Пептиды, содержащие более 20 аминокислот, гастрины, соматостатины, меланотропины, их производные: ...гормон роста (ГР) (соматотропин) – C07K 14/61

Изобретение относится к области биохимии. Предложен способ выделения и очистки рекомбинантного гормона роста человека, секретируемого дрожжами Saccharomyces cerevisiae в процессе их ферментации в соответствующих условиях. Осаждают целевой белок из освобожденной от биомассы культуральной жидкости путем либо подкисления до pH 2,9-4,0, либо добавлением полиэтиленгликоля 3000-6000 Да. Затем растворяют полученный осадок в подходящем растворителе. Осуществляют предварительную очистку целевого белка либо методом анионообменной хроматографии при pH 5,6, либо методом диафильтрации в присутствии 0,1-0,5 M хлористого натрия. Затем проводят основную очистку целевого белка методом анионообменной хроматографии при pH не менее 7,3 и гель-фильтрацию. Изобретение позволяет получить гормон роста, свободный от родственных белков, белков продуцента-хозяина и других примесей, таких как пигменты, с выходом до 60%. 8 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способу получения и очистки рекомбинантного гормона роста человека (рГРЧ). Предложенный способ получения и очистки рГРЧ включает растворение телец включения в 2 М мочевине при рН=11.0, проведение процесса ренатурации в буферном растворе 20 мМ Трис-НСl при рН=8.0. В качестве окислителя сульфогидрильных групп рГРЧ используют перекись водорода. Проводят отщепление N-концевого метионина с помощью лейциновой аминопептидазы. Хроматографическую очистку рГРЧ проводят с помощью двухстадийной ионообменной хроматографии на сорбенте Q Sepharose FF и стадии очистки с помощью гидрофобной хроматографии на сорбенте Butyl Sepharose 4 FF. Применяют гель-фильтрацию на Sephadex G-25 и ионообменную хроматографию на Q Sepharose FF, pH=6,5. После чего используют гель-фильтрацию на Sephacryl S-100HR. Предложенное изобретение позволяет получить препарат высокоочищенного белка рГРЧ фармакопейного качества, пригодного для производства лекарственных препаратов. 3 ил., 2 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к полипептиду и его гомодимеру, которые обладают агонистической активностью в отношении рецептора гормона роста, молекуле нуклеиновой кислоты, их кодирующей, вектору, который включает данную нуклеиновую кислоту, клетке для экспрессии данного полипептида, фармацевтической композиции и способу с применением вышеуказанных полипептидов для лечения дефицита гормона роста. Полипептид имеет аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO:11 или 12. Гомодимер состоит из двух полипептидов, состоящих из SEQ ID NO:11 или 12. Молекула нуклеиновой кислоты состоит из последовательности нуклеиновой кислоты, представленной в SEQ ID NO:4. Фармацевтическая композиция для применения в лечении дефицита гормона роста содержит указанный выше полипептид или гомодимер и эксципиент или носитель. Способ лечения дефицита гормона роста включает введение эффективного количества указанного выше полипептида или гомодимера. Предложенное изобретение позволяет создать полипептид, который обладают агонистической активностью в отношении рецептора гормона роста и эффективен при лечении дефицита гормона роста. 8 н. и 9 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению модифицированного гормона роста, и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают полипептид, который имеет антагонистическую активность в отношении рецептора гормона роста. Изобретение позволяет получить полипептид, который эффективен при лечении состояний, обусловленных избытком гормона роста в организме пациента. 6 н. и 5 з.п. ф-лы, 19 ил., 2 табл.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии. Предлагается способ конструирования штаммов дрожжей - стабильных продуцентов гормона роста человека (соматотропина). Кроме того, предлагаются два штамма ВКПМ Y-3506 и ВКПМ Y-3507 - стабильных продуцента соматотропина человека. Штаммы-продуценты были получены путем последовательной интеграции в геном реципиентного штамма экспрессионных плазмид. Каждая плазмида несет в своем составе ген соматотропина (GH1), слитый с лидерной последовательностью, под контролем промотора GAL1, а также один из генов URA3, LEU2, TRP1 и HIS3, комплементирующих ауксотрофные мутации штамма-реципиента. Продуктивность полученных штаммов составляет 100-130 мг соматотропина на 1 л среды. 3 н.п. ф-лы, 7 ил.

Предложены конъюгаты человеческого гормона роста, полученные путем удаления атома водорода из -NH₂ в боковой цепи Gln, который образован от человеческого гормона роста или соединения человеческого гормона роста. 3 н. и 3 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области генной инженерии, конкретно к химерным полипептидам, содержащим антагонист рецептора гормона роста, и может быть использовано в медицине. Производят модификации в связывающем домене гормона роста путем замены аминокислотного остатка глицина в положении 120 и дополнительно модифицируют в сайте 1, где заменяют по меньшей мере один аминокислотный остаток, который увеличивает сродство гормона роста к его связывающему домену на рецепторе гормона роста. Затем конъюгируют его с лигандсвязывающим доменом рецептора гормона роста посредством пептидного линкера. Изобретение обеспечивает получение высокоэффективного антагониста рецептора гормона роста с увеличенным периодом полувыведения, пониженной иммуногенностью и отсутствием токсичности по сравнению с известными мутантными формами. 12 н. и 23 з.п. ф-лы, 16 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения правильно скрученного, содержащего предшественник инсулина химерного белка. Химерный белок содержит пептидильный фрагмент протяженностью 20-92 аминокислот, который на 60% идентичен первым 20 N-аминокислотным остаткам SEQ ID N:1 или SEQ ID N:2, и пептидильный фрагмент предшественника инсулина, содержащий цепь А и цепь В человеческого инсулина. С-конец первого пептидильного фрагмента связан с N-концом пептидильного фрагмента предшественника инсулина с помощью Arg или Lys. Инсулин получают путем контактирования экспрессированного химерного белка с хаотропным агентом или меркаптаном. Изобретение позволяет получать предшественник инсулина в биоактивной конформации, а также скринировать пептидильный фрагмент, способный улучшать укладку предшественника инсулина. 3 н. и 13 з.п. ф-лы, 3 ил.