Пептиды, содержащие более 20 аминокислот, гастрины, соматостатины, меланотропины, их производные: ..цитохромы – C07K 14/80

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к способу получения цитохрома С. Способ предусматривает обезжиривание сердец свиней, крупного рогатого скота или лошадей. Подготовленное сырье измельчают с получением фарша, затем экстрагируют 2,5% раствором трихлоруксусной кислоты при температуре 10-15 ^°С и рН 3,9-4,2. Отделяют экстракт и осуществляют его сорбцию на катионите Nuvia S, уравновешенном дистиллированной водой. После завершения сорбции катионит Nuvia S промывают дистиллированной водой и аммиачно-аммонийным буферным раствором. Затем проводят элюцию цитохрома C с катионита Nuvia S раствором сульфата аммония с последующей очисткой его диафильтрацией до полного удаления ионов сульфата аммония и концентрированием цитохрома С ультрафильтрацией. Изобретение позволяет увеличить выход продукта, повысить его чистоту и сократить технологический процесс. 2 з.п. ф-лы, 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к фармакологии, а именно к способу получению цитохрома С. Способ получения цитохрома С, включающий обезжиривание сердец свиней крупного рогатого скота или лошадей, удаление из них связок и сосудов, измельчение и экстракцию раствором трихлоруксусной кислоты при определенных условиях, отделение экстракта от фарша, сорбцию отфильтрованного экстракта при pH экстракта на катионите UNOsphere S, уравновешенном стартовым буферным раствором при pH 3,9-4,2, после завершения сорбции катионит промывают стартовым буферным раствором, балластные белки удаляют с катионита UNOsphere S раствором трис, затем проводят элюцию цитохрома С с катионита UNOsphere S раствором сульфата аммония, концентрированно и очистку его диализом до полного удаления ионов сульфата аммония. Вышеописанный способ позволяет увеличить выход продукта, повысить его чистоту и сократить технологический процесс. 3 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. В частности, к способу получения рекомбинантного мутантного цитохрома с лошади. Данный способ осуществляют введением мутаций К27Е/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К или К8Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е, или К8Е/К27Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К с помощью метода сайт-направленного мутагенеза, в ген цитохрома с лошади, который находится в составе плазмидной ДНК pBPCYCS/3. Далее проводят трансформацию штамма Escherichia coli JM-109 полученной рекомбинантной плазмидной ДНК, экспрессию и выделение целевого белка с помощью катионообменной и адсорбционной хроматографии. Изобретение позволяет использовать рекомбинантный мутантный цитохром с лошади в качестве тест-системы для измерения скорости генерации супероксида в мембранных препаратах. 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу определения скорости генерации супероксида. Способ может быть использован для количественного определения супероксида в мембранных препаратах (микросом, митохондрий), обладающих цитохром с - редуктазной и цитохром с - оксидазной активностью. Кроме того, возможно его использование в медицинской биохимии для исследования роли супероксида в патогенезе нейродегенеративных заболеваний. Способ включает приготовление среды измерения, смешивание источника супероксида со средой измерения, добавление в полученную смесь субстрата окисления и мутантного цитохрома с К27Е/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К или К8Е/Е62К/Е69К7К72Е/К86Е/К87Е, или К8Е/К27Е/Е62К/Е69К/К72Е/К86Е/К87Е/Е90К. Спектрофотометрически проводят измерение скорости восстановления производного цитохрома с и определяют скорость генерации супероксида. Способ является более простым в сравнении с известными аналогами и позволяет определить скорость генерации супероксида с повышенной точностью. 1 табл., 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к диагностическому способу определения одной или нескольких мутаций цитохрома b в грибах в положении, соответствующем остатку 129 цитохрома b Saccharomyces cerevisiae. Проводят ПЦР-реакцию, в результате которой определяют связывание олигонуклеотидного зонда с ампликоном, генерированном в процессе данной реакции, или обнаруживают присутствие ампликона, который генерировался в результате ПЦР-реакции с использованием указанных праймеров. Изобретение позволяет быстро и точно определить мутации, придающие устойчивость гриба к фунгициду. 3 н. и 14 з.п. ф-лы, 21 ил., 43 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности к способам обнаружения низких частот встречаемости мутаций в гене цитохрома b. Выделяют ДНК из заданных грибов для конструирования олигонуклеотидного зонда или праймера. Проводят ПЦР-реакцию, в результате которой определяют связывание олигонуклеотидного зонда с ампликоном, генерированным в процессе данной реакции, или обнаруживают присутствие ампликона, который генерировался в результате ПЦР-реакции с использованием указанных праймеров. Изобретение позволяет быстро и точно определить мутации, придающие устойчивость гриба к фунгициду. 7 с. и 17 з.п. ф-лы, 9 ил.,14 табл.