системы и методы измерения клеток, использующие ультракороткую т2*-релаксометрию

Формула изобретения

1. Способ контроля меченых клеток, включающий в себя:

мечение клеток ex vivo контрастирующим агентом;

контроль миграции, пролиферации и/или хоминга упомянутых меченных клеток при помощи генерации последовательности магнитно-резонансных (МР) изображений;

измерение Т₂*-релаксометрии с кривой затухания Т₂*, полученной серией спин-эхо изображений, включая этапы, на которых:

(a) индуцируют первый спин-эхо сигнал, генерирующий первое спин-эхо изображение;

(b) индуцируют множество спин-эхо сигналов, генерирующее серию дополнительных спин-эхо изображений из подходящих смещений указанного затухания Т₂*; и

(c) получают Т ₂* изображения при помощи подбора экспоненты,

при этом упомянутый первый спин-эхо сигнал и упомянутый второй спин-эхо сигнал образуются при помощи первого радиочастотного (РЧ) импульса, за которым соответственно следует второй РЧ импульс, причем первый РЧ импульс отличается от второго РЧ импульса.

2. Способ по п.1, в котором упомянутый контрастирующий агент представляет собой суперпарамагнитную окись железа (SPIO).

3. Способ по п.1, в котором Т₂* является ультракоротким.

4. Способ по п.3, в котором Т₂* изменяется от применения к применению, и в некоторых применениях меньше или равно 2 мс.

5. Способ по п.1, в котором упомянутый первый РЧ импульс представляет собой 90° РЧ импульс, а второй РЧ импульс представляет собой 180° РЧ импульс.

6. Способ по п.1, в котором кривая затухания Т₂ определяется через М_ssе ^-t/T, где M_ss представляет собой намагниченность в устойчивом состоянии.

7. Способ по п.1, в котором упомянутая кривая затухания Т₂* определяется через: M_ss e^-TE/T2e^-(t-TE)/T2, где M_ss представляет собой намагниченность в устойчивом состоянии.

8. Способ по п.1, в котором упомянутое подходящее смещение эхо выполняют с шагами, не превышающими 1 или 2 мс.

9. Способ по п.1, в котором упомянутые Т₂* изображения совмещены и показаны в виде общего Т₂* изображения.

10. Способ по любому одному из предшествующих пунктов, в котором меченые клетки измеряют применительно к транспорту клеток или клеточной терапии.

11. Система для контроля меченых клеток, содержащая:

средство для мечения клеток ex vivo контрастирующим агентом;

средство для контроля миграции, пролиферации и/или хоминга упомянутых меченых клеток при помощи генерации последовательности магнитно-резонансных (МР) изображений;

средство для измерения Т₂*-релаксометрии с кривой затухания Т₂*, полученной серией спин-эхо изображений, включая этапы, на которых:

(a) индуцируют первый спин-эхо сигнал, генерирующий первое спин-эхо изображение;

(b) индуцируют множество спин-эхо сигналов, генерирующее серию дополнительных спин-эхо изображений из подходящих смещений указанного затухания Т₂*; и

(c) получают Т₂* изображения при помощи подбора экспоненты,

при этом упомянутый первый спин-эхо сигнал и упомянутый второй спин-эхо сигнал образуются при помощи первого радиочастотного (РЧ) импульса, за которым соответственно следует второй РЧ импульс, причем первый РЧ импульс отличается от второго РЧ импульса.

12. Система по п.11, в которой первый РЧ импульс представляет собой 90° РЧ импульс, а второй РЧ импульс представляет собой 180° РЧ импульс.

Описание изобретения к патенту

ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ

Настоящее изобретение относится к системам и способам, которые измеряют быстро затухающую Т₂*-релаксацию, для эффективного определения количества меченых клеток при помощи магнитно-резонансного изображения. Открытые системы и способы полезны в различных применениях, включая транспорт клеток и клеточную терапию.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

Клеточная терапия, использующая стволовые клетки и иммунные клетки, с целью восстановления и реваскуляризации все более часто применяются в клинических испытаниях. Успех или неудача могут зависеть от точной доставки клеток к заданным органам. Определение количества клеток, доставленных к заданной ткани(тканям), имеет огромное значение для расчета оптимальной дозы и времени клеточной терапии. Чтобы метить клетки ex vivo, использовались агенты суперпарамагнитной окиси железа (SPIO), обеспечивающие исследователям возможность контролировать миграцию, пролиферацию и хоминг этих клеток с помощью магнитно-резонансного (МР) изображения. Мечение SPIO вызывает эффект релаксации c высокой скоростью (R₂ *), который возрастает линейно с возрастанием концентрации железа. R₂* определяется как 1/Т₂*.

Т₂*-релаксометрия обычно достигается получением множества градиент-эхо изображений. В тканях, содержащих клетки, меченные железом с высокой концентрацией, Т₂* может быть ультракороткой. В приведенных в качестве примера случаях Т₂* находится ниже 1-2 миллисекунд, хотя точный период Т₂* меняется от применения к применению. Время эхо для градиентного эхо как правило ограничивается настройками аппаратуры. На практике обычно ультракороткого времени эхо является недостижимым. Поэтому затухание сигнала в тканях с ультракоротким Т₂* является как правило слишком быстрым для нормального градиент-эхо изображения.

Несмотря на все современные достижения, остается потребность в системах и/или способах, которые преодолеют трудности, связанные с традиционными техниками определения количества клеток. Кроме того, остается потребность в таких техниках определения количества клеток, которые не требуют модификации аппаратуры и/или специализированных расчетов РЧ импульса. Кроме того, нужны системы и способы для эффективного и надежного контроля и/или определения количества меченых клеток, например меченых стволовых клеток, в различных применениях, включая клеточную терапию и подобные. Эти и другие нужды удовлетворяются раскрытыми системами и способами.

ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение обеспечивает системы и способы для измерения и/или определения количества клеток в различных применениях, например транспорте клеток или клеточной терапии. Иллюстративные варианты осуществления раскрытых систем и способов включают использование клеток, которые были помечены ex vivo контрастирующим агентом, или других идентифицирующих характеристик. Меченые клетки контролируются с помощью МР изображения, чтобы оценить миграцию, пролиферацию и/или хоминг меченых клеток. Обычно контрастирующий агент представляет собой SPIO, хотя альтернативные контрастирующие агенты могут использоваться без отклонения от сущности и объема настоящего изобретения.

Согласно настоящему изобретению Т ₂*-релаксометрия преимущественно используется при измерении концентрации клеток в различных применениях, связанных с клетками. Поскольку в клетках, меченных железом с высокой концентрацией, Т₂* является ультракороткой, в настоящем описании раскрыты предпочтительные системы и способы для измерения Т ₂*-релаксометрии, такие системы и способы используют последовательность спин-эхо изображений вместо стандартных градиент-эхо изображений для достижения желаемых результатов. В приведенных в качестве примера случаях Т₂* не превышает 1-2 миллисекунд, хотя раскрытые системы и способы полезны в применении в широком диапазоне значений Т₂*, такие значения Т₂ * как правило отличаются от применения к применению. Раскрытые системы и способы индуцируют нормальный спин-эхо сигнал, генерирующий первое спин-эхо изображение с последующим индуцированием множества спин-эхо сигналов, генерирующих серию дополнительных спин-эхо изображений от соответствующих смещений эхо, до вышеупомянутого затухания Т₂* и затем получением схем Т₂ * при помощи подбора экспоненты.

Спин-эхо сигналы, выходящие из клеток, формируются для МР изображений первыми радиочастотными (РЧ) импульсами, за которыми следуют вторые радиочастотные импульсы, соответственно. При помощи спин-эхо сигналов строится кривая T₂, где для клеток, меченных частицами/наночастицами SPIO, T₂ гораздо длиннее, чем Т₂*, и определяется через M_sse^-t/T. Кривая затухания Т ₂* спин-эхо затем определяется через M_sse ^-TE/T2e^-(t-TE)/T2*. Множество спин-эхо изображений берется на разных интервалах, определяемых шагом смещения эхо, который может быть меньше 1 мс. Схема ультракороткого Т₂ * строится по первому спин-эхо изображению и множеству спин-эхо изображений с подходящим смещением эхо при помощи подбора экспоненты. Полная схема Т₂* строится при помощи наложения схемы ультракороткого Т₂* на схему нормального Т₂ *.

Дополнительные свойства, функции и преимущества раскрытых систем и способов будут ясны из последующего описания, в частности при чтении с прилагаемыми чертежами.

КРАТКОЕ ОПСИАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ

Чтобы помочь специалистам в данной области техники в создании и использовании раскрытых систем и способов, приведена ссылка на прилагаемые чертежи, на которых:

Фиг.1 представляет собой схематическую последовательность стандартной Т₂* релаксометрии, получаемой при помощи многократного градиентного эхо;

Фиг.2 представляет собой схематическую последовательность ультракороткой Т₂* релаксометрии;

Фиг.3a представляет собой аксиальное градинет-эхо изображение крысы с опухолью;

Фиг.3b представляет собой аксиальное спин-эхо изображение со смещением 0,8;

Фиг.3с представляет собой plussian blue-деформированный срез опухоли;

Фиг.4а представляет собой схему нормального Т₂*, скрытого пороговым сигналом для устранения шума;

Фиг.4b представляет собой схему ультракороткого Т₂*, наложенного на схему нормального Т₂*;

Фиг.5a представляет R₂ * схемы меченых боковых опухолей;

Фиг.5b представляет R₂* схемы не меченых боковых опухолей;

Фиг.6(а)-6(с) представляет собой гистограммы опухолей с разным количеством меченых железом клеток; и

Фиг.7 представляет собой график, иллюстрирующий линейную корреляцию R₂ * с количеством клеток/мм³.

ОПИСАНИЕ ИЛЛЮСТРАТИВНЫХ ВАРИАНТОВ ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Раскрыты системы и способы для измерения и/или определения количества клеток, не требующие модификаций аппаратуры и/или разработок специализированного РЧ сигнала. Раскрытые системы/способы имеют широкий спектр применений, включающий применения для транспорта клеток и клеточной терапии. Меченые клетки контролируются при помощи генерации МР изображений для того, чтобы отследить их миграцию, пролиферацию и хоминг. Периоды быстро затухающей Т ₂* - релаксации измеряются путем генерации МР изображений, чтобы эффективно определить количество меченых клеток, как здесь описано.

Агенты SPIO влияют на период Т₁ , Т₂ и Т₂*-релаксации. Влияние SPIO в компартментах клетки на Т₂*-релаксацию в десять раз больше, чем на Т₂-релаксацию. В результате в клетках, меченых SPIO, Т₂ намного длиннее, чем Т₂*. Раскрытые системы и способы используют сравнительно длинное Т₂ затухание с помощью получения серии спин-эхо изображений, чтобы преимущественно облегчить определение значения Т₂*, несмотря на значительное ослабление сигнала, связанное с затуханием ультракороткого Т₂*.

На Фиг.1 показана основная схема нормальной Т₂*-релаксометрии, используя последовательность многократного градиентного эхо. Сигнал индуцируется РЧ импульсом с небольшим поворотом угла. Вслед за импульсом возбуждения применяется градиентное считывание, чтобы произвести эхо. Время между РЧ импульсом и серединой градиента считывания определяется как «ТЕ». Очевидно, что временной интервал ТЕ ограничивается РЧ импульсом и формой волны градиента для градиента выбора отрезков, и градиентом считывания. Таким образом, ТЕ ограничивается настройками аппаратуры, включая, в частности, силу градиента и время нарастания градиента.

Сигнал, полученный от градиентного эхо, определяется через M_ss ^-TE/T2*, где M_ss представляет собой намагниченность в устойчивом состоянии. В тканях, содержащих клетки, меченные железом с высокой концентрацией, Т₂ * может быть ниже 1-2 миллисекунд. Следовательно, сигнал может затухать до уровня шума со временем эхо в пару миллисекунд. Приложенные ранее усилия по уменьшению ТЕ включали модификацию оборудования или большой объем работ над разработкой последовательности, и не смогли стать оптимальными или полезными для множества традиционных применений.

На Фиг.2 схематично изображены различные параметры, связанные с иллюстративным вариантом осуществления настоящего изобретения. Согласно раскрытым системам и способам, спин-эхо используется, чтобы получить изображение. Использование спин-эхо заменяет традиционное использование градиентного эхо. В иллюстративном варианте осуществления настоящего изобретения, спин-эхо формируется 90-градусным РЧ сигналом, за которым следует 180-градусный РЧ сигнал. Интенсивность сигнала за ТЕ определяется отношением M_ss ^-TE/T2. Поскольку в клетках, меченных SPIO, Т₂ гораздо длиннее, сигнал, полученный от спин-эхо гораздо сильнее сигнала, полученного от градиентного эхо, что помогает избежать негативных последствий, связанных с большой потерей сигнала на изображении. Схема ультракороткой Т₂ *-релаксации может затем быть наложена на схему нормального Т ₂* для создания конечной Т₂*-схемы в зоне обзора.

Измерение ультракороткой Т₂*-релаксации может быть достигнуто получением серий спин-эхо изображений, как показано на Фиг.2. Первое эхо получается как нормальное спин-эхо изображение. Следующие изображения получаются путем смещения считывания по направлению к кривой затухания Т2* используя шаги, подходящие для смещения эхо, которые могут быть ниже 1 миллисекунды. Этот способ позволяет получить образец кривой затухания Т ₂*, построенной по спин-эхо сигналу. Затем могут быть получены схемы Т₂* путем подбора экспоненты.

Обращаясь к Фиг.2, получают серию изображений с последовательностью спин-эхо. Первое сканирование получается в виде стандартного спин-эхо изображения. Последующие сканирования (сканирование 2- сканирование 5) получаются со смещением эхо по кривой затухания Т2*, определяемой отношением: M_sse^-TE/T2 e^-(t-TE)/T2*. Как показано на фиг.2, раскрытые системы и способы эффективны в преодолении ограничений, связанных с быстрым затуханием Т2*, путем успешного применения спин-эхо.

Для дальнейшей иллюстрации применений и преимуществ, связанных с раскрытыми системами и способами, сделана ссылка на следующие примеры. Однако нужно понимать, что данные примеры не являются ограничивающими объем настоящего изобретения, а только демонстрирующими иллюстративные варианты осуществления и/или выгоды изобретения:

Пример 1:

Чтобы облегчить измерение быстро затухающей Т2*-релаксации в тканях, содержащих клетки, меченные железом с высокой концентрацией, где затухание Т2* слишком быстрое для составления нормальной схемы многократного градиентного эхо, использовалась следующая методика. МР эксперименты in vivo на крысах с опухолями, меченными железом, использовались для демонстрации того, что раскрытая методика может быть использована для количественной оценки ультракороткой Т₂*, не превышающей 1-2 миллисекунд или ниже. В сочетании с составлением схемы регулярной Т2*, раскрытая техника может быть использована, чтобы обеспечить in vivo количественную оценку и контроль тканей, содержащих клетки, меченные большим количеством железа.

Наночастицы SPIO широко используются, чтобы влиять на периоды релаксации T₁, Т₂ и Т₂* меченых тканей и клеток. Период релаксации Т₂* представляет собой наиболее чувствительный параметр для обнаружения клеток, меченных SPIO, и, основываясь на преимуществах раскрытых в настоящем описании систем и способов, Т₂*-релаксометрия может быть успешно использована для количественной оценки и контроля меченных стволовых клеток в клеточной терапии. Как упоминалось выше, Т₂ *-релаксометрию как правило получают построением множества градиент-эхо изображений. Однако в тканях, содержащих клетки, меченные железом с высокой концентрацией, Т₂* может быть ниже 2 миллисекунд, и, следовательно, затухание сигнала происходит слишком быстро для периода нормального градиентного эхо. Используя преимущества сравнительно долгого затухания Т₂ клеток, связанных со SPIO, раскрытая система/способ используется для измерения быстро затухающей Т₂*-релаксации при помощи серии спин-эхо изображений. В иллюстративном примере, была проведена количественная оценка in vivo короткого Т₂* на крысах с опухолями, меченными железом.

Последовательность действий: измерение ультракороткой Т₂* было достигнуто с помощью получения серий спин-эхо изображений, как показано на Фиг.2. Первое эхо было получено в виде нормального спин-эхо изображения. Следующие изображения были получены при помощи смещения считывания по направлению к кривой Т₂*, используя шаги, не превышающие 1 миллисекунду. Это позволило получить кривую затухания Т₂* из спин-эхо сигнала.

Эксперимент in vivo: клетки меланомы С8161 были помечены (Feridex)-протамин сульфатными (FEPro) комплексами с помощью процедур мечения, которые известны в данной области техники. 2х10⁶ меченых FEPro или немеченых (контрольных) клеток меланомы были билатерально подкожно имплантированы в бок 5 голых крыс. Приблизительно через две недели после заражения опухолевыми клетками выполнялось ОМР на 3Т Intera whole-body scaner (Philips Medical System) при помощи специализированной 7-сантиметровой РЧ-катушки в форме соленоида для крыс. Схема нормальной Т ₂* была получена последовательностью многократного градиентного эхо (MGES) [TR/TE = 1540/16 мс, 13 эхо, матрица 256×256, 17 отрезков, толщина отрезков = 1,0 мм, зона обзора= 80 мм, NEX = 4]. Чтобы измерить короткую Т₂*, были получены пять наборов спин-эхо изображений с шагом считывания эхо 0 мс, 0,4 мс, 0,8 мс, 1,2 мс, 2,3 мс соответственно, со следующими параметрами: TR/TE = 1000/6,4, матрица 144×144, 17 отрезков, толщина отрезков = 1,5 мм, зона обзора = 80 мм, NEX = 4.

Анализ данных: анализ данных выполнялся при помощи инструментов программного обеспечения IDL. Схемы Т₂* были получены при помощи подбора экспоненты. Оба набора данных (то есть схема нормальной Т₂* и схема короткой Т₂*) были совмещены и показаны как схема Т₂*.

Схема ультракороткой Т₂*-релаксометрии и схема стандартной MGES Т₂* были получены для 4 крыс. На Фиг.3а показано аксиальное градиент-эхо изображение от боковых опухолей крысы. Отсутствие сигнала в меченых опухолях было вызвано клетками, меченными железом с высокой концентрацией, как показано на Фиг.3с. Однако спин-эхо изображение той же опухоли (Фиг.3b) меньше подвержено затуханию сигнала, обусловленному сравнительно долгим временем Т2-релаксации клеток, связанных со SPIO. Схема Т₂*, измеренная при помощи MGES (Фиг.4а), показывает площадь высоких значений Т2* на границе опухоли, показывающих последовательное ослабление FEPro-мечения по мере роста опухоли. На схеме MGES T2* нельзя обнаружить никакого сигнала вследствие быстрого затухания T2*, вызванного клетками, меченными железом с высокой концентрацией, в центре опухоли. Для сравнения, схема ультракороткой T2* (Фиг.4b) демонстрирует значения Т2* в центре опухоли, cоставляющие приблизительно 1 мс, что соответствует областям клеток, меченных железом с высокой концентрацией, согласно Фиг.3а.

Заключение: Этот эксперимент демонстрирует эффективное измерение времени ультракороткой T2*-релаксации в клетках и тканях. МР эксперименты in vivo демонстрируют, что этим способом можно измерять значения ультракороткого T2* вплоть до 1 мс или ниже в клетках, меченных железом с высокой концентрацией. В сочетании с традиционной схемой Т2*, раскрытая техника может использоваться для обеспечения количественной оценки и контроля тканей, содержащих клетки, меченные большим количеством железа, in vivo.

Эксперимент 2

Оценка количества меченых стволовых клеток в заданных тканях в экспериментальных моделях чрезвычайно важна, чтобы подобрать оптимальную дозу и время для клеточной терапии в клинических испытаниях. Агенты SPIO используются для мечения клеток, чтобы контролировать их миграцию, пролиферацию и хоминг при помощи МР изображения. Скорость релаксации R2* (1/T2*) является чувствительным параметром для количественного определения внутриклеточных SPIO.

В этом иллюстративном примере было изучено количественное отношение между числом меченных железом клеток и скоростью релаксации R2* у крысы с опухолью. Более конкретно, было изучено количественное соотношение между меченными железом клетками и скоростью тканевой релаксации R₂* у крысы с опухолью. Эксперименты in vivo показали хорошую линейную корреляцию между количеством меченных железом клеток и тканевой R₂*. В дальнейшем данные показали, что измерение R ₂* является надежным и чувствительным способом определения количества меченых клеток in vivo.

Клети меланомы С8161 и клетки глиомы С6 были помечены (Feridex)-протамин сульфатными (FEPro) комплексами с помощью известных процедур. 2×10⁶ меченных FEPro или немеченых (контрольных) клеток меланомы (n=4) или 1×10⁶ меченных FEPro или немеченых клеток глиомы (n=4) были билатерально подкожно имплантированы голым крысам. Приблизительно через две недели после заражения опухолевыми клетками выполнялось ОМР на 3Т Intera whole-body scaner (Philips Medical System) при помощи специализированной 7-сантиметровой РЧ-катушки в форме соленоида для крыс. Схема нормальной R₂* была получена последовательностью многократного градиентного эхо (MGES) [TR/TE = 1540/16 мс, 13 эхо, матрица 256×256, 17 отрезков, толщина отрезков = 1,0 мм, зона обзора = 80 мм, NEX = 4]. Чтобы измерить скорость релаксации R₂ * в тканях с высокой концентрацией меченых клеток, были получены пять наборов спин-эхо изображений с шагом считывания эхо 0 мс, 0,4 мс, 0,8 мс, 1,2 мс, 2,3 мс соответственно, со следующими параметрами: TR/TE = 1000/6,4, матрица 144×144, 17 отрезков, толщина отрезков = 1,5 мм, зона обзора = 80 мм, NEX = 4. Скорость релаксации R2* была подсчитана путем подбора экспоненты при помощи инструментов программного обеспечения IDL. Оба набора данных (то есть схема регулярной R₂* и схема тканевой R ₂* с высокой концентрацией меченых клеток) были совмещены. R2*-релаксация опухоли была подсчитана по пикселям как среднее от R₂*-релаксации по всему объему опухоли.

Результаты: Мечение железом не изменило рост опухоли. Не было статистически значимой разницы в размерах опухоли меченых и немеченых опухолей. Размеры меченых опухолей находились в диапазоне от 1890 мм³ до 4950 мм³ на время построения изображения, что означает от 325 до 1056 меченых клеток на мм ³ в восьми опухолях.

Мечение FEPro значимо удлинило скорость релаксации R₂* в опухоли. Фиг.5a и 5b иллюстрируют схемы R₂* меченой и немеченой опухоли соответственно. Влияние мечения железом на R₂*-релаксацию может быть также доказано при помощи R₂*-гистограммы опухоли с 1056 мечеными клетками/мм³ (Фиг.6а) и 325 мечеными клетками/мм³ (Фиг.6b). Меченые опухоли показали гораздо большее распространение R₂* по сравнению с контрольной опухолью (Фиг.6с). Средняя R₂* опухоли демонстрирует очень хорошую линейную корреляцию с количеством меченых клеток на мм³ (Фиг.7), с коэффициентом корреляции 0,91 (р<0,01).

Заключение: в этом иллюстративном примере было исследовано количественное соотношение между меченными железом клетками и скоростью тканевой релаксации R₂ *. Несмотря на то, что были использованы две различных линии опухолевых клеток, данные in vivo демонстрируют хорошую линейную корреляцию между количеством меченных железом клеток и тканевой R₂*. Экспериментальные данные также показывают, что измерение R₂* представляет собой надежный и чувствительный инструмент для количественной оценки меченных железом клеток. Согласно этому раскрытые системы и способы могут использоваться для эффективной неинвазивной количественной оценки меченных железом клеток in vivo.

В целом, системы и способы настоящего изобретения предлагают значительно улучшенные техники для МР измерений меченых клеток в различных применениях. Действительно, современные исследования в области транспорта клеток и клеточной терапии начинаются с инъекций большого количества клеток, меченных SPIO, в заданный участок, что приводит к очень короткому Т ₂* в меченых и окружающих клетках. Открытые системы и способы способствуют значительному улучшению в количественной оценке меченых клеток, несмотря на ультракороткое затухание Т₂ *, с которым приходится сталкиваться в таких тканевых системах. Раскрытые системы и способы могут также применяться для измерения ультракороткой Т₂* других контрастирующих агентов, которые вызывают значимую разницу между Т₂ и Т ₂*-релаксацией.

Хотя настоящее изобретение было описано со ссылкой на иллюстративные варианты осуществления и их реализации, раскрытые системы и способы не ограничены такими иллюстративными вариантами осуществления. Напротив, как будет видно специалистам в данной области техники из приведенного здесь описания, раскрытые системы и способы допускают модификации, изменения и усовершенствования без отклонения от сущности и объема настоящего изобретения. Следовательно, настоящее изобретение определенно охватывает такие модификации, изменения и усовершенствования в пределах его объема.