Микроорганизмы: ..Staphylococcus – C12R 1/44

Изобретение относится к области биохимии и микробиологии и касается биологически активного пептида. Охарактеризованный пептид хоминин KLP-1, продуцируется штаммом Staphylococcus hominis KLP-1 и проявляет антибактериальную активность против представителей следующих родов бактерий: Arthrobacter, Bacillus, Corynebacterium, Enterococcus, Lactobacillus, Micrococcus, Mycobacterium, Propionibacterium, Rhodococcus, Staphylococcus, Streptococcus, имеет молекулярную массу 2985 Да, чувствителен к протеазам, обладает высокой термостабильностью и имеет следующий аминокислотный: 51,1% катионных и 31,7% гидрофобных аминокислот, а также специфическую аминокислоту - лантионин. Пептид характеризуется высокой устойчивостью к нагреванию, щелочным условиям, а так же ферментам ДНК-азе и РНК-азе. Антибактериальная активность пептида значительно снижается или исчезает в кислой среде и при действии ферментов пепсина, трипсина и протеиназы К. Представленное изобретение может найти применение в биотехнологии, медицине, ветеринарии пищевой промышленности, а также в научных исследованиях. 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способам выделения чистой культуры микроорганизмов из патологического биоматериала, и может быть использовано в ветеринарной медицине и животноводстве. Способ предусматривает измельчение патологического биоматериала с последующей его гомогенизацией и приготовлением из него суспензии. В полученную суспензию вносят 3-5% лимонной кислоты из расчета ее содержания в суспензии. Выдерживают в течение 20-30 минут при 10-20°C, добавляют 3-4% янтарной кислоты и выдерживают в течение 20-30 минут при 10-20°C с последующей нейтрализацией суспензии 5-10% раствором аммиака и доведением pH до 7,5-7,6. Нейтрализованную суспензию отстаивают в течение 20-30 минут, декантируют надосадочную жидкость и содержимое осадка высевают на питательную среду, содержащую в 1 л дистиллированной воды 8,0 г лимонной кислоты, 2,0 г цитрата аммония, 3,0 г янтарной кислоты, 2,0 г аспарагина или глицина, 5,0 г фосфорнокислого калия двухзамещенного, 0,5 г сернокислого магния, 0,3 г сернокислого цинка, 3,0 г фосфорнокислого натрия двухзамещенного, 5,0-6,0 г хлористого натрия, 0,1 г сернокислого железа и 40-50 мл глицерина при pH 7,5-7,6. Для получения плотной агаровой питательной среды в жидкую среду, разведенную дистиллированной водой 1:1, добавляют 2,5 г агара на 100 мл жидкой среды и доводят содержание хлористого натрия до 5-6%. Изобретение позволяет сократить сроки выделения стафилококков. 1 табл., 1 пр.

Штамм Staphylococcus hominis KLP-1 выделен из клинического материала при проведении скрининга штаммов коагулазонегативных стафилококков на способность к продукции низкомолекулярных антибактериальных пептидов. Штамм депонирован в коллекции ГНИИСКМПБ им. Тарасевича под номером 284. При культивировании на жидкой питательной среде штамм характеризуется повышенным выходом низкомолекулярных пептидных антибактериальных соединений, ингибирующих рост грамположительных бактерий. Антибактериальное действие проявляется в отношении бактерий следующих родов: Arthrobacter, Bacillus, Enterococcus, Micrococcus, Mycobacterium, Rhodococcus, Staphylococcus, Streptococcus. Выход низкомолекулярных антибактериальных пептидов составляет 1024000 ЕА на 1 л среды. 1 ил., 1 табл.

Изобретение может быть использовано для определения аллергенной активности, контроля, стандартизации стафилококкового аллергена, изучения процессов аллергических реакций. Способ создания биологической модели аллергии к стафилококковому аллергену включает сенсибилизацию морских свинок суспензией стафилококков 5,0-10,0 млрд/мл, инактивированных автоклавированием с последующей детоксикацией 0,2% раствором формалина и сорбированных на гидроксиде алюминия 3-5 мг/мл. Полученную указанным способом суспензию однократного подкожно вводят морским свинкам в объеме 0,5-1,0 мл на одно животное. Аллергическую реакцию вызывают внутрикожным введением 0,1 мл стафилококкового аллергена в разведении 1:10, 1:20 и 1:40. Учет результатов реакции проводят по гиперемии кожи через 24 часа. Изобретение обеспечивает создание у лабораторных животных стабильно выраженной аллергии.

Изобретение предназначено для количественной оценки адгезивных свойств стафилококков, выделенных от человека и объектов окружающей среды, при его бактериологической идентификации и для характеристики его вирулентных свойств in vitro по уровню адгезии к биополимерным молекулам. Исследуемую культуру стафилококка инкубируют в лунках полистиролового планшета с иммобилизованными гемопротеинами (миоглобин, гемоглобин) в питательной среде 199 в течение 1 часа, далее удаляют неадгезированные бактерии трехкратной отмывкой средой 199 с твин-20 и определяют количество адгезированных стафилококков путем учета выросших клеток в питательной среде по оптической плотности среды или путем подсчета клеток, высеянных на плотную питательную среду из серии десятикратных разведений, или путем определения активности бактериальных ферментов у адгезированных штаммов. Способ характеризуется хорошей воспроизводимостью результатов, высокой чувствительностью, удобством проведения реакции непосредственно в лунках 96-луночного полистиролового планшета и возможностью проведения экспресс-оценки адгезивной способности штаммов. 3 табл.

Изобретение касается создания безопасного безальбумозного стафилококкового аллергена. Способ получения стафилококкового аллергена включает выращивание стафилококков на синтетической среде, содержащей в г на 1 л дистиллированной воды: лимонной кислоты - 8,0, аспарагина - 1,0, хлористого натрия - 7,0, сернокислого цинка - 0,2, сернокислого магния - 0,4, сернокислого железа - 0,2, фосфорнокислого калия 2-замещенного - 3,0, глицерина - 40 мл с последующим установлением реакции среды до 7,7±0,1 - 5-10% раствором аммиака перед автоклавированием в 2-литровых биобутылях с объемом среды, равным 1 л, в течение 10-12 суток до 10,0±2,0 млрд/мл взвеси микроорганизмов. Далее культуральную жидкость стерилизуют при 1,0 атм в течение 30 минут, отделяют фильтрацией культуральную жидкость от бактериальной массы. Способ предусматривает использование растворимых аллергеноактивных соединений без использования трихлоруксусной кислоты. Полученный препарат используется в качестве нативного аллергена с содержанием до 1,0±0,2 мг/мл протеина для внутрикожной аллергической диагностики стафилококкоза животных.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной инженерии, и представляет собой способ конструирования рекомбинантного штамма Staphylococcus carnosus - продуцента фермента нитритредуктазы. Данный способ предусматривает получение промежуточного штамма Staphylococcus carnosus thyA^- с помощью триметоприма и замещение в нем промоторной части оперона, отвечающего за восстановление нитритов при дыхании. Изобретение позволяет получить новый штамм, пригодный для снижения концентрации остаточного нитрита в пищевых продуктах. 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологической лабораторной диагностике инфекционных заболеваний. Способ предусматривает внесение 12-часовой культуры стафилококка в плазму, разведенную изотоническим раствором хлорида натрия. Полученную микробную взвесь инкубируют при температуре 37°С в течение 5 часов. Регистрируют электрическое сопротивление микробной взвеси с 3-го до 5-го часа инкубирования. Причем при показателях сопротивления раствора 64-84 кОм делают заключение о патогенности стафилококка по наличию плазмокоагулирующей активности. Изобретение позволяет сократить сроки проведения исследований и повысить точность анализа.

Изобретение относится к области биотехнологии и микробиологии и предназначено для выращивания стафилококков с целью получения антибактериальных пептидных соединений. Питательная среда содержит компоненты в следующем соотношении, г на 1 л: казаминовые кислоты - 10-12 г, дрожжевой экстракт - 3-5 г, калий фосфористокислый двузамещенный - 7-8 г, магний сернокислый - 0,1-0,2 г, натрий лимоннокислый 2-водный - 0,5-0,6 г, аммоний сернокислый - 2-2,5 г, глюкоза - 1-2. Применение жидкой питательной среды обеспечивает интенсивный рост стафилококков с первых часов культивирования и позволяет достигнуть максимального выхода антибактериального соединения через 8 часов роста культуры. 1 ил., 2 табл.