способ получения смолистого вещества

Формула изобретения

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СМОЛИСТОГО ВЕЩЕСТВА путем экстрагирования прополиса-сырца 96% -ным этиловым спиртом и высушивания спиртового экстракта, отличающийся тем, что, с целью обеспечения нерастворимости в слюне, спиртовой экстракт после высушивания подвергают экстракции дистиллированной водой при кипячении, а остаток экстракции солевым раствором, имитирующим действие слюны 5 - 7-кратно при кипячении, с последующим высушиванием осадка.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, а именно к способам получения препаратов из прополиса, и преимущественно может найти применение при изготовлении специального лака для защиты препарированных зубов.

Прополис-сырец /пчелиный клей/ - побочный продукт пчеловодства развитого повсеместно и используется в качестве сырья для получения биологически активных веществ (Авт. св. N 484871, кл. A 61 K 35/64, 1975. Авт. св. N 585846, кл. A 61 K 35/64, 1977) и многих медицинских препаратов. Фармакологически активным компонентом этих препаратов является водорастворимая фракция веществ прополиса, обладающая антибактериальными и лечебными свойствами (Тихонов А. И. , Сало Д. П. и Гриценко В. И. Биологически активные субстанции прополиса. В кн. : Прополис. Бухарест, 1987. с. 96-101), в то время как целевое получение из прополиса и использование в медицине водонерастворимой фракции смолистых веществ не разрабатывалось.

Известно смолистое пленкообразующее вещество-копаловая смола, которая является компонентом специальных защитных лаков для препарированных зубов: Copalite /Cooby and Cooby, Houston, Tex/, Silcot /Septodont, Paris, France/. Это препараты на основе природных смол, образующие тонкую пленку на препарированной поверхности зуба после испарения растворителя и применяемые для защиты тканей препарированного зуба от вредных компонентов фиксирующего искусственную коронку цемента и предупреждающие краевую проницаемость (Лекарства и препараты фирмы Септодонт. Париж, 1986; Felton D. A. , Konoy B. E. , White J. T. J. Prosthet Dent. , 1987. , 57. , N 4, 411-416; Mondelli J. , Ishikiriama A. , Junior J. G. , J. Prosthet Dent. , 1978, 40, N 5, 632-336). Однако пленкообразующее вещество этих препаратов имеет недостатки: копаловая смола сорта "Манила" добывается только в Юго-Восточной Азии, в нашем регионе этого сырья нет (Кнуняну И. Л. Химический энциклопедический словарь. М. , 1983, с. 276, 533). Таким образом, существует потребность в способе получения смолистого пленкообразующего вещества из общедоступного сырья.

Наиболее близкий к предлагаемому способу получения пленкообразующего смолистого вещества из прополиса-сырца является способ получения смолобальзамических веществ (Авторское свидетельство N 635988, 1978), который заключается в экстрагировании прополиса-сырца в органическом растворителе с последующим отделением экстракта и его высушивании. Полученные таким способом смолобальзамические вещества представляют собой весь комплекс водорастворимых и водонерастворимых веществ прополиса, т. е. цельный прополис. Однако это пленкообразующее вещество может быть использовано только для препаратов, образующих временные лечебные пленки, так как присутствие в ней водорастворимой фракции веществ (полисахаридов, полифенольных соединений и др. ) делает пленку этого вещества частично растворимой в слюне человека - 22,69% /табл. 3/ и способной выделять во влажной среде вещества с кислой реакцией рН 6,47 0,01 (табл. 2), что не позволяет применять его в качестве компонента специального защитного лака, используемого в условиях полости рта для защиты препарированных зубов.

Целью изобретения является обеспечение нерастворимости в слюне.

В способ получения пленкообразующего вещества из прополиса включают, кроме получения смолобальзамических веществ /цельного прополиса/ путем экстрагирования прополиса-сырца органическим растворителем /этиловый спирт 96% / и высушивание экстракта, еще два этапа очистки пленкообразующего вещества. Удаление вещества с кислой реакцией рН среды путем 10-кратного экстрагирования в дистиллированной воде /1: 20/ кипячением по 15 мин со сменой экстракционной среды. Удаление веществ, способных растворяться в слюне человека, путем 5-кратного экстрагирования в искусственной слюне /1: 20/ кипячением по 15 мин со сменой экстракционной среды с последующим высушиванием. Предложенный способ позволяет получить из прополиса-сырца пленкообразующее вещество - прополисную смолу.

В доступной литературе не обнаружили описания способа очистки прополиса путем 10-кратного кипячения в дистиллированной воде и 5-кратным кипячением в искусственной слюне.

Пример получения пленкообразующего вещества.

30 г Прополиса-сырца измельчали и помещали в 96% -ный этиловый спирт объемом 150 мл. Растворяли в течение 3 дней при периодическом помешивании. Полученный спиртовый экстракт отделяли от механических примесей /воск, пыльца, мусор/ путем фильтрования. Затем спиртовый экстракт прополиса помещали в выпаривательную чашку и высушивали под струей теплого воздуха в течение 1 ч. Полученные смолобальзамические вещества /цельный прополис/ экстрагировали многократным /10 раз/ кипячением в дистиллированной воде по 15 мин при соотношении сухого вещества к экстракционной среде 1: 20, с периодической сменой воды. Дальнейшее экстрагирование проводили 5-кратным кипячением в искусственной слюне (KCl - 1 г, NaCl - 2,5 г, NH₂CONH₂ - 0,9 г, (NH₄)₂HPO₄ - 0,5 г на 1 л дистиллированной воды) при соотношении 1: 20 по 15 мин со сменой экстракционной среды. Нерастворившийся остаток высушивали под струей теплого воздуха. Полученное вещество-смола темно-коричневого цвета, без запаха, растворима в этаноле, не растворима в воде и слюне.

С целью доказательства существенных отличий предложенного способа получения пленкообразующего вещества из прополиса и обоснования режима экстрагирования изучено влияние кратности экстрагирования в дистиллированной воде на рН водных экстрактов прополиса, растворимость прополисной смолы, полученной экстрагированием в различных средах, в искусственной слюне, а также рН пленки прополисной смолы во влажной среде.

Определение кратности кипячений прополиса в дистиллированной воде, обеспечивающих снижение рН прополиса, проведено по методике: 5 г цельного прополиса помещали в 100 мл дистиллированной воды с рН 7,0 и кипятили в выпаривательной чашке 15 мин, затем меняли экстракционную среду на новую и повторяли кипячение, всего экстрагирований проведено 10 раз одной порции цельного прополиса. Водные экстракты переливали в стеклянные стаканчики и после остывания их до температуры 20^оС определяли кислотность на рН метре 121. Для статистической достоверности результатов исследования эксперимент повторен 5 раз, таким образом рН определена у 50 порций водных экстрактов.

Изучено также свойство конечного продукта предложенного способа-кислотность прополисной смолы, а именно веществ, выделяемых пленкой этого вещества во влажной среде. Пленкообразующее вещество после растворения в 96% -ном этиловом спирте при соотношении 4: 100 наносилось на внутреннюю поверхность стеклянных стаканчиков при помощи пинцета и поролонового шарика. После испарения растворителя и образования сухой пленки вещества на внутренних стенках стаканчика в них наливали по 30 мл дистиллированной воды с рН 7,0 на 30 мин. После чего проводили испытание на рН-метре 121. Контролем в данном опыте служило пленкообразующее вещество - цельный прополис. Всего проведено 20 измерений рН среды проб воды : 10 проб воды, контактировавшей с прополисной смолой, и 10 проб воды, контактировавшей с пленкой цельного прополиса.

Влияние экстракционной среды на растворимость получаемого пленкообразующего вещества изучены путем испытания в среде, максимально приближенной к естественным условиям полости рта - в искусственной слюне при температуре 37^оС. Определена растворимость пленок цельного прополиса, прополисной смолы после очистки экстрагированием в дистиллированной воде, прополисной смолы после очистки экстрагированием в дистиллированной воде и искусственной слюне /предложенный способ/. Методика опыта заключается в следующем: пленкообразующие прополисные вещества после растворения в 96% -ном этиловом спирте в соотношении 4: 100 наносились на стандартные предметные стекла после их взвешивания на аналитических весах. Испытуемое вещество наносилось на одну сторону стекла и высушивалось под струей теплого воздуха. Стекла, с нанесенными на них пленкообразователями, помещались в испытательную среду - искусственную слюну. Емкости с образцами помещали в термостат на 24 ч при температуре 37^оС. После испытания стекла высушивали и повторно взвешивали на аналитических весах. Параллельно проведен холостой опыт для определения растворимости стекла в искусственной слюне. Всего иследовалось 40 образцов: 10 стекол с нанесенным цельным прополисом, 10 стекол с нанесенной прополисной смолой, полученной после очистки экстрагированием в дистиллированной воде, 10 стекол с нанесенной прополисной смолой после ее очистки экстрагированием в дистиллированной воде и искусственной слюне, 10 стекол не покрытых пленкообразующим препаратом. Все стекла взвешивали до и после испытания, всего проведено 80 взвешиваний.

Растворимость пленки прополисных пленкообразующих веществ определяли по формуле:

P= 100% - , где Р - растворимость вещества;

К - коэффициент растворимости стекла;

M₁ - масса пленки препарата до испытания;

М₂ - масса пленки препарата после испытания.

Полученные результаты исследований отражены в табл. 1, 2 и 3. Только 10-кратное экстрагирование прополиса в дистиллированной воде кипячением приводит к статистически достоверному, где Р 0,01 снижению кислотности веществ выделяемых прополисом и позволяет приблизится к нейтральной среде. Меньшая кратность экстрагирования в дистиллированной воде кипячением не может использоватся для получения пленкообразующего вещества, которое будет непосредственно контактировать с препарированной поверхностью зуба. рН конечного продукта - прополисной смолы 7,09 0,01, рН вещества прототипа - цельного прополиса 6,470,01. Растворимость цельного прополиса в искусственной слюне 22,69 0,1% , растворимость пленкообразующего вещества, полученного после экстрагирования кипячением в дистиллированной воде 11,700,01, растворимость прополисной смолы, полученной после экстрагирования кипячением в дистиллированной воде и искуственной слюне равна 0% . Таким образом, для получения пленкообразующего вещества из прополиса, не растворяющегося в слюне, очищение цельного прополиса только экстрагированием в дистиллированной воде не достаточно, необходима очистка экстрагированием как в дистиллированной воде, так и в искусственной слюне.

Проведенные исследования подтверждают существенные отличия полученного пленкообразующего вещества - прополисной смолы от смолобальзамических веществ /цельного прополиса/, полученных способом прототипом, а именно:

- растворимость пленки вещества, полученного предложенным способом в слюне, равна 0% в отличие от пленки цельного прополиса, растворимость которой в слюне равна 22,69 0,1%

- пленка прополисной смолы, полученной предложенным способом имеет нейтральную реакцию рН 7,09 0,01 во влажной среде в отличие от кислой реакции среды пленки из цельного прополиса, рН которой 6,47 0,01.

Таким образом, прополисная смола, полученная предложенным способом, может быть пленкообразующим веществом при изготовлении лака для защиты препарированных зубов.

Способ получения пленкообразующего вещества из прополиса-сырца может осуществляться как в условиях аптеки, так и в условиях фармацевтического производства при промышленной переработке прополиса-сырца, причем этот способ может проводиться параллельно с известным способом, максимально приблизив промышленную переработку прополиса-сырца к безотходной технологии.

(56) Авторское свидетельство N 635988, кл. A 61 K 35/64, 1978.