антитела, сконструированные на основе цистеинов, и их конъюгаты

Формула изобретения

1. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами, предназначенное для конъюгирования с химиотерапевтическими лекарственными средствами, токсинами, аффинными лигандами и детектируемыми метками,

содержащее один или несколько свободных цистеиновых остатков с величиной тиоловой реактивности в пределах от 0,6 до 1,0 и последовательность в тяжелой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 11, 12, 13 и 15:

LVTVCSASTKGPS	(SEQ ID NO: 11)
LVTVSCASTKGPS	(SEQ ID NO: 12)
LVTVSSCSTKGPS	(SEQ ID NO: 13)
HTFPCVLQSSGLYS	(SEQ ID NO: 15)

или последовательность в легкой цепи, выбранную из SEQ ID NO: 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 45 и 46;

SLASASCGDRVT	(EQ ID NO: 17)
QKPGKCPKLLI	(SEQ ID NO: 18)
EIKRTCAAPSV	(SEQ ID NO: 19)
TCAAPCVFIFPP	(SEQ ID NO: 20)
FIFPPCDEQLK	(SEQ ID NO: 21)
DEQLKCGTASV	(SEQ ID NO: 22)
FYPRECKVQWK	(SEQ ID NO: 23)

WKVDNCLQSGN	(SEQ ID NO: 24)
ALQSGCSQESV	(SEQ ID NO: 25)
VTEQDCKDSTY	(SEQ ID NO: 26)
GLSSPCTKSFN	(SEQ ID NO: 27)
FLSVSCGGRVT	(SEQ ID NO: 45)
QKPGNCPRLLI	(SEQ ID NO: 46)

где указанное сконструированное антитело с цистеиновыми заменами получают способом, включающим замену одного или нескольких аминокислотных остатков родительского антитела свободным цистеиновым остатком, где родительское антитело селективно связывается с антигеном, а сконструированное антитело с цистеиновыми заменами селективно связывается с тем же антигеном, что и родительское антитело.

2. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, полученное способом, включающим:

(i) мутагенез последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующей сконструированное антитело с цистеиновыми заменами;

(ii) экспрессию сконструированного антитела с цистеиновыми заменами и

(iii) выделение и очистку сконструированного антитела с цистеиновыми заменами.

3. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.2, полученное способом, дополнительно включающим:

(i) взаимодействие сконструированного антитела с цистеиновыми заменами с реагентом, обладающим аффинностью по отношению к реакционноспособному тиолу, с получением аффинно-меченного сконструированного антитела с цистеиновыми заменами; и

(ii) определение уровня связывания указанного аффинно-меченного сконструированного антитела с цистеиновыми заменами со средой для захвата.

4. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.3, где указанный реагент, обладающий аффинностью в отношении реакционноспособного тиола, содержит биотиновую молекулу и малеимидную молекулу.

5. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.3, где указанная среда для захвата содержит стрептавидин.

6. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, где родительским антителом является слитый белок, содержащий альбумин-связывающий пептид (АВР), выбранный из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5.

7. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, где родительское антитело выбрано из моноклонального антитела, биспецифического антитела, химерного антитела, антитела человека, гуманизированного антитела и фрагмента антитела.

8. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.7, где родительское антитело выбрано из huMAb4D5-8 (трастузумаб), анти-EphB2R антитела и анти-MUC16 антитела.

9. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, содержащее аминокислотную последовательность, выбранную из SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7, SEQ ID NO: 8, SEQ ID NO: 28 и SEQ ID NO: 39.

10. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, где родительским антителом является интактное антитело, выбранное из IgA, IgD, IgE, IgG и IgM.

11. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.10, где IgG выбран из подклассов IgG1, IgG2, IgG3, и IgG4.

12. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами или родительское антитело связывается с одним или несколькими рецепторами (1)-(36), а именно:

(1) BMPR1B (рецептор белка морфогенеза кости типа IB);

(2) E16 (LAT1, SLC7A5);

(3) STEAP1 (шестидоменный трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы);

(4) 0772P (CA125, MUC16);

(5) MPF (MPF, MSLN, SMR, мегакариоцитарный потенцирующий фактор, мезотелин);

(6) Napi3b (NAPI-3B, NPTIIb, SLC34A2, член 2 семейства растворимых носителей 34 (фосфат натрия), натрий-зависимый фосфат-переносящий белок 3b типа II);

(7) Sema 5b (FLJ10372, KIAA1445, Mm.42015, SEMA5B, SEMAG, семафорин 5b Hlog, сема-домен, семидоменные повторы тромбоспондина (типа 1 и подобный типу 1), трансмембранный домен (ТМ) и короткий цитоплазматический домен (семафорин) 5B);

(8) PSCA hlg (2700050C12Rik, C530008O16Rik, кДНК RIKEN 2700050C12, кДНК гена RIKEN 2700050С12);

(9) ETBR (рецептор эндотелина типа В);

(10) MSG783 (RNF124, гипотетический белок FLJ20315);

(11) STEAP2 (HGNC_8639, IPCA-1, PCANAP1, STAMP1, STEAP2, STMP, ген 1, ассоциированный с раком предстательной железы, белок 1, ассоциированный с раком предстательной железы, шестидоменный трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы 2, шестидоменный трансмембранный белок предстательной железы);

(12) TrpM4 (BR22450, FLJ20041, TRPM4, TRPM4B, рецептор, быстрый потенциал-зависимый катионный канал, член 4 подсемейства М);

(13) CRIPTO (CR, CR1, CRGF, CRIPTO, TDGF1, фактор роста, происходящий от тератокарциномы);

(14) CD21 (CR2 (рецептор комплемента 2) или C3DR (C3d/рецептор вируса Эпштейна-Барра) или Hs.73792);

(15) CD79b (CD79B, CD79p, IGb (бета-белок, связанный с иммуноглобулином), В29);

(16) FcRH2 (IFGP4, IRTA4, SPAP1A (фосфатазный якорный белок 1a, содержащий домен SH2), SPAP1B, SPAP1C);

(17) HER2;

(18) NCA;

(19) MDP;

(20) IL20R ;

(21) Brevican;

(22) EphB2R;

(23) ASLG659;

(24) PSCA;

(25) GEDA;

(26) BAFF-R (рецептор фактора активации В-клеток, рецептор 3 BlyS, BR3);

(27) CD22 (СВ22-В-изоформа В-клеточного рецептора);

(28) CD79a (CD79A, CD79 , связанный с иммуноглобулином альфа-белок, В-клетко-специфический белок, который ковалентно взаимодействует с Ig бета (CD79B) и образует комплекс с молекулами IgM на поверхности клеток, передает сигнал, участвующий в дифференцировке В-клеток);

(29) CXCR5 (рецептор 1 лимфомы Беркитта, связанный с G-белком рецептор, который активируется хемокином CXCL13, обеспечивает миграцию лимфоцитов и гуморальную защиту, а также играет определенную роль в инфицировании вирусом ВИЧ-2, и, вероятно, в развитии СПИДа, лимфомы, миеломы и лейкоза);

(30) HLA-DOB (бета-субъединица молекулы МНС класса II (антиген 1а), которая связывается с пептидами и презентирует их CD4⁺-T-лимфоцитам);

(31) Р2Х5 (ионный канал, открываемый лигандом пуринергического рецептора Р2Х5; ионный канал, открываемый внеклеточным АТР, может участвовать в синаптической передаче и в нейрогенезе, а его дефицит может играть определенную роль в патофизиологии идиопатической дисфункции мочевого пузыря);

(32) CD72 (антиген CD72 линии В-клеточной дифференцировки, Lyb-2);

(33) LY64 (лимфоцитарный антиген 64 (RP105), мембранный белок семейства богатых лейцином повторов (LRR) типа I, который регулирует активацию и апоптоз В-клеток, и потеря его функции ассоциируется с прогрессированием заболевания у пациентов с системной красной волчанкой);

(34) FcRH1 (Fc-рецептор-подобный белок 1, предполагаемый рецептор для Fc-домена иммуноглобулина, который содержит Ig-подобные домены типа С2 и домены ITAM, может играть определенную роль в дифференцировке В-лимфоцитов);

(35) IRTA2 (ассоциированный с транслокацией рецептор суперсемейства иммуноглобулина 2, предполагаемый иммунорецептор, который, возможно, играет определенную роль в развитии В-клеток и лимфомагенезе; в некоторых злокачественных В-клетках наблюдается нарушение регуляции гена посредством транслокации); и

(36) TENB2 (предполагаемый трансмембранный протеогликан, родственный семейству факторов роста EGF/герегулинов и фоллистатину).

13. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.1, где антитело ковалентно связано с меткой для захвата, с детектируемой меткой или с твердой подложкой.

14. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.13, где указанное антитело ковалентно связано с детектируемой меткой, являющейся флуоресцентным красителем, выбранным из красителей типа флуоресцеина и родамина; данзила; лиссамина; цианина; фикоэритрина; техасского красного и их аналогов.

15. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.13, где указанное антитело ковалентно связано с радионуклидной детектируемой меткой, выбранной из ³ H, ¹¹С, ¹⁴С, ¹⁸F, ³² P, ³⁵S, ⁶⁴Cu, ⁶⁸Ga, ⁸⁶ Y, ⁹⁹Tc, ¹¹¹In, ¹²³I, ¹²⁴ I, ¹²⁵I, ¹³¹I, ¹³³Xe, ¹⁷⁷ Lu, ²¹¹At и ²¹³Bi.

16. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами по п.13, где указанное антитело ковалентно связано с детектируемой меткой посредством хелатообразующего лиганда, выбранного из DOTA, DOTP, DOTMA, DTPA и ТЕТА.

17. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами, предназначенное для конъюгирования с химиотерапевтическими лекарственными средствами, токсинами, аффинными лигандами и детектируемыми метками,

содержащее сводный цистеиновый остаток с величиной тиоловой реактивности в пределах от 0,6 до 1,0, и указанный свободный цистеиновый остаток расположен в тяжелой цепи в положении, выбранном из 112, 113, 114, и 168, в соответствии с нумерацией по Кабату;

где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами получают способом, включающим замену одного или нескольких аминокислотных остатков родительского антитела свободным цистеиновым остатком, где родительское антитело селективно связывается с антигеном, а сконструированное антитело с цистеиновыми заменами селективно связывается с тем же антигеном, что и родительское антитело.

18. Сконструированное антитело с цистеиновыми заменами, предназначенное для конъюгирования с химиотерапевтическими лекарственными средствами, токсинами, аффинными лигандами и детектируемыми метками,

содержащее свободный цистеиновый остаток с величиной тиоловой реактивности в пределах от 0,6 до 1,0; и одну или несколько последовательностей в тяжелой цепи, выбранных из SEQ ID NO: 11, 12, 13 и 15:

LVTVCSASTKGPS	SEQ ID NO: 11
LVTVSCASTKGPS	SEQ ID NO: 12
LVTVSSCSTKGPS	SEQ ID NO: 13
HTFPCVLQSSGLYS	SEQ ID NO: 15

где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами получают способом, включающим замену одного или нескольких аминокислотных остатков родительского антитела свободным цистеиновым остатком, где родительское антитело селективно связывается с антигеном, а сконструированное антитело с цистеиновыми заменами селективно связывается с тем же антигеном, что и родительское антитело.

19. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство", содержащее сконструированное антитело с цистеиновыми заменами (Ab) по любому из пп.1-18, содержащее свободный цистеиновый остаток с величиной тиоловой реактивности в пределах от 0,6 до 1,0; и лекарственное средство (D), выбранное из майтанзиноида, ауристатина, доластатина, калихеамицина, где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами присоединено к молекуле D через один или несколько свободных цистеиновых остатков посредством линкерной группы (L); причем соединение имеет формулу I:



где p равно 1, 2, 3 или 4; и где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами получают способом, включающим замену одного или нескольких аминокислотных остатков родительского антитела одним или несколькими свободными цистеиновыми остатками, где родительское антитело селективно связывается с антигеном, а сконструированное антитело с цистеиновыми заменами селективно связывается с тем же антигеном, что и родительское антитело.

20. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где свободный цистеиновый остаток расположен в тяжелой цепи в положении, выбранном из 112, 113, 114, и 168, в соответствии с нумерацией по Кабату.

21. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, содержащее одну или несколько последовательностей в тяжелой цепи, выбранных из SEQ ID NO: 11, 12, 13 и 15:

LVTVCSASTKGPS	SEQ ID NO: 11
LVTVSCASTKGPS	SEQ ID NO: 12
LVTVSSCSTKGPS	SEQ ID NO: 13
HTFPCVLQSSGLYS	SEQ ID NO: 15.

22. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами получают способом, включающим:

(a) замену одного или нескольких аминокислотных остатков родительского антитела цистеином и

(b) определение реакционной способности тиоловой группы сконструированного антитела с цистеиновыми заменами путем проведения взаимодействия сконструированного антитела с цистеиновыми заменами с реагентом, взаимодействующим с тиолом;

где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами более активно реагирует с реагентом, взаимодействующим с тиолом, по сравнению с родительским антителом.

23. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, которое дополнительно содержит последовательность альбумин-связывающего пептида (АВР), выбранную из SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 и SEQ ID NO: 5.

24. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами связывается с рецептором ErbB, выбранным из EGFR, HER2, HER3 и HER4.

25. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где сконструированное антитело с цистеиновыми заменами связывается с одним или несколькими рецепторами (1)-(36), такими как:

(1) BMPR1B (рецептор белка морфогенеза кости типа IB);

(2) E16 (LAT1, SLC7A5);

(3) STEAP1 (шестидоменный трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы);

(4) 0772P (CA125, MUC16);

(5) MPF (MPF, MSLN, SMR, мегакариоцитарный потенцирующий фактор, мезотелин);

(6) Napi3b (NAPI-3B, NPTIIb, SLC34A2, член 2 семейства растворимых носителей 34 (фосфат натрия), натрий-зависимый фосфат-переносящий белок 3b типа II);

(7) Sema 5b (FLJ10372, KIAA1445, Mm.42015, SEMA5B, SEMAG, семафорин 5b Hlog, сема-домен, семидоменные повторы тромбоспондина (типа 1 и подобный типу 1), трансмембранный домен (ТМ) и короткий цитоплазматический домен (семафорин) 5B);

(8) PSCA hlg (2700050C12Rik, C53 0008016Rik, кДНК RIKEN 2700050С12, кДНК гена RIKEN 2700050C12);

(9) ETBR (рецептор эндотелина типа В);

(10) MSG783 (RNF124, гипотетический белок FLJ20315);

(11) STEAP2 (HGNC_8639, IPCA-1, PCANAP1, STAMP1, STEAP2, STMP, ген 1, ассоциированный с раком предстательной железы, белок 1, ассоциированный с раком предстательной железы, шестидоменный трансмембранный эпителиальный антиген предстательной железы 2, шестидоменный трансмембранный белок предстательной железы);

(12) TrpM4 (BR22450, FLJ20041, TRPM4, TRPM4B, рецептор, быстрый потенциал-зависимый катионный канал, член 4 подсемейства М);

(13) CRIPTO (CR, CR1, CRGF, CRIPTO, TDGF1, фактор роста, происходящий от тератокарциномы);

(14) CD21 (CR2 (рецептор комплемента 2) или C3DR (C3d/рецептор вируса Эпштейна-Барра) или Hs.73792);

(15) CD79b (CD79B, CD79 , IGb (бета-белок, связанный с иммуноглобулином), В29);

(16) FcRH2 (IFGP4, IRTA4, SPAP1A (фосфатазный якорный белок 1a, содержащий домен SH2), SPAP1B, SPAP1C);

(17) HER2;

(18) NCA;

(19) MDP;

(20) IL20R ;

(21) Brevican;

(22) EphB2R;

(23) ASLG659;

(24) PSCA;

(25) GEDA;

(26) BAFF-R (рецептор фактора активации В-клеток, рецептор 3 BlyS, BR3);

(27) CD22 (СП22-В-изоформа В-клеточного рецептора);

(28) CD79a (CD79A, CD79 , связанный с иммуноглобулином альфа- белок, В-клеткоспецифический белок, который ковалентно взаимодействует с Ig бета (CD79B) и образует комплекс с молекулами IgM на поверхности клеток, передавая сигнал, участвующий в дифференцировке В-клеток);

(29) CXCR5 (рецептор 1 лимфомы Беркитта, связанный с G-белком рецептор, который активируется хемокином CXCL13, обеспечивает миграцию лимфоцитов и гуморальную защиту, а также играет определенную роль в инфицировании вирусом ВИЧ-2, и, вероятно, в развитии СПИДа, лимфомы, миеломы и лейкоза);

(30) HLA-DOB (бета-субъединица молекулы МНС класса II (антиген Ia), которая связывается с пептидами и презентирует их CD4⁺-T-лимфоцитам);

(31) Р2Х5 (ионный канал, открываемый лигандом пуринергического рецептора Р2Х5; ионный канал, открываемый внеклеточным АТР, может участвовать в синаптической передаче и в нейрогенезе, а его дефицит может играть определенную роль в патофизиологии идиопатической дисфункции мочевого пузыря);

(32) CD72 (антиген CD72 линии В-клеточной дифференцировки, Lyb-2);

(33) LY64 (лимфоцитарный антиген 64 (RP105), мембранный белок семейства богатых лейцином повторов (LRR) типа I, который регулирует активацию и апоптоз В-клеток, и потеря его функции ассоциируется с прогрессированием заболевания у пациентов с системной красной волчанкой);

(34) FcRH1 (Fc-рецептор-подобный белок 1, предполагаемый рецептор для Fc-домена иммуноглобулина, который содержит Ig-подобные домены типа С2 и домены ITAM, может играть определенную роль в дифференцировке В-лимфоцитов);

(35) IRTA2 (ассоциированный с транслокацией рецептор суперсемейства иммуноглобулина 2, предполагаемый иммунорецептор, который, возможно, играет определенную роль в развитии В-клеток и лимфомагенезе; в некоторых злокачественных В-клетках наблюдается нарушение регуляции гена посредством транслокации); и

(36) TENB2 (предполагаемый трансмембранный протеогликан, родственный семейству факторов роста EGF/герегулинов и фоллистатину).

26. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где p равно 1 или 2.

27. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где L имеет формулу:

,

где А представляет собой удлиняющий компонент, ковалентно присоединенный к тиолу сконструированного антитела с цистеиновыми заменами (Ab);

а равно 0 или 1;

каждый W независимо представляет собой аминокислоту;

w независимо представляет собой целое число от 0 до 12;

Y означает спейсерный компонент, ковалентно связанный с молекулой лекарственного средства; и

у равно 0, 1 или 2.

28. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.27, имеющее формулу:



где РАВ представляет собой пара-аминобензилкарбамоил, a R¹⁷ представляет собой двухвалентный радикал, выбранный из (СН₂)_r, С₃-C₈ карбоциклила, -O-(СН₂)_r, арилена, (СН ₂)_r-арилена, арилен-(СН₂)_r -, (CH₂)_r-(C₃-C₈-карбоциклила), (С₃-С₈-карбоциклил)-(СН₂) _r-, -(С₃-C₈- гетероциклила), (СН ₂)_r-(C₃-С₈-гетероциклила), (C₃-C₈ гетероциклил)-(СН₂) _r, -(CH₂)_rC(O)NR^b(CH ₂)_r, -(СН₂СН₂О)_r -, -(CH₂CH₂O)_r-СН₂ -, -(CH₂)_rC(O)NR^b(CH₂ CH₂O)_r-, -(CH₂)_rC(O)NR ^b(CH₂CH₂O)_r-CH₂ -, -(CH₂CH₂O)_rC(O)NR^b (CH₂CH₂O)_r-, -(CH₂ CH₂O)_rC(O)NR^b(CH₂ CH₂O)_r-CH₂- и -(CH₂ CH₂O)_rC(O)NR^b(CH₂ )_r-, где R^b представляет собой Н, C ₁-С₆алкил, фенил или бензил, а r независимо представляет собой целое число от 1 от 10.

29. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.28, где W _w представляет собой валин-цитруллин.

30. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.28, где R ¹⁷ представляет собой (СН₂)₅ или (СН₂)₂.

31. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.28, имеющее формулу:

32. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.31, где R¹⁷ представляет собой (СН₂)₅ или (CH₂)₂ .

33. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.28, имеющее формулу:

34. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где L образован из линкерного реагента SMCC или ВМРЕО.

35. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где молекула лекарственного средства D выбрана из ингибитора микротубулина, ингибитора митоза, ингибитора топоизомеразы и ДНК- интеркалирующего агента.

36. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где молекула лекарственного средства D выбрана из майтанзиноида, ауристатина, доластатина и калихеамицина.

37. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где D представляет собой ММАЕ со структурой:

,

где волнистая линия указывает на сайт присоединения к линкеру L.

38. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где

D представляет собой MMAF со структурой:

,

где волнистая линия указывает на сайт присоединения к линкеру L.

39. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство по п.19, где D представляет собой DM1 со структурой:



или DM4 со структурой:



где волнистая линия указывает на сайт присоединения к линкеру L.

40. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где указанное родительское антитело выбрано из моноклонального антитела, биспецифического антитела, химерного антитела, человеческого антитела, гуманизованного антитела и фрагмента антитела.

41. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где родительским антителом является huMAb4D5-8 (трастузумаб), анти-ErbB2 антитело, анти-EphB2R антитело, анти-CD22 антитело, анти-MUC16 антитело.

42. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, где указанным родительским антителом является интактное антитело, выбранное из IgA, IgD, IgE, IgG и IgM.

43. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.42, где IgG выбран из подклассов IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4.

44. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, имеющий структуру:



где n равно 0, 1, или 2; и

Ab представляет собой сконструированное антитело с цистеиновыми заменами.

45. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, выбранное из следующих структур:









где Val представляет собой валин, и

Cit представляет собой цитруллин.

46. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство", предназначенное для конъюгирования с химиотерапевтическими лекарственными средствами, токсинами, аффинными лигандами и детектируемыми метками,

выбранное из следующих структур:









где Val представляет собой валин;

Cit представляет собой цитруллин;

p равно 1, 2, 3 или 4; и

Ab представляет собой антитело по любому из пп.1-18.

47. Соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19, используемое для лечения рака.

48. Фармацевтическая композиции, использующаяся в качестве иммуноконъюгата, содержащая соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19 или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемый разбавитель, носитель или наполнитель.

49. Фармацевтическая композиция по п.48, которая дополнительно содержит терапевтически эффективное количество дополнительного химиотерапевтического средства.

50. Промышленное изделие, содержащее:

соединение-конъюгат "антитело-лекарственное средство" по п.19,

контейнер и

вкладыш, вложенный в контейнер, или этикетку на упаковке, указывающий, что соединение может быть использовано для лечения рака.

51. Конъюгат антитело-лекарственное средство по п.19, содержащее одну или несколько последовательностей в легкой цепи, выбранных из SEQ ID NO: 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 45 и 46:

SLASASCGDRVT (EQ ID NO: 17)

QKPGKCPKLLI (SEQ ID NO: 18)

EIKRTCAAPSV (SEQ ID NO: 19)

TCAAPCVFIFPP (SEQ ID NO: 20)

FIFPPCDEQLK (SEQ ID NO: 21)

DEQLKCGTASV (SEQ ID NO: 22)

FYPRECKVQWK (SEQ ID NO: 23)

WKVDNCLQSGN (SEQ ID NO: 24)

ALQSGCSQESV (SEQ ID NO: 25)

VTEQDCKDSTY (SEQ ID NO: 26)

GLSSPCTKSFN (SEQ ID NO: 27)

FLSVSCGGRVT (SEQ ID NO: 45)

QKPGNCPRLLI (SEQ ID NO: 46).

Описание изобретения к патенту

Текст описания приведен в факсимильном виде.