Получение мутаций или генная инженерия, ДНК или РНК, связанные с генной инженерией, векторы, например плазмиды или их выделение, получение или очистка, использование их хозяев: .метод рекомбинантных ДНК – C12N 15/09

Группа изобретений относится к биотехнологии. Рекомбинантная плазмидная ДНК pPA-OPRF-ETA размером 8007 пар оснований кодирует синтез рекомбинантного белка OprF-ETA Pseudomonas aeruginosa. Плазмида содержит следующие фрагменты: Xba I-Hind III фрагмент ДНК размером 177 пар оснований; Hind III-Hind III фрагмент ДНК размером 1059 пар оснований; Hind III-Xho I фрагмент ДНК размером 1598 пар оснований; Sph I-Hind III фрагмент ДНК размером 425 пар оснований; EcoR I - BamH I фрагмент ДНК размером 57 пар оснований. Предложены также штамм бактерий Еscherichia coli PA-OPRF-ETA, продуцирующий белок OprF-ETA и полученный путем трансформации родительского штамма бактерий Escherichia coli BL21(DE3) плазмидной ДНК рРА-OPRF-ETA и способ получения указанного белка OprF-ETA. Группа изобретений позволяет получить целевой продукт с массой около 100 кДа. 3 н.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биоинженерии, молекулярной биологии и биотехнологии. Предложена дрожжевая клетка, предназначенная для детекции взаимодействия между белками и их доменами, котрансформированная двумя плазмидами, модифицированными для экспрессии в клетках дрожжей двух белков, где нуклеотидная последовательность, кодирующая первый белок, клонирована в одну плазмиду, а нуклеотидная последовательность, кодирующая второй белок, - в другую плазмиду, где нуклеотидные последовательности, кодирующие белки, слиты с нуклеотидными последовательностями, кодирующими активационный и ДНК-связывающий домены белка GAL4, при этом нуклеотидные последовательности, кодирующие исследуемые белки, отделены от нуклеотидных последовательностей, кодирующих активационный или ДНК-связывающий домен белка GAL4, при помощи нуклеотидной последовательности, кодирующей пептид, представляющий собой последовательность GluLeuGluAlaAlaAlaLysGluAlaAlaAlaLysGluAlaAlaAlaLysGluAlaAlaAla, который экспрессируется в виде белкового мостика между исследуемым белком и доменами белка GAL4. Изобретение позволяет свести к минимуму взаимовлияние доменов тестируемых белков и ДНК-связывающего/активационного доменов вектора и может быть использовано для детекции взаимодействия между белковыми молекулами в медицинских и исследовательских целях. 4 ил., 2 пр.

Изобретение относится к области молекулярной биологии, биохимии и генной инженерии. Предложены нуклеиновая кислота, характеризующаяся нуклеотидной последовательностью, кодирующей белок, который состоит из аминокислотной последовательности с делецией, заменой или добавлением одной или более аминокислот в аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2 или SEQ ID NO: 7 и обладает активностью фосфатазы фосфатидной кислоты, соответствующий белок, рекомбинантный вектор, клетка для экспрессии белка и способ получения композиции жирной кислоты. Изобретение может быть использовано для получения полиненасыщенных жирных кислот в пищевой промышленности. 8 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 7 ил., 8 пр.

Изобретение относится к способу скрининга нетератогенного вещества, который включает приведение испытуемого вещества в контакт с цереблоном или фрагментом цереблона, оценку способности испытуемого вещества связываться с цереблоном или фрагментом цереблона и отбор испытуемого вещества, не связывающегося с цереблоном или фрагментом цереблона, или испытуемого вещества, характеризующегося более низкой способностью связываться с цереблоном или фрагментом цереблона по сравнению с талидомидом. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 19 ил., 8 пр.

Изобретения относятся к области биотехнологии и касаются слитого белка для специфического ингибирования свертывания крови, экспрессионной плазмидной ДНК, кодирующей такой слитый белок, бактерии, принадлежащей к роду Escherichia, трансформированной такой ДНК, и способу получения слитого белка. Представленный слитый белок включает тиоредоксин I E.coli и инфестин-4 и характеризуется последовательностью SEQ ID NO:2. Плазмидная ДНК содержит последовательность SEQ ID NO:1, кодирующую представленный слитый белок, находящуюся под контролем промотора, функционирующего в бактериальной клетке. Способ получения упомянутого слитого белка включает культивирование упомянутых бактерий в питательной среде, разрушение бактериальных клеток и очистку указанного слитого белка с использованием металлохелатной хроматографии и анионообменной хроматографии. Охарактеризованные решения позволяют получить белок, обеспечивающий указанную специфичность, с последующим его использованием в блокировании контактной активации свертывания крови за счет ингибирования XIIa фактора и отсутствии ингибирования Ха фактора. 4 н.п. ф-лы, 10 ил., 7 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к белку, имеющему ацил-CoA-синтетазную активность, полученному из микроорганизма рода Mortierella и полинуклеотиду, кодирующему этот белок. Изобретение также относится к экспрессирующему вектору и трансформанту, не являющемся человеком, содержащим заявленные полинуклеотиды, а также к способу получения композиции липидов или жирных кислот с использованием этого трансформанта. Изобретение позволяет за счет использования нового гена увеличивать количество липидов или жирных кислот, а также изменять состав продуцируемых жирных кислот. 5 н. и 5 з.п. ф-лы, 28 ил., 14 табл., 2 пр.

ТЕСТ-СИСТЕМА ДЛЯ СКРИНИНГА ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ GSK3 ; ЧЕЛОВЕКА

Изобретение относится к области молекулярной биологии и касается тест-системы для скрининга ингибиторов протеинкиназы GSK3 . Охарактеризованное изобретение представляет собой генетическую конструкцию, представленную на рис.2, полученную на основе экспрессионного вектора pET32a, и включающую ген каталитического домена протеинкиназы GSK3 , клонированного по сайтам эндонуклеаз рестрикции EcoRI и HindIII, и ген субстрата - аминогликозидфосфотрансферазы aphVIII из Streptomyces rimosus, клонированный по сайту эндонуклеазы рестрикции XbaI, в котором модифицирован сайт фосфорилирования AphVIII Ser-146 (AVAEGS₁₄₆VDLED ASAEGS₁₄₆VDLSD). Тест-система позволяет проводить прескрининг in situ ингибиторов GSK3 - низкомолекулярных соединений различных химических классов, способных проникать в клетки E.coli и грамположительных бактерий и может быть использовано в фармацевтике и медицинской химии, в частности в разработке, создании и валидации новых биомишеней и тест-систем с целью поиска химических соединений-лидеров, которые могут являться потенциальными кандидатами в лекарства для лечения заболеваний человека. 5 ил., 3 табл., 3 пр.

Группа изобретений относится к области микробиологии и биотехнологии. Способ детекции живых клеток микроорганизма в тестируемом образце путем отличия живых клеток от мертвых клеток или поврежденных клеток предусматривает добавление в тестируемый образец средства, способного к ковалентному связыванию с ДНК или РНК при облучении светом с длиной волны от 350 нм до 700 нм; облучение тестируемого образца; амплификацию мишеневой области ДНК или РНК микроорганизма, содержащегося в тестируемом образце, способом амплификации нуклеиновых кислот в присутствии средства подавления действия вещества, ингибирующего амплификацию нуклеиновых кислот, соли магния, соли органической кислоты или соли фосфорной кислоты, без выделения нуклеиновых кислот из клеток и анализа продукта амплификации. Способ может быть осуществлен посредством применения набора, состоящего из средства, способного к ковалентному связыванию с ДНК или РНК при облучении светом с длиной волны от 350 нм до 700 нм, средства подавления действия вещества, ингибирующего амплификацию нуклеиновых кислот и праймеров для амплификации мишеневой области. При помощи данных изобретений можно с высокой чувствительностью и точностью детектировать живые клетки микроорганизмов в различных биологических образцах. 2 н. и 25 з.п. ф-лы, 17 ил., 12 табл., 9 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и нанотехнологии. Способ предусматривает трансформацию клеток архей рекомбинантной плазмидой, выращивание клеток, выделение жгутиков и модификацию поверхности жгутиков. Конструкция плазмиды содержит рекомбинантные гены для синтеза флагеллинов А1 и А2, формирующих жгутик, при этом последовательность флагеллина А1 или флагеллина А2 или последовательности флагеллина А1 и флагеллина А2 содержат по меньшей мере одну пептидную вставку для избирательного связывания ионов металлов или наночастиц. Место пептидной вставки во флагеллине А1 определяют в области между первым и вторым сайтами гликозилирования расположенной между поз.86 и поз.96 SEQ ID NO:2, а место пептидной вставки в флагеллине А2 определяют в области между первым и вторым сайтами гликозилирования, расположенной между поз.82 и поз.92 SEQ ID NO:3, где длина пептидной вставки составляет от 5 до 60 аминокислот. Осуществляют выделение жгутиков архей, содержащих пептидные вставки для нековалентного связывания с ионами металлов, проводят фрагментацию жгутиков на фрагменты с последующим проведением модификации поверхности жгутиков, которую осуществляют посредством связывания пептидных вставок с ионами металлов, и последующее оксидирование металлов, проводят промывку, сушку и упаковку полученного наноструктурированного материала. Способ позволяет получить покрытие для формирования активных поверхностей на гибких и твердых подложках или капсулах с использованием жгутиков архей, на основе которых можно обеспечить нековалентное связывание широкого перечня веществ, таких как ионы металлов, наночастицы металлов, полупроводники и другие лиганды. 5 з.п. ф-лы, 11 ил., 1 табл., 12 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантных векторов, используемых для производства противогриппозных вакцин. Охарактеризованы рекомбинантная псевдоаденовирусная частица на основе генома аденовируса человека 5 серотипа и способ ее использования. Представленная частица содержит экспрессирующую кассету со вставкой гена гемагглютинина вируса гриппа, при этом в качестве гена гемагглютинина вируса гриппа был использован ген гемагглютинина штамма A/Brisbane/59/2007(H1N1) с предварительно оптимизированной для экспрессии в клетках человека нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID N0:2. Указанный ген гемагглютинина вируса гриппа клонирован в экспрессирующую кассету, содержащую сигнал полиаденилирования SV40 под контролем промотора цитомегаловируса. Представленное изобретение может быть использовано для индукции специфического иммунитета к вирусу гриппа А субтипа H1 и Н5 при введении индивидууму в эффективном количестве, посредством обеспечения усиленной экспрессии рекомбинантного гемагглютинина вируса гриппа A/Brisbane/59/2007(H1N1). 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается синтетических олигонуклеотидов-праймеров. Представленные праймеры фланкируют участки генов PB2, PB1, PA, NP, MP, NS низкопатогенных вирусов гриппа птиц и не дают перекрестных реакций с родственными видам. Разработанные праймеры позволяют получить полную информацию о генах вирусов гриппа птиц, их принадлежности к той или иной генетической линии вируса, наличии нуклеотидных/аминокислотных замен в геноме патогена. Представленное изобретение может быть использовано в диагностических целях идентификации вируса гриппа птиц в вирусологии и ветеринарии, а также для решения научно-исследовательских задач по изучению данного вируса. 1 ил., 2 табл., 4 пр.

Изобретения относятся к области биотехнологии и касаются рекомбинантной плазмидной ДНК pQE30/Derf2L и штамма бактерий Escherichia coli M15/pQE30/Derf2L. Охарактеризованная рекомбинантная плазмидная ДНК кодирует белок Der f 2L клеща Dermatophagoides farinae и состоит из BamHI/HindIII - фрагмента ДНК плазмиды pQE30 и последовательности ДНК, кодирующей BamHI/HindIII фрагмент, включающий ген Der f2L Dermatophagoides farinae. Охарактеризованный штамм бактерий Escherichia coli M15/pQE30/Derf2L, получен путем трансформации клеток Escherichia coli M15 рекомбинантной плазмидной ДНК pQE30/Derf2L. Представленные изобретения могут быть использованы для разработки диагностикума к клещам домашней пыли, а также препаратов для проведения специфической иммунотерапии. 1 з.п. ф-лы, 3 ил., 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области генетической инженерии, молекулярной биологии и медицины. Предложен носитель для направленной доставки нуклеиновых кислот в клетки, экспрессирующие рецептор CXCR4, состоящий из последовательности-лиганда к рецептору CXCR4 с последовательностью аминокислот KPVSLSYRSPSRFFESH, линкерного участка из двух молекул -аминогексановой кислоты, соединяющей последовательность-лиганд с последовательностью для компактизации нуклеиновых кислот, последовательности, обеспечивающей компактизацию нуклеиновых кислот и выход комплекса из эндосом CHRRRRRRHC. Изобретение может быть использовано для направленной доставки генетических конструкций в клетки с рецептором CXCR4 на поверхности, таких как злокачественные опухолевые и стволовые клетки, с целью коррекции генных дефектов, воздействия на процессы реализации генетической информации и предотвращения заболеваний. 2 з.п. ф-лы, 7 ил., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается применения штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727. Охарактеризовано применение штамма дрожжей Komagataella pastoris ВКПМ Y-727 в качестве реципиента для конструирования продуцентов целевого белка, необязательно включающее введение в него мутаций, обеспечивающих использование ауксотрофных селективных маркеров. Представленное решение может быть применимо при получении рекомбинантных белков без использования метанола в качестве индуктора экспрессии генов. 8 ил., 4 табл., 10 пр.

Изобретение относится к биохимии. Описан способ иммунологического анализа белка CXCL1 человека. Измеряют CXCL1 человека или его фрагмент в образце, используя два или более типов моноклональных антител к CXCL1 человека или их фрагменты. Каждый из двух или более типов моноклональных антител к CXCL1 человека или их фрагментов специфично распознают любой из участков последовательности аминокислотных последовательностей, представленных в SEQ ID NO:1-3, которые представляют собой частичные последовательности аминокислотной последовательности, составляющей белок CXCL1 человека. При этом два или более типов моноклональных антител к CXCL1 человека или их фрагментов специфично распознают участки последовательности, отличающиеся друг от друга. Представлены моноклональные антитела или их фрагменты, каждый из которых специфично распознает любой участок аминокислотной последовательности, представленный в SEQ ID NO:1-3, и имеет новую аминокислотную последовательность. Изобретение позволяет определять с высокой чувствительностью белок CXCL1 человека. 6 н. и 9 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 21 пр.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой средство для вовлечения мезенхимальной стволовой клетки костного мозга в периферическую кровь из костного мозга, которое вводят в кровеносный сосуд или мышцу и которое содержит любой из компонентов: (a) белок HMGB1; (b) клетка, которая секретирует белок HMGB1; (c) вектор, в который встроена ДНК, кодирующая белок HMGB1; (d) белок HMGB2; (e) клетка, которая секретирует белок HMGB2; (f) вектор, в который встроена ДНК, кодирующая белок HMGB2; (g) белок HMGB3; (h) клетка, которая секретирует белок HMGB3; и (i) вектор, в который встроена ДНК, кодирующая белок HMGB3. 3 н. п. ф-лы, 6 пр., 1 табл., 14 ил.

Изобретение относится к области биохимии и представляет собой способ получения L-аминокислоты - L-лизина, L-треонина, L-аспарагина, L-аспарагиновой кислоты, L-метионина или L-изолейцина - предусматривающий культивирование бактерии Escherichia coli в среде для получения и накопления L-аминокислоты и сбор L-аминокислоты. Бактерию модифицируют таким образом, чтобы повысить экспрессию ее гена gltP или гена gltS. Изобретение позволяет повысить выход целевой L-аминокислоты. 11 з.п. ф-лы, 5 табл., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и пищевой промышленности. Представлено растение ячменя, которое дает зерно и является гомозиготным, по меньшей мере, в двух локусах для введенных генетических вариаций, которые представляют собой: a) аллель, в которой удалена большая часть или все гены, кодирующие В-гордеин в локусе Hor2, и b) мутантную аллель в локусе Lys3 ячменя, так что зерно не содержит ни В-, ни С- гордеинов, и указанные генетические вариации присутствуют в ячмене линий Riso 56 и Riso 1508 соответственно, при этом отсутствие В-гордеинов является обнаружимым по отсутствию амплифицированной ДНК с использованием праймеров: 5'B1hor: 5'-CAACAATGAAGACCTTCCTC-3', 3'B1hor: 5'-TCGCAGGATCCTGTACAACG-3', а отсутствие С-гордеинов является обнаружимым по отсутствию 70 кДа полосы при исследовании спирторастворимого экстракта зерна посредством ДСН-ПААГ. Также представлены: зерно ячменя, полученное от указанного растения; пищевые продукты, не содержащие В- и С-гордеинов, полученные из указанного зерна, такие как мука, солод, пиво. Кроме того, описаны способы получения пищевых продуктов (муки, цельнозерновой муки, крахмала, солода) и напитков с использованием зерна, полученного от растения ячменя, имеющего указанные выше признаки. Предложен способ идентификации ячменного зерна, пригодного для производства пищевого продукта и/или напитка на основе солода, пригодного для употребления лицом с целиакией, включающий: a) получение одного или нескольких материалов: i) образца растения, способного давать указанное зерно, ii) зерна, iii) солода, полученного из зерна, и/или iv) экстракта указанного зерна; b) анализ материала со стадии а) на наличие, по меньшей мере, одного гордеина и/или, по меньшей мере, одного гена, кодирующего гордеин, с выбором зерна, имеющего генный набор указанного выше растения. Изобретение позволяет получать пищевые продукты или напитки на основе солода, которые не содержат В- и С-гордеинов. 14 н. и 13 з.п. ф-лы, 14 ил., 10 табл., 10 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии. Представлен выделенный химерный полинуклеотид для усиления продуцирования представляющего интерес гетерологичного белка, содержащий полинуклеотидную последовательность промотора SigA или SigH, функционально связанную с полинуклеотидом, кодирующим белок YmaH, причем химерный полинуклеотид содержит последовательность, которая по меньшей мере на 90% идентична SEQ ID NO: 1, 2, 3 или 13. Также описаны вектор экспрессии, содержащий указанную нуклеотидную конструкцию, и клетка-хозяин Bacillus для продукции представляющего интерес гетерологичного белка, содержащая указанный вектор. Предложен способ получения модифицированной клетки Bacillus, включающий трансформацию клетки-хозяина Bacillus-продуцента представляющего интерес гетерологичного белка указанным вектором; и выращивание указанной модифицированной клетки в оптимальных условиях. Описан способ получения представляющего интерес белка в модифицированной клетке Bacillus, где способ включает культивирование указанной клетки-хозяина; и выращивание указанной модифицированной клетки Bacillus в оптимальных условиях. Кроме того, раскрыт способ усиления экспрессии представляющего интерес гетерологичного белка из Bacillus, включающий получение указанной модифицированной клетки Bacillus; выращивание модифицированной клетки Bacillus воптимальных условиях; и экспрессию указанного представляющего интерес белка в модифицированной клетке Bacillus, где экспрессия указанного представляющего интерес гетерологичного белка в модифицированной клетке Bacillus усиливается по сравнению с экспрессией указанного представляющего интерес белка в указанной родительской клетке-хозяине Bacillus. Изобретение позволяет повысить выход целевого белка за счет сверхэкспрессии белка YmaH. 7 н. и 23 з.п. ф-лы, 4 ил., 3 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способам направленного изменения дуплексной акцепторной ДНК-последовательности и улучшения эффективности направленного мутагенеза в растительных протопластах. Заявленные способы включают введение в протопласты растительных клеток одноцепочечного мутагенного олигонуклеотида, имеющего в своем составе по меньшей мере один ошибочный нуклеотид по отношению к дуплексной акцепторной ДНК-последовательности, которую необходимо изменить, с использованием ПЭГ-опосредованной трансформации. Изобретение позволяет повысить частоту направленного мутагенеза. 2 н. и 8 з.п. ф-лы, 3 табл.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой новую диацилглицерол-ацилтрансферазу. Изобретение относится также к полинуклеотиду, кодирующему диацилглицерол-ацилтрансферазу, вектору экспрессии и трансформанту, такому как дрожжи или грибок, а также к способу получения композиции липидов или жирных кислот с использованием трансформанта. Изобретение позволяет получить новый фермент, пригодный для эффективной продукции липидов и жирных кислот. 6 н. и 7 з.п. ф-лы, 5 ил., 2 табл., 1 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается получения генетической конструкции, обеспечивающей синтез в клетках Escherichia coli рекомбинантного белка p35d.Представлены: рекомбинантная плазмидная ДНК pQE-p35d, обеспечивающая синтез рекомбинантного белка p35dвируса оспы коров и содержащая в соответствии с физической и генетической картой плазмиды, приведенной на фиг. 2: плазмидный вектор pQE30, фрагмент, кодирующий олигопептид MRGSHHHHHHG и фрагмент размером 717 п.о., кодирующий фрагмент белка р35 вируса оспы коров с 1 по 239 аминокислотный остаток (фиг.1а); штамм бактерий Escherichia coli XL1Blue/pQE-p35d В-1252 - продуцент рекомбинантного белка p35dвируса оспы коров, содержащий рекомбинантную плазмидную ДНК pQE-p35d, депонированный в Коллекции бактерий, бактериофагов и грибов ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» под регистрационным номером В-1252 и рекомбинантный белок p35d вируса оспы коров. Охарактеризованные решения могут быть использованы для создания тест-систем и конструирования субъединичных вакцин против ортопоксвирусных инфекций. 3 н. п. ф-лы, 7 ил., 5 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа получения рекомбинантного антигена G2 хантавирусов. Представленный способ характеризуется тем, что ДНК конструкции pGHF, кодирующая слитый белок из трех частей, где N-концевое положение занимает зеленый флуоресцентный белок GFP, центральное - пептид длиной 73 а.о. с последовательностью аминокислот SRKKCNFATTPICEYDGNMVSGYKKVMATIDSFQAFNTSYIHYTDEQIEWKDPDGMLKDHLNILVTKDIDFDT, а C-концевое - мини-домен фолдон фибритина колифага JS98C3 (фиг.2), вводят в клетки E.coli, культивируют трансформированные данной конструкцией клетки, лизируют биомассу, отделяют нерастворимую фракцию лизата центрифугированием, продукт экспрессии в форме телец включения солюбилизируют с помощью денатурата, проводят хроматографию и используют полученный продукт для выявления специфических антител в сыворотке больных геморрагической лихорадкой с почечным синдромом. Представленное решение позволяет улучшить воспроизводимость и чувствительность иммуноферментного анализа при диагностике ГЛПС. 7 ил.

Изобретение относится к области биотехнологии и генной инженерии и представляет собой рекомбинантную плазмиду pHisTevTSIB0821 для экспрессии в клетках Escherichia coli пролидазы TSIB_0821 из археи Thermococcus sibiricus. Заявленная плазмида включает NdeI/SalI-фрагмент плазмиды pET-22b(+) (Novagen) и фрагмент ДНК размером 1196 пар оснований, содержащий слитый ген, состоящий из следующих структурных элементов: нуклеотидная последовательность, кодирующая шестигистидиновый таг, нуклеотидная последовательность, кодирующая сайт узнавания/расщепления протеазы TEV, и нуклеотидная последовательность гена TSIB_0821, соединенных так, чтобы при их биосинтезе в клетках Е. coli сохранялась непрерывная рамка считывания. Получен штамм Е. coli Rosetta(DE3), трансформированный указанной плазмидой, - продуцент химерного белка, включающего аминокислотную последовательность пролидазы TSIB_0821 слитую на N-конце с шестигистидиновым тагом и сайтом узнавания/расщепления протеазы TEV. Разработан способ выращивания и индукции штамма-продуцента и метод выделения и очистки из полученной биомассы функционально-активной рекомбинантной пролидазы TSIB_0821, включающий следующие технологические процессы: две металлоаффинные хроматографии, гель-фильтрацию, обработку TEV протеазой, диализ, концентрирование. Изобретение позволяет получить рекомбинантную пролидазу, максимально приближенную по структуре к ее природному аналогу с высоким и стабильным выходом, уровнем очистки и функциональной активности. 3 н.п. ф-лы, 3 пр.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к рекомбинантной плазмидной ДНК, кодирующей ферментативно-активную часть полипептида липазы, белка пищеварительного тракта пчелиной огневки длиной в 504 аминокислотных остатков. Рекомбинантная плазмидная ДНК содержит BamHI/HindIII - фрагмента ДНК плазмиды pQE30; BamHI/HindIII - фрагмента гена Yp2 Galleria mellonella, кодирующего ферментативно-активную часть полипептида липазы, белка пищеварительного тракта пчелиной огневки; в качестве генетического маркера ген bla в-лактамазы; нуклеотидную последовательность, кодирующую полигистидиновый тракт в рамке считывания гена Yp2. Изобретение может быть использовано для создания препарата-деструктора загрязнений, содержащих твердые алканы. 4 ил., 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантных векторов, используемых для производства противогриппозных вакцин. Охарактеризованы рекомбинантная псевдоаденовирусная частица на основе генома аденовируса человека 5 серотипа и способ ее использования. Представленная частица содержит экспрессирующую кассету со вставкой гена гемагглютинина вируса гриппа, при этом в качестве гена гемагглютинина вируса гриппа был использован ген гемагглютинина штамма A/Perth/16/2009(H3N2) с предварительно оптимизированной для экспрессии в клетках человека нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ ID N0:2. Причем указанный ген гемагглютинина вируса гриппа штамма A/Perth/16/2009(H3N2) клонирован в экспрессирующую кассету, содержащую сигнал полиаденилирования SV40 под контролем промотора цитомегаловируса. Представленное изобретение может быть использовано для индукции специфического иммунитета к вирусу гриппа А субтипа H3N2 при введении индивидууму в эффективном количестве, посредством обеспечения усиленной экспрессии рекомбинантного гемагглютинина вируса гриппа A/Perth/16/2009(H3N2). 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 4 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается рекомбинантных векторов, которые могут быть использованы для противогриппозных вакцин. Охарактеризованы рекомбинантная псевдоаденовирусная частица на основе генома аденовируса человека 5 серотипа и способ ее использования в качестве компонента для создания вакцины против вируса гриппа А субтипа H1N1. Представленная рекомбинантная частица содержит экспрессирующую кассету, включающую сигнал полиаденилирования SV40 и промотор цитомегаловируса, со вставкой гена гемагглютинина вируса гриппа, при этом в качестве гена гемагглютинина вируса гриппа используют ген гемагглютинина штамма A/California/07/2009(H1N1) с предварительно оптимизированной для экспрессии в клетках человека нуклеотидной последовательностью, представленной в SEQ NO:2. Представленные изобретения позволяют индуцировать специфический иммунитет к вирусу гриппа А субтипа H1N1 посредством обеспечения повышенной экспрессии гена гемагглютинина вируса гриппа A/California/07/2009(H1N1). 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 9 ил., 1 табл., 4 пр.

Настоящее изобретение относится к области биохимии, и представляет собой способ получения 2S,4R-монатина или его соли, предусматривающий контактирование 4R-IHOG с аминотрансферазой L-аминокислоты в присутствии L-аминокислоты, и способ получения 2R,4R-монатина или его соли, предусматривающий изомеризацию 2S,4R-монатина. Также настоящее изобретение раскрывает аминотрансферазы L-аминокислоты для осуществления способов получения монатина и способ получения таких L-аминотрансфераз, предусматривающий культивирование бактериальной клетки, в которую введен вектор экспрессии, содержащий полинуклеотид, кодирующий представленную аминотрансферазу. Настоящее изобретение позволяет получить 2S,4R-монатин и 2R,4R-монатин с улучшенным выходом благодаря использованию раскрытых аминотрансфераз L-аминокислоты. 9 н. и 18 з.п. ф-лы, 6 ил., 23 табл., 48 пр.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к вариантам антител против рецептора IL-6, вариабельные области тяжелой и легкой цепи которых модифицированы путем введения аминокислотных замен. Раскрыта фармацевтическая композиция для лечения заболеваний, ассоциированных с IL-6, содержащая указанный вариант антитела. Изобретение позволяет эффективно лечить заболевания, ассоциированные с IL-6. 4 н. и 4 з.п. ф-лы, 48 ил., 16 табл, 20 пр.

Изобретение относится к области биотехнологии и касается способа синтеза целевого секретируемого белка человека в клетках дрожжей Saccharomyces cerevisiae. Способ включает культивирование в подходящих условиях дрожжей Saccharomyces cerevisiae и секрецию целевого белка, причем секреция направлена лидерным полипептидом, имеющим аминокислотную последовательность SEQ ID NO1 и представляющим собой вариант про-области лидерного полипептида белка PpPIR1 Pichia pastoris. Представленное изобретение расширяет арсенал способов получения целевого белка в дрожжах Saccharomyces cerevisiae и увеличивает возможности для эффективного синтеза таких белков. 2 ил., 4 пр.