способ прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов сердца
Классы МПК: | G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого |
Автор(ы): | Шевченко Ольга Павловна (RU), Халилулин Тимур Абдулнаимович (RU), Орлова Ольга Владимировна (RU), Честухин Василий Васильевич (RU), Миронков Борис Леонтьевич (RU), Казаков Эдуард Николавич (RU), Кормер Аркадий Янкелевич (RU), Остроумов Евгений Николаевич (RU), Готье Сергей Владимирович (RU) |
Патентообладатель(и): | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный научный центр трансплантологии и искусственных органов имени академика В.И. Шумакова" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2012-04-10 публикация патента:
20.09.2013 |
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии и может быть использовано для прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов после трансплантации сердца. Сущность изобретения заключается в следующем: оценивают уровень плацентарного фактора роста (P1GF) в плазме крови реципиентов сердца на этапе до трансплантации сердца и в сроки от 24 до 36 месяцев после трансплантации. При увеличении уровня P1GF более чем на 60% от дотрансплантационного, прогнозируют развитие необратимой дисфункции трансплантата. Использование изобретения обеспечивает возможность прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата в отдаленные сроки у реципиентов после трансплантации сердца. 3 пр.
Формула изобретения
Способ прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов после трансплантации сердца, при котором у реципиента до трансплантации сердца и в сроки от 24 до 36 месяцев после нее определяют уровень плацентарного фактора роста в плазме крови, а развитие необратимой дисфункции трансплантата прогнозируют по увеличению более чем на 60% указанного уровня плацентарного фактора роста.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, а именно к трансплантологии, и может быть использовано для прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у пациентов после трансплантации сердца.
Болезнь коронарных артерий пересаженного сердца (БКАПС) является наиболее частой причиной, ограничивающей длительность жизни реципиентов сердца. Тяжесть поражения коронарного русла трансплантата прямо связана с длительностью выживаемости пациентов после трансплантации сердца. Тяжелое диффузное поражение дистального русла коронарных артерий приводит к необратимой дисфункции трансплантата сердца, сопровождается явлениями выраженной сердечной недостаточности и приводит к высокой летальности пациентов. Эффективных методик, позволяющих добиться радикального регресса тяжелой дисфункции трансплантата сердца, развивающейся в отдаленные сроки, в настоящее время не существует, единственно возможный радикальный метод лечения данной патологии является повторная трансплантация сердца (ретрансплантация).
Существующие в настоящее время методы лечения БКАПС и хронического антителообусловленного отторжения при развитии необратимой дисфункции трансплантата не эффективны. Основным методом, способным уменьшить или предотвратить тяжелую клиническую симптоматику является раннее прогнозирование и профилактика данной патологии. Клиническое значение прогноза развития необратимой дисфункции трансплантата в отдаленном периоде состоит в возможности более ранней диагностики патологии, усиление протоколов иммуносупрессии, увеличении частоты проведения контрольных биопсий трансплантата и коронароангиографий у пациентов с негативным прогнозом. В результате, это позволит добиться лучшей выживаемости в этой группе реципиентов сердца за счет ранней диагностики и своевременно начатого лечения, кроме того, это позволит значительно снизить экономические затраты при выполнении ретрансплантации сердца пациентам.
Известен способ прогнозирования развития поражения коронарного русла трансплантата у реципиентов сердца, основанный на выявлении высоких (превышающих медиану распределения) дотрансплантационных уровней показателей плацентарного фактора роста («Роль маркеров воспаления, тромбообразования, неоангиогенеза и апоптоза в прогнозировании и развитии васкулопатии трансплантированного сердца» Орлова О.В. Диссертация на соискание ученой степени доктора мед. наук, Москва, 2009 г.).
В литературе не найдено методик, позволяющих прогнозировать необратимую дисфункцию миокарда у реципиентов трансплантированного сердца.
Нами поставлена задача - разработать способ прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата у реципиентов сердца в отдаленном периоде.
Технический результат состоит в обеспечении возможности прогноза развития необратимой дисфункции трансплантата в отдаленные сроки у реципиентов после трансплантации сердца (ТС).
Нами выявлено, что существенное значение имеет не исходно высокий уровень плацентарного фактора роста в плазме крови, а степень нарастание его концентрации в течение 2-3 лет после трансплантации, вне зависимости от того был ли повышен дотрансплантационный уровень.
Сущность изобретения заключается в следующем:
Оценивают уровень плацентарного фактора роста (P1GF) в плазме крови реципиентов сердца на этапе до трансплантации сердца и в сроки от 24 до 36 месяцев после трансплантации. При увеличении уровня P1GF более, чем на 60% от дотрансплантационного, прогнозируют развитие необратимой дисфункции трансплантата.
Нами установлено, что нарастание уровня P1GF плазмы крови с момента до трансплантации к 24-36 месяцам после трансплантации сердца является достоверным прогностическим признаком необратимой дисфункции трансплантата.
Способ осуществляется следующим образом.
Уровень P1GF определяют в плазме крови пациентов, получаемую из образцов венозной крови. Кровь берут натощак в количестве 5 мл с добавлением гепарина (10 ед на 1 мл крови). Для получения плазмы исследуемые образцы крови центрифугируют, отделяя клеточные элементы, при 1500 оборотах в минуту в течение 30 минут при комнатной температуре (20°C). Плазму отбирают, при необходимости замораживают и хранят при температуре -20°C не более 6 месяцев. Для проведения лабораторного анализа образцы плазмы размораживают, повторные циклы замораживания-оттаивания не допускаются. Измерение уровня P1GF производят методом иммуноферментного анализа в микропланшетном формате в соответствии с инструкцией к набору, например, с помощью набора для количественного определения уровня P1GF в плазме крови методом иммуноферментного анализа «R&D SYSTEMS», США. Уровень P1GF определяют на этапе дотрансплантационного обследования и, как минимум, один раз в сроки от 24 до 36 месяцев после трансплантации.
Для подтверждения возможности реализации заявленного назначения и достижения указанного технического результата приводим следующие данные.
Предложенный способ был использован для прогноза развития необратимой дисфункции трансплантата у 28 реципиентов после трансплантации сердца. Во всех случаях прогноз необратимой дисфункции трансплантата, определенный с помощью предложенного нами способа, был подтвержден клинически и по данным коронароангиографического исследования.
Из 28 включенных в исследование пациентов у 6 развилась необратимая дисфункция трансплантата, сопровождающаяся выраженной клиникой сердечной недостаточности и снижением сократительной способности миокарда (фракция изгнания левого желудочка менее 35%). Во всех случаях (100%) прогноз подтвердился. Уровни P1GF, измеренные в сроки от 24 до 36 месяцев, превышали дотрансплантационные значения не менее чем на 60% (до 166%).
Выявленная коронарная дисфункция трансплантата потребовала выполнения ретрансплантации сердца у 2 пациентов в сроки от 54 до 67 месяцев после ТС.
Напротив, исходный, дотрансплантационный уровень P1GF плазмы крови реципиентов не отличался от такового через 24-36 месяцев после трансплантации у пациентов без выраженной дисфункции трансплантата, либо с легким и умеренным поражением коронарного русла. Уровень P1GF после трансплантации (в сроки от 24 до 36 месяцев) у всех пациентов этой группы оставался на прежнем уровне или мог превышать исходный, но не более, чем на 60%.
Приводим конкретные клинические примеры.
Пример 1
Пациент Т., 28 лет. Трансплантация сердца выполнена 18.03.2004 г. Дотрансплантационный уровень P1GF плазмы крови составил 7 пг/мл (ниже порогового значения 12 пг/мл при котором прогнозируют развитие васкулопатии трансплантата). Через 2 года после ТС уровень P1GF составил 18,67 пг/мл, что на 167% выше дотрансплантационного уровня. По данным обследования прогнозировалось развитие необратимой дисфункции трансплантата сердца.
Через 5 лет и 3 месяца после ТС у данного пациента было выявлено снижение сократительной способности миокарда по данным ультразвукового исследования сердца (расширение полостей сердца, снижение фракции изгнания до 43%) и радиоизотопной сцинтиграфии (до 42%). По данным очередной плановой коронарографии было выявлено поражение передней межжелудочковой артерии. Несмотря на проведенное стентирование коронарной артерии, спустя 3 месяца после процедуры выявлено усугубление дисфункции миокарда, снижение фракции изгнания по данным ультразвукового исследования сердца до 35%, по данным радиоизотопных методов диагностики до 29%, что потребовало повторной постановки пациента в лист ожидания и выполнения ретрансплантации сердца.
Таким образом, прогноз развития необратимой дисфункции трансплантата подтвердился.
Уровень P1GF в плазме крови можно рассматривать как значимый фактор риска, позволяющий на основе простого измерения его уровня в плазме крови в дотрансплантационном периоде и сроки от 24 до 36 месяцев после операции предположить развитие необратимой дисфункции трансплантата в отдаленном посттрансплантационном периоде.
Пример 2
Пациент А., 50 лет. Трансплантация сердца выполнена 9.05.2007 г. Дотрансплантационный уровень P1GF плазмы крови составил 10 пг/мл (ниже порогового значения 12 пг/мл). Через 2 года после ТС уровень P1GF составил 17 пг/мл, что на 70% выше дотрансплантационного уровня.
Таким образом, по данным обследования прогнозировалось развитие необратимой дисфункции трансплантата.
В течение всего периода наблюдения у больного отмечались эпизоды персистирующего антителообусловленного отторжения со снижением сократительной способности миокарда. У больного стали появляться и нарастать признаки дисфункции трансплантата. Появилась выраженная одышка в покое, отеки голеней, стоп, выраженный асцит.
При очередном коронароангиографическом исследовании через 2 года и 2 месяца у больного было выявлено поражение коронарного русла, преимущественно дистальных сегментов. Приводим данные коронароангиографического исследования. Передняя межжелудочковая ветвь: артерия диффузно изменена в проксимальной и средней трети, далее падение диаметра в дистальной трети, просвет менее 1 мм в дистальной трети. Диагональная ветвь: стенотического поражения не выявлено. Огибающая ветвь: два последовательных стеноза 1 степени в проксимальной трети. Правая коронарная артерия: стеноз 1 степени на границе средней и дистальной трети. Ветвь острого края - стеноз 3 степени в дистальной трети. Задняя межжелудочковая ветвь - протяженный стеноз 3 степени в дистальной трети.
По данным ультразвукового исследования сердца отмечалось снижение сократительной способности миокарда до 30%.
Выявленная патология трансплантата была связана с тяжелым поражением коронарных артерий и носила необратимых характер. В связи с чем больной был включен в лист ожидания на ретрансплантацию сердца так как этот метод лечения является единственным радикальным подходом при данной патологии. В январе 2012 года больному была выполнена повторная трансплантация сердца.
Таким образом, в описанных клинических примерах прогноз развития необратимой дисфункции трансплантата подтвердился. При уровне P1GF, измеренном в плазме крови в сроки от 24 до 36 месяцев после ТС, превышающим дотрансплантационный, как минимум, на 60% прогнозируется развитие необратимой дисфункции миокарда в отдаленные сроки после ТС.
Пример 3
Пациент Л., 47 лет. Трансплантация сердца выполнена 18.01.2006 г. Дотрансплантационный уровень P1GF плазмы крови составил 13 пг/мл (выше порогового значения 12 пг/мл). Через 2,5 года после ТС уровень P1GF оставался на прежнем уровне и составил 13 пг/мл. Развитие необратимой дисфункции миокарда не прогнозировалось.
В течение всего срока наблюдения, который до настоящего времени составляет 60 месяцев, у больного в плановом порядке выполняли контрольные исследования (ЭХО-кардиографическое, коронароангиографическое исследования, радиоизотопные методы исследования) по данным которых признаков нарушения функции трансплантата не выявлено.
Таким образом, несмотря на исходно повышенный уровень P1GF (13 пг/мл) с учетом отсутствия нарастания его концентрации к 24-36 месяцам после трансплантации прогноз полностью оправдался.
Таким образом, применение в практике данного метода прогнозирования развития необратимой дисфункции трансплантата сердца в отдаленные сроки после трансплантации позволит выделить группу реципиентов сердца с негативным прогнозом, которым своевременно будет назначаться дополнительное проведение контрольных биопсий миокарда трансплантата сердца, коронароангиографических исследований и усиление протоколов иммуносупрессивной терапии. В результате это позволит повысить выживаемость реципиентов сердца и значительно улучшить качество их жизни.
Класс G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого