Способы измерения или испытания, использующие ферменты или микроорганизмы, составы для них, способы получения подобных составов: .использующие вирусы или бактериофаги – C12Q 1/70

Изобретение относится к области медицины, в частности к применению молекулярных маркеров ВПЧ ВКР и их качественных и количественных характеристик для прогнозирования течения гиперпролиферативных заболеваний ШМ. Способ осуществляется поэтапно: 1) из соскобов из цервикального канала и биоптатов ШМ выделяют ДНК ВПЧ; 2) определяют генотип вируса; 3) отбирают пациенток с ВПЧ16-позитивной CIN; 4) методом ПНР в реальном времени определяют число копий ДНК вируса и степень интеграции ее в хозяйский геном (физический статус); 5) устанавливают пороговый уровень вирусной нагрузки с учетом физического статуса вируса (6,5 lg копий ДНК ВПЧ 16 на клетку); 6) классифицируют пациенток в зависимости от установленного порогового уровня вирусной нагрузки и физического статуса вируса (эписомальная или интегрированная форма); 7) выявляют пациенток с неблагоприятным прогнозом, имеющих высокую вирусную нагрузку (>6.5 lg копий ДНК на клетку) при эписомальной форме вируса или низкую нагрузку (<6.5 lg копий ДНК на клетку) при интегрированной форме вируса. Способ позволяет провести раннее прогнозирование неблагоприятного течения цервикальных интраэпителиальных неоплазий и возможного перехода их в рак ШМ. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ определения антител к оппортунистическим инфекциям в ликворе детей. Используют диагностический набор определения антител в крови и полистирольные планшеты. Цельный ликвор в количестве 10 мкл разводят в соотношении 1:100. Пробу инкубируют при 37°С в течение 40-45 мин. Вторичную инкубацию с конъюгатом антитела проводят при 37°С-38°С в течение 55-60 мин. По изменению критического значения оптической плотности определяют наличие антител в ликворе. Способ обеспечивает определение антител у детей в небольшом отобранном объеме ликвора (10 мкл) и может найти применение в диагностике оппортунистических инфекций детей. 4 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к области диагностики, в частности к способам и реагентам, включая биочипы, для выявления присутствия для одного или нескольких анализируемых объектов в образце, основанным на использовании набора гранул, содержащего множество семейств или поднаборов гранул, в котором каждая из гранул внутри каждого семейства гранул поднабора может быть соединена с меченным зондом захвата нуклеиновой кислоты, способным связываться со специфической для штамма HPV областью генома HPV. Каждое из семейств гранул внутри каждого одиночного набора имеет различную интенсивность флуоресценции. Группа изобретений обеспечивает быстрые, легко применяемые в диагностике способы и реагенты. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 пр., 5 табл.

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ раннего прогнозирования исходов противовирусной терапии хронического вирусного гепатита «С», включающий выявление иммунологических показателей в венозной крови больного, в том числе содержание циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) и вирусологического показателя (генотип вируса гепатита «С»), В комплексе определяют до начала противовирусной терапии количество В-лимфоцитов (CD₁₉), Т-лимфоцитов-супрессоров (CD₈), натуральных киллеров (CD₁₆), уровень иммуноглобулина A (IgA), и процент фагоцитоза (Ф%). По сумме весовых коэффициентов показателей определяют коэффициент иммунологического прогноза (КИП). При значении КИП 1,2÷3,2 определяют благоприятный прогноз исхода лечения, при значениях КИП 3,3÷3,9 возможен рецидив, а при КИП более 3,9 определяют неблагоприятный прогноз. Изобретение обеспечивает эффективный способ прогнозирования исхода противовирусной терапии до ее начала, предотвращая проведение дорогостоящего лечения и нерационального расходования денежных средств. 4 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и вирусологии. Описаны способ и набор для детекции и идентификации вирусов герпеса HSV-1 и HSV-2 и вируса ветряной оспы VZV. Тестируемый образец подвергают амплификации с комбинацией праймеров. Далее проводят денатурацию продуктов амплификации, гибридизацию денатурированных одноцепочечных олигронуклеотидов с зондами и детекцию гибридизованных олигонуклеотидов. Изобретение может быть использовано в медицине. 3 н. и 9 з.п. ф-лы, 9 ил., 2 пр.

Изобретение относится к лабораторной диагностике заболевания иерсиниозом, вызываемым Yersinia enterocolitica. Для идентификации возбудителя иерсиниоза применяют кишечноиерсиниозный фаг ФК-100, который наносят в виде дорожки на двухслойный газон, нижний слой которого представляет собой агаровую среду (рН 7,1) с добавлением ампициллина в концентрации 50 мкг/мл, а верхний получают из исследуемого штамма, который выращивают на 1,5% агаре Хоттингера при 28°С в течение суток и засевают в 4 мл бульона Хоттингера, инкубируют при температуре 28°С до конечной концентрации n·10⁸ м.к./мл, после чего 0,3 мл полученной культуры смешивают с 4,5 мл расплавленного и охлажденного до 45°С 0,7% агара Хоттингера с 50 мкг/мл ампициллина и выливают вторым слоем на пластинки агара. Посев инкубируют при 28°С в течение 20-24 часов. Yersinia enterocolitica в исследуемой пробе идентифицируют от других видов иерсиний по наличию зоны фаголизиса на выросшей культуре. Способ обеспечивает 100%-ную эффективность идентификации. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, вирусологии и ветеринарии. Описан аттенуированный рекомбинантный вирус классической лихорадки свиней (CSFV). Модификацию проводили путем прогрессивного мутирования участка гена Е2 высокопатогенного штамма Брешиа. В результате осуществлялась замена от двух до шести аминокислот на участке 829-837 на аминокислоты в количестве от двух до шести, характерными для гетерологичного гликопротеина Е2 вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV). Также на основе полученного аттенуированного вируса CSFV получена вакцина против классической лихорадки свиней. Изобретение может быть использовано в ветеринарии. 5 н. и 2 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, вирусологии и медицины. Описан рекомбинантный белок, содержащий один или несколько полипептидов, несущих один или несколько эпитопов одного или нескольких антигенов вируса папилломы человека ВПЧ. При этом указанные полипептиды встроены в один или в различные пермиссивные сайты белка аденилатциклазы (CyaA) или его фрагмента. Указанный фрагмент CyAa сохраняет свойство указанного белка аденилатциклазы направленно взаимодействовать с антиген-презентирующими клетками. Также описан полинуклеотид, кодирующий такой белок, и их использование в системах экспрессии для получения иммуногенных композиций и лекарственных средств. Изобретение может быть использовано в медицине. 17 н. и 43 з.п. ф-лы, 21 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к набору праймеров для амплификации гена L1 папилломавируса человека (HPV), набору для детектирования генотипа папилломавируса человека (HPV) и к способам детектирования генотипов папилломавируса человека (HPV). Способ включает осуществление первичной ПЦР-амплификации гена HPV L1 в анализируемом образце с использованием набора из прямого и обратного праймеров, специфичных для участка гена L1. После чего осуществляют вторичную ПЦР-амплификацию продукта первичной ПЦР-амплификации гена L1 с использованием обратного праймера, с получением меченого биотином одноцепочечного гена L1. Затем проводят реакцию гибридизации продукта вторичной ПЦР-амплификации, меченого биотином одноцепочечного гена L1 с одним или более зондов для детектирования HPV-генотипа или зонда для детектирования HPV-генотипа. Далее осуществляют проведение реакции продукта реакции гибридизации с фикоэритрином, связанным со стрептавидином. Затем проводят измерение уровня флуоресцентного вещества и идентификацию зондов в продукте реакции гибридизации для идентификации HPV-генотипа. После чего осуществляют определение генотипа HPV и уровня его присутствия в соответствии с зондами и уровнем флуоресцентного вещества. Предложенное изобретение позволяет разработать способ детектирования HPV в образце с высокой чувствительностью, достаточной для детектирования крайне малого количества HPV в образце. 4 н. и 4 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл.

Группа изобретений относится к области вирусологии и включает способ прогнозирования вирулентности изолята вируса PRRS с неизвестной вирулентностью, а также композицию, которая содержит ослабленные формы вируса PRRS, для которых спрогнозирована вирулентность. Способ прогнозирования вирулентности заключается в том, что изолят вируса PRRS с неизвестной вирулентностью в определенном количестве вводят свинье и дают вирусу PRRS реплицироваться в течение периода времени от 3 до 15 дней. В течение этого периода оценивают скорость роста изолята вируса PRRS и/или уровень виремии и эти данные сравнивают с соответствующей скоростью роста и/или уровнем виремии изолята вируса PRRS с известной вирулентностью. Причем изолят вируса PRRS будет обладать высокой вирулентностью, когда скорость роста и/или уровень виремии аналогичны этим показателям изолята с высокой вирулентностью, и изолят вируса PRRS будет обладать низкой вирулентностью, когда скорость роста и/или уровень виремии аналогичны этим показателям изолята с низкой вирулентностью. Способ позволяет прогнозировать вирулентность новых и не охарактеризованных изолятов вирусов PRRS для их дальнейшего применения в иммунологических композициях. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 9 ил., 6 табл.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения диагностических и/или терапевтических агентов, в частности антител, специфически взаимодействующих с белками клеточной поверхности клеток-мишеней. Предложен способ скрининга библиотеки фагового дисплея и включающие его способ выделения элемента библиотеки, являющегося специфическим партнером связывания поверхностного белка клетки-мишени, и способ выделения неизвестного белка клеточной поверхности, специфически взаимодействующего с элементом библиотеки. Способ скрининга библиотеки фагового дисплея по изобретению предусматривает контактирование указанной библиотеки с представляющими интерес клетками с последующим отделением клеток, которые связались с одним или несколькими элементами экспрессионной библиотеки, от не связанных элементов посредством разделения через органическую фазу, и отличается введением дополнительной стадии, которая состоит в проведении перед указанным разделением по меньшей мере одного этапа промывки материала и обеспечивает существенное повышение эффективности метода. 3 н. и 27 з.п. ф-лы, 7 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для прогнозирования возможности эпидемий. Определяют степень патогенности энтеровирусных штаммов Коксаки В вируса на основе исследования нейропатогенности полевого штамма Коксаки В вируса в условиях одного гнезда линейных мышей. Мышей делят на две группы. Одну подвергают искусственному инфицированию полевым штаммом. Фиксируют выраженные признаки поражений центральной нервной системы у мышей, зараженных естественным путем. Сравнивают их с характерными для контрольных штаммов Коксаки В вирусов прототипным и эпидемическим. При совпадении характера выраженных признаков поражений центральной нервной системы констатируют соответствие степени патогенности полевого штамма межэпидемической. Изобретение позволяет упростить определение степени патогенности штамма Коксаки В вируса.

Изобретение касается диагностического набора для определения наличия белка оболочки Prunus necrotic ringspot virus в растениях. Набор включает поликлональные антитела против белка оболочки этого вируса и пару праймеров: прямой 5'-праймер с последовательностью ID 1: CTGCAGATGGTTTGCCGAATTTGCAA и обратный 3'-праймер с последовательностью ID 2: GCTCTAGACTAGATCTCAAGCAGGTC. Набор позволяет определить наличие вируса некротической кольцевой пятнистости Prunus в растениях. 2 н. и 15 з.п. ф-лы, 4 табл.

Изобретение относится к области ветеринарии, иммунологии, биотехнологии и вирусологии. Способ получения стандартной позитивной панели сывороток крови животных для контроля качества иммуноферментных тест-систем, предназначенных для выявления специфических антител к вирусным респираторным инфекциям в биологических жидкостях организма крупного рогатого скота, заключается в отборе сывороток крови, которые пропускают в режиме замкнутого реактора через иммуносорбенты с нагруженными на них антигенами вирусов. Это приводит к адсорбции специфических антител из сыворотки крови на сорбенте. Затем после отмывки колонки с сорбентом проводят элюцию специфических антител. Применение метода экономически оправдано за счет сокращения сроков получения панели позитивных сывороток крови к вирусным респираторным инфекциям КРС и дает возможность повторного многократного использования колонок с иммуносорбентом. Изобретение обеспечивает получение контрольных образцов, содержащих специфические антитела, обладающих высокой специфичностью и детектируемостью и в то же время стандартных и экономически доступных. Изобретение может быть использовано в технологии изготовления панелей сывороток, содержащих специфические антитела к антигенам вирусных респираторных инфекций крупного рогатого скота (КРС). 1 табл.

Для обнаружения вируса В хризантемы у растений используют диагностический набор, содержащий поликлональные антитела к белку оболочки вируса В Chrysanthemum, конъюгат, меченый щелочной фосфатазой, фиксирующий буфер; экстракционный буфер, ECI-буфер и PNP-буфер. Белок оболочки вируса получают посредством амплификации очищенного гена этого белка с использованием смыслового праймера ATGCCTCCCAAACCGGCACCAGGTGAT и антисмыслового праймера TTTATAATGTCTTATTATTCGCAT. 2 н. и 13 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области медицины и касается новых мутаций, комбинаций мутаций или мутационных профилей генов обратной транскриптазы ВИЧ-1 и/или протеазы, коррелирующих с фенотипической резистентностью к лекарственным средствам против ВИЧ. Более конкретно, настоящее изобретение относится к применению генотипической характеристики популяции-мишени ВИЧ и последующей корреляции данной информации с фенотипической интерпретацией, с целью установления корреляции мутационных профилей вируса с резистентностью к лекарственным средствам. Преимущество изобретения заключается в использовании полученных данных для скрининга лекарственных препаратов против ВИЧ-инфекции, 12 з.п. ф-лы, 13 табл., 2 ил.

Изобретение относится к области медицины, медицинской токсикологии, микробиологии, биологии. Сущность способа сводится к тому, что в стандартных условиях монослоя культуры клеток эмбриона человека проводят совместное культивирование в течение 2 часов тест-штамма микроорганизма с соответствующим лечебным бактериофагом или комбинированным (поливалентным) бактериофагом, в состав которого входит соответствующий используемой тест-культуре микроорганизма фаг. Специфическую активность бактериофага оценивают по степени снижения адгезии тест-штамма микроорганизма к клеткам монослоя по сравнению с контролем (монослой клеток и тест-штамм без бактериофага). Использование способа позволяет повысить скорость определения и проводить оценку эффективности лечебного бактериофага за счет приближения условий оценки к условиям макроорганизма. 2 табл.

Изобретение относится к иммунологии. Предложена тест-система для количественного определения анти-HBs в биологическом образце методом иммуноферментного анализа. Тест-система содержит планшет стрипированный, сорбированный HbsAg, HBsAg-конъюгат, положительный контрольный образец, отрицательный контрольный образец, промывающий раствор, субстратный буферный раствор с перекисью водорода, хромоген, стоп-реагент. В качестве антигена для сорбирования планшета и изготовления HBsAg, конъюгата, состоящего из HbsAg, конъюгированного непосредственно с ферментом пероксидазой, используют вирусбезопасный HBsAg, очищенный из плазмы осаждением иммунного комплекса. Положительным контролем является иммуноглобулин человека нормальный с концентрацией анти-HBs 50 мМЕ/мл, стабилизированный нормальной донорской плазмой и мальтозой в конечной концентрации 2-20%, оттитрованный по международному стандарту содержания анти-HBs. Субстратный раствор и хромоген-0,2% раствор 3, 3', 5, 5' тетраметилбензидина в диметилсульфоксиде, разбавленный в 5 раз цитратным буфером с содержанием гидроперита в конечной концентрации 0,015% и 2-хлорацетамида в конечной концентрации 0,1%. Расчет количественного содержания антител к HbsAg осуществляют по формуле: СХ=((ОП_ср.Х-ОП_ср.К^- )/(ОП_ср.К₅₀ ⁺-ОП_ср. К^-))·50n, где СХ-концентрация анти-HBs в исследуемом образце (мМЕ/мл), ОП_ср.Х - среднее значение оптической плотности исследуемого образца, ОП_ср.К^- - среднее значение оптической плотности контрольного отрицательного образца, ОП_ср.К₅₀ ⁺ - среднее значение оптической плотности контрольного положительного образца, 50-концентрация анти-HBs в K₅₀ ⁺(мМЕ/мл), n - кратность разведения исследуемого образца. Результаты оценивают, если ОП_ср.К^- 0,150 опт.ед., ОП_ср.K₅₀ ⁺ >2,5 (ОП_крит.), где ОП_крит.=ОП_ср. К^-+0,06. Концентрацию анти-HBs определяют, если значения ОП исследуемого образца находятся в диапазоне от ОП_крит. до 1,500 о.е., если ОП образца выходит за верхнюю границу указанного диапазона, то эмпирически подбирают его разведение. Использование изобретения позволяет упростить расчет количественного содержания анти HBs при чувствительности не менее 10 мМЕ/мл по стандарту ОСО-42-28-320-00.

Настоящее изобретение относится к способу выявления бактерий в любом образце, в частности в области медицины, биотехнологии, пищевой промышленности и т.п. Способ предусматривает следующие стадии: а) соединяют бактериофаги и/или белки бактериофагов с носителем; б) носитель, соединенный с бактериофагами и/или белками бактериофагов, инкубируют с образцом, возможно удаляют образец и бактерии в образце, не связавшиеся с бактериофагами и/или белками бактериофагов; возможно добавляют вещества, пермеабилизирующие или разрушающие бактериальную мембрану; в) выявляют в образце бактерии, связавшиеся с бактериофагами и/или белками бактериофагов, причем связавшиеся бактерии не подвергают стадии культивирования. Набор для осуществления способа содержит носитель с иммобилизованными фагами или белками бактериофагов, причем последние соединены непосредственным связыванием с носителем либо непосредственным связыванием с полипептидом, иммобилизованным на носителе, и реактивы для анализа для выявления связавшихся бактерий. Набор дополнительно содержит растворы для отмывки и/или вещества, пермеабилизирующие или разрушающие мембрану бактерий. Изобретение обеспечивает возможность быстрого и чувствительного выявления бактерий. 2 н. и 12 з.п. ф-лы, 5 ил.