способ перорального введения препарата дилудин молоди длиннопалого рака (astacus leptodactylus esch.) для повышения его биопродуктивности

Формула изобретения

Способ перорального введения препарата дилудин молоди длиннопалого рака (Astacus leptodactylus Esch.) для повышения его биопродуктивности, отличающийся тем, что для поступления в организм молоди рака эффективных флюорисцирующих препаратов класса производных дигидропиридинов предлагается опосредованный механизм доставки их посредством живого зоопланктона, который при фильтрации пищи аккумулирует препарат и является доминирующим компонентом в кормовом рационе молоди рака.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к раководству, в частности к разработке ресурсосберегающих биотехнологических приемов повышения выживаемости и биопродуктивности рака.

Известно, что препарат дилудин (2,6-диметил-3,5 дикарбэтокси-1,4-дигидропиридин, C₁₃H₁₉N_O4) используется в качестве кормовой добавки для различных видов животных в качестве антиоксиданта и стимулятора роста, а также в качестве комплексона и антимутагена с эффективным ростостимулирующим действием [1-9]. Все вышеперечисленные свойства препарата могут быть использованы при промышленном выращивании молоди раков. Учитывая низкие темпы роста и развития ракообразных в условиях естественных водоемов Беларуси, использование кормов с добавкой дилудина для выращивания раков в промышленных масштабах позволит получить большое количество молоди рака, более жизнеспособного и устойчивого к заболеваниям.

При выращивании раков на промышленной основе и в аквариумистике для кормления молоди раков используются как живые корма (зоопланктон, водоросли и др.), так и стартовые искусственные многокомпонентные корма [10-13]. Известен способ введения препарата дилудин в искусственные корма для гидробионтов путем замешивания с различными компонентами животного и растительного происхождения с дальнейшей грануляцией корма [6]. Недостатком искусственных стартовых комбикормов для раков является их высокая стоимость, что обуславливает высокую себестоимость выращенной продукции и низкую рентабельность раководства [10-13].

Задачей настоящего изобретения является разработка нового биотехнологического приема повышения выживаемости и продуктивности рака за счет использования установленных ростостимулирующих свойств препарата дилудин и удобного способа его введения в корма для молоди раков. Поставленная задача достигается тем, что в качестве посредника по доставке препарата в организм молоди раков предложено использовать живые пищевые организмы, а именно зоопланктон, доминирующий на 70-80% в кормовом рационе у молоди рака в раннем онтогенезе.

При разработке данного способа введения препарата в живые корма для молоди раков были использованы известные свойства препарата дилудин, в частности такие как: водонерастворимость; мелкодисперсность; желтое флюоресцентное свечение в проникающем свете; способность образовывать коллоидную массу при его размешивании в воде [1].

Эффективность предложенного способа введения препарата дилудин в организм молоди рака для повышения его биопродуктивности посредством доставки с помощью живого зоопланктона с аккумулированным дилудином продемонстрирована на следующих примерах.

Пример 1. Аккумуляция дилудина дафниями.

Для выращивания зоопланктона, используемого в качестве живого корма для молоди рака, были оборудованы четыре замкнутых устройства с водой (в рыбоводстве они называются «дафниевые ямы»). В воде этих ям был разведен до коллоидной массы препарат дилудин. Затем туда была посажена маточная культура живого зоопланктона, отловленного в выростных прудах хозяйства. При изучении видового состава отловленного зоопланктона было установлено, что основная биомасса представлена прозрачным ветвистоусым рачком - дафнией (Daphnia longispina). Основной пищей для дафний служат бактерии, одноклеточные водоросли и органические частицы. Питаются дафнии путем отфильтровывания пищевых объектов, создавая токи воды ритмическими движениями грудных ножек.

Световая микроскопия дафний, выполненная через 30 минут после их помещения в воду с дилудином, показала, что в кишечнике дафний находится дилудин, дающий четкую желто-зеленую флюорисцентную окраску [1].

Как показали дальнейшие исследования, дилудин не оказывал отрицательного воздействия на выживаемость, видовой состав и биомассу зоопланктона в течение месяца наблюдения. Более того, через месяц после начала эксперимента было зарегистрировано увеличение в 2,1 раза численности зоопланктона в опытных ямах по сравнению с контрольными. Это свидетельствует о том, что дилудин стимулирует рост численности и биомассы дафний при их культивировании в дафниевых ямах, то есть проявляет ростостимулирующий эффект.

Пример 2. Влияние дилудина, аккумулированного в организме дафний, на рост и развитие молоди рака

Молодь рака выращивали в 12 садках, погруженных в воду и закрытых полиэтиленовыми укрытиями.

Перед посадкой личинок рака в садки были изучены их морфометрические показатели. Личинки, посаженные в контрольные и опытные садки, не отличались по линейным и весовым показателям (таблица 1). Молодь рака выращивались в садках с разной плотностью посадки, а именно 15 экз. на 1 м² и 30 экз. на 1 м ².

Для кормления опытной молоди рака при низкой плотности посадки личинок рака в садки вносили по 1 кг живого зоопланктона с отфильтрованным и аккумулированным дилудином, а при высокой плотности посадки личинок рака соответственно по 2 кг. Зоопланктон в контроле (без препарата) задавался личинкам рака в аналогичных опыту количествах. Длительность опытного скармливания личинкам рака живого зоопланктона, с поглощенным дилудином, составляла один месяц (с 01.07 по 30.07.2009 г.).

Таким образом, было проведено две серии экспериментов с трехкратным повтором по введению препарата дилудин молоди рака новым способом и изучению его влияния на биопродуктивность рака при низкой и высокой плотностях выращивания.

Каждые десять дней анализировались рост и развитие молоди рака, а также их выживаемость и частоты встречаемости морфологических отклонений.

Полный гидрохимический анализ проб воды в пруду и садках осуществлялся лабораторией хозяйства раз в декаду. Оперативный гидрохимический контроль в течение эксперимента проводили ежедневно с помощью термооксиметра «Horiba-U7» (Япония).

Результаты полного гидрохимического анализа в пруду и садках на начало постановки и в ходе проведения экспериментов показали, что вода полностью соответствовала оптимальным параметрам для выращивания молоди раков (таблица 2) [14,15].

На протяжении всего хода эксперимента отклонений от нормы по гидрохимическим показателям в садках не зарегистрировано.

Таблица 2
Обобщенные результаты гидрохимических исследований воды с 01.07. по 30.07.2009 г.
Наименование показателей	Ед. изм.	Реальные значения в садках	Оптимальные значения
Температура воды	град. С	19,9-23,5	22,0-25,0
Содержание кислорода	мг/л	7,8-8,1	5,5-9,5
РН		7,7-7,9	7,0-8,6
Азот аммонийный	мг/л	0,03-0,05	до 0,05
Аммиак	мг/л	0,0	до 0,01
Фосфор	мг/л	0,0	до 2,5
Щелочность	мг-экв/л	0,9-1,0	ДО 2,5
Сероводород	мг/л	0,0	0,0
Свободная углекислота	мг/л	0,0	0,0
Нитриты	мг/л	0,0	до 0,01
Нитраты	мг/л	0,0	до 0,4
Жесткость	мг-экв/л	3,6-4,6	2,0-6,0
Окисляемость	МГ02 /Л	12,0-15,0	до 15,0
Кальций	мг/л	10,0-15,5	10,0-60,0
Магний	мг/л	1,2-1,4
Железо общее	мг/л	0,05-0,1	0,35-1,0
Прозрачность	см	50-75	не менее 75

Данные двух серий экспериментов по определению оптимальной плотности посадки личинок в садки, а также влиянию дилудина, доставляемого в организм молоди рака перорально посредством живого зоопланктона, на рост и развитие личинок представлены в таблицах 3-5.

Полученные данные свидетельствуют о том, что плотность посадки 15 экз. молоди раков на 1 м² садков является наиболее благоприятной для выращивания сеголетка рака и не оказывает отрицательного воздействия на их продуктивность и выживаемость. Молодь рака при такой плотности посадки хорошо развивается и дает хорошие приросты.

В результате месячного эксперимента с дилудином у представителей ракообразных был впервые зарегистрирован ростостимулирующий эффект препарата. Так, при оптимальной плотности посадки личинок в садки величины прироста линейных и весовых показателей у молоди рака к концу эксперимента возросли по сравнению с контролем на 39,6% и на 60,6%, а при высоких плотностях посадки на 20,2% и 26,3% соответственно. Выживаемость молоди раков, получавших дилудин перорально посредством живого зоопланктона, была существенно выше (4,4-17,7%), чем в контрольных вариантах, как при низких, так и при высоких плотностях выращивания личинок. Установлено, что дилудин также способствовал уменьшению частот морфологических отклонений от 4,4 до 6,0% по сравнению с контролем.

Таким образом, установлено, что способ перорального введения дилудина молоди рака (Astacus leptodactylus Esch.), основанный на опосредованном механизме доставки препарата в организм посредством живого зоопланктона способствует повышению биопродуктивности молоди рака за счет увеличения роста и выживаемости, а также снижения частот морфологических отклонений.

Источники информации

1. Вальдман А.Р., Дубур Г.Я., Спруж Я.Я. Дилудин-новый антиоксидант-стабилизатор витаминов и стимулятор роста и продуктивности сельскохозяйственных животных // Известия АН Латв. ССР. - 1977. - № .9. - С.43-61.

2. Гончарова Р.И. Теоретические и практические аспекты антимутагенеза // Молекулярная и прикладная генетика. Т1. Минск, 2005. - С 21-25.

3. Т.Д.Кужир. Антимутагены и химический мутагенез в системах высших эукариот. Минск: Техналопя, 1999. - 267 с.

4. Наставление по применению дилудина в качестве стимулятора продуктивности сельскохозяйственных животных /МСХ СССР. Главное управление по производству комбикормов и кормовых добавок. Утверждено 16.04.1984. - № 109-10. - М., 1984.- 2 с.

5. Дилудин - стимулятор роста молоди лососевых /Маликова Е.М., Глаголева Т.П., Бодрова Т.И., Иозепсон У.П., Дубурс Г.Я., Улдрикис Я.Р. // Рыбн. хоз-во. - М., 1977. - № 5. - С.24-25.

6. Комбикорма для рыб: производство и методы кормления / Гамыгин Е.А., Лысенко В.Я., Скляров В.Я., Турецкий В.И. / М.: Агропромиздат, 1989. - 168 с.

7. Goncharova R, Slukvin A., Duburs G., Uldrikis J., Bisenieks E. Promising antimutagen for improving reproductive indices of stripped fishes and the quality of their progeny. - European Aquaculture Society, Special Publication. - 2002. - № 31, P.63-66.

8. Патент BY № 5016.

9. Каталог научно-технической продукции «Новые вещества и технологии для сельского хозяйства», Минск, 2007. - 24 с.

10. BIOMAX - корма для раков [Электронный ресурс] - Режим доступа: biomax-ru.narod.ru/food_cray.html - Дата доступа: 10.01.2011.

11. Корм для креветок и раков Tetra Crusta Menu 100 мл [Электронный ресурс] - Режим доступа: www.aquatrace.ru/product/tet-171794 / - Дата доступа: 10.01.2011.

12. TetraCrusta Menu 100 мл - специальный корм для раков и креветок - [Электронный ресурс] - Режим доступа: http://www.aquariumshop.ru/index.php?main_page=product_info&products_id=1616.

13. Корм Sera для раков Crabs Natural 100 - [Электронный ресурс]. - Режим доступа: www.aqua-shop.ru/product_info.php/ /17796 - Дата доступа: 10.01.2011.

14. Колмыков Е.В. Инструкция по разведению раков. - Астрахань, 2004. - 30 с.

15. Раколовство и раководство на водоемах Европейской части России.

(Справочник) под редакцией О.И. Мицкевич. Санкт-Петербург, 2006.-207 с.