способ диагностики хронического гнойного среднего отита

Формула изобретения

Способ диагностики хронического гнойного среднего отита (ХГСО) путем исследования биологического материала из полости среднего уха и определения в нем внеклеточных возбудителей ХГСО, отличающийся тем, что дополнительно в мазке со слизистой среднего уха определяют наличие ДНК внутриклеточных возбудителей ХГСО и при совместном выявлении наличия в гнойном отделяемом среднего уха внеклеточных возбудителей, а в мазке со слизистой среднего уха - ДНК внутриклеточных возбудителей, диагностируют ХГСО.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, а именно оториноларингологии, и может найти применение для диагностики хронического гнойного среднего отита.

Хронический гнойный средний отит (ХГСО) является одним из распространенных заболеваний в отиатрической практике и занимает второе место в структуре патологии ЛОР-органов (Каманин Е.И., Трофимов А.Е. Ципрофлоксацин в лечении больных острым и хроническим отитом // Вестник оториноларингологии. - 2003. - № 2. - С.24).

Социальная значимость этого заболевания заключается не только в возможности развития опасных для жизни больного внутричерепных осложнений, таких как мастоидит, гнойный менингит, эпи- и субдуральные абсцессы, абсцессы головного мозга, синус-тромбоз и др., но и формировании прогрессирующей тугоухости, а, следовательно, снижении трудоспособности больных (Полякова С.Д. Дифференцированная иммунокоррекция хронических гнойных средних отитов. - Воронеж, 2002. - С.1).

Диагностика ХГСО является сложной проблемой. Продолжительность заболевания, частые рецидивы свидетельствуют о недостаточности существующих методов диагностики (Погосов B.C., Мирошниченко Н.А., Тафинцев А.Н. Лечение больных ХГСО препаратами медицинского озона в комплексе с низкочастотной ультразвуковой терапией // Вестник оториноларингологии. - 2001. - № 5. - С.24-25; Плужников М.С., Дискаленко В.В., Бобошков М.Ю., Виноградов И.В. Местная противовоспалительная терапия наружных и средних отитов // Вестник оториноларингологии. - 2006. - № 4. - С.45-47). Поэтому разработка новых способов диагностики ХГСО является актуальной проблемой.

Проведенные исследования по научно-медицинской и патентной литературе выявили различные способы диагностики ХГСО.

В патенте РФ № 2138990 (1999, БИ № 28) описан «Способ рентгенодиагностики воспалительных заболеваний среднего уха», который заключается в проведении рентгенологического исследования среднего уха пациента.

Патентом РФ № 2151554 (2000, БИПМ № 18) защищен «Способ дифференциальной лучевой диагностики воспалительных заболеваний среднего уха», который заключается в компьютерно-томографическом исследовании среднего уха больного.

Недостатком этих двух способов является лучевая нагрузка на организм больного и обслуживающего персонала, сложность исследования, обусловленная необходимостью специального оборудования и специально обученного персонала.

Патентом РФ № 2174681 (2001, БИПМ № 28) защищен «Способ диагностики холестеатомы среднего уха». Способ основан на определении в слюне больного ХГСО, осложненным холеастеатомой, дополнительных включений в кристаллах холестерина. Недостатком способа является ограниченная функциональная возможность, так как не позволяет поставить диагноз ХГСО на более ранних стадиях заболевания.

Наиболее близким техническим решением, взятым за прототип, является способ диагностики ХГСО, описанный в работе Гурова А.В., Гусевой А.А. Микробиологические особенности хронического гнойного среднего отита и их влияние на течение заболевания // Вестник оториноларингологии. - 2007 - № 2. - С.7-10 путем исследования биологического материала - гнойного отделяемого из среднего уха. В гнойном отделяемом определяют наличие каких-либо внеклеточных возбудителей заболевания: аэробных и/или анаэробных бактерий, а также микроскопических грибов, и при их обнаружении диагностируют ХГСО.

Недостатком этого способа является недостаточная достоверность, так как его диагностика основана на определении только лишь внеклеточных возбудителей, а в этиологии ХГСО определенную роль играют также и внутриклеточные возбудители: хламидии, микоплазмы, вирусы (Полякова Т.С., Нечаева С.В., Поливода A.M. Роль хламидийной, микоплазменной инфекции в этиологии заболеваний ЛОР-органов // Вестник оториноларингологии. - 2004. - № 1. - С.24-27; Ying-Tai Sin, Sen-Tien Tsai, Ching Li. Prevalence of Human Papillomavims in middle ear carcinoma associated with chronic otitis media // Amer. Y. of Pathology. - 1997. - № 4. - P.1327-1332).

Целью настоящего изобретения является повышение достоверности диагностики ХГСО.

Цель изобретения достигается следующим образом. В биологическом материале, взятом из полости среднего уха больного, определяют наличие внеклеточных возбудителей ХГСО. Дополнительно в мазке со слизистой среднего уха определяют наличие ДНК каких-либо внутриклеточных возбудителей. При совместном выявлении наличия в гнойном отделяемом среднего уха каких-либо внеклеточных возбудителей, а в мазке со слизистой среднего уха - ДНК внутриклеточных возбудителей, диагностируют хронический гнойный средний отит.

Подробное описание способа.

Для определения наличия каких-либо внеклеточных возбудителей ХГСО: бактерий и микроскопических грибов, ЛОР-врач забирает гнойное отделяемое среднего уха специальным узким стерильным ватным тампоном с гибкой ручкой, с помощью ушной воронки, которая помогает предотвратить контаминацию материала микрофлорой наружного уха (В.И.Кочеровец, Ю.К.Янов, Н.М.Каргальцева, М.В.Молчанова, К.В.Айрапетян. Забор материала для микробиологического исследования у больных с заболеваниями ЛОР-органов // Российская оториноларингология. - 2008. - № 2. - С.48-59). Затем тампон помещают в пластиковую пробирку с тиогликолевым буфером и транспортируют в лабораторию не позже 1 часа после его забора, что обеспечивает сохранение жизнеспособности большинства микроорганизмов.

Для определения наличия ДНК каких-либо внутриклеточных возбудителей ХГСО: хламидий, микоплазм, герпетических вирусов, а именно вирусов простого герпеса, цитомегаловирусов, вирусов Эпштейна-Барра, а также вирусов папилломы человека, ЛОР-врач забирает мазок непосредственно со слизистой оболочки среднего уха (Меньшиков В.В. Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. Том 3. Клиническая микробиология. - М.: Лабора, 2009. - С.741-742) таким же стерильным тампоном, как и для определения внеклеточных возбудителей.

Определение в гнойном отделяемом среднего уха наличия каких-либо внеклеточных возбудителей ХГСО проводят микробиологическим методом, описанным в работе Гурова А.В., Гусевой А.А. Микробиологические особенности хронического гнойного среднего отита и их влияние на течение заболевания // Вестник оториноларингологии. - 2007 - № 2. - С.7-10.

Ватный тампон с исследуемым материалом тщательно отжимают о стенки пробирки вращательными движениями. Содержимое ресуспендируют пипеткой до получения гомогенной массы. Из исходного материала готовят 10-кратные разведения в тиогликолевом буфере от 10^-1 до 10^-6. Из разведений производят высевы пипеткой по 0,1 мл на соответствующие пластинчатые питательные среды: для аэробных бактерий - кровяной агар, желточно-солевой агар, среда Эндо; для микроскопических грибов - среда Сабуро; для анаэробных бактерий - агар Шадлера. Анаэробные условия создают согласно методике, описанной в работе Давыдова М.И., Дмитриевой Н.В. Инфекции в онкологии. М.: Практическая медицина, 2009. - С.58. Выделенные чистые культуры аэробных и анаэробных микроорганизмов идентифицируют до вида по морфологическим, тинкториальным, культуральным, а также биохимическим свойствам с помощью тест-систем производства PLIVA-Lachema (Чехия).

Определение в мазке со слизистой среднего уха наличия ДНК каких-либо внутриклеточных возбудителей ХГСО проводят с помощью полимеразной цепной реакции с электрофорезной детекцией продукта (ПЦР-ЭФ), используя при этом коммерческие тест-системы для молекулярной диагностики инфекционных заболеваний производства ЗАО «Литех» (г.Москва).

При совместном выявлении в гнойном отделяемом среднего уха наличия любых внеклеточных возбудителей: аэробных и/или анаэробных бактерий, а также микроскопических грибов, а в мазке со слизистой среднего уха - наличия ДНК каких-либо внутриклеточных возбудителей: хламидий, микоплазм, герпетических вирусов, а также вирусов папилломы человека, диагностируют хронический гнойный средний отит.

Практическая реализуемость предлагаемого способа иллюстрируется примерами из клинической практики.

Пример 1: больной Ш., 28 лет, история болезни № 1799 поступил в ЛОР-отделение МЛПУЗ «Городская больница № 1» им. Н.А.Семашко г.Ростова-на-Дону с жалобами на гноетечение из уха, головные боли и снижение слуха. В анамнезе у пациента в течение последних 3 лет наблюдалось 8 случаев гнойного воспаления среднего уха. Консервативное лечение было стандартным, результаты которого не привели к выздоровлению.

Для уточнения диагноза пациенту было проведено исследование согласно заявляемому способу. Для определения наличия внеклеточных возбудителей ХГСО, ЛОР-врач забирал гнойное отделяемое среднего уха специальным узким стерильным ватным тампоном с гибкой ручкой, с помощью ушной воронки, которая помогала предотвратить контаминацию материала микрофлорой наружного уха (В.И.Кочеровец, Ю.К.Янов, Н.М.Каргальцева, М.В.Молчанова, К.В.Айрапетян. Забор материала для микробиологического исследования у больных с заболеваниями ЛОР-органов // Российская оториноларингология. - 2008. - № 2. - С.48-59). Для определения ДНК внутриклеточных возбудителей ХГСО, ЛОР-врач забирал мазок непосредственно со слизистой оболочки среднего уха (Меньшиков В.В. Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. Том 3. Клиническая микробиология. - М.: Лабора, 2009. - С.741-742) таким же стерильным тампоном, как и для определения внеклеточных возбудителей.

Определение наличия каких-либо внеклеточных возбудителей ХГСО в биологическом материале - гнойном отделяемом из среднего уха проводили микробиологическим методом согласно методике, описанной в работе Гурова А.В., Гусевой А.А. Микробиологические особенности хронического гнойного среднего отита и их влияние на течение заболевания // Вестник оториноларингологии. - 2007 - № 2. - С.7-10. Определение наличия ДНК каких-либо внутриклеточных возбудителей ХГСО в мазке со слизистой среднего уха проводили с помощью ПЦР-ЭФ, используя при этом коммерческие тест-системы для молекулярной диагностики инфекционных заболеваний производства ЗАО «Литех» (г. Москва).

Были получены следующие результаты. В гнойном отделяемом из среднего уха больного были обнаружены внеклеточные возбудители ХГСО: синегнойная палочка и золотистый стафилококк, а в мазке со слизистой среднего уха - ДНК внутриклеточных возбудителей: хламидий, цитомегаловирусов и вируса папилломы человека.

Поскольку совместно было выявлено наличие в гнойном отделяемом среднего уха внеклеточных возбудителей, а в мазке со слизистой среднего уха - ДНК внутриклеточных возбудителей, больному был поставлен диагноз: хронический гнойный средний отит. Было назначено адекватное лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагноза, поставленного в соответствии с заявляемым способом.

Пример 2: больная У., 45 лет, история болезни № 52496 поступила в ЛОР-отделение МЛПУЗ «Городская больница № 1» им. Н.А.Семашко г.Ростова-на-Дону с жалобами на гноетечение из уха, головные боли, повышение температуры до 38°С и снижение слуха. В анамнезе у пациентки в течение последних 2 лет наблюдалось 5 случаев гнойного воспаления среднего уха. Консервативное лечение было стандартным, результаты которого не привели к выздоровлению.

Для уточнения диагноза пациентке было проведено исследование согласно заявляемому способу. Для определения наличия внеклеточных возбудителей ХГСО, ЛОР-врач забирал гнойное отделяемое среднего уха специальным узким стерильным ватным тампоном с гибкой ручкой, с помощью ушной воронки, которая помогала предотвратить контаминацию материала микрофлорой наружного уха (В.И.Кочеровец, Ю.К.Янов, Н.М.Каргальцева, М.В.Молчанова, К.В.Айрапетян. Забор материала для микробиологического исследования у больных с заболеваниями ЛОР-органов // Российская оториноларингология. - 2008. - № 2. - С.48-59). Для определения ДНК внутриклеточных возбудителей ХГСО, ЛОР-врач забирал мазок непосредственно со слизистой оболочки среднего уха (Меньшиков В.В. Методики клинических лабораторных исследований. Справочное пособие. Том 3. Клиническая микробиология. - М.: Лабора, 2009. - С.741-742) таким же стерильным тампоном, как и для определения внеклеточных возбудителей.

Определение наличия каких-либо внеклеточных возбудителей ХГСО в биологическом материале - гнойном отделяемом из среднего уха проводили микробиологическим методом согласно методике, описанной в работе Гурова А.В., Гусевой А.А. Микробиологические особенности хронического гнойного среднего отита и их влияние на течение заболевания // Вестник оториноларингологии. - 2007 - № 2. - С.7-10. Определение наличия ДНК каких-либо внутриклеточных возбудителей ХГСО в мазке со слизистой среднего уха проводили с помощью ПЦР-ЭФ, используя при этом коммерческие тест-системы для молекулярной диагностики инфекционных заболеваний производства ЗАО «Литех» (г. Москва).

Были получены следующие результаты. В гнойном отделяемом из среднего уха больной были обнаружены внеклеточные возбудители ХГСО: клебсиеллы и золотистый стафилококк, а в мазке со слизистой среднего уха - ДНК внутриклеточных возбудителей: микоплазм и вируса папилломы человека.

Поскольку совместно было выявлено наличие в гнойном отделяемом среднего уха внеклеточных возбудителей, а в мазке со слизистой среднего уха - ДНК внутриклеточных возбудителей, больной был поставлен диагноз хронический гнойный средний отит. Было назначено адекватное лечение, результаты которого подтвердили достоверность диагноза, поставленного в соответствии с заявляемым способом.

С помощью предлагаемого способа в ЛОР-отделении МЛПУЗ «Городская больница № 1» им. Н.А.Семашко г.Ростова-на-Дону были обследованы 96 пациентов. У всех обследованных в гнойном отделяемом из среднего уха было обнаружено наличие внеклеточных возбудителей ХГСО, а в мазке со слизистой среднего уха - наличие ДНК внутриклеточных возбудителей ХГСО.

Абсолютно всем обследованным пациентам был поставлен диагноз: хронический гнойный средний отит. Результаты назначеного адекватного лечения подтвердили достоверность поставленного диагноза.

Таким образом, предлагаемый способ значительно повышает достоверность диагностики хронического гнойного среднего отита.