устройство и способ для количественной оценки полипептида, содержащегося в пробе жидкости организма, а также маркер для выявления патологических состояний

Формула изобретения

Способ диагностики нефропатии, включающий в себя количественную оценку полипептидов, содержащихся в пробе жидкости организма, и сравнения с контрольными значениями, сохраненными в базе данных, причем контрольные значения используются в качестве записей данных, релевантных состоянию полипептидов, для сравнения, в котором сравнивают информацию о вероятности появления и/или концентрации полипептидов в пробе жидкости организма с показателем каждого из по меньшей мере одного контрольного значения о вероятности появления и/или концентрации полипептидов для патологического состояния в пробах здоровых и больных испытуемых, и для каждого полипептида, хранящегося для идентификации необходимой информации и для диагностики «нефропатии», используется комбинация полипептидов или все полипептиды с 158 по 380, перечисленные в следующей таблице, причем полипептиды определяют по соответствующим им показателям массы и времени задержки в капиллярном электрофорезе, например, при помощи капиллярного электрофореза в сочетании с масс-спектрометром:

№	ИД	Время (мин)	Масса (Дальтон)	% здоровых	% больных	Тип
158	32	21,7±5,12	830,5±0,11	4%	40%	полож. для нефропатии
159	69	32,4±1,83	866,4±0,11	0%	40%	полож. для нефропатии
160	111	30,6±3,07	909,5±0,13	11%	40%	полож. для нефропатии
161	152	32,8±3,14	937,5±0,11	14%	73%	полож. для нефропатии
162	155	24,9±2,97	952,5±0,16	11%	40%	полож. для нефропатии
163	238	32,1±2,44	1033,5±0,11	5%	40%	полож. для нефропатии
164	280	24,4±2,87	1060,6±0,16	17%	68%	полож. для нефропатии
165	353	27,5±2,86	1131,6±0,16	20%	68%	полож. для нефропатии
166	402	33,4±3,48	1181,6±0,15	22%	73%	полож. Для нефропатии
167	424	33,0±2,52	1203,6±0,14	9%	50%	полож. для нефропатии
168	2586	26,5±3,68	1211,6±0,14	14%	40%	полож. для нефропатии
169	2596	33,1±0,91	1219,6±0,15	18%	40%	полож. для нефропатии
170	2601	32,8±3,30	1225,6±0,13	12%	40%	полож. для нефропатии
171	510	30,7±3,18	1297,7+0,20	31%	82%	полож. для нефропатии
172	526	34,1±2,05	1333,7±0,23	9%	40%	полож. для нефропатии
173	2898	44,7±4,06	1337,5±0,20	19%	59%	полож. для нефропатии
174	2955	27,9±4,19	1398,8±0,36	29%	77%	полож. для нефропатии
175	2975	21,3±5,08	1423,7±0,49	6%	50%	полож. для нефропатии
176	633	28,1±4,95	1439,8±0,19	19%	68%	полож. для нефропатии
177	651	24,5±2,42	1466,0±0,27	9%	77%	полож. для нефропатии
178	641	27,5±4,93	1482,0±0,42	33%	40%	полож. для нефропатии
179	642	29,8±4,43	1482,9±0,28	18%	40%	полож. для нефропатии
180	662	24,3±2,65	1483,7±0,28	26%	91%	полож. для нефропатии
181	675	24,6±1,98	1500,0±0,20	38%	86%	полож. для нефропатии
182	711	24,6±2,90	1553,1±0,28	14%	64%	полож. для нефропатии
183	713	29,0±4,83	1556,7±0,45	26%	73%	полож. для нефропатии
184	720	24,2±4,48	1567,0±0,22	26%	86%	полож. для нефропатии
185	740	28,8±4,53	1596,9±0,31	21%	86%	полож. для нефропатии
186	111	24,5±2,43	1652,8±0,25	14%	59%	полож. для нефропатии
187	787	26,3±2,63	1669,8±0,37	20%	64%	полож. для нефропатии
188	3200	33,1±3,22	1729,2±0,36	6%	45%	полож. для нефропатии
189	3210	30,5±4,11	1744,4±0,46	16%	59%	полож. для нефропатии
190	6963	25,1±3,42	1754,4±0,41	53%	95%	полож. для нефропатии
191	3230	24,2±1,56	1776,0±0,27	9%	50%	полож. для нефропатии
192	3036	18,5±3,55	1791,0+0,38	7%	40%	полож. для нефропатии
193	843	32,2±5,38	1792,9±0,31	28%	40%	полож. для нефропатии
194	3043	9,7±2,54	1799,8±0,29	0%	40%	полож. для нефропатии
195	870	25,3±2,89	1810,9+0,38	43%	91%	полож. для нефропатии
196	895	24,6±2,34	1851,1±0,21	43%	95%	полож. для нефропатии
197	903	27,2±4,46	1867,3±0,42	38%	91%	полож. для нефропатии
198	939	25,0±3,97	1966,0±0,53	16%	40%	полож. для нефропатии
199	947	28,7±3,08	1982,8±0,57	11%	40%	полож. для нефропатии
200	965	29,5±5,53	1986,3±0,36	15%	64%	полож. для нефропатии
201	979	23,3±4,46	2045,9±0,32	32%	40%	полож. для нефропатии
202	1013	33,7±3,16	2115,1±0,53	30%	40%	полож. для нефропатии
203	3263	20,5±2,78	2177,1±0,37	9%	40%	полож. для нефропатии
204	1083	18,1±4,24	2241,6±0,41	9%	59%	полож. для нефропатии
205	1087	21,2±2,49	2250,7±0,38	23%	64%	полож. для нефропатии
206	1091	27,5±2,53	2258,7±0,49	9%	59%	полож. для нефропатии
207	1135	20,0±3,30	2356,4±0,41	13%	59%	полож. для нефропатии
208	1149	28,1±3,95	2391,4±0,42	13%	64%	полож. для нефропатии
209	1156	25,7±4,85	2406,1±0,57	20%	77%	полож. для нефропатии
210	1163	22,8±4,28	2423,2±0,53	14%	64%	полож. для нефропатии
211	1165	21,9±4,45	2427,3±0,40	31%	91%	полож. для нефропатии
212	1182	19,2±4,24	2465,1±0,62	9%	77%	полож. для нефропатии
213	5398	25,4±5,25	2493,0±0,38	9%	50%	полож. для нефропатии
214	3627	19,5±4,66	2494,0±0,66	12%	77%	полож. для нефропатии
215	5610	23,7±4,27	2494,9±0,49	7%	40%	полож. для нефропатии
216	3640	24,4±5,51	2522,0±0,67	17%	82%	полож. для нефропатии
217	1212	20,1±3,61	2540,5±0,54	14%	68%	полож. для нефропатии
218	3673	22,3±4,72	2593,5±0,30	7%	55%	полож. для нефропатии
219	1241	20,0±4,87	2613,9±0,83	14%	55%	полож. для нефропатии
220	1272	35,1±1,62	2726,5±0,67	61%	20%	полож. для нефропатии
221	1289	25,0±4,39	2775,1±0,56	12%	40%	полож. для нефропатии
222	1303	21,8±3,78	2790,7±0,55	19%	86%	полож. для нефропатии
223	1339	25,9±3,30	2892,2±0,50	9%	50%	полож. для нефропатии
224	3819	16,8±2,72	2919,0±0,26	2%	50%	полож. для нефропатии
225	1355	21,9±3,23	2937,0±0,49	13%	86%	полож. для нефропатии
226	1362	20,0±4,81	2958,8±0,80	5%	59%	полож. для нефропатии
227	1358	34,4±2,72	2962,0±0,54	12%	20%	полож. для нефропатии
228	1393	28,9±3,56	3059,7±0,78	30%	40%	полож. для нефропатии
229	1402	28,3±5,96	3088,0±0,79	7%	20%	полож. для нефропатии
230	1494	26,1±2,72	3369,2+0,73	21%	40%	полож. для нефропатии
231	1528	26,0±2,89	3483,4±0,95	30%	40%	полож. для нефропатии
232	1719	24,5±3,92	4183,3±1,44	4%	40%	полож. для нефропатии
233	1734	21,0±5,35	4241,0±0,62	29%	73%	полож. для нефропатии
234	1761	23,4±4,09	4370,2±1,01	11%	40%	полож. для нефропатии
235	1793	22,8±2,94	4527,6±0,67	1%	45%	полож. для нефропатии
236	1825	21,7±3,00	4713,6±0,44	7%	64%	полож. для нефропатии
237	2060	24,6±3,73	7556,6±1,55	2%	40%	полож. для нефропатии
236	3994	16,7+5,54	8055,1±2,10	12%	40%	полож. для нефропатии
239	2229	13,2±5,19	8765,8±0,96	37%	82%	полож. для нефропатии
240	2252	15,3±4,97	9181,0±1,28	10%	64%	полож. для нефропатии
241	2302	14,0±4,20	10046,1±0,96	21%	77%	полож. для нефропатии
242	2180	18,7±5,50	10208,0±1,24	2%	40%	полож. для нефропатии
243	2323	17,4±4,02	10518,2+1,10	23%	64%	полож. для нефропатии
244	138	35,3±5,04	924,5±0,12	50%	0%	отриц. для нефропатии
245	142	43,1±2,61	928,4±0,08	65%	14%	отриц. для нефропатии
246	2541	45,7±2,25	955,5±0,14	60%	5%	отриц. для нефропатии
247	2594	23,8±2,94	1010,6±0,09	67%	5%	отриц. для нефропатии
248	248	31,2±1,53	1028,5±0,09	84%	32%	отриц. для нефропатии
249	2622	45,9±2,27	1041,4±0,10	57%	0%	отриц. для нефропатии
250	266	31,5±1,98	1046,5±0,09	87%	32%	отриц. для нефропатии
251	2440	43,4±2,24	1047,5±0,12	68%	0%	отриц. для нефропатии
252	2442	18,1±4,34	1050,7±0,12	60%	0%	отриц. для нефропатии
253	304	32,9±3,03	1084,4±0,11	69%	18%	отриц. для нефропатии
254	347	46,7+2,63	1125,5±0,12	63%	9%	отриц. для нефропатии
255	2731	46,3±2,70	1157,5±0,10	83%	32%	отриц. для нефропатии
256	2733	43,7±1,70	1160,5±0,07	72%	18%	отриц. для нефропатии
257	400	44,5±3,67	1179,5±0,09	97%	36%	отриц. для нефропатии
258	412	45,0±2,24	1191,6±0,09	60%	9%	отриц. для нефропатии
259	416	46,2±2,59	1195,5±0,10	98%	32%	отриц. для нефропатии
260	2575	44,2±1,83	1200,6±0,13	86%	0%	отриц. для нефропатии
261	442	45,9±2,04	1223,5±0,10	80%	9%	отриц. для нефропатии
262	441	44,5±2,15	1239,6±0,08	89%	0%	отриц. для нефропатии
263	2814	47,8±3,08	1246,6±0,11	60%	5%	отриц. для нефропатии
264	2821	46,8±2,20	1254,7±0,19	56%	5%	отриц. для нефропатии
265	478	43,2±2,90	1261,5±0,16	91%	36%	отриц. для нефропатии
266	479	48,6±2,90	1262,5±0,09	65%	0%	отриц. для нефропатии
267	476	43,9±2,16	1277,6±0,11	67%	0%	отриц. для нефропатии
268	502	36,7±3,04	1288,7±0,18	72%	23%	отриц. для нефропатии
269	2856	47,2±3,17	1292,5±0,14	67%	18%	отриц. для нефропатии
270	521	47,8±2,58	1308,5±0,09	66%	0%	отриц. для нефропатии
271	4687	48,2±2,67	1321,6±0,11	53%	0%	отриц. для нефропатии
272	533	34,8±1,81	1321,7+0,23	98%	41%	отриц. для нефропатии
273	559	46,0±4,93	1351,7±0,15	63%	9%	отриц. для нефропатии
274	2925	47,7±2,99	1367,6±0,14	97%	23%	отриц. для нефропатии
275	582	37,8±2,93	1378,6±0,16	87%	36%	отриц. для нефропатии
276	2946	47,5+2,59	1389,7±0,15	86%	18%	отриц. для нефропатии
277	2961	46,5±2,28	1407,8±0,20	79%	9%	отриц. для нефропатии
278	2768	44,6±4,84	1422,1±0,33	70%	0%	отриц. для нефропатии
279	598	45,4±3,62	1423,8±0,19	75%	0%	отриц. для нефропатии
280	2976	48,0±2,97	1424,7±0,16	95%	18%	отриц. для нефропатии
281	638	47,6±3,40	1446,7±0,16	92%	23%	отриц. для нефропатии
282	2998	46,5±2,95	1450,4±0,25	62%	9%	отриц. для нефропатии
283	3008	48,0±2,95	1462,6±0,17	97%	9%	отриц. для нефропатии
284	665	35,7±1,90	1487,7±0,15	70%	18%	отриц. для нефропатии
285	3031	47,8±2,35	1490,6±0,12	72%	9%	отриц. для нефропатии
286	3032	49,2±2,77	1491,7±0,12	81%	14%	отриц. для нефропатии
287	3043	49,0±3,14	1507,8±0,17	99%	32%	отриц. для нефропатии
288	3055	49,2+2,86	1523,7±0,11	97%	18%	отриц. для нефропатии
289	3059	48,6±2,70	1529,7±0,19	83%	9%	отриц. для нефропатии
290	3065	49,2±3,26	1539,7±0,19	98%	23%	отриц. для нефропатии
291	3070	49,0±3,19	1545,7±0,13	99%	23%	отриц. для нефропатии
292	3081	49,8±2,76	1561,6±0,19	90%	18%	отриц. для нефропатии
293	3085	48,4±3,12	1567,7±0,20	65%	9%	отриц. для нефропатии
294	3089	48,1±2,66	1573,7±0,27	63%	5%	отриц. для нефропатии
295	3092	48,5±4,03	1577,8±0,35	94%	9%	отриц. для нефропатии
296	2900	50,6±3,40	1587,1±0,34	65%	0%	отриц. для нефропатии
297	735	48,6±2,68	1589,7±0,14	86%	18%	отриц. для нефропатии
298	736	45,9±3,83	1591,7±0,30	79%	18%	отриц. для нефропатии
299	3105	49,3±3,22	1594,8±0,14	88%	14%	отриц. для нефропатии
300	3111	48,8±2,78	1605,7±0,13	73%	18%	отриц. для нефропатии
301	750	48,5±2,81	1611,7±0,14	73%	5%	отриц. для нефропатии
302	3134	46,3±5,12	1636,4±0,39	79%	23%	отриц. для нефропатии
303	3145	49,5±3,37	1651,8±0,19	99%	23%	отриц. для нефропатии
304	780	45,2±5,96	1657,7±0,23	60%	5%	отриц. для нефропатии
305	790	49,5±3,33	1673,8±0,14	95%	23%	отриц. для нефропатии
306	2969	49,6+3,05	1689,8±0,18	86%	0%	отриц. для нефропатии
307	810	26,9±3,18	1706,8±0,30	78%	27%	отриц. для нефропатии
308	3203	49,4±2,84	1734,4±0,40	65%	5%	отриц. для нефропатии
309	4983	49,2±3,17	1739,7±0,22	59%	5%	отриц. для нефропатии
310	3212	45,1±4,21	1748,0±0,28	55%	5%	отриц. для нефропатии
311	5032	44,2±4,71	1813,6±0,38	58%	5%	отриц. для нефропатии
312	874	39,1±3,48	1817,0±0,29	85%	18%	отриц. для нефропатии
313	3272	51,7±3,48	1841,0±0,23	59%	9%	отриц. для нефропатии
314	3277	50,4±4,56	1848,2+0,43	58%	0%	отриц. для нефропатии
315	5059	51,5±2,94	1856,8±0,24	59%	5%	отриц. для нефропатии
316	3285	52,7±4,24	1863,8±0,31	88%	14%	отриц. для нефропатии
317	914	52,1±3,92	1885,8+0,20	70%	5%	отриц. для нефропатии
318	3108	47,7±4,69	1902,1±0,33	75%	0%	отриц. для нефропатии
319	3120	50,6±3,95	1924,0±0,48	68%	0%	отриц. для нефропатии
320	981	26,6±1,76	2048,5±0,44	86%	20%	отриц. для нефропатии
321	3415	25,8±1,39	2085,9±0,24	83%	32%	отриц. для нефропатии
322	3416	39,9±1,45	2087,8±0,34	72%	23%	отриц. для нефропатии
323	5214	52,8±4,09	2117,1±0,17	78%	9%	отриц. для нефропатии
324	1020	28,3±3,90	2129,7±0,42	63%	0%	отриц. для нефропатии
325	3456	40,4±1,53	2158,9±0,26	86%	32%	отриц. для нефропатии
326	3465	39,7±1,71	2174,9±0,36	97%	45%	отриц. для нефропатии
327	3491	32,6±1,79	2227,1±0,41	81%	23%	отриц. для нефропатии
328	1086	29,3±3,50	2249,0±0,41	92%	41%	отриц. для нефропатии
329	3506	40,6±1,25	2257,1±0,35	94%	45%	отриц. для нефропатии
330	1097	46,2±5,11	2273,5±0,38	71%	18%	отриц. для нефропатии
331	1094	40,8±2,66	2296,0±0,40	63%	20%	отриц. для нефропатии
332	1121	40,9±3,32	2327,6±0,52	85%	36%	отриц. для нефропатии
333	3551	41,8±2,45	2343,3±0,43	77%	27%	отриц. для нефропатии
334	3574	40,8±1,31	2385,3±0,32	95%	45%	отриц. для нефропатии
335	1185	40,9±2,68	2471,5±0,52	69%	14%	отриц. для нефропатии
336	1193	41,5±2,64	2493,5±0,48	74%	18%	отриц. для нефропатии
337	5432	52,9±3,98	2570,4±0,27	71%	5%	отриц. для нефропатии
338	3697	34,1±0,72	2642,8±0,40	86%	36%	отриц. для нефропатии
339	1268	36,1±2,56	2687,1±0,49	84%	23%	отриц. для нефропатии
340	1276	42,8±2,33	2710,6±0,46	88%	18%	отриц. для нефропатии
341	5506	50,6±4,73	2748,6±0,36	64%	0%	отриц. для нефропатии
342	1371	37,8+1,92	2986,6±0,55	74%	23%	отриц. для нефропатии
343	1379	23,3±2,07	3007,4±0,50	65%	9%	отриц. для нефропатии
344	1385	25,9±2,35	3038,3±0,70	46%	0%	отриц. для нефропатии
345	3868	46,0±2,91	3045,4±0,36	59%	5%	отриц. для нефропатии
346	5624	53,3±4,05	3057,2±0,64	76%	9%	отриц. для нефропатии
347	1411	38,9±2,57	3109,0±0,57	88%	14%	отриц. для нефропатии
348	1435	41,9+3,55	3187,6±0,47	71%	14%	отриц. для нефропатии
349	1437	26,6±1,15	3193,6±0,41	61%	0%	отриц. для нефропатии
350	5681	48,3±3,69	3223,8±0,41	88%	18%	отриц. для нефропатии
351	1458	31,7+3,65	3265,1±0,64	93%	41%	отриц. для нефропатии
352	1465	29,5±1,76	3291,0±0,52	81%	23%	отриц. для нефропатии
353	1466	49,2±3,70	3293,1±0,43	91%	14%	отриц. для нефропатии
354	3968	49,9±3,57	3315,0±0,45	67%	5%	отриц. для нефропатии
355	3969	43,3±2,04	3319,9±0,66	86%	23%	отриц. для нефропатии
356	3976	49,1±3,35	3336,7±0,38	63%	9%	отриц. для нефропатии
357	1486	33,5±2,05	3359,9±0,42	98%	41%	отриц. для нефропатии
358	1491	38,5±1,92	3360,1±0,65	98%	20%	отриц. для нефропатии
359	1505	38,5+2,03	3417,1±0,48	95%	45%	отриц. для нефропатии
360	1510	38,5±1,09	3433,3±0,43	92%	41%	отриц. для нефропатии
361	1525	51,6±3,50	3478,9±0,48	74%	5%	отриц. для нефропатии
362	1558	31,7+2,29	3589,7±0,48	73%	18%	отриц. для нефропатии
363	1570	33,2±3,71	3633,4±0,95	80%	18%	отриц. для нефропатии
364	1571	36,0±3,18	3636,6±0,73	58%	0%	отриц. для нефропатии
365	1597	37,9±2,69	3719,5±0,61	67%	9%	отриц. для нефропатии
366	1603	42,0±3,21	3739,7±0,99	73%	14%	отриц. для нефропатии
367	1659	25,8±1,20	3947,3±0,67	92%	32%	отриц. для нефропатии
368	4169	39,4+1,13	4006,6±0,49	62%	5%	отриц. для нефропатии
369	1685	26,0±3,97	4044,9±0,56	78%	14%	отриц. для нефропатии
370	1693	30,5±2,17	4070,4±0,48	57%	5%	отриц. для нефропатии
371	1701	29,5±0,93	4098,6±0,52	86%	32%	отриц. для нефропатии
372	1702	34,3±2,08	4102,5±0,50	7%	14%	отриц. для нефропатии
373	1747	34,7±0,63	4290,7±0,52	76%	18%	отриц. для нефропатии
374	1771	23,5±1,61	4405,8±0,54	51%	0%	отриц. для нефропатии
375	1841	30,4±1,31	4801,5±1,06	65%	0%	отриц. для нефропатии
376	1856	32,4±1,31	4863,8+0,64	67%	5%	отриц. для нефропатии
377	1909	29,5±2,25	5214,0±1,29	51%	0%	отриц. для нефропатии
378	1994	33,0±0,99	6172,0±1,57	65%	0%	отриц. для нефропатии
379	2039	33,2±0,75	6187,8±0,75	95%	45%	отриц. для нефропатии
380	2292	23,8±1,86	9869,7±1,06	69%	14%	отриц. для нефропатии

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение относится к устройству и способу для количественной оценки полипептидов, содержащихся в пробе жидкости организма, и сравнения с контрольными значениями, сохраненными в базе данных, а также к маркеру для выявления патологических состояний.

Из DE 10021737 С2 известны способ и устройство для количественного и/или качественного определения образца белка и/или полипептида в пробе жидкости организма. Белки и/или полипептиды пробы жидкости организма разделяют при помощи капиллярного электрофореза, затем подвергают прямой ионизации и передают online через интерфейс в подсоединенный масс-спектрометр для выполнения детекции.

Для контроля состояния организма человека или животного в течение длительного промежутка времени в базе данных автоматически сохраняют описывающие состояния контрольные значения и значения, относящиеся к пробам, а также связанные с ними отличия и соответствия, и автоматически производят поиск наилучших соответствий с новым целевым образцом белка или полипептида.

Было обнаружено, что при помощи собранных до настоящего времени образцов полипептидов могут быть получены весьма достоверные показатели, характеризующие состояния организма человека или животного. Это может дополнить или заменить обычно используемые способы исследования и диагностики, применяемые в настоящее время. В частности, к настоящему времени для диабета и диабетической нефропатии было получено большое количество контрольных значений и значений, относящихся к пробам, для определения образцов полипептидов.

Часто диабет представляет собой начальный этап диабетической нефропатии, которая может проявиться через годы или десятилетия. К тому же при диабете нефропатия проходит несколько стадий. Доступные в настоящее время способы диагностики диабетической нефропатии на ранней стадии являются неудовлетворительными вследствие их дороговизны и поскольку установление диагноза возможно на относительно поздней стадии.

Современная диагностика и последовательная терапия явной нефропатии не могут предупредить обязательный диализ или отодвинуть срок его начала, а также не могут снизить риск сердечно-сосудистых осложнений у диабетических пациентов.

Показана возможность установления диагноза при помощи образца полипептидов из пробы жидкости, например мочи, полученной на ранней стадии заболевания. Дальнейшие исследования позволили установить, что при использовании образца полипептидов также возможно диагностирование дальнейшего развития заболеваний, таких как вышеупомянутый диабет и диабетическая нефропатия.

В основе настоящего изобретения лежит задача разработки устройства и способа для количественной оценки полипептидов, содержащихся в пробе жидкости организма, и сравнения с контрольными значениями, сохраненными в базе данных, для соответствующего определения полипептидов при помощи компьютерной регистрации и обработки.

Эта задача решается при помощи устройства для количественной оценки полипептидов, содержащихся в пробе жидкости организма, и сравнения с контрольными значениями, сохраненными в базе данных, отличающегося тем, что контрольные значения хранятся в виде записей данных для полипептидов, релевантных состоянию, причем каждая из которых содержит по меньшей мере информацию о вероятности появления и/или концентрации полипептидов для патологического состояния в пробах здоровых и больных испытуемых, и при помощи способа количественной оценки полипептидов, содержащихся в пробе жидкости организма, и сравнения с контрольными значениями, сохраненными в базе данных, отличающегося тем, что для сравнения используются контрольные значения в виде записей данных для полипептидов, релевантных состоянию, причем информацию о вероятности появления и/или концентрации полипептидов в пробе жидкости организма можно сравнить с информацией для каждого по меньшей мере одного контрольного значения, относящегося к вероятности появления и/или концентрации полипептидов для патологического состояния в пробах здоровых и больных испытуемых.

Помимо этого, в основе настоящего изобретение также лежит задача получения маркера для выявления патологических состояний путем подходящего определения содержащихся в пробе полипептидов при помощи компьютерной регистрации и обработки.

Эта задача решается при помощи маркера для выявления патологических состояний, характеризующегося множеством полипептидов, релевантных состоянию, каждый из которых связан с информацией о вероятности появления и/или концентрации полипептида для патологического состояния в пробах здоровых или больных испытуемых.

Улучшенные и полезные варианты осуществления описаны в соответствующих зависимых пунктах формулы изобретения.

В настоящем изобретении оцениваются данные, относящиеся к полипептидам, концентрация которых в жидкости организма в патологическом состоянии явно меняется по сравнению с нормальным состоянием. Эти полипептиды могут быть определены при помощи предварительного исследования большого количества испытуемых.

Каждый полипептид связан с информацией, включающей в себя информацию о вероятности его появления или концентрации у здоровых и у больных испытуемых для патологического состояния.

При сравнении полипептидов из проб жидкости с контрольными значениями получают связи для каждого сравниваемого полипептида из пробы жидкости, благодаря тому, что появление и/или концентрация является репрезентативной для здорового или больного состояния. Путем сравнения множества полипептидов и концентраций можно сократить или исключить систематические ошибки в окончательном результате по каждому отдельному отличию от стандартной вероятности появления и концентрации.

Дополнительное улучшение позволяет определять полипептиды при помощи информации о соответствующих им массах и соответствующих им временах задержек в капиллярном электрофорезе.

При этом непосредственно используют данные капиллярного электрофореза и масс-спектрометрии. Эта информация отличается, но однозначна для всех полипептидов, так что эта информация является достаточной для определения. Время задержки в капиллярном электрофорезе может быть установлено, например, при помощи капиллярного электрофореза с использованием стеклянного капилляра длиной 90 см, внутренним диаметром (ID) 75 мкм и внешним диаметром (OD) 360 мкм при напряжении 30 кВ, причем в качестве растворителя для пробы используется водный раствор, содержащий 30% метанола и 0,5% муравьиной кислоты.

Для диагноза диабет и поражение почек в базе данных объединяли определенные записи данных для полипептидов, релевантных состоянию, которые выявляли и верифицировали на основании проб мочи для множества пациентов. При этом можно сравнивать отдельные полипептиды, либо комбинацию полипептидов или все полипептиды.

Поскольку представление большого количества полипептидов для здоровых и патологических состояний является избыточным, в простом случае может оказаться достаточным сравнение только некоторых из этих полипептидов. Тем не менее, ошибка, связанная со статистической погрешностью или индивидуальными отличиями, может быть исключена при сравнении комбинации полипептидов, релевантных состоянию. Оптимальный результат достигается при сравнении всех допустимых полипептидов.

Такие служащие в качестве маркеров полипептиды также могут представлять собой терапевтические мишени. Следовательно, возможно развитие способов терапии, в которых указанные полипептиды могут использоваться либо в качестве основной, либо в качестве целевой структуры. При этом наличие и/или концентрация каждого полипептида в организме изменяется путем добавления и/или при помощи антител таким образом, что его концентрация в исследуемой жидкости организма считается нормальной.

Далее изобретение описывается со ссылками на чертежи, на которых:

на фиг.1 (a-e) схематически показаны отдельные этапы сбора данных путем определения образцов полипептидов,

на фиг.2 (a-f) схематически показаны образцы полипептидов и их взаимосвязь.

В варианте осуществления настоящего изобретения анализируют наличие, а также концентрацию большого количества полипептидов в моче. В настоящее время это выполняют при помощи капиллярного электрофореза в сочетании с масс-спектрометром (СЕ-MS), но для этой цели можно использовать и другие способы.

Результаты исследований с помощью CE-MS, условно показанные в виде графика на фиг.1а, приведены в трехмерном виде через представление времени задержки по оси х, массы по оси у и амплитуды сигнала по оси z для образца обычных полипептидов с массой 500-1500. Фиг.1b представляет собой изображение исходных данных , из них получены отфильтрованные релевантные сигналы, показанные на фиг.1с как распознанные сигналы , при помощи обработки с применением программных средств для фильтрации и анализа, и затем вычислен образец полипептида, показанный на фиг.1d как паттерн полипептида . При этом полипептиды аннотировали/идентифицировали при помощи определения их масс и времен задержек в СЕ. Концентрацию вычисляли по амплитуде сигналов.

Полученные данные для указанного образца полипептида сохраняли в базе данных. При этом для каждого релевантного полипептида сохраняли необходимую информацию для однозначной идентификации. На фиг.1е показано отображение информации на экране дисплея для некоторых записей данных в алфавитно-цифровом виде.

Для выявления значимых полипептидов при помощи СЕ-MS исследовали мочу пациентов с диагностированной диабетической нефропатией и без нее или с диагностированным диабетом и без него.

При сопоставлении базы данных из 50 результатов исследований можно получить типичный образец полипептидов для испытуемого со здоровыми почками. С использованием такой же методики исследовали пробы мочи 200 пациентов с диабетом типа I и типа II. Используя этих пациентов, установили группы испытуемых с различными стадиями заболевания почек, с количеством белка в моче от совершенно незаметного до 3 г белка в сутки.

В результате анализа данных пациентов разбивали на четыре группы, как представлено в нижеследующей таблице.

Группа	Количество испытуемых	Тип	Классификация по диабету	Классификация по нефропатии
К0	60	Здоровые испытуемые, диабет не диагностируется, отсутствует протеинурия	здоровый	здоровый
Р0	120	Установлен диагноз диабет, протеинурия отсутствует	больной
Р1	61	Установлен диагноз диабет, повышенное содержание белка в моче	больной
Р2	23	Установлен диагноз диабет, сильно увеличено содержание белка в моче (симптом нефропатии)

Из обобщенного образца(ов) полипептидов исследованной группы выделили группоспецифичный образец полипептидов. Полученный таким образом образец полипептидов обнаруживает типичные отличия по сравнению с нормальным образцом, т.е. изменения в отдельных полипептидах. На фиг.2 показано графическое представление группоспецифичного образца полипептидов согласно таблице.

Образец полипептидов для каждой из групп К0, Р0, Р1, Р2 показан на фиг.2а, 2b, 2с, 2d. Из образцов полипептидов указанных групп К0, Р0, Р1, Р2 составлена общая картина и использована в качестве профиля маркера для разработки образца полипептидов, представленного на фиг.2е.

Для поиска релевантного маркера были использованы только такие полипептиды, которые были обнаружены в релевантном количестве, в данном случае больше 40% по меньшей мере в одной группе. Затем эти полипептиды проанализировали на возможность их использования для распознавания классов здоровый и больной . При этом учитывали согласующееся разбиение по группам.

Частично изменения в образце полипептидов обусловлены заболеванием диабетом и, следовательно, соразмерно обнаруживаются у всех больных диабетом, а также частично обусловлены развивающейся/прогрессирующей нефропатией. Таким образом, эти полипептиды можно использовать в качестве маркеров для установления диагноза диабет или диабетическая нефропатия .

Затем исследуемые пробы пациентов оценивают на наличие указанных полипептидов, после чего для установления диагноза используют указанное наличие либо отсутствие, как показано на фиг.2f.

В приведенной ниже таблице сведены полипептиды-маркеры, являющиеся особо релевантными при выявлении диабетической нефропатии. Вышеуказанные полипептиды служат для выявления больного на ранней стадии и при этом они могут быть использованы по отдельности, в виде сокращенного набора, или в виде полного набора.

Список содержит 380 полипептидов, определенных через их массы и времена задержки в капиллярном электрофорезе. Номера 1-157 относятся к пептидам-маркерам, используемым при установлении диагноза диабет . Номера 158-380 охватывают пептиды-маркеры, которые используют при установлении диагноза поражение почек . Внутри обеих групп полипептиды сначала сортируют, интерпретируя их как положительные , если в случаях заболевания вероятность появления таких полипептидов увеличивается, или как отрицательные . Затем полипептиды сортируют по порядку увеличения их масс.

В приведенной ниже таблице столбцы имеют следующие значения:

- №	Порядковый номер
- ИД	Внутренний идентификационный номер
- время	СЕ-время в минутах и стандартное отклонение
- масса	Масса полипептида в дальтонах и стандартное отклонение
- % здоровых	Процент появления в классе здоровый
- % больных	Процент появления в классе больной
- тип	Характеристика маркера в патологическом состоянии: Положительная: маркер появляется в состоянии больной с большей вероятностью, чем в состоянии здоровый Отрицательная: маркер появляется в состоянии больной с меньшей вероятностью, чем в состоянии здоровый

В предпочтительном варианте настоящего изобретения устройство согласно настоящему изобретению или способ согласно настоящему изобретению дополнительно отличаются тем, что полипептиды определяют путем определения соответствующих им масс и соответствующих им времен задержек в капиллярном электрофорезе, например, при помощи капиллярного электрофореза в сочетании с масс-спектрометром. В другом предпочтительном варианте осуществления база данных для диагноза диабет содержит по меньшей мере одну запись, подгруппу записей или все записи данных 1-157 для полипептидов из вышеуказанной таблицы. В другом предпочтительном варианте осуществления база данных для диагноза поражение почек содержит по меньшей мере одну запись, подгруппу записей или все записи данных 158-380 для полипептидов из вышеуказанной таблицы.

В предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения маркер согласно настоящему изобретению дополнительно отличается тем, что полипептиды определяют путем определения соответствующих им масс и соответствующих им времен задержек в капиллярном электрофорезе, например, при помощи капиллярного электрофореза в сочетании с масс-спектрометром. В частности, маркер отличается тем, что для диагноза диабет содержит по меньшей мере один полипептид, одну из комбинаций полипептидов или все полипептиды 1-157 из вышеуказанной таблицы, или для диагноза поражение почек содержит по меньшей мере один полипептид, одну из комбинаций полипептидов или все полипептиды 158-380 из вышеуказанной таблицы.

В особо предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения для устройства, способа или маркера можно использовать особо предпочтительные комбинации полипептидов.

В качестве "положительных" полипептидов для диабета предпочтительными являются полипептиды № 32(А), 1(В), 48(С), 2(D), 44(Е), 22(F), 9(G), 23(Н) и 20(I) и их комбинации, в частности, как показано ниже.

В качестве "отрицательных" полипептидов для диабета предпочтительными являются полипептиды № 123(А), 153(В), 155(С), 105(D), 150(Е), 121(F), 157(G), 92(Н) и 69(I) и их комбинации, в частности, как показано ниже.

В качестве "положительных" полипептидов для нефропатии предпочтительными являются полипептиды № 225(А), 208(В), 164(С), 166(D), 171(Е), 204(F), 206(G), 182(Н) и 210(I) и их комбинации, в частности, как показано ниже.

В качестве "отрицательных" полипептидов для нефропатии предпочтительными являются полипептиды № 262(А), 260(В), 306(С), 358(D), 279(Е), 318(F), 305(G), 261(Н) и 278(I) и их комбинации, в частности, как показано ниже.

В одном из предпочтительных вариантов осуществления настоящего изобретения используются любые два из вышеуказанных предпочтительных полипептидов А, В, С, D, Е, F, G, Н и I в качестве "отрицательных" для диабета, "положительных" для диабета, "отрицательных" для нефропатии или "положительных" для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А и В, А и С, А и D, А и Е, А и F, A и G, A и Н, А и I,

- В и С, В и D, В и Е, В и F, В и G, В и Н, В и I,

- С и D, С и Е, С и F, С и G, С и Н, С и I,

- D и Е, D и F, D и G, D и Н, D и I,

- Е и F, E и G, E и Н, E и I,

- F и G, F и Н, F и I,

- G и Н, G и I,

- Н и I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются три из вышеуказанных предпочтительных полипептидов A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А и B в комбинации с одним из полипептидов C, D, E, F, G, H или I,

- А и С в комбинации с одним из полипептидов D, E, F, G, H или I,

- А и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- А и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А и H в комбинации с полипептидом I,

- B и С в комбинации с одним из полипептидов D, E, F, G, H или I,

- B и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- B и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- B и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- B и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- B и H в комбинации с I,

- C и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- C и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- C и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- C и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C и H в комбинации с I,

- D и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- D и H в комбинации с I,

- E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- E и H в комбинации с I,

- F и G в комбинации с H или I,

- F и H в комбинации с I, или

- G и H в комбинации с I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются четыре из вышеназванных предпочтительных полипептидов A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А, В и С в комбинации с одним из полипептидов D, E, F, G, H или I,

- А, В и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- А, B и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, B и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, B и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, B и H в комбинации с I,

- А, C и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- А, C и Е в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, C и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, C и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, C и H в комбинации с I,

- А, D и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, D и H в комбинации с I,

- А, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, E и H в комбинации с I,

- А, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, F и H в комбинации с I,

- А, G и H в комбинации с I,

- В, C и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- В, C и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- В, C и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, C и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C и H в комбинации с I,

- В, D и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- В, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, D и H в комбинации с I,

- В, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, E и H в комбинации с I,

- В, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, F и H в комбинации с I,

- В, G и H в комбинации с I,

- C, D и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- C, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- C, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, D и H в комбинации с I,

- C, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- C, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, E и H в комбинации с I,

- C, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, F и H в комбинации с I,

- C, G и H в комбинации с I,

- D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- D, E и H в комбинации с I,

- D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- D, F и H в комбинации с I,

- D, G и H в комбинации с I,

- E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- E, F и H в комбинации с I,

- E, G и H в комбинации с I, или

- F, G и H в комбинации с I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются пять из вышеназванных предпочтительных полипептидов A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А, В, С и D в комбинации с одним из полипептидов E, F, G, H или I,

- А, В, С и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, В, С и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, С и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D и Е в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, В, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, D и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, Е и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, Е и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, Е и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D и Е в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, С, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, С, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, D и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, Е и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, С, Е и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, Е и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, Е и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, D, Е и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, D, Е и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, D, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- В, C, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, C, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, D и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, C, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, E и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, D, E и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, D, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- C, D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- C, D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, D, E и H в комбинации с полипептидом I,

- C, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, D, F и H в комбинации с полипептидом I,

- C, D, G и H в комбинации с полипептидом I,

- C, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- C, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- C, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- D, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- D, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- D, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I, или

- E, F, G и H в комбинации с полипептидом I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются шесть из вышеназванных предпочтительных полипептидов A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А, В, С, D и E в комбинации с одним из полипептидов F, G, H или I,

- А, В, С, D и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, С, D и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С, D и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, С, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С, E и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, D, E и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, D, F и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D, G и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, Е, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, Е, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, Е, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, С, D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, D, E и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, D, F и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D, G и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, Е, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, Е, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, Е, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, Е, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, D, Е, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- В, C, D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, D, E и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, D, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, D, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- C, D, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- C, D, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- C, D, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- C, D, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- C, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I, или

- D, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются семь из вышеназванных предпочтительных полипептидов A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А, В, С, D, E и F в комбинации с одним из полипептидов G, H или I,

- А, В, С, D, E и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С, D, E и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, D, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С, D, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, D, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, С, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, С, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, В, D, E, F и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D, E, G и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, D, F, G и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, В, Е, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- А, С, D, E, F и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D, E, G и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, D, F, G и Н в комбинации с полипептидом I,

- А, С, Е, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- А, D, Е, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D, E, F и G в комбинации с одним из полипептидов H или I,

- В, C, D, E, F и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D, E, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, D, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, C, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I,

- В, D, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I, или

- C, D, E, F, G и H в комбинации с полипептидом I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются восемь из вышеназванных предпочтительных полипептидов A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанные комбинации полипептидов представляют собой:

- А, В, С, D, E, F, G и H,

- А, В, С, D, E, F, G и I,

- А, В, С, D, E, F, H и I,

- А, В, С, D, E, G, H и I,

- А, В, С, D, F, G, H и I

- А, В, С, E, F, G, H и I,

- А, В, D, E, F, G, H и I,

- А, С, D, E, F, G, H и I или

- В, C, D, E, F, G, H и I.

В другом предпочтительном варианте осуществления настоящего изобретения используются все девять вышеназванных предпочтительных полипептида A, B, C, D, E, F, G, H и I в качестве отрицательных для диабета, положительных для диабета, отрицательных для нефропатии или положительных для нефропатии. В частности, указанная комбинация полипептидов представляет собой:

- А, В, С, D, E, F, G, H и I.