Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: ...гены, кодирующие микробные белки, например энтеротоксины – C12N 15/31

Группа изобретений относится к биотехнологии. Рекомбинантная плазмидная ДНК pPA-OPRF-ETA размером 8007 пар оснований кодирует синтез рекомбинантного белка OprF-ETA Pseudomonas aeruginosa. Плазмида содержит следующие фрагменты: Xba I-Hind III фрагмент ДНК размером 177 пар оснований; Hind III-Hind III фрагмент ДНК размером 1059 пар оснований; Hind III-Xho I фрагмент ДНК размером 1598 пар оснований; Sph I-Hind III фрагмент ДНК размером 425 пар оснований; EcoR I - BamH I фрагмент ДНК размером 57 пар оснований. Предложены также штамм бактерий Еscherichia coli PA-OPRF-ETA, продуцирующий белок OprF-ETA и полученный путем трансформации родительского штамма бактерий Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК рРА-OPRF-ETA и способ получения указанного белка OprF-ETA. Группа изобретений позволяет получить целевой продукт с массой около 100 кДа. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к клостридиальным нейротоксинам с измененной персистентностью. Заявлен полипептид, содержащий HC-домен, первый и, по меньшей мере, один дополнительный LC-домены с аминокислотными последовательностями, по меньшей мере на 90% идентичными соответствующим последовательностям нейротоксичного компонента ботулотоксина серотипа А, В, С1, D, Е, F или G. Также представлены нуклеиновая кислота, вектор экспрессии и клетка-хозяин, предназначенные для экспрессии указанного полипептида. Также предложены способ получения и применение указанного полипептида, в том числе в составе фармацевтической композиции, для лечения состояния, ассоциированного с гиперактивной холинэргической иннервацией мышцы или экзокринной железы, и для косметических процедур, связанных с морщинами. Изобретение позволяет направленно изменять период активности клостридиальных нейротоксинов. 9 н. и 3 з.п. ф-лы, 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантного штамма бактерий Escherichia coli - продуцента биологически активного флагеллина. Охарактеризованный штамм получен трансформацией культуры клеток E. coli BL21[DE3] рекомбинантной плазмидной ДНК рЕТ151FliC, полученной на основе вектора рЕТ151FliC, в который был встроен ген fliC, кодирующий биологически активный флагеллин, имеющий нуклеотидную последовательность, представленную в Seq ID No 3. Штамм депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ФГУП ГосНИИГенетика под № В-11369. Представленное решение обладает более высокой продуцирующей способностью в отношении рекомбинантного флагеллина, являющегося эффективным адъювантом. 1 ил., 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу идентификации возбудителя чумы и оценки количества микробных клеток, идентифицируемых в качестве возбудителя чумы в исследуемых пробах посредством ПЦР с учетом результатов в режиме реального времени, включающий следующие стадии: выделение ДНК микроорганизма из исследуемых проб, подготовка калибровочной панели, исследование выделенной ДНК в ПЦР с использованием специфических праймеров и зондов с флуоресцентной меткой, идентификация исследуемой ДНК как ДНК микробного или немикробного штамма по наличию нарастания флуоресцентного свечения или его отсутствию соответственно, определение по калибровочной панели концентрации ДНК в пробе. Использование изобретения позволяет повысить эффективность идентификации исследуемой пробы и сократить сроки ее тестирования в режиме реального времени. 2 з.п. ф-лы, 2 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и может быть использовано в медицине. Пептид структуры DGSVVVNKVSELPAGHGLNVNTLSYGDLAAD используют для подавления аллергического воспаления дыхательных путей, в профилактике и лечении артрита, а также для ослабления боли. Пептид эффективен в качестве адъюванта и для стимулирования продукции IL-12 в клетке. Пептид позволяет увеличить продукцию IL-12 по меньшей мере в 10 раз относительно нормальных уровней клеточного продуцирования IL-12. 9 н. и 10 з.п. ф-лы, 25 ил., 10 пр.

Изобретение относится к области микробиологии и молекулярной генетики и касается рекомбинантного полипептида А2, ДНК, его колирующей, штамма продуцирующего полипептид А2 и способов использования такого рекомбинантного полипептида. Представленный рекомбинантный полипептид А2, характеризуется аминоксилотной последовательностью из 346 аминокислот, в которой первые 13 аминокислот кодируются последовательностью плазмиды pQE 32 и ковалентно связаны с последующими 333 аминокислотами, кодируемыми последовательностью HAS-связывающего фрагмента хромосомной ДНК штамма DG 13 стрептококков группы G-CTG. Представленная группа изобретений может быть использована в диагностике, например, при создании тест-системы по определению микроальбуминурии - основного лабораторного критерия доклинической стадии диабетической нефропатии, а также в качестве реагента для выделения человеческого сывороточного альбумина аффинной хроматографией и для освобождения сыворотки крови от HAS, что позволит определять другие белки, присутствующие в сыворотке в более низких концентрациях. 7 н. и 2 з.п. ф-лы, 11 ил., 1 табл., 9 пр.

Представленные изобретения относятся к области биомедицины и касаются полинуклеотидной последовательности, кодирующей сконструированный белок пертактин (Prn), вектора, включающего такую последовательность, и композиций, содержащих белок или вектор. Охарактеризованная полинуклеотидная последовательность кодирует 300 первых аминокислот, ближайших к N-концу данного типа природного, зрелого Prn (PrnX300), и аминокислотную последовательность, включающую 620 последних аминокислот, ближайших к С-концу данного типа природного, зрелого Prn (PrnY620), с получением сконструированного пертактина PrnX300-PrnY620 из рода Bordetella. Сконструированные молекулы Prn включают в своей структуре полиморфизмы из различных штаммов B. pertussis и вызывают иммунные ответы с повышенной защитной способностью и опсонофагоцитирующей активностью, превышающими соответствующие показатели предшествующих вакцин. Получаемый по представленному изобретению белок может применяться в медицине и ветеринарии в качестве компонента противобактериальных вакцин против Bordetella pertusis. 5 н. и 7 з.п.ф-лы, 3 ил., 3 табл., 4 пр.

Группа изобретений относится к области белковой инженерии, молекулярной биологии растений и борьбы с вредителями и касается гибридного инсектицидного белка и его применений. Описанный гибридный инсектицидный белок включает от N-конца до С-конца N-концевой участок белка Cry3A, слитого с С-концевым участком белка Cry1Ab, причем позиция кроссинговера белка Cry3A и белка Cry1Ab расположена в консервативном блоке 2, в консервативном блоке 3 или в консервативном блоке 4 и обладает активностью против западного кукурузного корневого жука. Также представлены молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие новые белки, способы получения белков, способы их применения, а также трансгенные растения и их семена, содержащие такие белки. Группа изобретений позволяет получить экономически выгодные средства для борьбы с жуками рода Diabrotica. 13 н. и 26 з.п. ф-лы, 8 ил., 9 табл., 46 пр.

Данное изобретение относится к медицине, биофармацевтики и может быть использовано для приготовления вакцин. Для этого иммуногенная композиция содержит: 1) антиген нейссериальный аутотранспортерный белок, представляющий собой NadA или Hsf; 2) антиген нейссериальный белок, участвующий в усвоении железа, представляющий собой Lipo28 или низкомолекулярный и высокомолекулярный TbpA и 3) препарат везикул наружной мембраны, включающий нейссериальный липополисахарид (LPS) иммунотипа L3; и где указанные антигены, в тех случаях, когда они присутствуют в везикуле наружной мембраны, позитивно отрегулированы рекомбинантным образом в указанной везикуле наружной мембраны. При использовании данной вакцины - комбинации нейссериальных антигенов из разных классов, генерируется иммунный ответ, который является более сильным в единицах бактерицидной активности. 16 з.п.ф-лы, 11 ил., 21 пр.

Настоящее изобретение относится к области генной терапии. Предложена конструкция нуклеиновой кислоты для лечения опухолей, содержащая по меньшей мере две открытые рамки считывания, включающие последовательности, кодирующие цитотоксический или цитостатический генный продукт, в частности дифтерийный токсин, функциональным образом связанные с различными опухоль-специфичными промоторами: Н19-специфичным промотором, промотором IGF-II Р3 или Р4. Рассмотрен эукариотический вектор экспрессии, содержащий указанную конструкцию нуклеиновой кислоты, а также способы лечения и ингибирования развития опухоли у субъекта-человека посредством введения конструкции нуклеиновой кислоты по изобретению. Настоящее изобретение может найти дальнейшее применение в терапии рака. 9 н. и 24 з.п. ф-лы, 12 пр., 40 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к способу дифференцирования подвидов туляремийного микроба. Изобретение может быть использовано в лабораторной диагностике туляремии. Способ включает проведение ПЦР-амплификации с использованием специфических для гена iglC и регионов хромосомы, содержащих Chi-последовательности подобные Е.coli, праймеров FiglC-AAGGATAAGACCTGTCTG, RiglC-TTGAAACCATACCGGGTA и Chi1f CTAGG-GCTGGTGG-G. Проводят электрофорез продуктов амплификации, с последующей дифференциацией путем сравнения электрофоретической подвижности полученных ампликонов с подвижностью маркерных фрагментов ДНК. При наличии специфической светящейся полосы на уровне 986 п.о. данные штаммы регистрируют как род Francisella. Характер распределения полос в диапазоне от ~190 до ~830 п.о. позволяет дифференцировать исследуемые образцы на уровне подвидов туляремийного микроба: ~190 п.о. для subsp. novicida, ~500-570 п.о. для subsp. mediasiatica, ~570 п.о. для subsp. holarctica, тогда как для subsp. tularensis характерен фрагмент размером ~500 п.о. Предложенное изобретение позволят осуществить точный, ускоренный, и высокоспецифичный способ дифференцирования подвидов F.tularensis. 1 пр.

Изобретение относится к области молекулярной генетики и касается рекомбинантной плазмиды pVA891-2[mutR], способа получения мутантных по гену mutR штаммов Streptococcus pyogenes и рекомбинантных штаммов Streptococcus pyogenes. Плазмиду pVA891-2[mutR] конструируют на основе вектора pVA891-2, неспособного реплицироваться в клетках грамположительных микроорганизмов и содержащего маркерный ген устойчивости к эритромицину, путем введения PstI-SacI фрагмента гена mutR штамма Streptococcus pyogenes SF370, размером 520 п.н., представленного на фиг.1. Для получения мутантных авирулентных штаммов Streptococcus pyogenes (SF370[mutR], № 97[mutR], № 152[mutR) полученную плазмиду вводят в соответствующие штаммы S. pyogenes, вследствие чего происходит нарушение структурной области гена mutR в геноме таких штаммов. Отбор клонов с инактивированным геном mutR привел к получению штаммов, у которых проявление вирулентных свойств отсутствует или значительно снижено. Представленная группа изобретений может быть использована в профилактической медицине при создании вакцин. 5 н.п. ф-лы, 8 ил.

Изобретение относится к области биохимии. Представлены варианты рекомбинантных вирулентных полипептидов и кодирующие их молекулы нуклеиновых кислот с последовательностями, раскрытыми в описании, используемые для получения вакцинной композиции против А/Е-патогена. Описана композиция вакцины для индукции против А/Е-патогена у животных, содержащая указанный полипептид; указанную молекулу нуклеиновой кислоты; супернатант клеточной культуры, содержащий указанный полипептид; и/или бактерию или ее препарат, имеющей мутацию в своем геноме в указанной молекуле нуклеиновой кислоты, приводящую к ослаблению вирулентности, или имеющей делецию гена nleA, в сочетании с физиологически приемлемым носителем. Предложен способ ослабления вирулентности А/Е-патогена, включающий делетирование гена nleA в А/Е-патогене или делетирование одной или более указанных нуклеиновых кислот в геноме А/Е-патогена. Изобретение позволяет получить вакцину против А/Е-патогена. 4 н. и 20 з.п. ф-лы, 2 табл., 27 ил., 9 пр.

Изобретение раскрывает пептиды RumC1, RumC2 и RumC3, обладающие антимикробной активностью, в частности, в отношении Clostridium perfringens, имеющие молекулярную массу от 4000 до 4600 Да и выделенные из мутантного штамма Ruminococcus gnavus, депонированного под номером CNCM I-3705. В изобретении описаны полинуклеотиды, кодирующие указанные пептиды, экспрессионная кассета, включающая промотор, указанный полинуклеотид и терминаторную последовательность, а также клонирующий и экспрессионный вектора на основе полинуклеотида. Описан организм-хозяин, экспрессирующий указанные пептиды, композиция, обладающая антимикробной активностью в отношении Clostridium perfringens и содержащая пептид, организм-хозяин или штамм CNCM 1-3705, и корм для животных, представляющий пищевое основание и композицию. Использование изобретения позволит изготавливать лекарственное средство для профилактики и лечения заболеваний, в частности некротического энтерита у свиней или домашней птицы, и желудочно-кишечных заболеваний у человека. 10 н. и 6 з.п. ф-лы, 9 ил., 7 табл.

Рекомбинантная плазмидная ДНК рТВ323 по изобретению, кодирующая гибридный полипептид глутатион-S-трансфераза (GST) и укороченный вариант белка МРТ64 (r МРТ64), имеет среднюю м.м. 3,6 МДа, размер 5574 п.н., состоит из: а) EcoRI-BamHI-фрагмента векторной плазмиды pGEX-2T размером 4938 п.н., содержащего ген -лактамазы, индуцируемый tac-промотор, внутренний ген lacI ^q, кодирующий белок-репрессор лактозного оперона, фрагмент гена глутатион-S-трансферазы из S. japonicum с множественным сайтом для клонирования (МСК) генов в 3'-концевой части этого гена и нуклеотидной последовательностью, кодирующей сайт протеолиза тромбина и располагающейся перед МСК; б) EcoRI-BamHI-фрагмента размером 636 п.н., содержащего фланкированный сайтами для эндонуклеаз рестрикции EcoRI и BamHI укороченный ген МРТ64, полученный амплификацией соответствующего гену фрагмента с геномной ДНК М. tuberculosis; в) генетического маркера - ген -лактамазы, детерминирующий устойчивость трансформированных плазмидой рТВ323 клеток Е. coli к антибиотику ампициллину; г) уникальные сайты рестрикции: BamHI - 930/934, EcoRI - 1566/1570. Рекомбинантный штамм бактерий Escherichia coli BL21/pTB323 - продуцент гибридного полипептида GST- МРТ64 со свойствами микобактериального антигена МРТ64 депонированв Коллекции культур микроорганизмов ФГУН ГНЦ ВБ "Вектор" под № В-1028. Рекомбинантный полипептид GST- MPT64, продуцируемый рекомбинантным штаммом по изобретению, содержит в качестве белка-носителя N-концевой полипептидный фрагмент глутатион-S-трансферазы S.j. (226 а.о., 26,31 кДа) и имеет полную аминокислотную последовательность (431 а.о., 48,76 кДа), приведенную в описании. Использование изобретения позволяет нарабатывать высокоочищенный полипептид в препаративных количествах при сохранении иммуногенных свойств и возможности отделения целевого белка от аминокислотной последовательности белка-носителя для исследования иммуногенных свойств целевого белка. 3 н.п. ф-лы, 4 ил., 4 табл., 6 пр.

Изобретение относится к медицинской микробиологии и представляет собой референтные штаммы Francisella tularensis подвида tularensis, включающего две генетические группы AI и AII, подвида holartica, включающего биовары japonica, эритромицинчувствительный и эритромицинустойчивый, Ery^s и Ery^R, и подвида mediasiatica. Штаммы депонированы в ГКПБ «Микроб». Все штаммы являются природными, кроме штамма подвида holartica биовар japonica, который выделен от человека. Штаммы получены путем отбора клонов, стабильно сохраняющих фенотипические свойства и содержащих гены, нуклеотидная последовательность которых специфична для вида и подвида. Комплект контрольных препаратов ДНК создан на основе данных штаммов и может быть использован для генетических и иммунологических исследований. Использование изобретения позволит повысить эффективность диагностических исследований, стандартизировать и повысить качество диагностических препаратов на этапах производства. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 4 ил., 1 табл., 10 пр.

Изобретение раскрывает выделенный полипептид, включающий мутантную А субъединицу термолабильного энтеротоксина E.coli (LT), которая имеет только один мутированный остаток, представляющий собой K, R, Н или Y, по сравнению с термолабильным энтеротоксином дикого типа, содержащим определенную аминокислотную последовательность (приведена в описании). Мутантная А субъединица содержит замену аминокислоты в положении, соответствующем положению 61 LT дикого типа. LT, содержащий такую мутантную А субъединицу, проявляет сниженную токсичность по сравнению с его аналогом дикого типа. Полипептид по изобретению может быть использован в качестве адъюванта. Описана вакцина для индукции иммунного ответа, включающая бактериальный или вирусный антиген, и полипептид в качестве адъюванта. В изобретении раскрыта нуклеиновая кислота, кодирующая мутантную А субъединицу LT E.coli, вектор экспрессии и трансформированная клетка, включающая указанный вектор. Использование изобретения обеспечивает получение вакцин с использованием высокоиммунногенного и нетоксигенного адъюванта. 5 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложенная тест-система для количественного определения Streptococcus agalactiae включает видоспецифичные праймеры, имеющие нуклеотидные последовательности 5'-CAGTTGAATCCAAATGTTACGG-3' и 5'-TAATGCTGTTTGAAGTGCTG-3', и зонд, имеющий нуклеотидную последовательность 5'-CAACAAGTTGATCAAGAGATTGTAACATTACAAGCA-3'. ДНК-мишенью для специфической амплификации является фрагмент гена cfb Streptococcus agalactiae между 685 и 762 нуклеотидными остатками его полной последовательности. Предложенное изобретение позволяет быстро и высокоспецифично выявлять Streptococcus agalactiae в образцах биологического материала и определение его количественного содержания. 2 ил., 2 табл.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к генетической инженерии. Предложены синтетические олигонуклеотидные праймеры, имеющие следующий нуклеотидный состав: (SEQ ID NO:5) gaagggtgttcggggccgtcgcttagg и (SEQ ID NO:6) ggcgttgaggtcgatcgcccacgtgac и комплементарные специфичной для M.paratuberculosis - возбудителя паратуберкулеза области генома IS900. Предложен способ выявления ДНК Mycobacterium paratuberculosis - возбудителя паратуберкулеза, проводимый в 1 раунд с помощью олигонуклеотидных праймеров (SEQ ID NO:5) gaagggtgttcggggccgtcgcttagg и (SEQ ID NO:6) ggcgttgaggtcgatcgcccacgtgac методом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Способ включает выделение ДНК, проведение амплификации ДНК на олигонуклеотидных праймерах, перенос продукта амплификации на гель с последующим детектированием результатов анализа на трансиллюминаторе, в случае положительной реакции синтезируется фрагмент, соответствующий размеру 413 п.н. Предложенное изобретение позволяет производить экспресс-диагностику паратуберкулезной инфекции. 2 н. и 1 з.п. ф-лы, 1 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к способу дифференциации штаммов возбудителя чумы основного и неосновных подвидов и возбудителя псевдотуберкулеза. Способ предусматривает выделение ДНК исследуемого штамма, проведение ПНР с использованием нуклеотидных праймеров на гены terC, ilvN и inv, имеющих следующие последовательности: 89-S - AATCAAATCTCGCCCAGC, 89-As - GCTGCGTATCATTTCACC; 45-S - AGTGGTCTGCTTCTCTGG, 45-As - CGGCATACACAGAATACC; inv839 - TACCTGCACTCCCACAAC, inv1007 - CCCATACGCTGATCTACC. Дифференциацию исследуемых штаммов проводят путем сравнения размеров полученных фрагментов генов terC, ilvN и inv с аналогичными фрагментами у типичных штаммов возбудителей чумы основного и неосновных подвидов. Предложенное изобретение позволяет быстро, эффективно и надежно проводить дифференциацию штаммов Y. pestis основного и неосновных подвидов и Y. pseudotuberculosis. 1 табл.

Настоящее изобретение относится к области генетической инженерии и может быть использовано в медико-биологической промышленности при поиске и/или разработке новых антимикобактериальных препаратов. Определены мутации аминокислотной последовательности белка atpE микобактерий (М.tuberculosis и М.smegmatis), определяющие их устойчивость к DARQ J. Получены кодирующие мутантные формы atpE, нуклеиновые кислоты, содержащие их векторы, клетки-хозяева, экспрессирующие мутантные белки. Предложено использование указанных клеток-хозяев в способе идентификации соединений, которые могут быть применены в качестве антимикробных агентов для резистентных к известным препаратам штаммов микобактерий. 5 н.п. ф-лы, 4 ил., 7 табл.

Изобретение относится к выделенным полипептидам, обладающим антимикробной активностью, и выделенным полинуклеотидам, кодирующим эти полипептиды, а также к конструкциям нуклеиновой кислоты, векторам и клеткам-хозяевам, содержащим указанные полинуклеотиды. Антимикробная активность полученных полипептидов позволяет применять их в ветеринарии и медицине, а также в кормопроизводстве. 12 н. и 4 з.п. ф-лы, 6 табл.

Изобретение относится к области биотехнологии и здравоохранения. Рекомбинант аденовируса р53 способен снизить побочные эффекты типа побочных эффектов, вызванных противоопухолевой химиотерапией и радиотерапией. У раковых пациентов рекомбинант аденовируса р53 способен восстановить деятельность органов, включая анализ крови, функцию печени, функцию почек и т.д., в целях улучшения качества жизни пациентов, например улучшение аппетита, улучшение ментального статуса и им подобные. Изобретение может быть использовано в медицине. 2 н. и 17 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл.

Описаны композиции на основе соединений для профилактики и лечения хламидийной инфекции. Соединения, входящие в состав одной из композиций, представляют собой полипептиды, которые содержат по меньшей мере иммуногенный фрагмент белка СТ858 или белка СТ089 Chlamydia trachomatis с определенной аминокислотной последовательностью, либо полинуклеотиды, кодирующие иммуногенные фрагменты указанных белков. Соединения, входящие в состав другой композиции, представляют собой слитые полипептиды, содержащие иммуногенный фрагмент белка СТ858 или СТ089 и партнер слияния, выбранный из иммунологических партнеров слияния, усилителей экспрессии, аффинных меток и неродственных известных белков Chlamydia trachomatis. Указанные композиции могут быть использованы для стимуляции специфического Т-клеточного ответа на Chlamydia trachomatis, для ингибирования развития инфекции и для лечения инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis, обеспечивая высокий уровень иммунного ответа и терапевтического эффекта. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 7 табл., 16 ил.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой липолитический фермента, который получен из одного из Streptomyces. Такой липолитический фермент имеет аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID No:4, или аминокислотную последовательность, по меньшей мере на 70% идентичную ей. Изобретение относится также к применению липолитического фермента в способе получения лизогликолипида, лизофосфолипида, в способе рафинирования масел, в способах обработки фосфолипида, в биоконверсии полярных липидов, в получении пищевых продуктов. Изобретение позволяет получить новый фермент, обладающий гидролизующей гликолипид активностью. 21 н. и 25 з.п. ф-лы, 17 ил, 4 табл.

Полипептид, гомологичный полипептиду, экспрессируемому Eurotinium amstelodami, обладает противомикробной активностью и может быть использован для применения в качестве лечебного или профилактического средства человеку или животному, а также в корме для животных. 10 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 табл.

Изобретение может быть использовано при производстве вакцин против Streptococcus agalactiae - представителя стрептококков группы В (СГВ), при диагностике заболеваний - для создания системы по детекции уровня иммуноглобулина А в биологических жидкостях, в иммунохимии в качестве доступных иммунохимических реагентов (аффинное выделение фрагментов IgA). Предлагаемые уникальные рекомбинантные ДНК получены методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием хромосомной ДНК штамма 219/4849 Ibc серотипа СГВ и уникальных праймеров. Одна из рекомбинантных ДНК содержит три нуклеотидные замены по сравнению с исходным участком хромосомной ДНК. Последующее клонирование амплифицированных фрагментов осуществлено в линейном векторе pGEM-T Easy, а на конечном этапе посредством системы экспрессионных векторов pQE30/31/32 в Е.coli JM 109. Полученные рекомбинантные ДНК кодируют аминокислотные последовательности рекомбинантных полипептидов, обладающих способностью селективно связывать различные молекулярные формы IgA и обозначенных как Р6, Р7, Р8. Полипептид Р6 вызывает синтез длительно циркулирующих высокоаффинных анти-Р6 антител, обладающих протективными свойствами против СГВ. Использование изобретения обеспечивает получение на основе N-терминальной консервативной части поверхностного Вас белка СГВ Ibc серотипа рекомбинантных полипептидов, включающих первый IgA-связывающий сайт А с измененной или нативной последовательностью MLKKIE, при этом полипептиды обладают иммуногенными и протективными свойствами, а также высокоселективно связывают IgA. 12 н.п. ф-лы, 20 ил., 4 табл.

Изобретение касается способа получения иммуногенного реагента, который вызывает иммунный ответ на инфекцию Bacillus anthracis, включающего в себя один или несколько полипептидов, которые вместе представляют три домена полноразмерного защитного антигена (РА) из В. anthracis или их варианты, и по меньшей мере один из указанных доменов включает в себя домен 1 или домен 4 РА или его вариант. Данные полипептиды указанного иммуногенного реагента, а также полноразмерный РА продуцируются в результате экспрессии в рекомбинантной клетке E.coli. Изобретение раскрывает также вектор экспрессии и нуклеиновую кислоту с процентной долей остатков гуанидина и цитозина более 35%, кодирующую иммуногенный полипептид, являющийся защитным антигеном (РА). Использование данного способа обеспечивает высокий выход иммуногенного полипептида. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 5 ил., 4 табл.

Изобретение касается получения микробиологическим синтезом нового гибридного полипептида GST-CFP10 со свойствами видоспецифичного белка-антигена CFP10 Mycobacterium tuberculosis, который может быть использован для ранней видоспецифичной диагностики туберкулезной инфекции. Сконструирована рекомбинантная плазмидная ДНК рТВ232, кодирующая гибридный полипептид GST-CFP10 со свойствами микобактериального антигена CFP10, со средней молекулярной массой (м.м.) 3,4 МДа и имеющая размер 5257 п.н. Рекомбинантный штамм бактерий Е.coli BL21/pTB232 содержит рекомбинантную плазмидную ДНК рТВ232, является продуцентом гибридного полипептида GST-CFP10 со свойствами микобактериального антигена CFP10 и депонирован в КМ ГНЦ ВБ "Вектор" под номером В-1027. Рекомбинантный полипептид GST-CFP10, продуцируемый штаммом бактерий Е. coli BL21/pTB232, содержит в качестве белка-носителя N-концевой полипептидный фрагмент глутатион-S-трансферазы S.j. (226 а.о. с м.м. 26,3 кДа), соединенный через концевой сайт гидролиза тромбина (LVPR^GS) с С-концевым полипептидным фрагментом антигена CFP10 (100 а.о. с м.м. 10,8 кДа) и имеет полную аминокислотную последовательность длиною 326 а.о. и м.м. 37,1 кДа, приведенную в тексте описания. Использование изобретения обеспечивает возможность получать целевой высокоочищенный гибридный полипептид GST-CFP10 в препаративных количествах при сохранении иммуногенных свойств последнего. 3 н.п.ф-лы, 4 табл., 3 ил.

Изобретение относится к области микробиологии и молекулярной генетики и может быть использовано при производстве вакцин против Streptococcus pyogenes - стрептококков группы А (СГА) и Streptococcus agalactiae - стрептококков группы В (СГВ). Сущностью изобретения является создание рекомбинантной ДНК рВ1, полученной в результате ПЦР с использованием хромосомной ДНК штамма 090R Ia серотипа СГВ, праймеров Pb1 и Pb2 и последующего клонирования с использованием экспрессионной плазмиды pQE-30 в Е. coli M15. Рекомбинантная ДНК рВ1 кодирует рекомбинантный белок РВ1, обладающий протективными свойствами в отношении указанных выше стрептококков, который не имеет ферментативной активности и вызывает синтез анти-РВ1 антител, обладающих протективными свойствами в отношении Streptococcus pyogenes и Streptococcus agalactiae. В изобретении создана рекомбинантная плазмидная ДНК pQE-pB1, представляющая собой плазмидную ДНК pQE-30, несущую рекомбинантную ДНК рВ1, и штамм-продуцент Е. coli M15-PB1, позволяющий экспрессировать рекомбинантный белок РВ1. Отсутствие у полученного рекомбинантного белка ферментативной активности позволит применять его в качестве компонента вакцины против Streptococcus pyogenes и Streptococcus agalactiae. 5 н. и 2 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 табл.