глазные капли на основе композиции фармацевтически приемлемой аддитивной соли кислоты и метилэтилпиридинола и таурина, содержащие композицию витаминов группы в

Формула изобретения

1. Глазные капли, отличающиеся тем, что содержат композицию активных веществ, представляющую смесь фармацевтически приемлемой аддитивной соли кислоты и метилэтилпиридинола и таурина, композицию промотирующих веществ, выбранных из группы, состоящей из витамина B1, витамина B2, витамина PP и их смесей, стабилизатор, консервант, буферный агент и регулятор вязкости в следующих количествах (г/100 мл):

Композиция активных веществ	1,00-5,00
Композиция витаминов группы B	0,01-0,05
Стабилизатор	0,15-0,35
Консервант	0,10-0,30
Буферный агент	1,00-1,25
Регулятор вязкости	0,60-0,70
Вода для инъекций	до 100 мл

2. Глазные капли по п.1, отличающиеся тем, что композиция активных компонентов состоит из фармацевтически приемлемой соли 2-этил-6-метил-3-пиридин-3-ола, выбранной из группы, состоящей из гидрохлорида и сукцината, и таурина в массовом соотношении от 9:1 до 1:9, композиция витаминов группы B выбрана из группы, состоящей из витамина B1, витамина B2, витамина PP и их смесей, стабилизатор выбран из сульфита натрия и метабисульфита натрия, буферный агент выбран из смеси гидрофосфата и дигидрофосфата натрия или калия, регулятор вязкости выбран из группы, состоящей из метилцеллюлозы и гидроксипропилметилцеллюлозы, и консервант выбран из группы, состоящей из бензоата натрия и нипагина.

3. Глазные капли по п.1 или 2, отличающиеся тем, что композиция витаминов группы B состоит из витамина B2.

4. Капли по п.1 или 2, отличающиеся тем, что композиция витаминов группы B состоит из витаминов B1 и B2.

5. Капли по п.1 или 2, отличающиеся тем, что композиция витаминов группы B состоит из витаминов B1, B2 и PP.

Описание изобретения к патенту

Область техники, к которой относится изобретение

Изобретение относится к офтальмологическим препаратам, более конкретно - к глазным каплям, которые можно применять в терапевтических целях при конъюнктивальном или ретинальном кровоизлиянии, а также при кровоизлиянии в стекловидное тело, при травмах, термических и химических ожогах в области глаза. Предлагаемый препарат оказывает благотворное влияние при дегенерации макулы и/или сосудистой оболочки глаза, глаукоме, миопии и диабетической ретинопатии.

Уровень техники

Эмоксипин (3-окси-6-метил-2-этилпиридина гидрохлорид) известен как биологически активное вещество, обладающее антиагрегационным, антигипоксическим, ангиопротективным и выраженным кардиопротективным действием. Эмоксипин снижает проницаемость сосудистой стенки, улучшает микроциркуляцию, в частности, за счет уменьшения вязкости и свертываемости крови, усиливает процесс фибринолиза, повышает устойчивость мозга к гипоксии и ишемии, нормализует тканевый метаболизм, в том числе - при инсульте и инфаркте миокарда, нестабильной стенокардии.

В контексте офтальмологических применений полезные свойства эмоксипина способствуют, в частности, рассасыванию посттравматических внутриглазных кровоизлияний и улучшению кровоснабжения тканей глаза при тромбозе центральной вены сетчатки и ее ветвей. Кроме того, эмоксипин благодаря своему ретинопротективному действию способствует защите сетчатой оболочки глаза при воздействии света высокой интенсивности, применяемого при лазерокоагуляции.

Известны офтальмологические препараты в виде глазных капель, представляющие 1% водный раствор эмоксипина с фармацевтически приемлемыми добавками (буферные агенты, консервант, антиоксидант, модификатор вязкости). Примером такого препарата является «Эмоксипин. Капли глазные 1%» (ФГУП «Московский эндокринный завод», Россия). Такие капли показаны, в частности, для лечения кровоизлияния в переднюю камеру глаза и склеру (особенно - у пациентов пожилого возраста), воспалений и ожогов роговицы, а также при ношении контактных линз (защита роговицы) и осложнениях миопии.

Таурин (2-аминоэтансульфоновая кислота) играет важную роль в липидном обмене, способствует нормализации функции клеточных мембран, оптимизации энергетических и обменных процессов, сохранению электролитного состава цитоплазмы за счет накопления ионов калия и кальция. В головном мозге выполняет функцию нейромедиатора, тормозящего синаптическую передачу, обладает противосудорожной активностью. Вызывает нормализацию метаболизма глазных тканей при заболеваниях дистрофического характера.

Известны офтальмологические препараты в виде глазных капель, представляющие 4% водный раствор таурина, содержащий метилгидроксибензоат в качестве консерванта. Примером такого препарата является «Тауфон. Капли глазные 4%» (ФГУП «Московский эндокринный завод», Россия). Субконъюнктивальная инстилляция таких капель показана при дистрофических поражениях сетчатой оболочки глаза, в том числе - наследственных, дистрофии роговицы, старческой, диабетической, травматической и лучевой катаракта, а также при травмах роговицы в качестве стимулятора репаративных процессов.

Известны витаминные офтальмологические препараты в виде капель, предназначенные для улучшения питания и энергетического обмена в тканях глаза, способствующие восстановлению роговицы при раневых повреждениях и ожогах, облегчающие лечение блефарита, кератита, аллергического конъюнктивита, осуществляемое введением соответствующих лекарственных средств. Также витаминные капли показаны при катаракте. Примером такого препарата являются глазные капли «Eyelight Vita Yellow» (Hua Giang Pharmaceutical JSC, Вьетнам), состава

Витамин B1	5 мг
Витамин B2	0,2 мг
Витамин PP	40 мг
Эксципиенты (борная кислота, борат
натрия, нипагин, вода для инъекций в
достаточных количествах)	до 10 мл

Недостатком рассмотренных препаратов является узкий диапазон показаний к применению.

В патенте RU 2493841 (опубл. 27.09.2013) раскрыт синергетический препарат для лечения сердечно-сосудистой недостаточности, сахарного диабета типов I и II, заболеваний гепато-билиарной системы, отличающийся тем, что он содержит 2-75% комбинации активных компонентов и фармацевтически приемлемые носители, наполнители и вспомогательные вещества, при этом композиция активных компонентов состоит из фармацевтически приемлемой соли 2-этил-6-метил-3-пиридин-3-ола и таурина в массовом соотношении от 9:1 до 1:9. Предпочтительно препарат представлен в виде раствора для инъекций, содержащего 1,5% масс./об. сукцината метилэтилпиридинола и 3,5% масс./об. таурина, а также в виде желатиновых капсул и таблеток. Описание изобретения к указанному патенту не содержит информации, позволяющей специалисту в данной области рассматривать такой раствор для инъекций как потенциальное офтальмологическое средство.

В связи с рассмотренными причинами существует потребность в расширении арсенала лекарственных средств для лечения дистрофических и травматических поражений глаза, обладающих, в частности, более широким спектром показаний и большей эффективностью.

Раскрытие изобретения

Целью изобретения является создание комбинированного препарата для лечения травматических и дистрофических поражений глаза, не оказывающего раздражающего действия и обладающего улучшенными фармакологическими свойствами.

В результате исследований авторы изобретения установили, что недостатки известного уровня техники могут быть преодолены созданием глазных капель на основе фармацевтически приемлемой аддитивной соли кислоты и метилэтилпиридинола, содержащих композицию витаминов группы B, которая выбрана из группы, состоящей из витамина B1, витамина B2, витамина PP и их смесей.

Основными требованиями к растворам, предназначенным для инстилляции в конъюнктивальную полость, являются стерильность, прозрачность, значения pH и осмоляльности, близкие к показателям слезной жидкости здорового организма.

Стерильность необходима для обеспечения длительного хранения препарата перед применением. Она также гарантирует отсутствие патогенных микроорганизмов, выделяющих токсичные продукты жизнедеятельности, способных размножаться на конъюнктиве после введения препарата. В соответствии с изобретением стерильность при производстве обеспечивают стерилизацией и асептической упаковкой контейнеров, содержащих глазные капли, а при хранении - введением консерванта (натрия бензоата).

Прозрачность является естественным требованием для оптических сред. Показатели осмоляльности (260-330 мОсм/кг) и pH (5,5-6,2), близкие к естественным, создают комфортную среду для клеток конъюнктивы, что исключает их повреждение и неприятные ощущения рези или жжения в глазу. Специалисту в данной области очевидны теоретические и экспериментальные способы оценки концентраций компонентов в препаратах подобного типа, наиболее известным из которых является теоретический расчет с учетом изотонических эквивалентов, криометрия при переохлаждении смесью соль/лед и электронная спектроскопия в УФ-области. Введение компонентов буферной смеси (натрия гидрофосфат додекагидрат, калия дигидрофосфат) в соответствующих количествах позволяет поддерживать осмоляльность и pH в их естественных границах.

Таким образом, цель изобретения может быть достигнута с помощью глазных капель, содержащих композицию активных веществ, представляющую смесь фармацевтически приемлемой аддитивной соли кислоты и метилэтилпиридинола и таурина и композицию промотирующих веществ, выбранных из группы, состоящей из витамина B1, витамина B2, витамина PP и их смесей, указанные капли имеют состав (в г/100 мл):

Композиция активных веществ	1,00-5,00
Композиция витаминов группы B	0,01-0,05
Стабилизатор	0,15-0,35
Консервант	0,10-0,30
Буферный агент	1,00-1,25
Регулятор вязкости	0,60-0,7 0
Вода для инъекций	до 100 мл

В первом предпочтительном осуществлении изобретения композиция активных компонентов состоит из фармацевтически приемлемой соли 2-этил-6-метил-3-пиридин-3-ола, выбранной из группы, состоящей из гидрохлорида и сукцината, и таурина в массовом соотношении от 9:1 до 1:9, композиция витаминов группы B выбрана из группы, состоящей из витамина B1, витамина B2, витамина PP и их смесей, стабилизатор выбран из сульфита натрия и метабисульфита натрия, буферный агент выбран из смеси гидрофосфата и дигидрофосфата натрия или калия, регулятор вязкости выбран из группы, состоящей из метилцеллюлозы и гидроксипропилметилцеллюлозы, и консервант выбран из группы, состоящей из бензоата натрия и нипагина.

Во втором предпочтительном осуществлении изобретения композиция витаминов группы B состоит из витамина B2.

В третьем предпочтительном осуществлении изобретения композиция витаминов группы B состоит из витаминов B1 и B2.

В четвертом предпочтительном осуществлении изобретения композиция витаминов группы B состоит из витаминов B1, B2 и PP.

Капли в соответствии с изобретением не проявляют местнораздражающего действия и не вызывают системных аллергических реакций, что может быть установлено на адекватной животной модели.

Капли в соответствии с изобретением пригодны к применению в течение 2 лет, что было подтверждено сравнением физико-химических и микробиологических показателей, полученных для свежефасованного препарата и препарата после хранения. Показатели качества, подлежащие обязательному контролю (pH, поверхностное натяжение, удельное электрическое сопротивление и показатель преломления) для всех препаратов при хранении статистически достоверно (p<0,05) не отличались от исходных значений.

Капли в соответствии с изобретением обладают антигипоксическим, антидистрофическим и реэпителизирующим действием, что может быть показано на адекватных моделях in vitro и in vivo.

Достижение технического результата изобретения будет далее показано на предпочтительных примерах его осуществления.

Осуществление изобретения

Примеры 1-3. Глазные капли

А. Приготовление раствора композиции активных веществ

В соответствии с санитарными нормами готовят стеклянный аппарат, имеющий рабочий объем 0,8 л и снабженный мешалкой, термометром и барботером. В аппарат загружают 550-570 мл воды для инъекций с температурой 20-25°C, через барботер подают азот и при перемешивании вносят 6,0 г метилэтилпиридинола гидрохлорида, добиваются полного растворения, после чего растворяют 54,0 г таурина. Объем раствора доводят до 600 мл и продувают азотом. Массовое соотношение метилэтилпиридинола гидрохлорида и таурина составляет 1:9.

Б. Приготовление глазных капель

В асептических условиях в стеклянный аппарат, имеющий рабочий объем 1,0 л, снабженный мешалкой и термометром, помещают 670-700 мл воды для инъекций и последовательно растворяют в ней 4,875 г метилцеллюлозы водорастворимой, 1,500 г натрия бензоата, 4,050 г калия дигидрофосфата, 4,875 г натрия дигидрофосфата додекагидрата и 1,500 г натрия сульфита. Полученный раствор разделяют на три части по 250 мл, помещая каждую часть в асептических условиях в отдельную колбу.

В трех стерильных стеклянных аппаратах, имеющих рабочий объем 0,8 л и снабженных мешалкой и термометром, готовят три композиции промотирующих веществ (витаминов группы B), смешивая следующие навески компонентов:

Пример	Масса витамина, мг			Массовое соотношение
	B1	B2	PP
1	0	25,0	0	-
2	22,5	2,5	0	B1/B2 9:1
3	4,5	0,5	20,0	B1/B2/PP 9:1:40

и растворяя их при перемешивании в 250 мл полученного ранее раствора. В каждый аппарат при перемешивании добавляют по 200 мл раствора композиции активных веществ, приготовленного по методике A, приведенной выше, и объем каждого раствора доводят до 500 мл.

Прозрачные растворы подвергают последовательной стерилизующей фильтрации через мембранные фильтры с отсекающей способностью 1,0 и 0,2 мкм и порциями по 10 мл асептически упаковывают в стеклянные флаконы, которые герметизируют резиновыми крышками и обкатывают алюминиевыми колпачками, после чего снабжают этикетками с указанием информации, необходимой для идентификации и применения, и помещают в картонные коробки.

Приготовленные глазные капли имеют следующий состав (г/100 мл):

Композиция активных веществ	4,00
Композиция промотирующих веществ	0,01
Натрия сульфит	0,25
Натрия бензоат	0,20
Натрия дигидрофосфат додекагидрат	0,65
Калия дигидрофосфат	0,54
Метилцеллюлоза водорастворимая	0,65
Вода для инъекций	до 100 мл

Пример 4. Оценка аллергенности капель in vivo

Исследование проводят на 9 кроликах породы «шиншилла» массой 2,1-2,4 кг, содержавшихся на 10-дневном карантине при естественном освещении и свободном доступе к корму и воде в стандартных клетках по одной особи в каждой клетке.

В течение 2 недель в правый глаз каждого кролика (группа из трех кроликов для исследования каждого препарата) утром и вечером инстиллировали исследуемые капли. В левый (контрольный) глаз инстиллировали стерильный изотонический раствор натрия хлорида. Наблюдение за животными в светлое время суток вели в течение всего времени исследования, оценивая следующие показатели: внешний вид (состояние тела, зубов и шерстяного покрова, вид глаз, конечностей и ушей), двигательные функции (активность, мышечный тонус, ориентация в пространстве, темперамент), дыхание, слюноотделение, частота выделения и вид мочи и экскрементов.

В течение 2 недель исследования внешний вид кроликов неизменен: выпадения шерсти и/или зубов, изменений показателей двигательной и выделительной функций не отмечено. Экскременты оформленные, дыхание ровное, незатрудненное. Инстилляция препарата не доставляет животным беспокойства и в течение последующего часа не вызывает отека, гиперемии и/или слезотечения.

По окончании исследования визуальный осмотр не выявил различий правого и левого глаз по состоянию век, роговицы, радужной оболочки и хрусталика. Наблюдения указывают на отсутствие местнораздражающего действия любого из препаратов, предоставляемых в соответствии с предпочтительными вариантами осуществления изобретения.

Пример 5. Оценка антигипоксического действия капель на модели хемилюминесценции (ХЛ) суспензии фосфолипидных липосом, индуцированной ионами железа(II)

А. Получение суспензии липосом

Для экстракции фосфолипидов из общей фракции фосфолипидов желтка яиц один объем желтка яиц гомогенизируют в течение 30 мин в 20 объемах хлороформ-метанольной смеси (2:1 по объему), гомогенат фильтруют через обезжиренный бумажный фильтр для отделения агрегировавшего белка. Полученный липидный экстракт промывают 0,74% водным раствором KCl (1/3 общего объема). После отстаивания в течение 12 час при 0-4 C верхнюю водно-метанольную фазу тщательно удаляют, нижнюю фазу переливают в круглодонную колбу и выпаривают на роторном испарителе. Сухую липидную пленку смывают 3-4 мл гексана и добавляют 20-кратное количество охлажденного ацетона, при этом фосфолипиды выпадают в осадок в виде белых хлопьев. Преципитацию фосфолипидов ацетоном проводят 5 раз. Полученные фосфолипиды растворяют в хлороформ-метанольной смеси. Концентрацию фосфолипидов определяли гравиметрически.

Для приготовления многослойных фосфолипидных липосом необходимое количество хлороформ-метанольного раствора фосфолипидов помещают в круглодонную колбу и упаривают растворитель на вакуумном роторном испарителе. Сухую липидную пленку смывают со стенок колбы 20 мМ трис-HCl буфером с pH 7,4. С целью формирования более однородных по размеру липосом полученную липосомальную суспензию подвергают криолитической обработке путем трехкратного замораживания-оттаивания. Перед использованием суспензию липосом выдерживают не менее 1 часа при 37°C.

Б. Хемилюминесцентные измерения

Хемилюминесцентные измерения проводят с помощью хемилюминометра ХЛМ-3 («Бикап», Россия). Данные регистрируют и обрабатывают с помощью USB-лаборатории PCSGU250 и комплекта прилагаемого к ней ПО (Velleman, Бельгия).

Реакционная среда общим объемом 5 мл содержит 0,1 мл суспензии липосом с концентрацией по фосфолипиду 0,4 мг/мл в 20 мМ трис-HCl буфера с pH 7,4. В систему вводят спиртовой раствор C-525 до конечной концентрации 1 мкМ. Инициирование липидной пероксидации осуществляли введением раствора FeSO₄ до конечной концентрации 7 мкМ, после чего в течение 10-30 мин регистрируют кинетику изменения интенсивности хемилюминесценции.

Для измерений в кювету хемилюминометра последовательно добавляют фосфатный буфер (50 мМ KH₂ PO₄, 100 мкМ ЭДТА, pH 7,4) до конечного объема 5 мл, 0,3 мкМ Нв, 10 мкМ ЛМ и определенный объем исследуемого объекта. Инициирование окисления ЛМ осуществляют введением 52 мкМ пероксида водорода. Исследуемые вещества добавляли перед введением H ₂O₂.

Параметрами кинетической модели, характеризующими эффективность препаратов в качестве антиоксидантных и ретинопротекторных средств, являются относительные значения амплитуды t/t₀ и индукционного (латентного) периода h/h₀ ХЛ, рассчитанные относительно контроля. Чем меньше значения указанных величин, тем более активным является препарат.

Данные, представленные в таблице 1,

Таблица 1
Препарат	t/t0	h/h0
Контроль	1,00	1,00
Эмоксипин	0,42	0,57
Пример 1	0,28	0,37
Пример 2	0,33	0,48
Пример 3	0,36	0,51

показывают, что капли в соответствии с изобретением обладают более выраженными антиоксидантными свойствами по сравнению с известным препаратом «Эмоксипин. Капли глазные 1%» (среднеквадратичное отклонение не более 8%).

Пример 6. Оценка реэпителизирующего действия на модели травмы роговицы

Опыты проводят на 7 кроликах породы «Шиншилла», весом 2-2,5 кг. После эпибульбарной анестезии трепаном диаметром 6,0 мм производят надрез передних слоев стромы роговицы, после чего слой этот под уровень кромки надреза удаляют вместе с эпителием.

Препарат инстиллируют 3 раза в сутки в правый глаз. Левый глаз служит контролем - в него инстиллируют физиологический раствор.

Реэпителизацию и регенерацию тканей стромы роговицы оценивают по динамике изменений внешних проявлений воспалительной реакции, фибринной пленки на дефекте рогвицы, отека стромы и по времени заполнения дефекта тканью и полной эпителизации и выражают в часах относительно контрольного глаза (знак «минус» указывает на ускорение процессов). Результаты, представленные в таблице 2,

Таблица 2
Препарат	Среднее время регистрации состояния относительно контрольного глаза, ч
	А	Б	В	Г	Д
Эмоксипин	-36	-27	-89	-33	-15
Пример 1	-43	-34	-96	-40	-20
Пример 2	-39	-31	-92	-36	-17
Пример 3	-37	-29	-91	-34	-16
А - исчезновение признаков воспаления;
Б - исчезновение фибринной пленки;
В - исчезновение отека стромы;
Г - заполнение дефекта танью;
Д - полная реэпителизация.

свидетельствуют о более высокой активности капель в соответствии с изобретением по сравнению с известным препаратом «Эмоксипин. Капли глазные 1%».