Пептиды, содержащие более 20 аминокислот, гастрины, соматостатины, меланотропины, их производные: ...факторы VIII – C07K 14/755

Способ очистки белка Фактора свертывания VIII из раствора включает: а) контактирование белка с мультимодальной смолой или смолой смешанного типа действия, содержащей лиганды, которые включают гидрофобную часть и отрицательно заряженную часть; b) элюцию белка элюирующим буфером, содержащим по меньшей мере 1,5 М соли и по меньшей мере 40% (вес/объем) этиленгликоля, пропиленгликоля или их смеси и ионы кальция. Способ представляет собой одностадийный хроматографический процесс, при котором происходят захват и очистка белка Фактора свертывания VIII, не требующий доведения рН или электропроводности в ходе стадии загрузки. Способ стабилизации белка Фактора свертывания VIII, при котором происходят захват и стабилизация белка Фактора свертывания VIII за один проход белка через колонку с мультимодальной смолой, содержащей лиганды, которые включают гидрофобную часть и отрицательно заряженную часть, и элюция белка элюирующим буфером, содержащим по меньшей мере 1,5 М соли и по меньшей мере 40% (вес/объем) этиленгликоля, пропиленгликоля или их смеси и ионы кальция. Изобретение обеспечивает сокращение объема колонки примерно в 250 раз и «коэффициент очистки», по меньшей мере равный 30, высокий показатель стабильности для белкового продукта. 2 н. и 14 з.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 7 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к продукции терапевтически активных полипептидов с использованием клеток млекопитающих, и может быть использовано для продуцирования полипептида фактора VIII. Способ продуцирования полипептида фактора VIII предусматривает культивирование клеток млекопитающих, экспрессирующих полипептид фактор VIII, в условиях, подходящих для экспрессии указанного полипептида фактора VIII, которые включают клеточную культуральную среду с О-фосфо-L-серином (OPLS), и выделение экспрессированного полипептида фактора VIII из клеток млекопитающих с помощью подходящих средств. Изобретение позволяет получить полипептид фактор VIII с увеличенной специфической активностью. 2 н. и 9 з.п. ф-лы, 3 ил., 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии и биохимии и может быть использовано в медицине. Предлагается конъюгат мутеина фактора свертывания крови VIII (FVIII), в котором не являющийся цистеином остаток в положении 41, 129, 377, 388, 468, 491, 556, 1804, 1808, 1810, 1812, 1813, 1815 и/или 2118 заменен остатком цистеина, с полиэтиленгликолем (ПЭГ), где молекула ПЭГ связана с полипептидом по мутантному цистеиновому остатку. Улучшение фармакокинетических свойств FVIII в составе конъюгата по изобретению при сохранении прокоагулянтной активности фактора позволяет предложить новые ПЭГ-илированные мутеины FVIII для получения фармацевтических композиций, предназначенных для лечения гемофилии. 4 н. и 8 з.п.ф-лы, 38 ил., 8 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению вариантов полипептида IB альфа гликопротеина тромбоцитов человека (GPIbальфа), и может быть использовано в медицине для лечения сосудистых нарушений. Рекомбинантным путем получают полипептид, содержащий замены в SEQ ID NO:2, выбранные из группы: Y276F K237V C65S; K237V C65S; Y276F C65S; или Y276F Y278F Y279F K237V C65S. Полученный полипептид используют для ингибирования прикрепления лейкоцитов к биологической ткани или для лечения нарушения, ассоциированного с активацией тромбоцитов. Изобретение позволяет получить полипептид GPIbальфа, который связывается с фактором фон Виллебранда с аффинностью, которая по меньшей мере в 10 раз выше, чем у природного полипептида GPIb , а также обладает более низкой аффинностью связывания с альфа-тромбином, более низкой агрегацией и/или повышенной устойчивостью к протеолизу относительно полипептида с SEQ ID NO:2. 15 н. и 26 з.п. ф-лы, 3 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для получения модифицированного свиного фактора VIII (POL1212). Молекулу ДНК, кодирующую белок модифицированного свиного фактора VIII, клонируют в экспрессирующий вектор, функциональный в клетках млекопитающих. Белок модифицированного свиного фактора VIII получают путем культивирования линии клеток млекопитающего ВНК CRL-1632 (АТСС), ВНК 1632 или СНО-К1, трансфицированной вектором. Терапевтическая композиция для лечения пациентов, имеющих недостаточность фактора VIII, содержит белок свиного фактора VIII в эффективном количестве. Изобретение позволяет разрабатывать средства для лечения недостаточности фактора VIII, например, у пациентов, страдающих гемофилией, 10 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 ил. 4 табл.