Микроорганизмы: ...Staphylococcus aureus – C12R 1/445

Изобретение касается способа определения генотипов золотистого стафилококка. Представленный способ включает получение чистой культуры микроорганизмов на плотной питательной среде с последующим выделением и амплификацией ДНК возбудителя с помощью мультиплексной полимеразной цепной реакции (ПЦР) и с детекцией результатов методом электрофореза в агарозном геле. При осуществлении мультиплексной ПЦР используют четыре пары праймеров, комплементарных к участкам гена внеклеточной термонуклеазы ( nuc), гена лейкоцидина Пантона-Валлентайна (pvl), гена белка токсического шока (tst) и гена устойчивости к метициллину (mecA). Генотипы золотистого стафилококка определяют по наличию или отсутствию генов вирулентности pvl и tst и гена устойчивости к метициллину mecA или их сочетаний. Изобретение позволяет определять отдельные генотипы золотистого стафилококка одновременно в одной мультиплексной реакции, а также исключить предварительный этап идентификации микроорганизма. 1 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения высокотитражной антимикробной сыворотки. Способ включает использование штамма S.aureus № 1991, характеризующийся иммуногенностью ED₅₀ =(50-100)×10⁶ микробных клеток, слабой вирулентностью LD₅₀=(0,5-2,0)×10⁹ микробных клеток. Его инактивацию и высушивание диметилкетоном путем 2-кратной обработки 3 объемами диметилкетона. Далее проводят иммунизацию животных: двукратно подкожно и двукратно внутривенно. В заключение осуществляют выделение сыворотки. Изобретение может быть использовано в медицине для оценки антигенной активности противостафилококковых вакцин. 3 табл.

Изобретение относится к области биохимии и клинической микробиологии. Проводят выращивание золотистого стафилококка Staphylococcus aureus на питательной среде, содержащей желточно-солевой агар. На стадии подготовки к анализу в питательную среду вводят стимуляторы роста Staphylococcus aureus в виде водных растворов в концентрациях 10^-4-10^-6 вес.%. В качестве стимуляторов роста используют следующие соединения: трис(2-гидроксиэтил)аммоний 4-хлорфенил-сульфанилацетат или трис(2-гидроксиэтил)аммоний 2-хлорфенилоксиацетат или трис(2-гидроксиэтил)аммоний 2-метил-4-хлорфенилоксиацетат или трис(2-гидроксиэтил)аммоний 1-бензилиндол-3-ил-сульфонилацетат. Изобретение позволяет ускорить выращивание золотистого стафилококка для диагностики инфекций, сокращая время выращивания с 48 до 6-9 часов по сравнению с контролем на стандартной питательной среде (ЖСА). 2 табл., 7 пр.

Изобретение относится к урологии и может быть использовано, в частности, для определения роли микроорганизмов в развитии инфекционных заболеваний урогенитальной сферы. Изобретение раскрывает способ определения способности к персистенции Staphylococcus aureus, путем определения биологических свойств, в частности, способности синтезировать иммунологически сходные с лептином и/или растворимым рецептором лептина веществ в суточной жидкой культуре стафилококков. При наличии синтеза указанных веществ определяют способность стафилококка к персистенции. Использование способа по изобретению позволяет повысить чувствительность, точность определения и ускорить определение. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к микробиологии и клинической лабораторной диагностике. Способ количественного определения антиоксидантной активности микроорганизмов заключается в том, что оценивается антиоксидантная активность бульонной культуры микроорганизмов или взвеси клеток микроорганизмов, выращенных на твердой питательной среде. В качестве окисляемой среды используется раствор лецитина, а в качестве инициаторов перекисного окисления: клетки Staphylococcus aureus, аскорбиновая кислота, ионы железа (II) (в виде водного раствора железа сульфата). Определение антиоксидантной активности по способности ингибировать перекисное окисление липидов проводят добавлением концентрированной ортофосфорной кислоты, и 1% раствора 2-тиобарбитуровой кислоты в диметилсульфоксиде и этаноле (1:1). Окрашенный комплекс экстрагируют н-бутанолом и, отделив бутанольную фазу, спектрофотометрируют, учитывая единицы пропускания при 550 нм, где в качестве кюветы сравнения используют кювету с н-бутанолом. Параллельно приготавливают два контроля, где в пробирки, содержащие субстрат окисления - лецитин, добавлено вещество с известной антиоксидантной активностью, а в другой инициированное перекисное окисление осуществляется без добавления антиоксиданта. Полученные значения антиоксидантного статуса рассчитываются в единицах антиоксидантной активности. 1 пр.

На перевиваемых клетках культуры ткани клеток почки зеленой африканской мартышки BGM определяют индекс адгезивной активности (А), индекс инвазивной активности (I) и индекс токсической активности (Т) патогенных бактерий. Вносят в культуральный монослой клеток BGM дозу, содержащую 10⁷ колоний бактериальных клеток, и выдерживают при 37°С в течение 24 ч. Промывают клетки монослоя физиологическим раствором рН=7,2 в количестве 10 мл 8 раз. Определяют индекс (А) по формуле, предварительно подсчитав визуально в камере Горяева живые и мертвые клетки, адгезированные бактериальным ростом и окрашенные 0,1% раствором трипанового синего. Определяют индекс (I) по формуле, предварительно питательную среду во флаконах заменяют средой, содержащей антибиотик в концентрации 50 мкг/мл и инкубируют в термостате 1 ч при 37°С. Отмывают клетки BGM от бактерий 8 раз физиологическим раствором по 10 мл, лизируют их 0,1% Triton X-100. Из полученной суспензии делают высевы по 0,1 мл с учетом необходимых разведений на чашки со средой Эндо. Инкубируют в течение 24 ч в термостате при 37°С и подсчитывают число выросших бактериальных клеток. Определяют индекс (Т) по формуле, предварительно 1 сут. инкубируют бактерии в монослое клеток BGM. Центрифугируют и фильтруют суспензию через мембранные фильтры с диаметром пор 0,22 мкм. Помещают полученный субстрат в чистый монослой перевиваемых клеток и через 1 сут. подсчитывают количество живых и мертвых клеток BGM. Изобретение позволяет определить степень эпидемической опасности патогенных бактерий, выделенных из воды: она считается высокой при значениях: А>4,00, I>50%, Т>4,00. 3 табл., 4 пр.

Способ индикации госпитальных штаммов Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Enterobacter cloacae предусматривает идентификацию выделенной чистой культуры бактерий, посев идентифицированных бактерий на кровяной мясопептонный агар, смыв накопленных бактерий S.aureus - через 12 часов, a E.cloacae и P.aeruginosa - через 8 часов раствором хлорида натрия. Определяют электрическое сопротивление взвеси бактерий в растворе хлорида натрия при концентрации бактерий в количестве 500000 в 1 мл в поле постоянного электрического тока при напряжении на электродах 2,8 вольт. На основании показателей электрического сопротивления для бактерий P.aeruginosa от 579 до 674 кОм, S.aureus 545-642 кОм, E.cloacae 452-584 кОм и эпидемиологических данных о регистрации 5 и более случаев заболеваний от одного источника инфекции, выделенный возбудитель инфекции относят к госпитальным штаммам. Изобретение позволяет сократить время проведения лабораторных исследований и выявления циркуляции госпитальных штаммов в больничных учреждениях. При использовании изобретения не требуется осуществлять внутривидовую идентификацию бактерий. 2 табл.

Изобретение относится к иммунологии. Предложен способ индикации госпитальных штаммов Staphylococcus aureus, характеризующийся тем, что исследуемый Staphylococcus aureus культивируют 12 часов, доводят концентрацию микробной взвеси Staphylococcus aureus до рабочей концентрации 1 млрд КОЕ/мл. Приготовленную микробную взвесь в количестве 0,1 мл вносят в пробирку с 0,3 мл плазмы, разбавленной 1:5 изотоническим раствором хлорида натрия. Относят штамм Staphylococcus aureus к госпитальному штамму по коагуляции плазмы в сроки до 50 мин. Использование изобретения позволяет сократить время проведения исследований и материальные средства, а также обеспечивает 100% точность исследований. 1 табл.