активная фракция экстракта млечного сока растения семейства euphorbiaceae, способ ее получения, композиция на ее основе (варианты) и способ лечения заболеваний, связанных с пролиферацией клеток (варианты)

Формула изобретения

1. Активная фракция экстракта млечного сока из растения Euphorbia tirucalli L в полярном растворителе, который обладает значением дипольного момента от приблизительно 1,60 до приблизительно 1,80 и диэлектрической проницаемостью от приблизительно 15 до приблизительно 18 для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, включающая вещества с молекулярным весом от приблизительно 500 до приблизительно 600.

2. Фракция по п.1, в которой указанный полярный растворитель представляет собой спирт.

3. Фракция по п.2, в которой указанный полярный растворитель представляет собой н-бутанол.

4. Фракция по п.1, в которой указанный млечный сок представляет собой свежеполученный млечный сок.

5. Фракция по пп.1-4, в которой веществами являются 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенол и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенол.

6. Способ получения активной фракции экстракта млечного сока из растения Euphorbia tirucalli L в полярном растворителе для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, в котором на первой стадии осуществляют экстрагирование млечного сока из растения Euphorbia tirucalli L с использованием полярного растворителя со значением дипольного момента от приблизительно 1,60 до приблизительно 1,80 и диэлектрической проницаемостью от приблизительно 15 до приблизительно 18.

7. Способ по п.6, в котором указанный полярный растворитель представляет собой н-бутанол.

8. Способ по п.6, в котором указанный млечный сок является свежеполученным.

9. Композиция для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, включающая эффективное количество активной фракции по пп.1-5.

10. Композиция по п.9, в которой указанная активная фракция присутствует в количестве от приблизительно 0,001% до приблизительно 95%.

11. Композиция по п.9, включающая по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадека-тетраноил)-ингенола, в количестве от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 2000 мг, более предпочтительно от приблизительно 10 мг до приблизительно 100 мг.

12. Композиция для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, включающая эффективное количество активной фракции по пп.1-5, в которой веществами являются 3-(2,4,6-додека-триеноил)-ингенол или 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенол, и фармацевтически приемлемый наполнитель.

13. Применение активной фракции по пп.1-5 для получения композиции или лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией.

14. Применение активной фракции по пп.1-5, в которой веществами являются 3-(2,4,6-додекатриения)-ингенол или 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенол, для получения композиции или лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией.

15. Применение по п.13 или 14, в котором указанное заболевание представляет собой рак.

16. Применение по п.15, в котором рак выбран из группы, включающей рак легкого, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак почки, рак яичника и рак предстательной железы.

17. Применение композиции по п.9 или 12 для получения лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией.

18. Способ лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, включающий введение пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества активной фракции по пп.1-5.

19. Способ лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, включающий введение пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества активной фракции по пп.1-5, в которой веществам и являются 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенол или 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенол.

20. Способ лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, включающий введение пациенту, нуждающемуся в указанном лечении, эффективного количества композиции по пп.9-12.

21. Способ по пп.18-20, в котором указанное заболевание представляет собой рак.

22. Способ по п.21, в котором указанный рак выбран из группы, включающей рак легкого, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак почки, рак яичника и рак предстательной железы.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение в целом относится к активной фракции экстракта млечного сока (латекса) растений семейства Euphorbiaceae в полярном растворителе, к одному или более содержащимся в ней соединениям, а также к использованию указанной фракции и/или указанных соединений, предпочтительно, в лечении рака. Настоящее изобретение также относится к композициям, содержащим указанную активную фракцию и/или указанные соединения, а также к их использованию для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией/ангиогенезом, в особенности, для лечения рака.

В частности, активную фракцию настоящего изобретения получают из бутанольного экстракта млечного сока растений Euphorbia tirucalli Linnaeus.

В частности, настоящее изобретение относится к использованию 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола для получения композиции или лекарственного средства эффективных для лечения заболеваний, связанных с клеточной пролиферацией, или для лечения заболеваний, относящихся к клеточной пролиферации.

Уровень техники

Все больше и больше исследований посвящается проблеме рака и борьбы с ним, в качестве особого примера заболевания, сопровождающегося нежелательной клеточной пролиферацией или ангиогенезом.

Euphorbia tirucalli L. - это растение семейства Euphorbiaceae, произрастающее в Восточной Африке и Азии, широко известное также как aveloz или карандашное дерево, milkbush, esqueleto, graveto do cao, figueira do diabo, dedo do diabo, pau-pelado, Sao Sebastiao tree, espinho-de-cristo, coroa-de-cristo, espinho-de-judeu, espinho italiano, pau-sobre-pau, arvore de coral. Это растение, части которого, например листья и кора, используются в современной медицине.

Однако многие растения семейства Euphorbiaceae, особенно Euphorbia tirucalli L, выделяют токсичный, раздражающий и едкий млечный сок. Этот млечный сок может вызывать повреждение и отек кожи и слизистой оболочки, раздражение, резь в глазах, отек века и даже проблемы со зрением. Проглатывание млечного сока может вызвать тошноту, рвоту, диарею, и в больших количествах может даже оказаться смертельным. На самом деле, млечный сок aveloz богат терпенами, включая сложные эфиры форбола и ингенола. Форболовые эфиры являются сильными раздражителями, и сообщается, что они способствуют возникновению опухолей (Khan, A. Q. et al., Euphoreinolf a New PentacyclicTriterpene from Euphorbia tirucalli Planta Medica, 1989; 55: 290-291). По результатам клинических исследований сообщается, что, предпочтительно, форбол aveloz, 4-деоксифорболовый эфир, усиливал заражение вирусом Эпштейна-Барра (ВЭБ), вызывая разрушение ДНК иммунных клеток, а также вызывая подавление иммунной системы в целом (MacNeil, A. et al., Activation of Epstein-Barr Virus Lytic Cycle by the Latex of the Plant Euphorbia tirucalli, Br. J. Cancer, 2003; 88 (10): 1566-9). Сообщалось также, что помимо данного химического соединения экстракт aveloz также понижал способность некоторых иммунных клеток (Т-клеток) уничтожать ВЭБ. ВЭБ является членом семейства вируса герпеса, который является одним из наиболее распространенных человеческих вирусов. После первичного поражения ВЭБ создает латентную на протяжении всей жизни инфекцию в клетках В. Инфекция ВЭБ может вызвать мононуклеоз, а некоторые переносчики ВЭБ могут привести к развитию рака, такого как, например, лимфома Беркита или раковая карцинома nosefaringeous. Таким образом, из вышесказанного ясно, что указанный млечный сок агрессивен по отношению к человеческому организму и, следовательно, рассматривается и рекомендуется как вещество, с которым следует избегать любых контактов.

Таким образом, вопреки всем техническим предубеждениям, заявитель доказал, что специфическая активная фракция экстракта указанного млечного сока, так же, как и одно или более соединений, входящих в его состав, оказывают эффективное противораковое действие, как будет описано ниже.

Раскрытие изобретения

В одном аспекте объектом настоящего изобретения является активная фракция экстракта млечного сока растений семейства Euphorbiaceae в полярном растворителе. Способ ее получения является одним из аспектов настоящего исследования.

Подходящие полярные растворители известны как растворители с высокой или средней полярностью, особенно растворители с дипольным моментом от приблизительно 1,60 до приблизительно 1,80, а также диэлектрической проницаемостью от приблизительно 15 до приблизительно 18. Спирты, такие как бутанол, являются особенно подходящими.

Растения семейства Euphorbiaceae, которые особенно пригодны для настоящего изобретения, относятся к роду Euphorbia; конкретнее, млечный сок, используемый при получении активной фракции, добывается из растения Euphorbia tirucalli L.

Указанная активная фракция демонстрирует противораковое действие, что показано в исследованиях ниже, но не ограничивает объем настоящего изобретения, который определяется прилагаемой формулой изобретения.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к активной фракции экстракта млечного сока из растения Euphorbia tirucalli L, полученной в полярном растворителе. При этом указанный полярный растворитель обладает значением дипольного момента от приблизительно 1,60 до приблизительно 1,80 и диэлектрической проницаемостью от приблизительно 15 до приблизительно 18, а указанная фракция содержит молекулы с молекулярным весом от приблизительно 500 до приблизительно 600.

В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к активной фракции, которая получена с использованием в качестве полярного растворителя спирта.

В более предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к активной фракции, которая получена с использованием в качестве полярного растворителя н-бутанола.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к активной фракции, которая получена из млечного сока, который был только что получен.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к активной фракции, в состав которой входят соединения 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенол и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенол.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу получения активной фракции экстракта млечного сока из растения Euphorbia tirucalli L с использованием полярного растворителя. При этом на первой стадии осуществляют экстрагирование млечного сока из растения Euphorbia tirucalli L в полярном растворителе, имеющем дипольный момент от приблизительно 1,60 до приблизительно 1,80 и диэлектрическую проницаемость от приблизительно 15 до приблизительно 18.

В одном предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения активной фракции, указанной выше, с использованием в качестве полярного растворителя н-бутанола.

В другом предпочтительном варианте настоящее изобретение относится к способу получения активного экстракта из только что полученного млечного сока.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к композиции, в состав которой включена активная фракция, полученная из млeчнoгo coкa pacтeния Euphorbia tirucalli L с испoльзовaниeм полярного растворителя.

В одном предпочтительном варианте вышеуказанная активная фракция находится в упомянутой композиции в количестве от приблизительно 0,001% до приблизительно 95%.

В другом предпочтительном варианте изобретение относится к композиции, которая включает по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, в количестве от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 2000 мг, более предпочтительно, от приблизительно 10 мг до приблизительно 100 мг.

В другом предпочтительном варианте изобретение относится к композиции, которая включает эффективное количество по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, а также фармацевтически приемлемые наполнители.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению активной фракции, полученной из млечного сока растения Euphorbia tirucalli L с использованием полярного растворителя для получения композиции или лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриенил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, для получения композиции или лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией.

В предпочтительном варианте осуществления настоящее изобретение относится к применению активной фракции, полученной из млечного сока растения Euphorbia tirucalli L с использованием полярного растворителя или к применению по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриенил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, для получения композиции или лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией, где указанное заболевание представляет собой рак.

В наиболее предпочтительном варианте вышеуказанное заболевание относится к раку, выбранному из группы, включающей рак легкого, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак почки, рак яичника и рак предстательной железы.

В одном варианте осуществления изобретение относится к применению композиции, включающей активную фракцию, полученную из млечного сока растения Euphorbia tirucalli L с использованием полярного растворителя или к композиции, включающей по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриенил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, для получения лекарственного средства для лечения заболевания, связанного с клеточной пролиферацией.

В одном варианте осуществления изобретение относится к способу лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества активной фракции, полученной из млечного сока растения Euphorbia tirucall L c иcпoльзoвaниeм пoляpнoго pacтвopитeля.

В предпочтительном варианте изобретение относится к способу лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола.

В другом предпочтительном варианте изобретение относится к способу лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции, в состав которой включена активная фракция, полученная из млечного сока растения Euphorbia tirucalli L c использованием полярного растворителя, при этом вышеуказанная активная фракция может находиться в упомянутой композиции в количестве от приблизительно 0,001% до приблизительно 95%.

В другом предпочтительном варианте изобретение относится к способу лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции, в состав которой включено по меньшей мере одно соединение, выбранное из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, в количестве от приблизительно 0,1 мг до приблизительно 2000 мг, более предпочтительно, от приблизительно 10 мг до приблизительно 100 мг.

В другом предпочтительном варианте изобретение относится к способу лечения заболевания, связанного с пролиферацией клеток, который включает введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, эффективного количества композиции, в состав которой включено эффективное количество по меньшей мере одного соединения, выбранного из группы, состоящей из 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенола и 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенола, а также фармацевтически приемлемые наполнители.

В одном предпочтительном варианте изобретение относится к вышеуказанным способам лечения, в которых заболеванием является рак.

Наконец, в наиболее предпочтительном варианте изобретение относится к способам лечения, которые обсуждались выше, в которых указанный рак выбран из группы, включающей рак легкого, рак молочной железы, рак толстой кишки, рак почки, рак яичника и рак предстательной железы.

Краткое описание чертежей

На фигуре 1 показана хроматограмма, иллюстрирующая разделение полученных после ВЭЖХ фракций методом тонкослойной хроматографии на силикагеле с использованием смеси 8:2 по весу гексан:этилацетат.

На фигурах 2 и 3, соответственно, показаны кривые концентрация/активность исследуемой активной фракции и доксорубицина, химиотерапевтического продукта, используемого в качестве позитивного контроля для клеток в различных концентрациях (от 250 до 0,25 мкг/мл). На графиках проиллюстрирована в процентах зависимость роста клеток от концентрации исследуемого экстракта.

Осуществление изобретения

Получение активной фракции бутанольного экстракта из Euphorbia tirucalli L.

Готовится смесь млечного сока Euphorbia tirucalli L, желательно свежеполученного, с гексаном, например, 1:1 по весу. Появляется осадок. Декантированная твердая фракция (или даже ее смесь с жидкой фракцией) смешивается с н-бутанолом, желательно при достаточном перемешивании, чтобы обеспечить эффективную экстракцию компонентов, так как более полярные вещества имеют большее сродство к бутанолу, в то время как менее полярные вещества имеют большее сродство к гексану.

Отделение фракции бутанола (с помощью ВЭЖХ, жидкость-жидкостной хроматографии, колоночной хроматографии или эквивалентными способами) позволяет извлекать содержащиеся там соединения в групповых шкалах, главным образом по размеру. При разделении колоночной хроматографией на силикагеле Sephadex G75 с использованием смеси гексан:этилацетат (от 0% до 100%), из бутанольной фракции экстракта млечного сока выделяются восемь фракций.

Полученные фракции, в данном разделении предпочтительно фракционируемые по молекулярному весу, далее подвергаются тонкослойной хроматографии на силикагеле со смесью 8:2 по весу гексан:этилацетат. Полученная хроматограмма изображена на фигуре 1.

Видно, что фракция 7 четко определена, показывая безусловное наличие компонентов с более высокой полярностью, с растворимостью и характеристиками сродства к субстрату. Как известно квалифицированному специалисту, фракции 6 и 8 могут также содержать незначительные количества компонентов, найденных во фракции 7, из-за характеристик самого процесса фракционирования.

Указанную фракцию 7 подвергали тестированиям, с целью подтверждения ее противоракового действия, как раскрыто ниже.

Примеры

Модель in-vitro для оценки антипролиферативной активности опухолевых клеточных линий человека с использованием пробы сульфородамина В.

Для проведения теста были отобраны раковые клеточные линии MCF-7, NCI-ADR, OVCAR-03, PC 03, 786-0 и HT-29, выращенные в RPMI/SFB (RPMI относится к RPMI 1640 - среда культивирования Roswell Park Memorial Institute, как описано в J. Surg. Oncol. 1969; 1 (2); 153-66; SBF относится к инактивированной эмбриональной бычьей сыворотке) с 5% SFB; упомянутые клеточные линии были предоставлены Национальном Институтом Рака NCI, Соединенные Штаты Америки (Таблица 1).

Таблица 1
Список клеток для оценки антипролиферативной активности.
Тип клетки	Код	Тип культуры
Легкое	NCI 460	Соблюден
Молочная железа	MCF-7	Соблюден
NCI ADR*
Толстая кишка	НТ 29	Соблюден
Почка	786-0	Соблюден
Яичник	OVCAR-3	Соблюден
Предстательная железа	PC-3	Соблюден
* Клеточные линии, проявляющие резистентность фенотипа к комплексным лекарствам.

Клетки хранились в 25 см² колбах с 5 мл RPMI/SFB при 37°С под 5% СO₂ при 100% атмосферной влажности, реплицировались каждый раз, когда образовывался слой, достигающий приблизительно 80% конфлюэнтности (степени смыкания монослоя).

Определение антипролиферативной активности исследуемых веществ.

100 мкл клеток в RPMI/SFB/гентамицине инокулировали при соответствующих плотностях инокуляции (установленных заранее с помощью кривых роста) в 96 ячейках.

После 24 часов инкубации при 37°С в 5% растворе СO₂ и 100% атмосферной влажности добавляли исследуемое вещество (0,25 до 250 мкг/мл) в объеме 100 мкг/мл. В этот момент контрольная плашка фиксировалась для определения поглощения в момент добавления исследуемого вещества (значение Т₀ - представлено в прилагаемом графике сплошной линией на нулевой отметке). После 48 часов инкубации остальные плашки фиксировались для определения содержания протеина.

Растворение образца

Для получения готовых растворов образцы растворяли в натрий диметилсульфоксиде (DMSO) в концентрации 100 мг/мл. Для добавления к экспериментальным ячейкам, такие растворы разводили в 400 раз в RPMI/SFB/гентамицине.

Колориметрическое исследование с сульфородамином В (SRB).

Данное исследование проводилось в соответствии с Skehan et al. - New Colorimetric Cytotoxicity Assay for Anticancer-Drug Screening. J Natl Cancer Inst 82: 1107- 1112 (1990).

После 48 часов инкубации клетки фиксировали с 50 мкл трихлоруксусной кислоты (ТС) при 50% и 4°С. Для завершения фиксации клеток плашки инкубировали в течение 1 часа при 4°С.

После фиксации трихлоруксусной кислотой плашки четырежды промывали дистиллированной водой для удаления остатков TСA, среды культивирования, эмбриональной бычьей сыворотки и вторичных метаболитов, и затем выдерживали при комнатной температуре до полного высушивания.

После этого плашки окрашивали добавлением 50 мкл сульфородамина (SRB) при 0,4% (вес/объем), растворенного в 1% уксусной кислоте, и инкубировали 30 минут при 4°С. Затем их промывали последовательно 4 раза 1%-ной уксусной кислотой. Остаток промывного раствора удаляли, а плашки затем снова сушили при комнатной температуре. Красящий агент, связанный с клеточными протеинами, растворяли с помощью трис(гидроксиметил)аминометанового буфера (Trizmabase®, производство Sigma Aldrich Fine Chemicals, USА), с 10 мкмМ концентрацией и рН 10,5 в течение 5 минут в ультразвуке. Спектрофотометрическое считывание поглощения производилось при 560 нм в ELISA считывателе.

Анализ результатов

Рассчитывали средние значения поглощения, с учетом их соответствующего поглощения в пустом (контрольном) опыте, и определяли ингибирование роста (GI) каждого протестированного образца с помощью приведенной ниже формулы. Полученные результаты анализировали, считая, что:

- если Т>С, стимулируется рост клеток;

- если Т Т₀, но <С, проявляется цитостатическая активность (ингибирование роста) и используемая формула принимает вид 100×[(Т-Т ₀)/(С-Т₀)];

- если Т<Т ₀, проявляется цитоцидальная активность (смерть клеток) и используемая формула принимает вид 100×[(Т-Т₀ )/(С-Т₀)];

где Т представляет собой среднее поглощение обработанной клетки, С означает клеточный контроль и T₀ - это контроль клеток на день добавления.

Наконец, можно также вычесть полученный результат из 100%, получив таким образом процент ингибирования роста (GI).

Графики на фигурах 2 и 3, соответственно, представляют кривые концентрации/активности исследуемой активной фракции и доксорубицина, химиотерапевтического продукта, используемого в качестве позитивного контроля для клеток в различных концентрациях (от 250 до 0,25 мкг/мл), соотнося процент роста клеток и концентрацию исследуемого экстракта.

Образцы считаются активными, когда они демонстрируют ингибирование роста более 50% (представлен на графике линией на отметке 50) в концентрационно-зависимой форме и предпочтительно демонстрируя клеточную селективность (разная активность между клеточными линиями или специфическая активность для одной из клеточных линий).

Значения IC₅₀ (концентрация, ингибирующая рост на 50%) были определены с помощью сигмоидальной нелинейной регрессии, при использовании анализа с программным обеспечением GraphPad Prism (от компании GraphPad Software Inc., San Diego CA, США); доксорубицин является позитивным контролем.

Фигура 2 доказывает, сама по себе и по сравнению с позитивным контролем, эффективность активной фракции экстракта млечного сока из растения Euphorbiaceae в полярном растворителе, в данном случае н-бутаноле, в отношении противоракового действия.

В рамках другого аспекта настоящего изобретения, несколько отдельных соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, предпочтительно, обнаруженные в качестве компонентов указанной активной фракции, сами обладают противораковым действием.

Изобретение также относится к указанным соединениям и их применению, отдельно или в комбинации друг с другом или с другими соединениями, для лечения заболеваний, связанных с пролиферативными клетками, предпочтительно, для лечения рака, а также к их использованию при получении композиций и препаратов, применяемых при лечении упомянутых заболеваний.

Нижеследующие соединения особенно эффективны среди указанных соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, с соответствующими пространственными структурами:

Соединение 1: 3-(2,4,6-додекатриеноил)-ингенол (молекулярный вес 524)

Соединение 2: 3-(2,4,6,8-тетрадекатетраноил)-ингенол (молекулярный вес 550)

В дополнительном аспекте настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, включающим фармацевтически активное количество фракции экстракта в полярном растворителе, предпочтительно, н-бутане, из млечного сока растения Euphorbiaceae, предпочтительно, Euphorbia tirucalli L, совместно с фармацевтически приемлемыми наполнителями.

Композиции по настоящему изобретению могут включать от приблизительно 0,001% до 95% активной фракции экстракта млечного сока Euphorbiaceae, полученной, как описано выше.

В другом аспекте настоящего изобретения рассматриваются фармацевтические композиции, включающие эффективные количества одного или более соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, содержащиеся в полученной активной фракции экстракта млечного сока Euphorbiaceae, как раскрыто, и фармацевтически приемлемые наполнители.

В другом аспекте настоящего изобретения оно относится к фармацевтическим композициям, включающим фармацевтически активное количество одного или более соединений 1 и 2, как указано выше, и фармацевтически приемлемые наполнители.

Фармацевтически приемлемые наполнители для приготовления композиций по настоящему изобретению могут включать все известные в данной области, такие как лактоза, крахмал, сахароза, глюкоза, метилцеллюлоза, стеарат магния, дикальция фосфат, сульфат кальция, маннитол, сорбитол, этанол, глицерин, вода и другие. Для приготовления данных фармацевтических препаратов можно обратиться в качестве ссылки к работе Remington's Pharmaceutical Sciences, от издателя Mack Publishing, США.

Достаточное количество, не исключая каких-либо других, одного или более соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, как указано, особенно одного или более соединений 1 и 2 в композициях по настоящему изобретению, составляет между приблизительно 0,1 мг и 2000 мг, предпочтительно, между приблизительно 10 мг и 100 мг.

Композиции по настоящему изобретению могут вводиться перорально (включая формы с немедленным и/или контролируемым высвобождением), парентерально (внутримышечно, внутривенно, внутриартериально, внутрибрюшинно, интратекально, подкожно или гиподермально и внутрикожно), через слизистую оболочку (легких, подъязычно, назально, конъюктивно, ректально, вагинально), а также местно.

Подходящими формами выпуска для композиций по настоящему изобретению, не ограничиваясь только ими, являются: раствор, сироп, эликсир, суспензия, эмульсия, лосьон, мазь, крем, паста, аэрозоль, порошок, пилюля, таблетка, капсула, суппозиторий, овулярные или глазные капли.

Композиции по данному изобретению могут также включать помимо активной фракции экстракта млечного сока Euphorbiaceae в полярном растворителе и/или одного или более содержащихся в ней соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, и/или одного или более соединений 1 и 2, как указано выше, другие активные компоненты, используемые против того типа пролиферативных клеток, с которыми желают бороться. Опытному специалисту известно, как принять решение относительно добавления других эффективных активных компонентов.

В рамках другого варианта осуществления настоящего изобретения существует способ лечения заболеваний, связанных с пролиферативными клетками, особенно способ лечения рака, при котором пациент, нуждающийся в указанном лечении, получает достаточное количество:

(1) активной фракции млечного сока растения Euphorbiaceae, полученной с использованием полярного растворителя, и/или

(2) одного или более соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, содержащихся в указанной активной фракции и/или

(3) одного или более соединений 1 и 2, как указано выше, или

(4) композиции, включающей любое из перечисленного выше или их сочетания.

В рамках еще одного аспекта настоящего изобретения существует возможность применения активной фракции млечного сока растения из семейства Euphorbiaceae, предпочтительно, Euphorbia tirucalli L, экстрагированного с использованием полярного растворителя, предпочтительно, бутанола. Эта возможность заключается в том, что данная фракция может быть использована для приготовления композиции или лекарственного средства, эффективных для лечения заболеваний, связанных с пролиферативными клетками, предпочтительно, для лечения рака. Настоящее изобретение также включает использование одного или более соединений с молекулярным весом между приблизительно 500 и 600, содержащихся в указанной активной фракции. Эти соединения могут быть использованы для приготовления композиции или лекарственного средства, эффективных для лечения заболеваний, связанных с пролиферативными клетками, предпочтительно, для лечения рака. Настоящее изобретение также включает использование одного или более соединений 1 и 2, как указано выше, для приготовления композиции или лекарственного средства, эффективных для лечения заболеваний, связанных с пролиферативными клетками, предпочтительно, для лечения рака.

Настоящее изобретение относится к пролиферативным клеткам любого животного организма, предпочтительно, человека.

Квалифицированный специалист сможет найти другие равноценные способы применения настоящего изобретения на основе описания и примеров, представленных в настоящей заявке, не выходя за границы, установленные формулой изобретения, представленной ниже.