конструкции, содержащие составные экспрессионные кассеты, для терапии рака

Формула изобретения

1. Конструкция нуклеиновой кислоты, полезная для лечения опухолей, содержащая:

а) первую открытую рамку считывания, кодирующую дифтерийный токсин, причем данная первая открытая рамка считывания связана функциональным образом с Н19-специфичным промотором; и

б) вторую открытую рамку считывания, кодирующую дифтерийный токсин, причем данная вторая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II (инсулиноподобный фактор роста-II), выбранным из последовательностей IGF-II P4 и IGF-II Р3;

или содержащая:

а) первую открытую рамку считывания, кодирующую дифтерийный токсин, причем указанная первая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II Р3; и

б) вторую открытую рамку считывания, кодирующую дифтерийный токсин, причем указанная вторая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II P4.

2. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где дифтерийный токсин представляет собой дифтерийный токсин A (DTA).

3. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где Н19-специфичный промотор содержит последовательность нуклеиновой кислоты, изложенную в любой из SEQ ID NO:1-2.

4. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный промотор IGF-II Р4 содержит последовательность нуклеиновой кислоты, изложенную в SEQ ID NO:9.

5. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где указанный промотор IGF-II Р3 содержит последовательность нуклеиновой кислоты, как изложено в последовательности, выбранной из SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:12 и SEQ ID NO:17.

6. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, представляющая собой плазмиду.

7. Эукариотический вектор экспрессии, содержащий конструкцию нуклеиновой кислоты по п.1.

8. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.2, где указанный дифтерийный токсин содержит последовательность, как изложено в SEQ ID NO:7.

9. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где первая открытая рамка считывания связана функциональным образом с Н19-специфичным промотором, и вторая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II Р4.

10. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.9, дополнительно содержащая третью открытую рамку считывания, кодирующую дифтерийный токсин, причем указанная третья открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II Р3.

11. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где первая открытая рамка считывания связана функциональным образом с Н19-специфичным промотором, и вторая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II Р3.

12. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.11, дополнительно содержащая третью открытую рамку считывания, кодирующую дифтерийный токсин, причем указанная третья открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II Р4.

13. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.1, где первая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II Р3, и вторая открытая рамка считывания связана функциональным образом с промотором IGF-II P4.

14. Способ лечения опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту-человеку конструкции нуклеиновой кислоты по п.1, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором H19, транскрипт, управляемый промотором IGF-II Р3, или транскрипт, управляемый промотором IGF-II P4, посредством чего лечат опухоль у субъекта-человека.

15. Способ по п.14, где указанная опухоль представляет собой карциному.

16. Способ по п.15, где указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы мочевого пузыря, гепатокарциномы, карциномы яичника и карциномы поджелудочной железы.

17. Способ ингибирования развития опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту-человеку конструкции нуклеиновой кислоты по п.1, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором H19, транскрипт, управляемый промотором IGF-II P4, или транскрипт, управляемый промотором IGF-II Р3, посредством чего ингибируют развитие опухоли у субъекта-человека.

18. Способ по п.17, где указанная опухоль представляет собой карциному.

19. Способ по п.18, где указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы мочевого пузыря, гепатокарциномы, карциномы яичника и карциномы поджелудочной железы.

20. Способ ингибирования метастаза опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту-человеку конструкции нуклеиновой кислоты по п.1, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором H19, транскрипт, управляемый промотором IGF-II P4, или транскрипт, управляемый промотором IGF-II Р3, посредством чего ингибируют развитие опухоли у субъекта-человека.

21. Способ по п.20, где указанная опухоль представляет собой карциному.

22. Способ по п.21, где указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы мочевого пузыря, гепатокарциномы, карциномы яичника и карциномы поджелудочной железы.

23. Способ лечения опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту-человеку конструкции нуклеиновой кислоты по п.13, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором IGF-II Р3, или транскрипт, управляемый промотором IGF-II P4, посредством чего лечат опухоль у субъекта-человека.

24. Способ по п.23, где указанная опухоль представляет собой карциному.

25. Способ по п.24, где указанная, опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы мочевого пузыря, гепатокарциномы, карциномы яичника и карциномы поджелудочной железы.

26. Способ ингибирования развития опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту-человеку конструкции нуклеиновой кислоты по п.13, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором IGF-II Р3, или транскрипт, управляемый промотором IGF-II P4, посредством чего ингибируют развитие опухоли у субъекта-человека.

27. Способ по п.26, где указанная опухоль представляет собой карциному.

28. Способ по п.27, где указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы мочевого пузыря, гепатокарциномы, карциномы яичника и карциномы поджелудочной железы.

29. Способ ингибирования метастаза опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, включающий введение указанному субъекту-человеку конструкции нуклеиновой кислоты по п.13, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором IGF-II Р3, или транскрипт, управляемый промотором IGF-II P4, посредством чего ингибируют развитие опухоли у субъекта-человека.

30. Способ по п.29, где указанная опухоль представляет собой карциному.

31. Способ по п.30, где указанная опухоль выбрана из группы, состоящей из карциномы мочевого пузыря, гепатокарциномы, карциномы яичника и карциномы поджелудочной железы.

32. Конструкция нуклеиновой кислоты, полезная для лечения опухолей, содержащая:

первую открытую рамку считывания, кодирующую цитотоксический или цитостатический генный продукт, причем данная первая открытая рамка считывания связана функциональным образом с первым промотором; и

вторую открытую рамку считывания, кодирующую указанный цитотоксический или цитостатический генный продукт, причем данная вторая открытая рамка считывания связана функциональным образом со вторым промотором;

где первый промотор и второй промотор выбраны из группы, состоящей из:

1) первого промотора, представляющего собой Н19-специфичный промотор, и второго промотора, представляющего собой промотор IGF-II P4;

2) первого промотора, представляющего собой промотор H19, и второго промотора, представляющего собой промотор IGF-II Р3; и

3) первого промотора, представляющего собой промотор IGF-II P4, и второго промотора, представляющего собой промотор IGF-II Р3.

33. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.32 для лечения опухоли, ингибирования развития опухоли или ингибирования метастаза опухоли у субъекта-человека, нуждающегося в этом, где клетка указанной опухоли способна экспрессировать транскрипт, управляемый промотором H19.

Описание изобретения к патенту

Текст описания приведен в факсимильном виде.