Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ...тромбин – C12N 9/74

Способ промышленного получения тромбина предусматривает подготовку сырья, получение комплекса белков, содержащих протромбин, активацию протромбина и превращение его в тромбин, очистку диализом и лиофильную сушку раствора тромбина. При этом в сырье вносят раствор гепарина из расчета 50-800 ME на 1 л сырья. При использовании в качестве сырья плазмы крови человека или фракции II+III по Кону плазмы крови человека после начала активации протромбина суспензию тромбина инкубируют при 14-18 ч, добавляют полиэтиленгликоль 6000 в количестве 0,75-1,25% от массы суспензии тромбина, доводят рН суспензии тромбина до величины 5,25-5,75 добавлением 10% или 20% раствора уксусной кислоты. При использовании в качестве сырья плазмы крови крупного рогатого скота после начала активации протромбина через 10 минут каждые 15 минут в течение 40-60 минут добавляют 200 мл дистиллированной воды, содержащей 2 мл 20%-раствора уксусной кислоты, добавляют 0,75-1,25% полиэтиленгликоля 6000 от массы суспензии, доводят рН суспензии тромбина до величины 5,25-5,75 добавлением 10% или 20% раствором уксусной кислоты. Изобретение обеспечивает повышение выхода тромбина и улучшение стабильности тромбина при хранении. Выход тромбина составляет 40-60 тыс. NIH единиц активности тромбина из 1 л плазмы крови. 2 н.з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Описано производное тромбина, включающее цепь А и цепь В, где цепь В имеет аминокислотную последовательность, в которой аминокислоты активного центра серии в положении 205 и гистидин в положении 43 в аминокислотной последовательности цепи В тромбина замещены и где указанное производное тромбина разлагает субстрат тромбина в количестве 10% или менее при взаимодействии с субстратом тромбина в 50 мМ Трис-НСl (рН 7,4), содержащем 0,1 М NaCl, при температуре 37°С в течение 3 ч, и указанное производное тромбина сохраняет способность связываться с С-концевым пептидом гирудина, иммобилизованным в геле. Раскрыта фармацевтическая композиция, содержащая описанное производное тромбина. 4 н. и 50 з.п. ф-лы, 48 ил., 2 табл.