способ моделирования экспериментальной кардиопатии

Формула изобретения

Способ моделирования экспериментальной кардиопатии, отличающийся тем, что старым крысам однократно вводят равнодолевую смесь нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций: внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно.

Описание изобретения к патенту

Данное изобретение относится к медицине, экспериментальной биологии и может быть использовано для моделирования экспериментальной кардиопатии у животных с целью получения возможности изучения патогенеза, профилактики и лечения кардиопатии.

Кардиопатия, cardiopathia (от греч. cardia - сердце и pathos - страдание, поражение), термин, применяемый по отношению к таким изменениям сердца, которые представляют собой длительное или стойкое патологическое состояние, являющееся следствием предшествовавших дегенеративных или воспалительных процессов.

В связи с актуальностью проблемы кардиопатии возникла необходимость разработки и создания способов ее моделирования для получения возможности дальнейшего изучения патогенеза, профилактики и лечения кардиопатии.

Известен способ моделирования хронической токсической артериальной гипертонии и кардиопатии (патент РФ на изобретение № 2364947 С1, Митциев А.К., Брин В.Б., Кабисов О.Т., зарегистрированный 14.04.2008, заявка № 2008114661/14 от 14.04.2008 г., МПК` G09B 23/28), заключающийся в введении экспериментальным животным раствора ацетата свинца 1 раз в сутки ежедневно в дозе 40 мг/кг в пересчете на металл. При этом на единицу раствора, равную 0,2 мл, приходится 8 мг свинца.

Недостаток данного способа заключается в том, что экспериментальным животным нужно ежедневно зондировать желудок, а это является довольно сложной манипуляцией, требующей владения специальными навыками. Также работа с ацетатом свинца представляет некоторую опасность, в связи с его высокой токсичностью.

Также известен способ моделирования хронической токсической кардиопатии (патент РФ на изобретение 2426173 С1, Албегова Ж.К., Брин В.Б., Кабисов О.Т., зарегистрированный 22.03.2010 г., заявка № 2010110932/14 от 22.03.2010 г., МПК` G09B 23/28), заключающийся в введении экспериментальным животным ежедневно в течение двух месяцев через зонд в желудок раствора молибдата аммония в дозе 5 мг/100 г массы тела в пересчете на металл. При этом на единицу раствора, равную 1 мл, приходится 50 мг молибдена.

Недостатками данного способа является необходимость многократного введения в желудок ежедневно один раз в сутки экзогенных веществ, при этом каждый раз приходится производить зондирование животных, что сопряжено с риском травматизации животных и нарушения чистоты опыта.

Известен способ моделирования хронической токсической кардиопатии (патент РФ на изобретение 2402824 С1, Албегова Ж.К., Брин В.Б., Кабисов О.Т., зарегистрированный 21.07.2009 г., заявка № 2009128296/14 от 21.07.2009 г., МПК` G09B 23/28), заключающийся в введении животным ежедневно в течение месяца через зонд в желудок раствора хлорида никеля в дозе 2,5 мг/100 г в пересчете на металл. При этом на единицу раствора, равную 1 мл, приходится 25 мг никеля.

Недостатками данного способа также является необходимость многократного введения в желудок ежедневно один раз в сутки экзогенных веществ, при этом каждый раз приходится производить зондирование животных, что является довольно сложной манипуляцией, требующей владения специальными навыками и сопряжено с риском травматизации животных и нарушения чистоты опыта.

Заявляемое изобретение направлено на решение задачи, заключающейся в разработке способа моделирования экспериментальной кардиопатии.

Решение этой задачи обеспечивает расширение возможностей моделирования экспериментальной кардиопатии у животных.

Способ моделирования экспериментальной кардиопатии у животных, отличающийся тем, что старым крысам однократно вводят равнодолевую смесь нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций - внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно.

Заявленный способ является эффективным, экономически выгодным и легко воспроизводимым.

По имеющимся у автора сведениям совокупность существенных признаков, характеризующих сущность заявляемого изобретения, не известна, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «новизна».

Экспериментальным животным (старые крысы-самцы в возрасте 18-24 мес, массой тела 350-400 гр.) однократно вводят равнодолевую смесь нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций, что обеспечивает расширение возможностей моделирования экспериментальной кардиопатии у животных, что позволяет сделать вывод о соответствии критерию «изобретательский уровень».

Совокупность существенных признаков, характеризующих сущность изобретения, в принципе может быть многократно использована в медицине с получением результата, заключающегося в эффективном и легко воспроизводимом способе моделирования экспериментальной кардиопатии у животных, что позволяет сделать вывод о соответствии изобретения критерию «промышленная применимость».

Данный способ осуществляется следующим образом.

Для получения экспериментальной кардиопатии в качестве экспериментальных животных выбраны крысы-самцы линии «Вистар» массой 350-400 гр. в возрасте 18-24 мес, так как именно старческая брадитрофия тканей позволяет ставить вопрос о моделировании кардиопатии. Для моделирования кардиопатии экспериментальным животным однократно проводятся инъекции равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций (внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области подкожно слева и справа). У контрольных и опытных животных под тиопенталовым наркозом исследуются гемодинамические показатели инвазивным способом.

Животные исследуются под наркозом в сроки: 60 дней эксперимента, после чего забиваются. Образцы тканей фиксируются в 10% нейтральном формалине с последующим приготовлением парафиновых срезов толщиной 5-6 микрон. Срезы окрашиваются гематоксилином и эозином, конго-красным. Изучение срезов проводится в проходящем свете при помощи микроскопа Микмед-1 под увеличением × 80, × 200, × 600.

Сущность заявляемого способа подтверждается функционально и морфологически.

При исследовании основных показателей гемодинамики отмечалось снижение: среднего артериального давления на 4,3%, сердечного индекса на 22,0%, ударного индекса на 16,4%, частоты сердечных сокращений на 6,0% и повышение удельного периферического сосудистого сопротивления на 24,1% по сравнению с контролем (табл.1).

Таблица 1
Изменения основных показателей гемодинамики при формировании экспериментальной кардиопатии
Группа	Показатель	САД	Серд. Индекс	Ударн. Индекс	УПСС	ЧСС
Интактная	М±m	114±1	47,2±0,32	0,118±0,003	1,93±0,01	401±8
Опытная	М±m	109,1±1,5	36,8±1,36	0,098±0,005	2,39±0,11	376,8±11
	t	1,933	4,495	2,17	2,46	1,258
	Р	0,0852	0,0015	0,0576	0,0362	0,24

Пример № 1.

Проведены серии опытов из 2-х групп:

1-я группа (20 крыс-самцов линии «Вистар») - контрольная

2-я группа (20 крыс-самцов линии «Вистар») - опытная - старым крысам-самцам (возраст 18-24 мес, масса тела 350-400 г) однократно проводились инъекции равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций (внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно).

Морфологическому исследованию на предмет выявления кардиопатии подвергнут миокард, кровеносные сосуды.

В результате проведенных исследований получены морфологические доказательства эффективности применения нативного яичного альбумина в сочетании с полным адъювантом Фрейнда для моделирования экспериментальной кардиопатии у старых крыс-самцов.

Гистологически (окраска гематоксилин и эозин, ув. ×80) у 2-й группы животных в миокарде (фиг.1) при окраске срезов гематоксилином и эозином, а также конго-красным отмечалась белковая и жировая дистрофия кардиомиоцитов (а), их очаговая конгофилия (б) и исчезновение поперечной исчерченности (в), набухание отдельных групп кардиомиоцитов, гомогенизация (г). Фокусные очаги фибриноидного некроза и дегенеративные изменения интерстициальных структур. Мукоидное фибриноидное набухание с очаговым разрыхлением и гомогенизацией волокнистых элементов интерстиция (д).

В миокарде крысы при экспериментальном моделировании кардиопатии (окраска гематоксилин и эозин, ув. × 600 (фиг.2)) отмечены дистрофические (а) и некробиотические изменения микроциркуляторного русла (б) - прекапилляров, капилляров, посткапилляров венул и лимфатических капилляров в виде застойной гиперемии, гиперперфузии, плазматического пропитывания стенок, периваскуляного отека, склероза отдельных участков, гиалиноза просвета терминальных фрагментов микрососудистой сети (в). Во всех указанных отделах микроциркуляции, начиная с артериол, отмечается выраженная конгофилия стенок и периваскулярных пространств микрососудистой системы. Местами отмечаются атрофичные участки кардиомиоцитов с пролиферацией лимфогистиоцитарных элементов (г).

Исходя из полученных результатов исследования обосновывается использование равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций (внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно) для моделирования кардиопатии у старых крыс.

Подводя итог, следует отметить, что однократное подкожное введение старым крысам равнодолевой смеси нативного яичного альбумина и полного адъюванта Фрейнда из расчета по 0,2 мл в 5 точек инъекций (внутрибрюшинно, в паховые и подмышечные области слева и справа подкожно) является эффективным способом моделирования экспериментальной кардиопатии.