штамм получают трансформацией клетки гриба Penicillium verruculosum генетической конструкцией, содержащей целевую кодирующую последовательность фермента, функционально связанную с регуляторными элементами гена целлобиогидролазы I Penicillium verruculosum, которые представляют собой промотор и терминатор гена целлобиогидролазы I, a сигнальный пептид при этом зависит от того, каков целевой фермент. Изобретение позволяет получать ферменты с высокой степенью эффективности. 3 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 6 ил.

Изобретение относится к биотехнологии. Трансформацию выполняют с использованием ауксотрофных штаммов (например, ауксотрофных по урацилу), принадлежащих роду Mortierella в качестве штамма-хозяина. В частности, в качестве маркера применяют передаваемый в штамм-хозяин ген, восстанавливающий прототрофность (стадия переноса гена). Далее трансформант отбирают с использованием в качестве маркера восстановления прототрофности (стадия селекции). В качестве липид-продуцирующих грибов, например, можно использовать грибы вида М. Aplina. Настоящее изобретение позволяет эффективно и рационально проводить селекцию липид-продуцирующих грибов, принадлежащих роду Mortierella, без применения антибиотиков. 5 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой бета-глюканазу, получаемую из гриба Talaromyces emersonii, или композицию, обладающую активностью бета-глюканазы. Данный фермент или композиция используются при обработке растительного материала для разрушения или модификации целлюлозы, а также входят в состав пищевых продуктов и кормов для животных. Заявленное изобретение позволяет расширить ассортимент ферментов, обладающих бета-глюканазной активностью. 9 н. и 8 з.п. ф-лы, 15 табл.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и касается новых полинуклеотидов, которые кодируют полипептид с активностью трипептидилпептидазы. Для получения полипептида с активностью трипептидилпептидазы клетку-хозяина трансформировали полинуклеотидом или вектором, содержащим полинуклеотид, и культивировали в условиях, подходящих для экспрессии полинуклеотида. Изобретение позволяет получить новую протеазу из нитчатых грибов. 6 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генетической инженерии. Штамм гриба Penicillium canescens ВКПМ F-912 является продуцентом секретируемой эндо-(1-4)-бета-ксиланазы с удаленными генами эндоглюканаз. Данный штамм за 120-144 часов ферментации на средах со свекловичным жомом позволяет накапливать до 800 единиц активности секретируемой эндо-(1-4)-бета-ксиланазы и не более 0.13 единиц целлюлазной активности в 1 мл культуральной жидкости. 2 ил., 1 табл.

Изобретение относится к пищевой промышленности и биотехнологии и представляет собой полипептид, обладающий ксиланазной активностью, который может разлагать целлюлозные экстракты и растительные материалы. В другом аспекте изобретение представляет собой полинуклеотид, кодирующий указанный полипептид, а также композицию, содержащую полипептид с активностью ксиланазы. Данный полипептид используют для обработки растительного или ксилансодержащего материала при приготовлении хлеба и корма для животных. Причем полипептид обладает как арабиноксиланазной, так и ксилозидазной активностью. Изобретение позволяет расширить ассортимент ксиланаз, используемых в промышленном производстве. 9 н. и 14 з.п. ф-лы, 12 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Кормовой комплексный ферментный препарат с эндо-1,4- -глюканазной, -глюканазной, эндо-1,4- -ксиланазной, фитазной, пектин-лиазной и -галактозидазной активностью получают при совместном культивировании мультикопийных штаммов гриба Penicillium canescens BKM F-3868 D и ВКМ F-3869 D. Ферментный препарат с эндо-1,4- -глюканазной, -глюканазной, эндо-1,4- -ксиланазной, фитазной, пектин-лиазной активностью получают при совместном культивировании мультикопийных штаммов гриба Penicillium canescens BKM F-3868 D и ВКМ F-3870 D. Для получения ферментного препарата с эндо-1,4- -глюканазной, -глюканазной, эндо-1,4- -ксиланазной активностями культивируют штамм Penicillium canescens BKM F-3868 D, а для получения ферментного препарата с фитазной, пектин-лиазной и -галактозидазной активностями культивируют штамм Penicillium canescens ВКМ F-3869 D. Ферментный препарат с фитазной и пектин-лиазной активностями получают культивированием штамма Penicillium canescens BKM F-3870 D. Заявленное изобретение позволяет расширить ассортимент ферментных препаратов. 11 н.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к микробиологической промышленности, в частности к производству бактериальных биопрепаратов. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК, содержащую ген устойчивости к эритромицину (ErmC), последовательность фрагмента ДНК В. thuringiensis subsp. tenebrionis, кодирующую синтез -эндотоксина cryIIIA, последовательность фрагмента ДНК хромосомы В. thuringiensis subsp. kurstaki размером 448 п.н., последовательность фрагмента ДНК хромосомы В. thuringiensis subsp. kurstaki размером 501 п.н., сайты расщепления эндонуклеазой EcoRI, PstI, Barn HI, HmdIII, KpnI. Получают штамм В. thuringiensis subsp. kurstaki, содержащий указанную рекомбинантную плазмидную ДНК. Изобретение позволяет получить штамм В. thuringiensis, обладающий повышенной инсектицидной активностью в отношении представителей отряда Lepidoptera, Coleoptera, Homoptera, приносящих вред сельскохозяйственным культурам. 2 н.п. ф-лы, 5 ил., 6 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой фермент гликозилгидролазу (варианты), продуцируемый гифомицетами, в частности Chrysosporium lucknowense, а также нуклеиновокислотный конструкт для экспрессии гликозилгидролазы. Заявленное изобретение позволяет получать гликозилгидролазу культивированием гриба Chrysosporium в оптимальных условиях, обеспечивающих экспрессию и выделение фермента с высокой степенью эффективности. 15 н. и 4 з.п. ф-лы, 2 ил., 4 табл.