способ определения содержания эфирного масла в листьях растений мяты по суммарному объему секреторных желез

Классы МПК:A01G7/00 Ботаника, общие вопросы
A01H1/04 способы селекции 
Автор(ы):,
Патентообладатель(и):Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Главный ботанический сад им. Н.В. Цицина Российской академии наук (ГБС РАН) (RU)
Приоритеты:
подача заявки:
2012-03-02
публикация патента:

Изобретение относится к области сельского хозяйства, в частности к селекции. В способе определяют содержание эфирного масла в листьях растений мяты по суммарному объему секреторных желез. При этом количество и размеры железок на единице площади листьев растений мяты получают с использованием светового микроскопа с видеосистемой Lumenera Infinity 2 с последующей обработкой данных с помощью программы Infinity camera V:5.02. Также используют световой микроскоп с цифровой камерой и масштабной линейкой или бинокуляр с окулярным микрометром. Способ позволяет повысить скорость оценки потенциальной продуктивности селекционных образцов. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.

Формула изобретения

1. Способ определения содержания эфирного масла в листьях растений мяты по суммарному объему секреторных желез, отличающийся тем, что количество и размеры железок на единице площади листьев растений мяты получены с использованием светового микроскопа с видеосистемой Lumenera Infinity 2 с последующей обработкой данных с помощью программы Infinity camera V:5.02.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют световой микроскоп с цифровой камерой и масштабной линейкой.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что используют бинокуляр с окулярным микрометром.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к сельскому хозяйству и, в частности к селекции, и касается создания экспресс-метода выделения перспективных гибридов и сортов мяты. Известен способ оценки перспективных гибридов и сортов мяты по количеству эфирного масла, выделенного из вегетативной массы листьев и соцветий растения, методом гидродистилляции (метод Клевенджера, модифицированный Лошкаревым (ГОСТ 24027.2-80)). Недостатком данного способа является длительное время экстракции водяным паром (не менее 2 часов), достаточно большое количество сухого материала (не менее 50 г) и сроки отбора анализируемого материала (вторая половина вегетационного периода - фаза бутонизации-массового цветения), поэтому дальнейшая работа с отобранным селекционным материалом возможна только на следующий вегетационный год.

Другими оценочными показателями продуктивности селекционного материала могут бы физиологические и биохимические параметры и их комплексный системный анализ - данный способ широко применяется при прогнозировании потенциальной продуктивности зерновых культур (патент RU 2439873 С2, A01G 7/00, 2009).

Продуктивность эфирного масла мяты определяется железистым аппаратом растения, главным образом численностью 10 - клеточных железок (трихом) сферической формы на поверхности листьев и соцветий.

Наиболее близким по технической сущности к заявляемому способу является способ отбора высокопродуктивных форм мяты по количеству эфирного масла, приходящегося на I мм2 листовой поверхности (Диссертационная работа на соискание кандидата сельскохозяйственных наук Лысяковой Н.Ю., 1984). Этот способ заключается в анализе методом хромотографии суспензии из высечек листовых пластинок растений мяты на ранних сроках вегетации. Недостатком данного экспресс-метода является необходимость наличия высокоточного и дорогостоящего оборудования - газового хроматографа.

Задачей, решаемой предлагаемым изобретением, является создание более простого способа прогнозирования продуктивности эфирного масла межвидовых гибридов, внутривидовых клонов и сортов мяты. Поставленная задача решается путем учета количества и морфологических параметров трихом на листьях мяты, отобранных в фазу технической спелости, расчета суммарного объема железистых образований и сопоставления полученных данных с результатами районированных сортов старой селекции мяты. Необходимо наличие только светового микроскопа с видеосистемой Lumenera Infinity 2 или цифровой фотокамерой, линейки для фиксирования масштаба при фотосъемке, или бинокуляра с окулярным микрометром.

Ход работы

У отобранных к оценке растений мяты отбираются 10-30 листьев 5-7 пары 2-3 яруса главного цветоносного побега в фазу технической спелости, т.к. в данную фазу заканчивается формирование эфиромасличных желез и в них наблюдается наибольшее содержание масла.

С помощью видеосистемы или цифровой фотокамеры, присоединенной к световому микроскопу, фотографируются на увеличении ×500 по 10 участков каждого листа с верхней и нижней сторон, поскольку железки зачастую расположены с обеих сторон листа. На полученных снимках с помощью программы Infinity camera V:5.02 подсчитывают число железок в кадре, определяют площадь поверхности листа в кадре в см2, количество железок на 1 см2 верхней и нижней сторонах листа. Также измеряют их диаметр и вычисляют среднее значение диаметра железок.

Возможно проведение данных расчетов с помощью масштабной линейки, для чего ее фотографируют и учитывают, что 1 мм =100 мкм.

При отсутствии светового микроскопа аналогичные замеры можно проводить с помощью бинокуляра. Учет количества железок в поле зрения, их диаметра и площади поля зрения проводят, используя окулярный микрометр.

Используя полученные данные, вычисляют суммарный объем железок на 1000 см2 площади листьев по формулам:

V1000=Vверх +Vниз

Vверх или низ=4/3способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 R3×n×1000, где

V 1000 - суммарный объем железок на 1000 см2 площади листьев, см3;

Vверх - объем железок на верхней стороне, см3;

V них - объем железок на нижней стороне, см3;

способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 R=3,14;

R - радиус железок, см;

n - число железок на 1 см2 поверхности листа, шт.

Для отбора перспективных селекционных образцов гибридов и сортов мяты рассчитанные суммарные объемы их железок на листьях растений сравнивают с аналогичными данными районированных сортов мяты или растениями старой селекции. В ходе разработки данного экспресс-метода получена положительная корреляция между суммарным объемом железок на 1000 см2 площади листьев и сбором эфирного масла с целого растения, что позволяет рассматривать данный признак в качестве показателя продуктивности эфирного масла растений мяты.

Пример 1. Расчет V1000 для сортов мяты старой селекции, районированных для Украины и южных регионов России, выращенных на экспериментальном участке лаборатории в Главном ботаническом саду РАН. На отобранных 30 листьях 5-7 пары 2-3 яруса главного цветоносного побега в фазу технической спелости каждого сорта подсчитаны количество секреторных железок, их диаметр и V1000 (табл.1).

Табл.1.
Суммарный объем желез (V1000) сортов мяты старой селекции, см3.
сорт кол-во желез на 1 см2 площади листа, шт.диаметр желез, мкмV1000 .см3
верхняя сторона листанижняя сторона листа верхняя сторона листанижняя сторона листа
Краснодарская 2 334108088,58 88,390,509
Кубанская 6590 125290,61 85,990,646
Симферопольская 200210 850106,6106,2 0,664
Москвичка 655999 90,4487,810,605
Удайчанка474 125792,21 95,550,766
Лекарственная 4551 89593,2290,94 0,583

Как видно из данных таблицы районированные сорта мяты старой селекции имеют V1000 не менее 0,5 см3 (мл). Данная величина (0,5) взята за нижний предел показателя V1000 при отборе перспективных селекционных образцов межвидовых гибридов и внутривидовых клонов растений мяты для дальнейшей селекционной работы.

Пример 2. Расчет V1000 Для межвидовых гибридов, внутривидовых клонов мяты, выращенных на экспериментальном участке лаборатории в Главном ботаническом саду РАН.

На отобранных 30 листьях 5-7 пары 2-3 яруса главного цветоносного побега в фазу технической спелости каждого селекционного образца согласно предлагаемому способу подсчитаны количество секреторных железок, их диаметр и V 1000 (табл.2).

Как видно из данных таблицы опытные образцы растений мяты № 1, 2, 4, 7 и 8 имеют V1000 больше 0,5 см 3, поэтому они были отобраны для дальнейшей селекционной работы.

Табл.2.
Суммарный объем желез (V1000) опытных образцов растений мяты, см3.
Внутривидовые клоны, межвидовые гибридыкол-во желез на 1 см2 площади листа, шт. диаметр желез, мкмV1000, см3
верхняя сторона листанижняя сторона листа верхняя сторона листанижняя сторона листа
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 Внутривидовой способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 тетраплоидный клон М. способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
1 arvensis,439785 101,7593,09 0,573
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 Внутривидовой клон М. способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
2 arvensis (NV-74)524 137387,5787,79 0,670
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 Внутривидовой клон М. способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
3 arvensis (17-Тайвань)411 98387,8988.68 0,502
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 Внутривидовой клон М. способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
4 arvensis (18-Япония)385 114886,3388,29 0,541
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 Внутривидовой клон М. способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
5 arvensis (24-Сыктывкар)218 20477,7873,29 0,094
способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 Внутривидовой клон М. способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866 способ определения содержания эфирного масла в листьях растений   мяты по суммарному объему секреторных желез, патент № 2490866
6 arvensis (19-Крым)302 100886,288,06 0,460
7 Межвидовой гибрид М. piperita и М. crispa 5391320 85,8385,730,611
8Внутривидовой клон М. crispa (Крым)550 174181,7786,44 0,745

Таким образом, предлагаемый нами способ определения содержания эфирного масла в листьях растений мяты по суммарному объему секреторных желез отличается простотой и позволяет быстро оценить потенциальную продуктивность селекционных образцов и выбрать перспективные гибриды и клоны растения, дальнейшая селекционная работа с которыми будет экономически оправданна. Источники информации

1. ГОСТ 24027.2-80. Сырье лекарственное растительное. Методы определения влажности, содержания золы, экстрактивных и дубильных веществ, эфирного масла.

2. Лысякова Н.Ю. Некоторые морфо-физиологические особенности межвидовых гибридов мяты, определяющие уровень накопления эфирного масла / Диссертационная работа на соискание кандидата сельско-хозяйственных наук. Симферополь, 1984.

Класс A01G7/00 Ботаника, общие вопросы

способ подкормки растений, выращиваемых в защищенном грунте -  патент 2527065 (27.08.2014)
способ выращивания эхинацеи пурпурной в защищенном грунте -  патент 2524085 (27.07.2014)
устройство для магнитно-импульсной обработки растений -  патент 2523162 (20.07.2014)
способ обработки садовых деревьев и винограда для защиты от низких температур и весенних заморозков -  патент 2522522 (20.07.2014)
способ повышения продуктивности яровых одно- и многокомпонентных фитоценозов -  патент 2520683 (27.06.2014)
способ определения потерь массы корнеплодов от механических повреждений -  патент 2520129 (20.06.2014)
способ определения поражения селями горной долины -  патент 2519807 (20.06.2014)
способ фитоиндикации с обеспечением благоприятной обстановки на склоновых землях -  патент 2519716 (20.06.2014)
способ обогащения йодом плодов и ягод -  патент 2519231 (10.06.2014)
способ определения поражения горной долины лавинообразным потоком -  патент 2518447 (10.06.2014)

Класс A01H1/04 способы селекции 

способ отбора селекционных образцов растений гречихи -  патент 2525134 (10.08.2014)
способ идентификации стерильности/фертильности подсолнечника -  патент 2524135 (27.07.2014)
способ оценки реализации элементарных двойных диплоидных геномов в полиплоидных полигеномных пшеницах -  патент 2520835 (27.06.2014)
способ тестирования солеустойчивости сельскохозяйственного растения -  патент 2520744 (27.06.2014)
способ возделывания адаптивных систем сортов пшеницы (варианты) -  патент 2517849 (10.06.2014)
способ оценки зимостойкости плодовых растений -  патент 2514400 (27.04.2014)
способ оценки кислотоустойчивости сельскохозяйственных растений -  патент 2505958 (10.02.2014)
способ ускоренной оценки устойчивости сортов гороха к bruchus pisorum l. -  патент 2500099 (10.12.2013)
способ отбора растений рапса (brassica napus l.) по признаку засухоустойчивость -  патент 2498564 (20.11.2013)
способ отбора селекционного материала рапса (brassica napus l.) по признаку устойчивость к растрескиванию стручков -  патент 2497350 (10.11.2013)
Наверх