способ прогнозирования снижения транспортной функции белка полосы-3 мембраны эритроцитов новорожденного от матерей, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности

Формула изобретения

Способ прогнозирования снижения транспортной функции белка полосы-3 мембран эритроцитов новорожденного от матерей, перенесших обострение герпес-вирусной инфекции в третьем триместре беременности, характеризующийся тем, что в периферической крови новорожденного определяют содержание TNF , выявляют в мембранах эритроцитов новорожденных методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле (10%) с додецилсульфатом натрия белок полосы-3, вычисляют значение дискриминантной функции по формуле

Dф=(5.167 × полоса-3)+(2.196×TNF ),

где Dф - дискриминантная функция,

полоса-3 - белок стромы мембраны эритроцитов,

TNF - интерлейкин в крови новорожденных,

и при Dф более 218.67 прогнозируют снижение транспортной функции анионов с помощью белка полосы-3 через мембраны эритроцитов новорожденного.

Описание изобретения к патенту

Цель изобретения заключается в прогнозировании устойчивости переноса анионов через мембрану эритроцитов новорожденных при обострении у матери в третьем триместре беременности герпес-вирусной инфекции, увеличивающей в крови содержание TNF , что приводит к снижению содержания в мембранах эритроцитов белка полосы-3.

Белок полосы-3 - транспортный гликопротеин мембран эритроцитов (Воробьев А.И., 2007 [1]; Braton D., Cohec С., 1981 [3]). Эта самая большая фракция белков мембраны эритроцитов составляла 27% от общего количества белков мембран. Белок полосы-3 принимает активное участие в переносе хлоридов и бикарбонатов через мембрану эритроцитов (Воробьев А.И., 2007 [1]; Gallagher P.O., Forget В., 2001 [4]). Протеин полосы-3 взаимодействует с анкирином, расположенным на внутренней поверхности мембраны, обеспечивая прочную связь липидного слоя с периферическими белками (Marchesi V.F., 1979 [5]; Prankerd T.A., 1961 [6]; Walensky L., Nariam, Luxs, 2003 [7]).

Прототипом мы избрали исследования М.Т.Луценко, И.А.Андриевской «Способ прогнозирования устойчивости мембран эритроцитов периферической крови при обострении герпес-вирусной инфекции у беременных» (патент 2344423, зарегистрированный в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 20 января 2009 г. [2]). В данной работе авторы показали, что обострение герпес-вирусной инфекции при нарастании в мембранах эритроцитов лизофосфатидилхолина снижает содержание белков полосы-3.

В настоящей заявке мы обращаем внимание, в отличие от вышеуказанного исследования, на то, что:

1. При обострении герпес-вирусной инфекции у матери титр антител к вирусу герпеса нарастает и в крови новорожденного;

2. В крови новорожденного резко увеличивается при этом содержание интерлейкина TNF , который усиливает повреждение мембран эритроцитов;

3. В предыдущей работе обращалось внимание на эритроциты беременной. В настоящем изобретении отмечено, что при этом страдает структура и мембрана эритроцитов новорожденных, что приводит к снижению транспортной функции анионов с помощью белка полосы-3 через мембраны эритроцитов новорожденного.

Изучая доступную литературу, мы не обнаружили сведений, освещающих, что при обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности у новорожденного, под влиянием вирусов герпеса, активизируется интерлейкин TNF , под влиянием которого снижается в мембранах эритроцитов новорожденных содержание белка полосы-3, что создает угрозу обмена между эритроцитами и плазмой крови анионов Сl^- и бикарбонатов, что приводит к нарушению буферных свойств в периферической крови новорожденных.

Заявленный способ имеет следующие приемы.

1. Исследования проводились на 20 беременных в третьем триместре гестации и на 15 новорожденных, родившихся от этих матерей, которые в третьем триместре перенесли обострение герпес-вирусной инфекции. Титр антител к вирусу герпеса определяли иммуноферментным методом на спектрофотометре «Stat-Fax-2100» (USA).

2. Содержание TNF в периферической крови определяли спектрофотометрически иммуноферментным методом на аппарате «Stat-Fax-2100» (USA).

3. В мембранах эритроцитов новорожденных методом диск-электрофореза в ступенчатом градиентном полиакриламидном геле (10%) с додецилсульфатом натрия выявляли белок полосы-3 с помощью денситометрии на аппарате «Biometra» (Германия).

4. Исследования проводились на базе стационара акушерского отделения клиники Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания СО РАМН. Все исследования были проведены с учетом требований Хельсинской декларации Всемирной ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г. и «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава РФ от 19.06.2003 г. № 266.

Исследования показали, что в случае обострения герпес-вирусной инфекции у беременной в третьем триместре гестации высокий титр антител в периферической крови отмечается как у матери, так и у новорожденного (1:12800). На этом фоне отмечается повышение активности интерлейкина TNF до 95.05 нг/мл (контроль - 22.5±0.85 нг/мл; р<0.001). При изучении на этом фоне методом диск-электрофореза в полиакриламидном геле (10%) с додецилсульфатом натрия в мембранах эритроцитов новорожденного обнаружено значительное снижение белка полосы-3 до 12.58±0.35% (контроль - 14.1±0.68%; p<0.001).

Проведенный дискриминантный анализ показал, что дискриминантная функция (Dф) больше граничного значения при обострении герпесной инфекции и активизации TNF , повлиявшая на содержание белка полосы-3 в мембранах эритроцитов. При Dф более 218.67 прогнозируют снижение транспортной функции анионов с помощью белка полосы-3 мембран эритроцитов новорожденного.

Dф=(5.167×12.58)+(2.196×95.05)

Dф=(64.91)+(208.159)=273.06

Dф (273.06)> граничного значения (218.67)

Следовательно, при Dф (273.06)> граничного значения (218.67) развивается на фоне снижения белка полосы-3 неустойчивость транспортной функции белка полосы-3 в мембранах эритроцитов.

Литература

1. Воробьев А.И. Руководство по гематологии. М.: Изд. «Ньюдиамед». 2007. - 1224 с.

2. Луценко М.Т., Андриевская И.А. Патент 2344423, зарегистрированный в Государственном реестре изобретений Российской Федерации 20 января 2009 г.

3. Braton D., Cohen C.M., Tjler I. Interaction of cytoskeletetal on the human erythrocyte membrane. Cell. 1981, Vol.24. - P.24-32.

4. Gallagher P.O., Forges B.G. The red cell membrane. Williams Hematology. Ed. E.Beutler, M.A.Littman, B.S.Coller. Chapter 49, 6 editions McGrow Hill International Edition. 2001. - P.333-343.

5. Marchesi V.F. Functional proteins of the human red cell membrane. Semin. Hematol. 1979. - Vol.16. - P.3-20.

6. Prankerd T.A. The red cell. An account of its chemical physiology and pathology. Black well scientific publications. Oxford. - 1961.

7. Walensky L., Naria М., Lux S. Disorders of the red blood cell membrane. Blood, principles and practice of hematology Ed. R.Mandin. - 2003.