способ активации роста клеток в питательной среде

Формула изобретения

Способ активации роста клеток в питательной среде, включающий обработку культуры клеток акустическим звуком интенсивностью 20-60 дБ в течение 10 мин с частотой активации 50 Гц для клеток печени человека и 2000 Гц для клеток почек свиньи.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области биологии, ее разделу цитологии.

Известны химические способы биохимической активации клеточных линий, как правило импортные и дорогостоящие [1].

Известны способы физического повышения ростовой активности клеточных линий путем их электромагнитной обработки [2]. К недостаткам способов относится их сложность, заключающаяся в необходимости использования специальной аппаратуры.

Целью предлагаемого изобретения является упрощение способа активации роста клеточных линий.

Указанная цель достигается способом активации роста клеточных линий животных и человека, заключающимся в их обработке в питательной среде акустическим звуком интенсивностью 20 - 60 дБ с определенной частотой в течение 2-10 мин. В качестве частоты активации предлагается 50 Гц для клеток печени человека и 2000 Гц для клеток почек свиньи.

Предлагаемый способ отличается простотой и эффективностью при низкой себестоимости.

Способ иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1

Стерильную суспензию клеток печени человека (КПЧ - Chang Liver) в питательной среде Игла озвучивают (динамик, присоединенный к ГНЧ-1) с частотой 50 Гц и интенсивностью 20-40 дБ в течение 10 мин. После этого ее помещают в термостат при 37°С на 3 суток. В процессе роста (на 2-3 сутки) микроскопическим методом в камере Горяева (после окрашивания 0,4% раствором трипанового синего) оценивают жизнеспособность и определяют индекс пролиферации клеток. Данные по отношению к контролю (без озвучивания) см. в таблице.

Пример 2

Способ по примеру 1. Стерильную суспензию клеток почек эмбриона свиньи (СПЭВ) в питательной среде ДМЕМ озвучивают с частотой 2000 Гц и интенсивностью 40-60 дБ в течение 10 мин. Через 3 дня, т.е. после образования монослоя, определяют индекс пролиферации и жизнеспособность (по примеру 1). Данные см. в таблице.

В таблице приведены данные индекса пролиферации (ИП) и жизнеспособности клеток (Ж) по отношению к контролю (клетки без озвучивания).

Индекс пролиферации и жизнеспособность клеточных линий КПЧ и СПЭВ
Пример	ИП	ИП, % к контролю	Ж, %	Ж, % к контролю
1	1,25	121	94	104,5
2	1,66	166	88	101,5

Из таблицы следует, что предлагаемый способ при очевидной простоте, низкой стоимости и возможности одновременной обработки нескольких образцов, в частности нескольких клеточных линий, отличается достаточно высокой эффективностью в плане заметного ускорения роста клеток, увеличения их жизнеспособности.

Литература

1. Дьяконов Л.П., Ситькова В.И. Животная клетка в культуре. М. 2000. с.59.

2. Подчерняева Р.Я., Мезенцева М.В. Нетрадиционные подходы к изучению экспериментальной гриппозной инфекции. В кН. Биомедицина XXI века. Достижения и перспективы направления развития. М.: РАЕН. 2008. с.308.