способ диагностики вибрационной болезни

Формула изобретения

Способ диагностики вибрационной болезни, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что для исследования используют как сыворотку крови, так и плазму крови, исследование осуществляют путем проведения экстракции из сыворотки или плазмы крови высших жирных кислот (ВЖК) метанол-эфирной смесью, после чего на полученный экстракт ВЖК воздействуют 1,5%-ным раствором серной кислоты в метиловом спирте, затем полученные в результате реакции сложные метиловые эфиры ВЖК извлекают из реакционной смеси гексан-эфирной смесью, и извлеченные метиловые эфиры ВЖК анализируют методом капиллярной газовой хроматографии, и, используя метод нормирования площадей пиков, определяют количество каждой из присутствующих ВЖК в сыворотке или плазме крови (в мас.%), далее вычисляют суммарное содержание насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой, и на основании полученных данных рассчитывают величину отношения (K₁) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -6 и величину отношения (K₂) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, и при величине 0,90 K₁ 1,49 и 16,0 K₂ 28,5 диагностируют вибрационную болезнь.

Описание изобретения к патенту

Предлагаемый способ относится к медицине, а именно к неврологии и профессиональной патологии, и может быть использован при диагностике вибрационной болезни (ВБ).

Этиологическим фактором развития данного заболевания является производственная вибрация.

В зависимости от характера контакта тела рабочего с вибрацией условно различают местную (локальную) и общую (вибрация рабочих мест).

Наиболее высокая заболеваемость вибрационной болезнью регистрируется на предприятиях тяжелого, энергетического и транспортного машиностроения, горнорудной промышленности и составляет 9,8 случая на 100 тыс. работающих.

Известно, что вибрационная болезнь, как правило, протекает с поражением нервной, сердечно-сосудистой системы, опорно-двигательного аппарата, рефлекторными нарушениями функций внутренних органов.

В основе развития вибрационной болезни лежат сложные механизмы регуляторных расстройств с одновременным или последовательным формированием нейрогуморальных, нейрогормональных и рефлекторных нарушений.

В зависимости от характера контакта тела рабочего с вибрацией условно различают местную (локальную) и общую (вибрация рабочих мест) [1]. Разработка способов диагностики данного заболевания связана с необходимостью снижения высоких уровней профессионально обусловленной заболеваемости, а также повышения эффективности лечения больных вибрационной болезнью.

Известен способ диагностики ВБ, основанный на сборе жалоб (выявлении феномена быстрой утомляемости при физическом напряжении), исследовании неврологического статуса, биохимическом анализе крови (в том числе с определением содержания кальция), выявлении ангиоспастических нарушений, расстройств болевой и вибрационной чувствительности с учетом результатов электромиографии (ЭМГ) при игольчатом снятии биопотенциалов, при этом предпочтительно при анализе ЭМГ оценивать длительность потенциалов двигательных единиц (ПДЕ), максимальные и средние амплитуды ПДЕ, степень отклонений характеристик гистограммы биопотенциалов от возрастной нормы, выраженность фибрилляций и фасцикуляций [2].

Однако данный способ сложен для реализации при недостаточной точности за счет субъективности получаемых результатов.

Известен способ диагностики вибрационной болезни, включающий проведение функциональной нагрузочной пробы Труссо-Бонсдорфа, при этом до и после проведения функциональной нагрузочной пробы Труссо-Бонсдорфа по результатам электромиографии оценивают степени изменений отдельных этектромиографических показателей как отношение большего показателя к меньшему: оценку выраженности фибрилляций, крампи, фасцикуляции и симптома Хвостека осуществляют в течение 8-10 мин после проведения функциональной пробы Труссо-Бонсдорфа, дополнительно проводят электрокардиографию, психометрическое исследование уровня психоэмоциональной напряженности, реовазографию, рентгенографию или денситометрию опорного скелета, биохимические исследования с количественной оценкой степени отклонения содержания простого и ионизированного кальция в сыворотке крови от нормативных величин, после чего рассчитывают соответствующие индексы по отдельным показателям с учетом их информационной значимости и интегральный комплексный количественный показатель вибрационной патологии (ИВП) по формуле. Диагностику болезни производят по следующей шкале: при показателе ИВП менее 4,000 усл. ед. делают вывод об отсутствии у обследуемого лица вибрационной болезни, при показателе ИВП от 4,001 до 7,000 усл. ед. делают вывод о наличии у обследуемого лица вибрационной болезни 1 степени, при показателе ИВП от 7,001 до 8,500 усл. ед. делают вывод о наличии у обследуемого лица вибрационной болезни 2 степени, при показателе ИВП более 8,501 усл. ед. делают вывод о наличии у обследуемого лица вибрационной болезни 3 степени [3].

Данный способ диагностики ВБ информативен и надежен.

Однако он очень продолжителен по времени, т.к. связан с применением большого количества различных методов исследования и проведением сложных математических расчетов.

Известен также способ диагностики вибрационной болезни, который осуществляют путем определения диастолической скорости артериального кровотока на лучевой артерии в области лучезапястного сустава. При ее уменьшении в 4 раза и более относительно нормы диагностируют вибрационную болезнь [4].

Способ прост и доступен, позволяет диагностировать вибрационную болезнь не только в условиях стационара, но и в поликлинике.

Однако данный способ не обладает достаточной точностью.

Известен также способ диагностики вибрационной болезни, для осуществления которого проводят определение наличия ревмофактора крови и антител к кардиолипину, фагоцитарной активности крови, уровня содержания CD-4+- и CD-16+-лимфоцитов, иммуноглобулина М (Ig M) и цитокина IL-10 (IL-10), адренокортикотропного и тиреотропного гормонов (АКТГ и ТТГ) в крови. На основании полученных данных определяют прогностические коэффициенты F1 и F2 и сравнивают их. В том случае, если F1 больше F2, то диагностируют вибрационную болезнь I степени, а при F1 меньше F2 - вибрационную болезнь II степени [5].

Данный способ позволяет повысить точность диагностики и объективно оценить степень выраженности вибрационной болезни при постановке диагноза.

Однако данный способ требует больших затрат, а также используемые при этом исходные реактивы являются дефицитными.

Наиболее близким по совокупности существенных признаков к предлагаемому способу является известный способ диагностики вибрационной болезни, который выбран авторами в качестве прототипа.

Сущность известного способа заключается в том, что у рабочего, подвергающегося воздействию вибрации, берут кровь из вены и определяют уровень нейрон-специфической енолазы (NSE) методом иммуноферментного анализа (ИФА), и при содержании NSE менее 20 нг/мл делают вывод об отсутствии у обследуемого вибрационной болезни, при NSE от 20 до 30 нг/мл - о наличии вибрационной болезни первой степени тяжести, при NSE более 30 нг/мл - вибрационной болезни второй степени тяжести [6].

Использование способа позволяет упростить диагностику вибрационной болезни и оценить степень выраженности вибрационной болезни.

Однако данный способ не позволяет диагностировать данное заболевание с высокой точностью за счет его неспецифичности, кроме того, данный способ требует при реализации больших затрат.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа диагностики вибрационной болезни, обладающего высокой точностью и не требующего при этом больших материальных затрат.

Поставленная задача решается предлагаемым способом диагностики вибрационной болезни, включающем исследование сыворотки крови согласно изобретения, для исследования используют как сыворотку крови, так и плазму крови, исследование осуществляют путем проведения экстракции из сыворотки или плазмы крови высших жирных кислот (ВЖК) метанол-эфирной смесью, после чего на полученный экстракт ВЖК воздействуют 1,5% раствором серной кислоты в метиловом спирте, затем полученные в результате реакции сложные метиловые эфиры ВЖК извлекают из реакционной смеси гексан-эфирной смесью и извлеченные метиловые эфиры ВЖК анализируют методом капиллярной газовой хроматографии и, используя метод нормирования площадей пиков, определяют количество каждой из присутствующих ВЖК в сыворотке или плазме крови (в мас.%), далее вычисляют суммарное содержание насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой, и на основании полученных данных рассчитывают величину отношения (K₁) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -6 и величину отношения (К₂) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, и при величине 0,90 K₁ 1,49 и 16,0 K₂ 28,5 диагностируют вибрационную болезнь.

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности диагностики данного заболевания. При этом предлагаемый способ при реализации не требует больших материальных затрат.

Данный технический результат достигается тем, что исследование осуществляют путем проведения экстракции из сыворотки или плазмы крови высших жирных кислот (ВЖК) метанол-эфирной смесью, затем на экстракт ВЖК воздействуют 1,5% раствором серной кислоты в метиловом спирте, после чего полученные в результате реакции сложные метиловые эфиры ВЖК извлекают из реакционной смеси гексан-эфирной смесью, извлеченные метиловые эфиры ВЖК анализируют методом капиллярной газовой хроматографии и, используя метод нормирования площадей пиков, определяют количество каждой из присутствующих ВЖК в сыворотке или плазме крови (в мас.%) и далее вычисляют суммарное содержание насыщенных жирных кислот (НЖК), таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3 (ПННЖК семейства -3), таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6 (ПННЖК семейства -6), таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой, и на основании полученных данных рассчитывают величину отношения (K₁) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -6 и величину отношения (K₂) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -3.

При этом в качестве исследуемого материала используют как сыворотку, так плазму крови, поскольку выбор исследуемого биоматериала при осуществлении данного способа не влияет на количественное содержание в них ВЖК.

Данный технический результат обусловлен тем, что вибрационная болезнь вносит существенный вклад в изменение содержания ВЖК в сыворотке или плазме крови, при этом изменение содержания ВЖК является следствием дегенерации нервной системы. Когда гомеостаз клетки находится под угрозой дисбаланса нормального функционирования нервной системы, одним из ее первых защитных средств является синтез липидного медиатора - докозаноида нейропротектина из ее биологического предшественника докозагексановой кислоты [7, 8].

Полученные результаты исследования показали, что предложенные коэффициенты (K₁ , K₂), характеризующие относительное изменение содержания НЖК, ПННЖК семейства -3 и ПННЖК семейства -6 в сыворотке или плазме крови при развитии ВБ, могут служить маркером поражения нервной системы и, как следствие, наличием вибрационной болезни.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом

Для исследования используют предварительно подготовленную сыворотку или плазму крови обследуемого, исследование осуществляют путем проведения экстракции из сыворотки или плазмы крови высших жирных кислот (ВЖК) метанол-эфирной смесью, затем на полученный экстракт ВЖК воздействуют 1,5% раствором серной кислоты в метиловом спирте, полученные в результате реакции сложные метиловые эфиры ВЖК извлекают из реакционной смеси гексан-эфирной смесью, извлеченные метиловые эфиры ВЖК анализируют методом капиллярной газовой хроматографии и, используя метод нормирования площадей пиков, определяют количество каждой из присутствующих ВЖК в исследуемой сыворотке или плазме крови (в мас.%), после чего вычисляют суммарное содержание насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой, и на основании полученных данных рассчитывают величину отношения (K₁) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -6 и величину отношения (K₂) суммарного содержания насыщенных жирных кислот к суммарному содержанию полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, и при величине 0,90 K₁ 1,49 и 16,0 K₂ 28,5 диагностируют у обследуемого вибрационную болезнь.

Предлагаемым способом на базе ФБУН Нижегородского НИИ гигиены и профпатологии было обследовано 27 пациентов, которым предварительно был поставлен диагноз ВБ, развившейся под воздействием локальной вибрации. Средний возраст пациентов составил 56±10 лет при среднем стаже работы в условиях локальной вибрации 21,6±3,6 лет.

Предварительно всем обследуемым рабочим диагноз - ВБ был поставлен с использованием общепринятой методики [1].

Предлагаемым способом диагноз вибрационная болезнь был поставлен из 27 обследуемых пациентов всем 27, что позволяет говорить о высокой точности способа. При этом предлагаемый способ не требует больших затрат.

Примеры конкретного использования предлагаемого способа

Пример 1

Пациент Гаврилов В., 50 лет.

Клинический диагноз - ВБ первой степени (вегетативно-сенсорная полинейропатия, периферический ангиодистонический синдром).

Стаж работы в условиях воздействия локальной вибрации составляет 22 года.

Для исследования использовали предварительно подготовленную сыворотку крови обследуемого, исследование осуществляли путем проведения экстракции из сыворотки или плазмы крови высших жирных кислот (ВЖК) метанол-эфирной смесью, затем на полученный экстракт ВЖК воздействовали 1,5% раствором серной кислоты в метиловом спирте, полученные в результате реакции сложные метиловые эфиры ВЖК извлекали из реакционной смеси гексан-эфирной смесью, извлеченные метиловые эфиры ВЖК анализировали методом капиллярной газовой хроматографии, проводя газохроматографический анализ метиловых эфиров ВЖК на газовом хроматографе «Кристалл 5000.1», снабженном пламенно-ионизационным детектором и капиллярной колонкой Zebron 30 м×0,32 мм×0,5 µм с привитой фазой 5% фенол - 95% диметилполисилоксан при температуре колонки - 190°C, температуре испарителя - 200°C, температуре детектора - 200°С, идентификацию ВЖК осуществляли по их времени удерживания с использованием стандартов, обработку хроматографических данных проводили на аппаратно-программном комплексе «Хроматэк-Аналитик», далее, используя метод нормирования площадей пиков, определили количество каждой из присутствующих ВЖК в исследуемой сыворотке крови (в масс.%), после чего вычислили суммарное содержание насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой, которое составило: 36,77 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой, которое составило: 2,02 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой, которое составило: 40,66 масс.%, далее рассчитали величину отношения K₁ и K₂, которая составила K₁=0,90, a K₂=18,2. На основании полученных величин отношений обследуемому был поставлен диагноз - вибрационная болезнь, что подтверждает вышеуказанный у пациента диагноз.

Пример 2

Пациент Краснова О., 46 лет.

Клинический диагноз - ВБ первой степени (вегетативно-сенсорная полинейропатия, периферический ангиодистонический синдром, деформирующий артроз локтевых суставов НФI). Стаж работы в условиях воздействия локальной вибрации 21 год.

Пример 2 осуществляли, как пример 1.

При этом суммарное содержание в сыворотке крови насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой составило: 39,89 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой составило: 1,46 масс.%; суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой составило: 33,73 масс.%, далее рассчитали величину отношения K₁ и K₂, которая составила K₁=1,18, а K₂=27,4. На основании полученных величин отношений обследуемой был поставлен диагноз - вибрационная болезнь, что подтверждает вышеуказанный у пациентки диагноз.

Пример 3

Пациент Рахимов Н., 58 лет.

Клинический диагноз - ВБ первой степени (нерезко выраженная вегетативно-сенсорная полинейропатия).

Стаж работы в условиях воздействия локальной вибрации 14 лет.

Пример 3 осуществляли, как пример 1, только для исследования использовали плазму крови.

При этом суммарное содержание в плазме крови насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой составило: 37,21 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой составило: 2,09 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой составило: 40,21 масс.%, и рассчитали величину отношения K₁ и K₂, которая составила K₁=0,93, а K₂=17,8. На основании полученных величин отношений обследуемому был поставлен диагноз - вибрационная болезнь, что подтверждает вышеуказанный у пациента диагноз.

Пример 4

Поплевичев А., 52 года.

Клинический диагноз - ВБ первой степени (нерезко выраженная вегетативно-сенсорная полинейропатия, периферический ангиодистонический).

Стаж работы в условиях воздействия локальной вибрации 18 лет.

Пример 4 осуществляли, как пример 1, только для исследования использовали плазму крови.

При этом суммарное содержание в плазме крови насыщенных жирных кислот, таких как: лауриновой, тридекановой, миристиновой, пентадекановой, пальмитиновой, маргариновой, стеариновой, арахиновой, генэйкозановой, бегеновой, трикозановой составило: 39,20 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -3, таких как: линоленовой -3, эйкозатриеновой -3, эйкозапентановой, докозагексановой составило: 1,43 масс.%, суммарное содержание полиненасыщенных жирных кислот семейства -6, таких как: линолевой, линоленовой -6, эйкозатриеновой -6, арахидоновой составило: 33,74 масс.%, далее рассчитали величину отношения K₁ и K₂, при этом величина отношений составила K₁=1,16, а K₂=27,4.

На основании полученных величин отношений обследуемому был поставлен диагноз - вибрационная болезнь, что подтверждает вышеуказанный у пациента диагноз.

Как видно из полученных результатов, предлагаемый способ обладает высокой точностью (p<0,001) и не требует при этом больших материальных затрат.

Кроме того, предлагаемый способ позволяет диагностировать вибрационную болезнь не только в условиях стационара, но и в поликлинике.

Источники информации

1. Измеров Н.Ф. и др. Профессиональные заболевания. Руководство для врачей. М.: Медицина, 1996, т.2, гл.7, с.141.

2. Любимова Р.П. Динамика клинико-электрофизиологических изменений нервно-мышечной системы больных вибрационной болезнью. Ж. Невропатология и психиатрия. 1991, № 9, с.13.

3. Патент РФ № 2123279, заявка № 97109325 от 04.06.1997 на «Способ диагностики вибрационной болезни».

4. Патент РФ № 2154991, заявка № 97119129 от 24.11.1997 на «Способ диагностики вибрационной болезни».

5. Патент РФ № 2337363, заявка № 2007107417 от 27.02.2007 на «Способ диагностики степени вибрационной болезни».

6. Прототип. Патент РФ № 2423708, заявка № 2010116540 от 26.04.2010 на «Способ диагностики вибрационной болезни».

7. Салахова Л.Р. Профиль циркулирующих жирных кислот у больных ишемической болезнью сердца и возможности их коррекции. Автореферат диссертации на соискание ученой степени к.м.н., Казань, 2007.

8. Palacios-Pelaez R., Lukiw W.J., Bazan N.G. Omega-3 essential fatty acids modulate initiation and progression of neurodegenerative desease. Mol. Neurobiol, 2010, № 41, p.367.