Ферменты, например лигазы (6.), проферменты, композиции их, способы получения, активирования, ингибирования, разделения или очистки ферментов: ...действующие на бета-галактозо-гликозидные связи, например бета-галактозидаза – C12N 9/38

Настоящее изобретение относится к биохимии. Представлена -галактозидаза, имеющая трансгалактозилирующую активность, с последовательностью, представленной в описании, и кодирующая ее ДНК. Описан рекомбинантный вектор экспрессии, содержащий указанную ДНК, и клетка-хозяин, содержащая представленный вектор или ДНК. Предложено применение фермента, имеющего трансгалактозилирующую активность, для получения смеси олигосахаридов, состоящей из дисахаридов, трисахаридов, тетрасахаридов и пентасахарида. Описан способ получения указанного фермента, включающий культивирование клетки-хозяина в соответствующей культуральной среде в условиях, допускающих экспрессию фермента, и выделение его из культуры. Описан также способ получения смеси олигосахаридов, включающий контактирование данного фермента или клетки-хозяина с материалом, содержащим лактозу. Изобретение позволяет получить смесь олигосахаридов путем ферментативной трансформации лактозы. 11 н. и 6 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.

Изобретение относится к области биохимии. Представлена молекула ДНК, выделенная из Bifidobacterium bifidum, с последовательностью, приведенной в описании, и ее вырожденная производная, кодирующие -галактозидазу. Также представлен -галактозидазный фермент, имеющий последовательность, приведенную в описании. Описаны экспрессионный вектор, содержащий указанную ДНК, и бактериальная клетка-хозяин, содержащая данный вектор. Предложено применение фермента или клетки-хозяина для получения смеси олигосахаридов, которые могут быть использованы для приготовления пищевых продуктов, кормов для животных и медикаментов. Описан способ продуцирования фермента, включающий культивирование указанной клетки-хозяина в подходящей культуральной среде в условиях, допускающих экспрессию указанного фермента и выделение полученного фермента из культуры. Изобретение позволяет трансформировать лактозу в смесь олигосахаридов. 9 н. и 3 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 табл.

РЕКОМБИНАНТНАЯ БЕЛКОВАЯ КОНСТРУКЦИЯ ДСД-сп- -ГАЛ, ОБЛАДАЮЩАЯ АКТИВНОСТЬЮ ФЕРМЕНТА ТЕРМОСТАБИЛЬНОЙ -ГАЛАКТОЗИДАЗЫ (ЛАКТАЗЫ) И СПОСОБНОСТЬЮ АФФИННО СВЯЗЫВАТЬСЯ С ДЕКСТРАНОМ, ПЛАЗМИДНАЯ ДНК pGD-10, ОПРЕДЕЛЯЮЩАЯ БИОСИНТЕЗ ДСД-сп- -ГАЛ, И ШТАММ-ПРОДУЦЕНТ Escherichia coli DH5 /PGD-10

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано для получения белка ДСД-сп- -ГАЛ в клетках Е.соli. Конструируют рекомбинантную плазмидную ДНК pGD-10, кодирующую химерную белковую конструкцию ДСД-сп- -ГАЛ, содержащую декстрансвязывающий домен ДСД из микроорганизма Leuconostoc mesenteroides, который генно-инженерным путем объединен через глицин-сериновый спейсер с термостабильной бета-галактозидазой из термофильного микроорганизма Thermoanaerobacter ethanolicus. Для получения штамма Escherichia coli DH5 /pGD-10 - продуцента рекомбинантной белковой конструкции ДСД-сп- -ГАЛ, клетки родительского штамма Escherichia coli DH5 трансформируют рекомбинантной плазмидной ДНК pGD-10. Изобретение позволяет получить белок ДСД-сп- -ГАЛ, обладающий активностью фермента термостабильной бета-галактозидазы (лактазы) и способностью аффинно связываться с декстраном. 3 н.п. ф-лы, 4 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается варианта ДНК, связанного с гиполактазией взрослого типа. Сущность изобретения включает молекулу нуклеиновой кислоты, содержащей 5'-концевую часть гена кишечной лактазы-флоризингидролазы (LPH), принимающего участие в или служащего индикатором гиполактазии взрослого типа, при этом указанная молекула нуклеиновой кислоты выбрана из группы, состоящей из: (а) молекулы нуклеиновой кислоты, имеющей последовательность SEQ ID NO:1 или включающей ее, причем последовательность SEQ ID NO:1 и (b) молекулы нуклеиновой кислоты, имеющей последовательность SEQ ID NO:2 или включающей ее, (с) молекулы нуклеиновой кислоты, состоящей, по меньшей мере, из 20 нуклеотидов, комплементарная цепь которой гибридизуется в строгих условиях с молекулой нуклеиновой кислоты по пункту (а) или (b), причем указанный полинуклеотид/ молекула нуклеиновой кислоты содержит остаток цитозина в положении, соответствующем положению -13910 в 5'-направлении от гена LPH; и (d) молекулы нуклеиновой кислоты, состоящей, по меньшей мере, из 20 нуклеотидов, комплементарная цепь которой гибридизуется в строгих условиях с молекулой нуклеиновой кислоты по пункту (а) или (b), причем указанный полинуклеотид/ молекула нуклеиновой кислоты содержит остаток гуанина в положении, соответствующем положению -22018 в 5'-направлении от гена LPH. Настоящее изобретение также касается способов тестирования на наличие или предрасположенность к гиполактазии взрослого типа, которые основываются на анализе SNP, содержащегося в вышеуказанной молекуле нуклеиновой кислоты. 16 н. и 49 з.п. ф-лы, 8 табл., 9 ил.

Изобретение относится к области генной инженерии и биотехнологии и может быть использовано в пищевой промышленности. Предложен слитый белок бета-галактозидазы и целлюлозосвязывающего домена эндоглюканазы CelD из Anaerocellum thermophilium. Сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК pLACspCBD, обеспечивающая его экспрессию в клетках Е.coli. Получен штамм Е.coli - продуцент указанного слитого белка. Разработан способ получения данного слитого белка в иммобилизованном виде путем обработки целлюлозы гидролизатом указанного штамма Е.coli. Иммобилизованный слитый белок используют для ферментативного расщепления лактозы. Применение изобретения позволяет упростить переработку молочных продуктов. 5 н.п. ф-лы, 1 ил.