Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ....получаемые из животной ткани, например реннин – C12N 9/64

Проводят подготовку исходного сырья, его гомогенизацию, внесение экстрагента, который представляет собой подкисленный соляной кислотой до pH 1.5-2,0 водный раствор с добавлением 7,5-10,0% сульфата аммония и экстракцию. Отстаивают полученную смесь до разделения ее на жидкую фазу и осадок. Осуществляют выделение молокосвертывающего фермента и его последующую обработку. Изобретение позволяет сократить время получения ферментного препарата, повысить его удельную молокосвертывающую активность и чистоту, а также снизить его потери в условиях промышленного производства. 1 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению слитых с альбумином полипептидов фактора VII (FVII) и фактора VIIa (FVIIa), и может быть использовано в медицине. Рекомбинантным путем получают полипептид, представляющий собой полипептид FVII или FVIIa, слитый с альбумином через глицин-сериновый пептидный линкер особой конструкции, отделяющий часть, относящуюся к FVII или FVIIa, от альбуминовой части, при этом полипептид FVII или FVIIa расположен на N-конце слитого белка. Слитый полипептид или векторную конструкцию, содержащую кодирующую его нуклеиновую кислоту, используют в качестве лекарственного средства для лечения или предотвращения нарушений свертываемости крови. Изобретение позволяет получить белок с биологической активностью FVII или FVIIa и увеличенным функциональным временем полужизни в плазме in vivo по сравнению с неслитыми FVII или FVIIa. 8 н. и 4 з.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл., 6 пр.

Изобретение относится к производству сычужного фермента из сычугов телят, ягнят и козлят-молочников и может быть использовано в молочной промышленности при производстве молокосвертывающих ферментных препаратов, а также в ветеринарии, микробиологической промышленности и медицине. Приготавливают солевой экстракт сычугов и проводят экстрагирование сычужного фермента раствором хлористого натрия при температуре 35-40°С в течение 3-3,5 ч, и медленном постоянном перемешивании без дополнительного доведения pH. Экстракт отделяют от сырья и проводят активацию сычужного фермента в экстракте при pH 4,6-4,7 путем выдержки его в течение 8-16 ч при температуре 25-35°С. Активированный экстракт обрабатывают перлитом и затем фильтруют под давлением 0,015-0,02 МПа при температуре 20-25°С. Полученный фермент стабилизируют путем внесения в фильтрат сухого хлористого натрия до содержания его в готовом препарате 17-18%, доведения pH до 5,3-7,0 1 н раствором гидроокиси натрия и внесения бензоата натрия до содержания его в готовом препарате 0,1-0,5%. Изобретение обеспечивает оптимизацию технологических режимов процесса получения сычужного фермента для достижения максимальной его активности и чистоты, упрощение, удешевление и ускорение технологического процесса (за счет сокращения его длительности и энергоемкости). 1 з.п. ф-лы, 2 ил.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и представляет собой эукариотическую клетку-хозяина для продуцирования гамма-карбоксилированного белка, содержащую вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую белок, требующий гамма-карбоксилирования, и ассоциированные последовательности контроля экспрессии, и вектор экспрессии, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую витамин К-эпоксидоредуктазу и ассоциированные последовательности контроля экспрессии. При этом клетка-хозяин дополнительно содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую -глутамилкарбоксилазу и ассоциированные последовательности контроля экспрессии. Данное изобретение относится также к способу получения гамма-карбоксилированного белка и способу получения фармацевтической композиции, пригодной для индукции свертывания крови или стимуляции повышенного или пониженного свертывания крови, на основе полученного гамма-карбоксилированного белка. Изобретение позволяет получать гамма-карбоксилированный белок с высокой степенью эффективности. 3 н. и 17 з.п. ф-лы, 2 ил., 9 табл.

Способ предусматривает образование в растворе Рингера, содержащем азид натрия и дитиотриэтол, гомогената биомассы кишечников и голов личинок жуков вида Dermestes frischii или Dermestes maculates. Объемное соотношение биомассы и раствора Рингера составляет 1: (0,5-5,0). Затем осуществляют отделение супернатанта путем декантирования гомогената. Проводят гель-фильтрацию супернатанта на сефадексе G-150 с сорбцией и элюцией ферментативного комплексного препарата. Полученный препарат подвергают обессоливанию и концентрированию, после этого осуществляют ионообменную хроматографию с сорбцией и элюцией. Затем проводят обессоливание элюированного препарата и концентрирование целевого продукта. При этом каждое обессоливание проводят с помощью колоночной хроматографии на сефадексе G-25. Каждое концентрирование ведут путем ультрафильтрации на мембранах с проницаемостью от 5 тысяч до 50 тысяч дальтон. Способ позволяет получить ферментативный препарат с высоким выходом. Выход полученного препарата составляет 70% при измерении активности по эффективности гидролиза Z-Ala-Ala-Pro-pNA и 85% при измерении активности по Мандлу.

Изобретение может быть использовано в биотехнологии. Проводят гомогенизацию сырья в 0,1 М ацетате аммония, содержащем 0,1-1 мМ ацетата кальция при рН 6,4-7,0. Гомогенат центрифугируют, к супернатанту добавляют сульфат аммония до 60-70%-ного насыщения. Полученный комплекс ферментов отделяют центрифугированием, растворяют в дистиллированной воде с добавлением 0,1-1 мМ ацетата кальция до получения истинного раствора. Затем очищают, концентрируют и обессоливают ферменты на поливолоконной мембране с размером пор 100 кДа. Промывают супернатант, содержащий ингибитор коллагеназы, дистиллированной водой, прогревают до 60-100°С, отделяют осадок центрифугированием. Полученный суммарный препарат ингибитора коллагеназы подвергают дополнительному растворению в 0,1 М ацетата аммония с рН 6,0-6,4, отделяют осадок центрифугированием и добавляют к супернатанту сульфат аммония 35-45% насыщения. Осадок отделяют и растворяют в 0,01 М трисовом буфере с рН 7,0-8,0. Раствор прогревают при 70-90°С, подвергают центрифугированию. Полученную сульфат-пасту растворяют в 0,05 М Трис-буфере с рН 8,0 с добавлением 0,5 М NaCl. Фракционируют гель-фильтрацией на Сефадексе G-100 с последующим концентрированием активных фракций ультрафильтрацией на мембране с размером пор 30-50 кДа. Супернатант, содержащий целевой продукт, промывают и лиофильно высушивают. Изобретение позволяет расширить ассортимент препаратов, обладающих противосвертывающим действием. 2 з.п. ф-лы, 5 ил, 4 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению гамма-карбоксилированного белка, и может быть использовано в медицине. Витамин К-зависимый белок получают путем выделения после культивирования эукариотической клетки, содержащей экспрессирующий вектор, который содержит молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую витамин К-зависимый белок и ассоциированные последовательности, контролирующие экспрессию. Ассоциированные последовательности содержат первый промотор и молекулу нуклеиновой кислоты, кодирующую гамма-глутамилкарбоксилазу, и второй промотор. В качестве первого промотора используют предранний промотор цитомегаловируса человека (hCMV), а в качестве второго промотора - предранний промотор SV40. При этом соотношение экспрессии витамин К-зависимого белка и гамма-глутамилкарбоксилазы составляет от 10:1 до 250:1. Изобретение позволяет получить гамма-карбоксилированный витамин К-зависимый белок в промышленных масштабах. 4 н. и 25 з.п. ф-лы, 3 ил., 6 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к выделению сериновых протеаз, содержащих GLA-остаток, и может быть использовано в медицине. Очищенную сериновую протеазу, содержащую GLA-остаток, получают путем культивирования клетки-хозяина млекопитающего, экспрессирующей указанную сериновую протеазу в культуральной среде, сбора культуральной среды, содержащей указанную сериновую протеазу, и очистки указанной сериновой протеазы от культуральной среды при рН от 4,5 до 6,9 или от 8,6 до 10 и концентрации свободных ионов кальция либо выше 20 мМ, либо ниже 1 мМ. Изобретение позволяет получить стабильный очищенный полипептид фактора VII, IX или X. 3 н. и 39 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению полипептидов фактора VII, и может быть использовано в медицине. Получают конъюгат полипептида фактора VII, включающий полипептид фактора VII с аспарагинсвязанными и/или серинсвязанными олигосахаридными цепями, которые включают фрагменты сиаловой кислоты или фрагменты галактозы. При этом по меньшей мере одна из олигосахаридных цепей ковалентно связана с по меньшей мере одной полимерной группой, представляющей собой полиэтиленгликоль, имеющий молекулярную массу в диапазоне приблизительно 300-100000 Да. Полученный конъюгат фактора VII используют в составе фармацевтической композиции для лечения фактор VII-реактивного синдрома. Изобретение позволяет получить конъюгат фактора VII с ПЭГ с заданным характером гликозилирования для получения гомогенно модифицированного препарата. 4 н. и 18 з.п. ф-лы, 1 ил.

Изобретение относится к биохимии и может быть использовано в биотехнологии при получении генно-инженерных продуктов. Для выделения карбоксипептидазы В из поджелудочной железы свиньи экстракцию, осаждение сульфатом аммония и очистку проводят в буферных растворах, содержащих 0,001-0,005 М хлорида цинка. При этом очистку проводят двукратной хроматографией на Q-сефарозе, а в процессе хроматографии используют элюцию 0,07-0,08 М NaCl в 0,005 М трис HCl буфере, рН 7,6. Изобретение обеспечивает упрощение способа получения карбоксипептидазы В при сохранении высокой удельной активности конечного препарата и стабильности карбоксипептидазы В.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой олигопептид, способный блокировать инвазию и метастазирование раковых клеток, содержащий олигопептидную последовательность (приведена в заявке) или ее фрагмент, также представляет собой фармацевтическую композицию для предупреждения или лечения дегенеративных заболеваний, или патологических состояний, обусловленных разрушением внеклеточного матрикса (ЕСМ) металлопротеиназами матрикса (ММР), диагностическую композицию для выявления дегенеративных заболеваний или патологических состояний, обусловленных разрушением внеклеточного матрикса (ЕСМ) металлопротеиназами матрикса (ММР). Также изобретение представляет собой вакцину для лечения или предупреждения дегенеративных заболеваний, или патологических состояний, обусловленных разрушением внеклеточного матрикса (ЕСМ) металлопротеиназами матрикса (ММР). Данное изобретение обеспечивает олигопептиды, которые могут эффективно блокировать инвазию и метастазирование раковых клеток и которые полезны для предупреждения или лечения дегенеративных заболеваний или патологических состояний, обусловленных разрушением внеклеточного матрикса металлопротеиназами матрикса. 5 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области белковой и генной инженерии и может быть использовано в фармацевтической промышленности. Предложены новые варианты фактора VII свертывания крови с повышенной протеолитической активностью, которая является результатом замены аминокислотного остатка, занимающего в природной последовательности положение, соответствующее Met 298 фактора VII человека, остатком глутамина. Варианты фактора VII по изобретению могут включать дополнительные замены в некоторых других положениях протеазного домена и представлять многосайтовые мутантные формы, в частности [V158T/M298Q]-FVIIa, [V158D/M298Q]-FVIIa, [V158D/E296V/M298Q]-FVIIa и [V158D/E296V/M298Q/K337A]-FVIIa. Новые варианты фактора VII получены с помощью метода рекомбинантных ДНК, для реализации которого предложены кодирующие нуклеотидные последовательности, векторные конструкции и трансформированные клетки. Изобретение раскрывает возможность использования новых мутантных форм фактора VII для получения лекарственных препаратов с коагулянтной активностью. 7 н. и 13 з.п.ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Настоящее изобретение относится к области белковой и генетической инженерии и может быть использовано в медицине. Предложены варианты полипептида фактора коагуляции VII человека, которые характеризуются повышенной, по сравнению с природной формой фактора VIIa, коагулянтной активностью и при этом не нуждаются в индукции тканевым фактором для ее проявления. В структурном отношении новые варианты фактора VII представляют собой аминокислотную последовательность природного белка, содержащую замену L305 Val/Tyr/Ile, и одну или несколько замен из группы, включающей К337 Ala/Gly/Val/Ser//Thr/Asn/Gln/Asp/Glu; V158 Ser/Thr/Asn/Gln/Asp/Glu; E296 Arg/Lys/Val и М298 Lys/Arg/Gln/Asn. Описаны генетические конструкции и системы экспрессии для получения предложенных вариантов фактора VII с помощью технологии рекомбинантных ДНК, а также применение новых полипептидов в составе фармацевтических композиций, которые могут быть использованы в частности для лечения кровотечений и поддержания системы свертывания крови в норме. 9 н. и 22 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл.

Изобретение относится к области медицины и касается гликоформ фактора VII и к композициям, содержащим фактор VII, имеющим измененные конфигурации на основе аспарагинсвязанных олигосахаридных цепей. Изобретение также включает способ определения гликоформ полипептидов фактора VII, способ их получения, а также способ лечения заболеваний. Преимущество изобретения заключается в идентификации биологически активных форм рекомбинантного фактора VII. 20 н. и 33 з.п. ф-лы, 6 табл.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложены пептиды, которые происходят из проферментных форм матриксных металлопротеиназ и являются ингибиторами матриксных металлопротеиназ. Аминокислотная последовательность представлена в описании. Описана композиция для стимулирования развития здоровой кожи, содержащая терапевтически эффективное количество пептидов. Описаны перевязочный материала для ран, способ стимулирования развития здоровой кожи и лосьон для обработки кожи для уменьшения результатов воздействия старения и для стимулирования развития здоровой кожи и лечения ран на основе композиции. Раскрыто применение композиции для изготовления лекарственного средства, способствующего заживлению ран, предотвращению рубцевания, снижению образования морщин, уменьшению результатов воздействия старения или улучшения цвета кожи. Использование изобретения позволяет получить новые противовозрастные и ранозаживляющие агенты. 6 н. и 9 з.п. ф-лы, 24 ил., 6 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может найти применение в производстве медицинских препаратов - рибонуклеазы панкреатической, дезоксирибонуклеазы панкреатической, трипсина, а также холестеролэстеразы. Способ предусматривает измельчение поджелудочной железы крупного рогатого скота, ее гомогенизацию. Полученный гомогенат экстрагируют охлажденным этиловым спиртом при постоянном перемешивании. Центрифугируют. Проводят повторную экстракцию серной кислотой, содержащей сульфат магния, при постоянном перемешивании. Экстракт, содержащий целевые ферменты, отделяют от осадка центрифугированием. Балластные белки осаждают сульфатом аммония при 30-35%-ном насыщении и удаляют центрифугированием из супернатанта. Холестеролэстеразу осаждают сульфатом аммония при 45-50% насыщении экстракта, трипсин осаждают при 60-65% насыщении, дезоксирибонуклеазу (ДНК-аза) осаждают при 80-85% насыщении. Полученный при осаждении ДНК-азы супернатант, содержащий рибонуклеазу, подвергают ультрафильтрации и осаждению сернокислым аммонием при 95-98% насыщении с последующим диализом и хроматографической очисткой на колонке с ДЭАЭ-целлюлозой. Изобретение позволяет получать четыре фермента из поджелудочной железы в рамках единой технологической схемы, увеличить выход рибонуклеазы панкреатической, увеличить ее удельную активность. 4 з.п. ф-лы, 8 табл., 6 ил.

Изобретение может быть использовано в масложировой промышленности для извлечения масла из маслосодержащего сырья. Способ включает измельчение маслосодержащего сырья, влаготепловую обработку, суспензирование в водной среде, обработку ферментативным препаратом с протеолитической активностью в водной среде и центрифугирование полученного гидролизата с разделением водной, масляной и гидролизованной твердой фракции. Сырье подвергают сушке до влажности 6%, обрушиванию, разделению рушанки, измельчению ядра семян, влаготепловую обработку проводят с нагреванием до 105°C, подготовленное сырье-мезгу охлаждают до 50°С, смешивают с водой в соотношении вода: мезга 4:1, к смеси добавляют комплексный ферментный препарат в количестве 1% массы мезги. В качестве комплексного ферментного препарата используют фермент из гепатопанкреаса краба, ферментативный гидролиз проводят при постоянном перемешивании в течение 5 часов при температуре 50°С, после выделения центрифугированием масляной фракции проводят инактивацию фермента нагревом выделенного масла до 80°C и вторичное центрифугирование масла с целью очистки масла от инактивированного фермента. Изобретение позволяет увеличить выход масла и максимально сохранить все полезные компоненты сырья.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению ингибиторов коллагеназы, и может быть использовано в ветеринарии, пищевой промышленности, а также для исследовательских целей. Способ предусматривает гомогенизацию гепатопанкреаса промысловых видов краба в 0,1 М ацетате аммония, содержащем 0,1-1 мМ ацетата кальция при рН 6,4-7,0. Гомогенат центрифугируют. К полученному супернатанту добавляют сульфат аммония до 60-70%-ного насыщения и центрифугируют. Полученный комплекс ферментов растворяют в дистиллированной воде с добавлением 0,1-1 мМ ацетата кальция до получения истинного раствора с последующей его очисткой и концентрированием. Обессоливают ферменты на поливолоконной мембране с размером пор 100 кДа. Супернатант, содержащий ингибитор коллагеназы, промывают дистиллированной водой. Прогревают до 60-100°С и отделяют осадок центрифугированием. Раствор ферментов лиофильно высушивают. 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к получению ферментного препарата, и может быть использовано в производстве пищевых продуктов из слабосозревающих объектов промысла Волго-Каспийского района. Способ предусматривает измельчение сырья. Измельченное сырье подвергают автолизу в присутствии воды при гидромодуле 1:0,5 при pH 6,2±0,2 в течение 1-5 часов. После проведения автолиза жидкий автолизат, содержащий протеолитические ферменты, отделяют центрифугированием и подвергают очистке изопропиловым спиртом при гидромодуле 3:1 в течение 30-40 мин. Полученный в результате очистки жидкий ферментный препарат высушивают при температуре 150-180°С в течение 5-8 с. Изобретение позволяет повысить выход протеолитического препарата и повысить его активность. 1 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в парфюмерно-косметической промышленности, кожевенном производстве, меховом производстве, химико-фармацевтической промышленности. Способ предусматривает выделение фермента из замороженного гепатопанкреаса краба посредством автолиза. Автолиз осуществляют в растворе деионизированной воды температурой не выше 21°С, при соотношении гепатопанкреас краба : деионизированная вода 1:4 соответственно и периодическом перемешивании в течение 14-15 ч. Полученную смесь фильтруют при температуре не выше 21°С под давлением через сито с размером ячей 5 мм, затем через фильтрующие устройства с размером пор 1,5 и 0,1 мм соответственно. К полученному фильтрату сначала добавляют раствор пищевой соды и перемешивают 5 мин. Затем к полученной смеси добавляют раствор аскорбата хитозана, температурой не выше 21°С, при общем соотношении частей фильтрат : раствор пищевой соды : раствор аскорбата хитозана 1,25:0,15:1 соответственно. Смесь перемешивают в течение 10-15 мин. Выдерживают в течение 1,5 ч до расслоения на белковую и липидную фракции. Белковую фракцию направляют на последовательную микрофильтрацию, затем ультрафильтрацию с охлаждением фильтрата до 12°С. Ультрафильтрацию проводят в замкнутом цикле при подаче деионизированной воды и поддержании соотношения белкового раствора и деионизированной воды 2:1. Изобретение позволяет упростить процесс получения ферментного препарата, дает возможность его легко автоматизировать, повысить экологичность процесса. 1 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к полиферментным препаратам из морского животного сырья и способам их получения и может найти применение в биотехнологии, медицине, косметологии, ветеринарии, сельском хозяйстве, в научных исследованиях и производстве биохимических реактивов. Препарат получают путем гомогенизации гепатопанкреаса промысловых видов крабов в буферных растворах, удаления твердых примесей центрифугированием гомогената, флокуляции липидов хитозаном. Причем гомогенат дополнительно очищают центрифугированием. Ультрафильтрацию раствора ферментного препарата ведут на мембране, пропускающей вещества с молекулярной массой 15 кДа и ниже, а затем на мембране, задерживающей вещества с молекулярной массой 50 кДа и выше. Раствор, содержащий ферментативные активности, лиофилизируют. В состав полиферментного препарата входят коллагенолитические и металлозависимые протеиназы с молекулярной массой меньше 30 кДа, рибонуклеазы, дезоксирибонуклеазы, фосфодиэстеразы, фосфатазы, амилазы, липазы и -глюканазы. Изобретение обеспечивает расширение арсенала полиферментных препаратов, увеличение выхода ферментного препарата за счет увеличения количества типов ферментов, входящих в полиферментный комплекс (протеазы, нуклеазы, гликозидазы и липазы), повышения уровня активности гидролаз, расширение спектра возможного использования полиферментного препарата в различных отраслях промышленности. 2 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложены белки и полинуклеотиды, которые стимулируют ферментативное расщепление и высвобождение рецепторов TNF. Также предложены способы идентификации дополнительных соединений, которые влияют на выделение рецептора TNF из клеток. В качестве активного ингредиента в фармацевтической композиции продукты данного изобретения увеличивают или уменьшают трансдукцию сигнала TNF, ослабляя тем самым патологию заболевания. 16 с. и 11 з.п. ф-лы, 5 ил., 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и направлено на получение высокоочищенного и высокоактивного ферментного препарата коллагеназы, который может быть использован в медицине, ветеринарии, биохимии и пищевой промышленности, а также для исследовательских целей. Способ получения препарата коллагеназы включает гомогенизацию гепатопанкреаса промысловых видов крабов в буферных водных растворах, выделение раствора коллагеназы, очистку его последовательной 2-х стадийной ультрафильтрацией на мембранах, отсекающих примесные вещества, и лиофильную сушку препарата. Ультрафильтрацию проводят на поливолоконных мембранах с размером пор 15 кДа, концентрат, полученный на 1-ой стадии ультрафильтрации, разбавляют водой в соотношении 1:5-10, а концентрат, полученный на 2-ой стадии ультрафильтрации, дополнительно подвергают последовательно микрофильтрации на мембранах с размером пор 100 кДа и ультрафильтрации на мембранах с размером пор 15 кДа. Гомогенизацию гепатопанкреаса промысловых видов крабов ведут в ацетат-аммонийном буфере, содержащем ацетат кальция при рН 6,4-6,7, с последующим осаждением коллагенолитических ферментов сульфатом аммония 60-70% насыщения. Изобретение обеспечивает повышение суммарной коллагенолитической активности препарата, удельной активности и чистоты препарата. 1 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к биотехнологии. Способ получения таурина предусматривает измельчение биологического сырья, его обработку и выделение таурина. В качестве сырья используют отходы мясоперерабатывающей промышленности, а обработку проводят раствором гидроксида натрия. Полученный раствор последовательно обрабатывают протосубтилином, гомогенизированной биомассой поджелудочной железы и печени крупного рогатого скота. Выделение таурина из гидролизата проводят сорбцией на анионите АВ-17-2 с осаждением продукта 10-ти кратным гидромодулем этилового спирта с дальнейшей очисткой. Способ позволяет повысить выход таурина при использовании непищевого сырья.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к способу активации протеолитических ферментов поджелудочной железы убойных животных. Данное изобретение может быть использовано для получения белковых гидролизатов в мясопереработке. Предложенный способ позволяет увеличить ферментативную активность протеолитических ферментов поджелудочной железы, уменьшить время и увеличить производительность активации.

Изобретение относится к биотехнологии, может быть использовано в медицине, косметологии, дерматологии, биохимии и пищевой промышленности, а также для исследовательских целей. Способ получения препарата коллагеназы включает гомогенизацию исходного коллагенсодержащего сырья, отделение экстракта центрифугированием, хроматографическую очистку на ионообменном сорбенте и последующие элюцию активных ферментов, диализ элюата и лиофильную сушку препарата. В качестве исходного коллагенсодержащего сырья используют личинки жуков-кожеедов рода Dermestes, гомогенизацию проводят в растворе хлорида натрия с добавлением азида натрия при объемном соотношении биомассы и раствора 1:2-2,5, при этом хроматографическую очистку ведут на ДЕАЕ-сефарозе, уравновешенной MES-буфером с добавлением 0,005 М хлорида кальция, а элюцию – трисовым буфером, с добавлением хлорида натрия, хлорида кальция и этилового спирта. Изобретение обеспечивает высокий выход коллагеназы, повышает удельную активность в 5-10 раз, сокращает продолжительность процесса получения. 3 з.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к генной инженерии, и может быть использовано для модулирования действия лиганда FAS-R или TNF на клетки. Полипептид, способный связываться с MORT-1 и воздействовать на внутриклеточный процесс передачи сигнала, инициируемый связыванием FAS лиганда с его рецептором или связыванием TNF с р55-TNF-R, получают путем культивирования клеток, трансформированных вектором, содержащим ДНК, кодирующую полипептид. Модуляцию действия лиганда FAS-R или TNF на клетки или модуляцию индуцируемого MORT-1 действия осуществляют с помощью полипептида, связывающегося с MORT-1, или нуклеотидной последовательности, кодирующей его. Фармацевтическая композиция для модулирования действия лиганда FAS-R или TNF на клетки содержит полипептид, связывающийся с MORT-1. Изобретение позволяет разрабатывать средства для обработки опухолевых или ВИЧ-инфицированных клеток. 13 н. и 42 з.п. ф-лы, 37 ил., 4 табл.