цитокинсодержащая аэрозольная композиция
Классы МПК: | A61K9/12 аэрозоли; пены A61K31/355 токоферолы, например витамин E A61K38/20 интерлейкины A61K38/21 интерфероны |
Автор(ы): | Ищенко Александр Митрофанович (RU), Симбирцев Андрей Семенович (RU), Мартюшин Сергей Васильевич (RU), Соловьева Людмила Яковлевна (RU), Антипова Татьяна Олеговна (RU), Антропова Галина Федоровна (RU), Котов Александр Юрьевич (RU), Митрофанов Евгений Витальевич (RU), Полякова Елена Акимовна (RU), Протасов Евгений Александрович (RU), Гончарова Светлана Викторовна (RU), Горбунова Ирина Николаевна (RU), Пигарева Наталья Васильевна (RU), Петров Александр Владимирович (RU) |
Патентообладатель(и): | Федеральное государственное унитарное предприятие "Государственный научно-исследовательский институт особо чистых биопрепаратов" Федерального медико-биологического агентства (RU), Общество с ограниченной ответственностью "ЦИТОКИН" (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2009-11-26 публикация патента:
27.01.2011 |
Изобретение относится к области медицины, а именно к аэрозольным препаратам интерферона, которые могут использоваться для лечения вирусных и онкологических заболеваний. Композиция содержит цитокин, декстран, хлорид натрия, альфа-токоферол ацетат, трилон Б, бензалконий хлорид, полисорбат и фосфатную смесь при следующем соотношении ингредиентов:
цитокин | 1×10 -5-5×10-1 мг/мл; |
ацетат альфа-токоферола | 0,05-0,1 мг/мл; |
гидролизованный декстран | 0,1-0,5 мг/мл; |
бензалкония хлорид | 0,1-0,2 мг/мл; |
полисорбат | 0,3-1,0 мг/мл; |
натрия хлорид | 50-100 мг/мл; |
трилон Б | 5-10 мг/мл; |
раствор буферобразующих фосфатных солей | остальное. |
В качестве цитокина используют интерферон, интерлейкин или их рецепторный антагонист. Композиция обладает улучшенными характеристиками при хранении в жидком виде и повышенными реологическими свойствами. 5 з.п. ф-лы, 5 табл.
Формула изобретения
1. Цитокинсодержащая аэрозольная композиция, содержащая цитокин, декстран, хлорид натрия, фосфатную смесь и иные вспомогательные вещества, отличающаяся тем, что она дополнительно содержит альфа-токоферол ацетат, трилон Б, бензалконий хлорид и полисорбат при следующем соотношении ингредиентов:
цитокин | 1·10 -5-5·10-1 мг/мл |
ацетат альфа-токоферола | 0,05-0,1 мг/мл |
гидролизованный декстран | 0,1-0,5 мг/мл |
бензалкония хлорид | 0,1-0,2 мг/мл |
полисорбат | 0,3-1,0 мг/мл |
натрия хлорид | 50-100 мг/мл |
трилон Б | 5-10 мг/мл |
раствор буферобразующих фосфатных солей | остальное |
2. Цитокинсодержащая аэрозольная композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве полисорбата она содержит полисорбат-80 или Твин-20.
3. Цитокинсодержащая аэрозольная композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве буферобразующих фосфатных солей она содержит натрий гидрофосфат и натрий дигидрофосфат.
4. Цитокинсодержащая аэрозольная композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве цитокина она содержит интерферон-альфа.
5. Цитокинсодержащая аэрозольная композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве цитокина она содержит интерлейкин.
6. Цитокинсодержащая аэрозольная композиция по п.1, отличающаяся тем, что в качестве цитокина она содержит антагонист интерлейкина.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины, а именно к аэрозольным препаратам цитокинов, в частности интерферонов и интерлейкинов, которые могут использоваться для лечения вирусных и онкологических заболеваний.
В настоящее время одной из сложнейших проблем белоксодержащих медицинских препаратов является их нестабильность при хранении и применении. Подобно другим протеинам, цитокины подвергаются модификации и химическому разложению за счет протекания процессов протеолиза, окисления, дисульфидного обмена и т.д. Кроме того, на их биологическую активность негативно воздействуют такие факторы, связанные с их получением и применением, как агрегация, осаждение и адсорбция.
Для уменьшения потерь активности цитокинсодержащих препаратов в состав лекарственной формы, как правило, вводят различные стабилизирующие добавки. Так, известно использование в качестве стабилизаторов биологической активности цитокинов человеческого альбумина (ЕР 133767, 1984), сахаров - глюкозы, маннозы, галактозы, фруктозы, сахарозы и др. (ЕР 0133767, 1984), декстранов и гидроксиэтилкрахмала (ЕР 0150067, 1985), полиэтиленгликоля и гидроксиэтилцеллюлозы (ЕР 0152345, 1985), поликарбоновых кислот сополимеров метилметакрилата и малеиновой кислоты, Na-соли карбоксиметилцеллюлозы и ксилита (DE 3642223, 1988).
Однако использование этих добавок вызывает определенные проблемы, Так, применение человеческого альбумина (ЧСА), как стабилизатора лекарственных форм цитокинов, связано с необходимостью осуществления дополнительного контроля полученных лекарственных форм на отсутствие антигена гепатита и вируса СПИДа и ограничено недостаточностью сырья для его производства - донорской крови.
При использовании в качестве стабилизирующих веществ аминокислот или их производных в смеси с альбумином (ЕР 0082481, 1982; US 4496537, 1983) биологическая стабильность этой композиции сохранялась в достаточной степени только 6 месяцев. Кроме того данной композиции свойственны вышеперечисленные недостатки, связанные с применением ЧСА.
Известна композиция, содержащая интерферон-альфа2; ацетат токоферола, органическую кислоту и буферобразующие соли, обеспечивающие в водном растворе pH 7,4 (RU 2218934, 2001). Композиция обеспечивает сохранность интерферона при хранении, однако при аэрозолировании раствора, содержащего данную композицию, не удается получить мелкодисперсный стабильный аэрозоль, способный проникать достаточно далеко в дыхательные пути больного, что ограничивает возможность его применения.
В качестве добавок для препаратов ингибитора интерлейкина-1 используют неионные поверхностно-активные вещества, лимонную кислоту и цитрат натрия (RU 2126262, 1999), однако данные композиции используются, как правило, перорально или подкожно. Вводимые добавки обеспечивают устойчивость цитокина к перемешиванию, однако не позволяют получить стабильный мелкодисперсный аэрозоль.
В настоящее время исследования в области получения аэрозолей цитокинов, как правило, проводятся на основе изучения аэрозолей интерферонов. Так, известна композиция для решения данной задачи, содержащая в своем составе интерферон, полудан, полиоксидоний, метронидозол, витамины, противовоспалительные препараты и амиксин (RU 2002123272, 2002).
Недостатком композиции является сложный многокомпонентный состав, наличие в ее композиции большого числа биологически активных веществ, что может вызвать аллергические или иные побочные реакции у больного, а также невозможность хранить данный препарат длительное время из-за потери активности интерферона.
Известен препарат интерферона для аэрозольного применения, содержащий интерферон, хлористый натрий, тяжелую воду и вспомогательные вещества, который показал хорошее сохранение свойств при аэрозолировании (RU 2218913, 2001), однако он не подлежит длительному хранению.
Известен аэрозольный препарат, содержащий интерферон с антиоксидантом - трилоном Б и полимером-поливинилпирролидоном и/или полиэтиленоксидом, показывающий хорошие аэрозольные характеристики, однако он не может храниться длительное время в жидкой форме без существенной потери активности (RU 2156136, 2000).
Наиболее близкой по составу к заявляемому решению является интерферонсодержащая композиция, содержащая наряду с интерфероном частично гидролизованный декстран (полиглюкин), хлорид натрия и фосфатную смесь (компоненты фосфатного буферного раствора) (RU 2095081, 1997).
Однако данная смесь успешно хранится только в сухом виде и малопригодна для использования в жидких формах, что затрудняет его использование в клинической практике.
Задачей, решаемой авторами, являлось создание аэрозольного цитокинсодержащего препарата, который мог бы длительное время храниться в жидкой или сухой форме и обеспечивал высокие реологические характеристики и стабильность в аэрозольной форме, в частности мог бы использоваться в виде аэрозоля с размером капель менее 4 мкм, что позволило бы обеспечить его проникновение в нижние части дыхательной системы больного.
Было найдено, что сочетание указанных характеристик обеспечивает композиция, содержащая наряду с цитокином, декстраном, хлоридом натрия и фосфатной смесью, дополнительно альфа-токоферол ацетат, трилон Б, бензалконий хлорид и полисорбат при следующем соотношении ингредиентов:
цитокин | 1×10 -5-5×10-1 мг; |
ацетат альфа-токоферола | 0,05-0,1 мг/мл; |
гидролизованный декстран | 0,1-0,5 мг/мл; |
бензалкония хлорид | 0,1-0,2 мг/мл; |
полисорбат | 0,3-1,0 мг/мл; |
натрия хлорид | 50-100 мг/мл; |
трилон Б | 5-10 мг/мл; |
раствор буферобразующих фосфатных солей | остальное. |
В качестве цитокинов могут использоваться рекомбинантные интерфероны, интерлейкины или их рецепторные антагонисты. В качестве полисорбата используют полисорбат-80 или Твин-20, в качестве буферобразующих фосфатных солей - натрий гидрофосфат и натрий дигидрофосфат. Гидролизованный декстран (полиглюкин) представляет собой декстран со средней молекулярной массой 50000-70000 Д.
Основной особенностью заявляемой композиии являлось использование в ее составе сочетания ионных - бензалкония хлорид и неионных - полисорбат поверхностно-активных веществ, которые обеспечивают помещение молекул белка в сочетании с антиокислителем и иными вспомогательными веществами в «сетку» не позволяющую цитокину контактировать с внешней средой вне организма и изменять свою пространственную структуру. Выход за пределы указанного диапазона, как правило, ухудшает либо результаты по хранению препарата, либо реологические характеристики, что особенно важно при работе с супердисперсными аэрозолями.
Композицию получают следующим образом.
В 70% от необходимого объема воды для инъекций, нагретой до 60°С, в подходящую емкость (коническая колба подходящего объема) растворяют навеску полиглюкина необходимой массы. Затем раствор полиглюкина охлаждают до 25±5°С и вводят навески натрия фосфат двуосновного, натрия фосфат одноосновного моногидрата, трилона Б и натрия хлорида. Полученный раствор автоклавируют при 2 атм. и 110°С. После автоклавирования и охлаждения раствор переносят в ламинарный шкаф, охлаждают до комнатной температуры и продувают стерильным (после фильтра) азотом без погружения трубки с током азота непосредственно в раствор. Затем в полученную смесь добавляют раствор полисорбата, бензалкония хлорида и альфа-токоферола, перемешивают, после чего добавляют цитокин и воду для инъекций до необходимого объема, осторожно помешивая раствор для достижения гомогенности. При наличии соответствующих возможностей проводят стерилизующую фильтрацию подготовленного раствора в емкость, которая предварительно заполнена азотом. Затем дополнительно наслаивают азот в емкость с отфильтрованным раствором и разливают по флаконам с применением дозатора.
Результаты проведенных испытаний представлены в следующих примерах.
Пример 1. Влияние состава композиции исходного препарата (препарат для внутримышечного введения) на изменение активности интерферона - альфа-1 (ИНТ) при хранении в виде раствора при температуре +37°С. При этом за основу была взята композиция, содержащая интерферон-альфа2 1×10-5-5×10-1 мг; детергент неионный твин-80 - 0.0005 мг; детергент ионный бензалконий хлорид - 0.1 мг; полиглюкин от 0.5 мг; трилон Б - 6,7 мг; альфатокоферола ацетат - 0.05 мг; фосфатный буферный раствор - 31 мг; натрий хлористый - 80 мг; вода для инъекций - до 1 мл. На базе исходного состава осуществляли изменения содержания отдельных ингредиентов. Полученные результаты приведены в таблицах 1-4
Таблица 1 | |||||
Влияния состава композиции при хранении препарата. Исходная активность 1.1×103 МЕ/мл, что соответствует 5.5×10 -6 мг/мл | |||||
Детергент неионный твин-80, мг/мл | Полиглюкин, мг/мл | Альфа-токоферол, мг/мл | Активность ИНТ в начале хранения, МЕ/мл (мг/мл) | Активность ИНТ после 12 недель хранения, МЕ/мл | Сохранение активности ИНТ, % |
0.05 | 0.1 | 0.05 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.95×106 | 86.3 |
0.1 | 1 | 0.5 | 1.1×10 3 (5.5х10-6) | 0.86x106 | 78.2 |
0.5 | 0.5 | 0.05 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.98±106 | 89.1 |
0.01 | 0.1 | 0.5 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.97×106 | 88.2 |
0.1 | 1 | 0.1 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.94х106 | 85.5 |
нет | 1 | 0.5 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.75×106 | 68.2 |
0.1 | нет | 0.1 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.68х106 | 61.8 |
0.5 | 0.5 | Нет | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.57×106 | 51.8 |
5 | 1 | 0.05 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.88×106 | 80.0 |
0.1 | 10.0 | 0.05 | 1.1×10 3 (5.5×10-6) | 0.83106 | 75.5 |
Таблица 2 | |||||
Влияния состава композиции при хранении препарата. Исходная активность 1.1×108 МЕ/мл, что соответствует 0.55 мг/мл | |||||
Детергент неионный твин-80, мг/мл | Полиглюкин, мг/мл | Альфа-токоферол, мг/мл | Активность ИНТ в начале хранения, МЕ/мл (мг/мл) | Активность ИНТ после 12 недель хранения, МЕ/мл | Сохранение активности ИНТ, % |
0.05 | 0.1 | 0.05 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.93×108 | 84.2 |
0.1 | 1 | 0.5 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.8×108 | 73.1 |
0.5 | 0.5 | 0.05 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 1.01×108 | 92.4 |
0.01 | 0.1 | 0.5 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.86×108 | 78.3 |
0.1 | 1 | 0.1 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.91×108 | 82.6 |
нет | 1 | 0.5 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.66×108 | 59.8 |
0.1 | нет | 0.1 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.76×108 | 68.8 |
0.5 | 0.5 | Нет | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.55×108 | 49.7 |
5 | 1 | 0.05 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.87×108 | 79.9 |
0.1 | 10.0 | 0.05 | 1.1×10 8 (5.5×10-1) | 0.77×108 | 69.8 |
Таблица 3 | ||||
Влияние хлорида натрия и ионного детергента в исходном препарате на изменение активности ИНТ при хранении в виде раствора при температуре +37°С. | ||||
Детергент ионный бензалконий хлорид, мг/мл | Натрий хлористый, мг/мл | Активность ИНТ в начале хранения, МЕ/мл (мг/мл) | Активность ИНТ после 12 недель хранения, МЕ/мл (мг/мл) | Сохранение активности ИНТ, % |
0.05 | 1 | 1.1×103 (5.5×10-6) | 1.24×103 | 112 |
0.5 | 5 | 1.1×103 (5.5×10-6) | 1.32×103 | 120 |
0.05 | 5 | 1.1×103 (5.5×10-6) | 1.22×103 | 111 |
5 | 1 | 1.1×103 (5.5×10-6) | 1.34×103 | 122 |
Нет | 5 | 1.1×103 (5.5×10-6) | 0.64×103 | 58.2 |
0.05 | Нет | 1.1×103 (5.5×10-6) | 0.23×103 | 20.9 |
Таблица 4 | |||||||
Влияние состава композиции препарата для аэрозольного применения на активность интерферона при хранении. | |||||||
Состав композиции препарата | Результаты хранения | ||||||
Активность ИНТ вначале хранения, МЕ/мл (мг/мл) | Полиглюкин, мг/мл | АТА, мг/мл | Трилон Б, мг/мл | Детергент неионный твин-80, мг/мл | pH | Активность ИНТ, МЕ/мл (мг/мл) | Степень сохранения активности, % |
Хранение жидкой формы в течении 12 недель при +37°С | |||||||
1.19×10 5 (5.9×10-4) | Нет | 0.05 | 5 | 0.1 | 6.0 | 0.39×105 | 32.7 |
1.27×10 5 (6.3×10-4) | 0.1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 6.0 | 0.94×105 | 74.0 |
1.31×10 5 (6.5×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 6.0 | 0.91×105 | 69.5 |
1.23×10 5 (6.1×10-4) | 5 | 0.05 | 5 | 0.1 | 6.0 | 0.95×105 | 77.2 |
1.10×10 5 (5.5×10-4) | 10 | 0.05 | 5 | 0.1 | 6.0 | 0.92×105 | 83.6 |
1.26×10 5 (6.4×10-4) | 100 | 0.05 | 5 | 0.1 | 6.0 | 0.82×105 | 65.1 |
1.31×10 5 (6.5×10-4) | 1 | 0.5 | 5 | 0.1 | 7.0 | 0.89×105 | 67.9 |
1.33×10 5 (6.6×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 7.0 | 0.96×105 | 72.2 |
1.19×10 5 (5.9×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 7.0 | 0.91×105 | 76.5 |
1.23×10 5 (6.1×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 7.0 | 0.93×105 | 75.6 |
1.18×10 5 (5.9×10-4) | 1 | 0.1 | 5 | 0.1 | 7.0 | 0.96×105 | 81.4 |
1.23×10 5 (6.1×10-4) | 1 | 0.5 | 5 | 0.2 | 7.0 | 0.19×105 | 15.4 |
1.32×10 5 (6.6×10-4) | 1 | 2.0 | 5 | 0.2 | 7.0 | 0.29×105 | 22.0 |
1.26×10 5 (6.3×10-4) | 1 | 0.05 | нет | 0.2 | 7.5 | 1.09×105 | 86.5 |
1.15×10 5 (5.7×10-4) | 1 | 0.05 | 1 | 0.2 | 7.5 | 0.97×105 | 84.3 |
1.05×10 5 (5.1×10-4) | 1 | 0.05 | 2 | 0.2 | 7.5 | 0.88×105 | 83.8 |
1.08×10 5 (5.2×10-4) | 1 | 0.05 | 4 | 0.2 | 7.5 | 0.79×105 | 73.1 |
1.24×10 5 (6.2×10-4) | 1 | 0.05 | 8 | 0.2 | 7.5 | 0.89×105 | 71.8 |
1.26×10 5 (6.3×10-4) | 1 | 0.05 | 12 | 0.4 | 7.5 | 1.05×105 | 83.3 |
1.25×10 5 (6.2×10-4) | 1 | 0.05 | 16 | 0.4 | 7.5 | 1.01×105 | 80.8 |
1.14×10 5 (5.6×10-4) | 1 | 0.05 | 20 | 0.4 | 7.5 | 0.71×105 | 62.3 |
1.18×10 5 (5.7×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 7.5 | 1.05×105 | 89.0 |
1.25×10 5 (6.3×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.2 | 7.5 | 1.03×105 | 82.4 |
1.26×10 5 (6.3×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 2.0 | 7.5 | 0.78×105 | 61.9 |
1.29×10 5 (6.4×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0.1 | 5.0 | 1.09×105 | 84.5 |
1.38×10 5 (6.9×10-4) | 1 | 0.05 | 5 | 0. 1 | 8.4 | 1.21×105 | 87.7 |
Полученные результаты свидетельствуют о хорошем сохранении свойств препарата при его хранении в жидкой форме и при аэрозолировании.
Пример 2. Изучение клинической эффективности аэрозольного препарата интерферона с добавлением бензалкония хлорида (БАХ) у больных с гриппом в остром периоде болезни (на 1-2 день от начала заболевания), средней степени тяжести, при отсутствии осложнений. Больной Ц. обратился с жалобами на общую слабость, озноб, мышечные и суставные боли, головную боль, заложенность носа, выделения из носа серозно-слизистого характера, повышенное потоотделение, чувство инородного тела в ротоглотке, сухой кашель.
Диагноз «грипп» на основании комплексного клинико-анамнестического обследования, включая эпидемические данные, тщательный сбор анамнеза на предмет отсутствия хронической патологии ЛОР-органов в виде хронических аллергических реакций на лекарственные препараты, данных ЛОР-осмотра.
При осмотре у больного интоксикация выражена умеренно, температура 38,5°С, ринит, фарингит, сухой мучительный кашель с болями за грудиной. Применение препарата аэрозольного интерферона начато в день обращения пациента по 1 дозе в каждую половину носа через каждые 2 часа, исключая время сна. Курс лечения составлял 5 дней.
Оценка клинической эффективности препарата осуществлялась на основании динамики наступления субъективного (исчезновения жалоб на недомогание, слабость, головной боли) и объективного улучшения (нормализация температуры, исчезновения катарального синдрома, определяемого при эндовидеоскопическом исследовании ЛОР-органов) улучшения состояния больных, отсутствия осложнений.
При применении аэрозольного интерферона у больного отмечено полное купирования лихорадки на второй день применения препарата. При этом у пациентов, получавших стандартную симптоматическую терапию, включающую применение НПВП (парацетамол по 0,5 г 1-3 раза в сутки), полное купирование лихорадки наблюдалось на четвертые - шестые сутки. Кроме того отмечено быстрое снижение явлений интоксикации, что проявлялось в исчезновении жалоб на головную боль, слабость, боль в мышцах и суставах на второй-третий день.
Это сопровождалось как отсутствием жалоб на заложенность носа и выделений из носа, так и данными передней риноскопии, при которой наблюдалось регрессирование гиперемии, отека слизистой носовой полости и отсутствие выделений в общих носовых ходах. При применении стандартной терапии эти симптомы держались значительно дольше - 5-8 дней.
Препарат переносился хорошо, побочных явлений, нежелательных эффектов и аллергических реакций, связанных с применением данного лекарственного средства, не наблюдалось.
Таким образом, наблюдалось существенное ускорение купирования всех основных симптомов гриппа.
Пример 3. Изучение клинической эффективности аэрозольного препарата интерлейкина-1 у больных с острыми респираторными вирусными инфекциями (ОРВИ) в остром периоде болезни (не позднее 2 дня от начала заболевания), при отсутствии осложнений. Больная Г., 28 лет обратилась в ЛОР-отделение с жалобами на озноб, головную боль, заложенность носа, выделения из носа серозно-слизистого характера, сухой кашель.
Диагноз ОРВИ поставлен на основании комплексного клинико-анамнестического обследования, включая эпидемические данные, тщательный сбор анамнеза на предмет отсутствия хронической патологии ЛОР-органов в виде хронических аллергических реакций на лекарственные препараты, данных ЛОР-осмотра. При осмотре у больной признаки умеренной интоксикация, температура 37,5°С, ринит.
Применение препарата аэрозольного рекомбинантного интерлейкина-1 бета человека (концентрация - 1 мкг/мл, детергент неионный твин-80 0.0005 мг; детергент ионный бензалконий хлорид - 0.1 мг; полиглюкин от 0.5 мг; трилон Б - 6,7 мг; альфа-токоферола ацетат - 0.05 мг; фосфатный буферный раствор - 31 мг; натрий хлористый - 80 мг; вода для инъекций - до 1 мл) начато в день обращения по 1 дозе в каждую половину носа через каждые 2 часа, исключая время сна. Курс лечения составлял 3 дня.
Оценка клинической эффективности препарата осуществлялась на основании динамики наступления субъективного улучшения состояния больных, отсутствия осложнений.
При применении аэрозольного ИЛ-1 у больной отмечено полное купирования лихорадки на третий день применения препарата. На 2-3 день лечения постепенно исчезли жалобы на недомогание, слабость, головную боль. Объективно при эндовидеоскопическом исследовании ЛОР-органов отмечено исчезновение катарального синдрома, регрессирование гиперемии, отека слизистой носовой полости и отсутствие выделений в общих носовых ходах. При этом у пациентов, получавших стандартную симптоматическую терапию, включающую применение НПВП (парацетамол по 0,5 1-3 раза в сутки), полное купирование лихорадки и исчезновение клинических проявлений ОРВИ наблюдалось на четвертые-шестые сутки.
Препарат переносился хорошо, побочных явлений, нежелательных эффектов и аллергических реакций, связанных с применением данного лекарственного средства, не наблюдалось.
Таким образом, наблюдалась выраженная тенденция к ускорению купирования всех основных симптомов ОРВИ.
Пример 4. Изучение специфической активности аэрозольных препаратов рецепторного антагониста интерлейкина-1 (РАИЛ) с добавлением бензалкония хлорида (БАХ) на модели острого легочного воспаления у мышей, вызванного механической пылью. Использовался препарат РАИЛ, полученный по методике примера 1, имеющий следующий состав: (концентрация - 1 мг/мл, детергент неионный твин-80 - 0.0005 мг: детергент ионный бензалконий хлорид - 0.1 мг; полиглюкин от 0.5 мг; трилон Б - 6,7 мг; альфа-токоферола ацетат - 0.05 мг; фосфатный буферный раствор - 31 мг; натрий хлористый - 80 мг вода для инъекций - до 1 мл). На модели острого легочного воспаления, вызываемого введением ультрадисперсного препарата железа Fe79, проводили исследование лечебной эффективности аэрозольного препарата на основе РАИЛ, содержащего добавки бензалкония хлорида и без него.
Через 10 мин после введения в легкие беспородных белых мышей металлической пыли проводили экспозицию животных с аэрозольными препаратами РАИЛ в дозе 100 мкг/мышь в течение 30 мин. Лечебное действие аэрозоля оценивали по степени снижения показателей воспаления, судя по изменениям общего количества клеток, относительного содержания (%) сегментоядерных нейтрофилов в бронхоальвеолярном лаваже (БАЛ), индекса люминол-зависимой хемилюминесценции (ЛЗХЛ) клеток БАЛ. Результаты исследования представлены в таблице 1. Средний диаметр частиц аэрозоля в случае композиции без БАХ составил 6,8 мкм, при использовании композиции с БАХ при аэрозолировании в тех же условиях - 3,8 мкм.
Таблица 5 | ||||
Изменение общей клеточности (кл/мл БАЛ), количества зрелых нейтрофилов (%) и индекса ЛЗХЛ при лечении аэрозольным препаратом РАИЛ. | ||||
Показатель воспаления | Контроль | Воспаление | Композиция без БАХ | Композиция с БАХ |
Кол-во кл. в БАЛ (×106), кл/мл | 1,16±0,15 | 31,05±1,74 | 16,7±1,2* | 10,4±1,0** |
Нейтрофилы зрелые, % | 3,8±1,7 | 32,8±11,4 | 21,4±10,7* | 15,26±5,76* |
ЛЗХЛ, индекс | 1,1±0,1 | 3,7±1,7 | 3,4±0,3 | 2,3±0,2** |
Примечания | ||||
*- Достоверное отличие от воспаления, Р<0,05 | ||||
**- Достоверное отличие между Композициями с БАХ и без БАХ, Р<0,05 |
Таким образом, аэрозольный препарат РАИЛ обладает противовоспалительным действием в использованной модели легочного воспаления. Эффективность лечебного противовоспалительного действия аэрозольной формы возрастает при добавлении в состав препарата бензалкония хлорида, что может быть связано с улучшением показателей дисперсности препарата, приводящим к улучшению распределения в легких и более выраженному противовоспалительному действию.
Класс A61K31/355 токоферолы, например витамин E