способ очистки ванкомицина

Формула изобретения

1. Способ очистки ванкомицина, выполняемый путем растворения макролидного антибиотика в воде и проведению ультрафильтрации раствора с мембраной, имеющей номинальное удержание ниже 30,000 Да.

2. Способ по п.1, где мембрана имеет номинальное удержание, меньшее или равное 10,000 Да.

3. Способ по п.1 или 2, где после ультрафильтрации очищенный раствор дополнительно концентрируют путем обратного осмоса, а затем лиофилизируют при оптимизированных условиях давления и температуры для получения белого порошка.

4. Способ по п.3, где конечный порошок имеет поглощение при 450 нм менее 0,100.

5. Способ по п.3, где конечный порошок имеет поглощение при 450 нм менее 0,080.

Описание изобретения к патенту

Настоящее изобретение касается способа очистки макролидных антибиотиков. Более конкретно, оно касается процесса очистки макролидных антибиотиков, дающего белый порошок. Этот порошок остается белым также спустя некоторое время хранения.

Макролидные антибиотики имеют макроциклические лактоновые химические структуры, которые являются лактозными кольцами из 12-22 углеродных атомов, к которым может быть прикреплен сахар. Они являются бактериостатическими и связываются с рибосомами бактерий для предотвращения выработки белков.

Макролидные антибиотики включают ванкомицин, тейкопланин, эритромицин, азитромицин, кларитромицин, рокситромицин, джозамицин, ристоцетин, актиноидин, авопарцин, актапланин, тейхомицин и телитромицин.

Настоящее изобретение направлено на очистку макролидных антибиотиков в общем и, более конкретно, на очистку ванкомицина.

US 5853720 раскрывает процесс очистки ванкомицина, где этап очистки включает применение препаративной хроматографии на колонке с силикагелем.

ЕР 132117 раскрывает процесс очистки ванкомицинового класса антибиотиков, включающий применение аффинной хроматографии, где антибиотик связывается с матриксом посредством формирования сорбционного комплекса.

Эти способы, основанные на хроматографии, производят антибиотик с повышенной чистотой, но не производят порошок с удовлетворительным белым цветом. В случае ванкомицина после хроматографической очистки исходный цвет является слегка розовым, а спустя некоторое время цвет становится коричневатым. Это не соответствует требованиям Европейской Фармакопеи.

Было установлено, что если подвергать макролидный антибиотик ультрафильтрации, можно удалить примеси, приводящие к высокому поглощению при 450 нм.

Ультрафильтрация является процессом разделения молекул различного размера. Молекулярный вес молекулы играет, фактически, наиболее важную роль в ультрафильтрации, хотя могут играть роль другие вторичные факторы, такие как размер и электрический заряд молекулы. Коммерчески доступны различные ультрафильтрационные мембраны, определяемые по молекулярному весу молекул, задерживаемых мембраной. Мембраны, применяемые в настоящем изобретении, имеют значение удержания ниже 30,000 Да.

Способ по настоящему изобретению выполняется путем растворения макролидных антибиотиков, например, коммерческого ванкомицина гидрохлорида, в воде, и проведения ультрафильтрации раствора с мембраной, имеющей номинальное удержание ниже 30,000 Да, предпочтительно меньше или равно 15,000 Да, наиболее предпочтительно меньше или равно 10,000 Да. Предпочтительно ультрафильтрационная мембрана имеет номинальное удержание выше 6,000 Да. Очищенный раствор предпочтительно концентрируют обратным осмосом, а затем лиофилизируют при оптимизированных условиях давления и температуры для получения белого порошка. Когда предполагается получить стерильный порошок, предпочтительно пропускать раствор, после концентрирования и обратного осмоса, через фильтр 0,22 микрон, и собирать фильтрат в стерильный сосуд (Класса А в соответствии с Европейской Фармакопеей).

Тип мембраны зависит от антибиотика. В случае ванкомицина, при применении мембраны, имеющей значение удержания 30,000 Да, ванкомицин проходит через мембрану, в то время как примеси остаются в концентрате. Напротив, очистка тейкопланина считается эффективной при применении 10,000 Да мембраны. В этом случае примеси остаются в ультрафильтрате, а тейкопланин находится в концентрате. Таким образом, для каждого антибиотика возможно оптимизировать тип мембраны для достижения оптимального разделения примесей и макролидного антибиотика.

Когда антибиотиком является ванкомицин, он характеризуется поглощением при 450 нм ниже 0,100, предпочтительно ниже 0,080.

Макролидный антибиотик растворяют в воде, и концентрация антибиотика в исходном растворе включает между 0,1 и 30 мас.%, предпочтительно между 1 и 20 мас.%, наиболее предпочтительно между 3 и 18 мас.%.

ПРИМЕРЫ

Ванкомицина гидрохлорид, применяемый в примерах, является коммерческим продуктом, полученным от Альфарма.

Измерение поглощения при 450 нм было сделано в соответствии с монографией Ванкомицина из Европейской Фармакопеи.

Пример 1. Очистка ванкомицина гидрохлорида

65 г коммерческого ванкомицина гидрохлорида от Альфарма растворяли в 500 мл дистиллированной воды. После полной солюбилизации раствор подвергали ультрафильтрации с 10,000 Да мембраной, поддерживая падение давления 1 бар между ультрафильтратом и концентратом, при этом падение трансмембранного давления составило 2,5 бар. Ультрафильтрат концентрировали путем обратного осмоса, пропускали через 0,22 микронный фильтр и собирали в сосуд Класса А в соответствии Европейской GMP.

Пример 2. Очистка ванкомицина гидрохлорида

30 г коммерческого ванкомицина гидрохлорида от Альфарма растворяли в 500 мл дистиллированной воды. После полной солюбилизации раствор подвергали ультрафильтрации с 10,000 Да мембраной, поддерживая падение давления 1 бар между ультрафильтратом и концентратом, при этом падение трансмембранного давления составило 2,5 бар. Ультрафильтрат концентрировали путем обратного осмоса, пропускали через 0,22 микронный фильтр и собирали в сосуд Класса А в соответствии Европейской GMP.

	Исходный Ванкомицин	Пример 1	Пример 2
Поглощение при 450 нм	0,184	0,064	0,045

Пример 3. Очистка тейкопланина.

10 г тейкопланина растворяли в 100 мл дистиллированной воды. После полной солюбилизации раствор подвергали ультрафильтрации с 10,000 Да мембраной, поддерживая падение давления 1 бар между ультрафильтратом и концентратом, при этом падение трансмембранного давления составило 2,5 бар. В этом случае тейкопланин оставался в концентрате, в то время как некоторые примеси проходили в ультрафильтрат. Концентрат затем лиофилизировали, оптимизируя условия температуры и вакуума, пропускали через 0,22 микронный фильтр и собирали в сосуд Класса А в соответствии Европейской GMP.

Содержание тейкопланина, измеренное с помощью ВЭЖХ, составило 89,7% до и 93,8% после очистки. Наиболее важная примесь составила 10,8% до и 6,1% после очистки, в то время как вторая примесь, присутствовавшая в количестве 2,9% перед очисткой, полностью исчезала после очистки.