средство, снижающее гематотоксичность цитостатических препаратов
Классы МПК: | A61K36/28 Asteraceae или Compositae (семейство сложноцветных), например ромашка, девичья трава (пиретрум), тысячелистник или эхинацея A61P43/00 Лекарственные средства для специфических целей, не указанные в группах 1/00 |
Автор(ы): | Лопатина Ксения Александровна (RU), Сафонова Елена Андреевна (RU), Гурьев Артем Михайлович (RU), Белоусов Михаил Валерьевич (RU), Юсубов Мехман Сулейманович (RU), Федорова Елена Павловна (RU), Разина Татьяна Георгиевна (RU), Амосова Евдокия Наумовна (RU), Крылова Светлана Геннадьевна (RU), Ефимова Лариса Анатольевна (RU), Чурин Алексей Александрович (RU), Зуева Елена Петровна (RU) |
Патентообладатель(и): | Учреждение Российской академии медицинских наук Научно-исследовательский институт фармакологии Сибирского отделения РАМН НИИ фармакологии СО РАМН (RU), Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ГОУ ВПО СибГМУ РОСЗДРАВА) (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2009-06-17 публикация патента:
27.08.2010 |
Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к созданию средства, снижающего гематотоксичность цитостатических препаратов. В качестве данного средства применяют полисахариды из листьев мать-и-мачехи обыкновенной (Tussilago farfara L.). Средство расширяет арсенал средств, повышающих эффективность химиотерапии путем снижения гематотоксичности цитостатических препаратов. 2 табл.
Формула изобретения
Применение полисахаридов из листьев мать-и-мачехи обыкновенной (Tussilago farfara L.) в качестве средства, снижающего гематотоксичность цитостатических препаратов.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины, конкретно к онкологии, и может быть использовано для снижения гематотоксичности цитостатических препаратов у больных со злокачественными новообразованиями.
Цитостатические препараты обладают повреждающим действием на здоровые, активно обновляющиеся ткани организма, в частности кроветворную. Часто данный побочный эффект химиопрепаратов является лимитирующим фактором для продолжения лечения, приводит к развитию анемии, нейтропении у пациентов, риску развития инфекции, снижению эффективности терапии и качества жизни больных. В настоящее время в клинической онкологической практике для стимуляции эритропоэза применяют рекомбинантные эритропоэтины (эпрекс, рекормон), для стимуляции лейкопоэза используют факторы роста (лейкомакс, нейпоген) [1, 2].
Задачей изобретения является расширение арсенала средств, повышающих эффективность химиотерапии путем снижения гематотоксичности цитостатических препаратов.
Поставленная задача решается применением полисахаридов из листьев мать-и-мачехи обыкновенной (Tussilago farfara L.) в качестве средства, снижающего гематотоксичность цитостатических препаратов.
Известно применение листьев мать-и-мачехи в натуральном виде (измельченное сырье) в качестве отхаркивающего и противовоспалительного средства (отвар) при заболеваниях верхних дыхательных путей [1].
Новым в предлагаемом изобретении является то, что в качестве средства, снижающего гематотоксичность цитостатических препаратов, используют полисахариды из листьев мать-и-мачехи обыкновенной.
Новые свойства полисахаридов из листьев мать-и-мачехи обыкновенной снижать гематотоксичность цитостатических препаратов были выявлены экспериментальным путем. Новые свойства не вытекают явным образом из уровня техники в данной области, неочевидны для специалистов и не обнаружены в патентной и научно-медицинской литературе. Предлагаемое в качестве изобретения средство может быть использовано в клинической онкологии.
Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентоспособности: «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».
Исследования проведены на трехмесячных мышах-самках линии C57B1/6 массой 19-20 г. В качестве модели злокачественного роста использовали гематогенно метастазируюшую карциному легких Льюис, перевиваемую внутримышечно по 5 млн опухолевых клеток на мышь. Животных делили на следующие группы:
1. «Контроль» (n=5) - мыши, получавшие ежедневно в течение 11 сут по 0,1 мл ампульной воды для инъекций внутрибрюшинно.
2. «Паклитаксел» (n=5) - мыши, получавшие паклитаксел в дозе 20 мг/кг однократно на 9 сут развития опухоли.
3. «Паклитаксел + полисахариды мать-и-мачехи» (n=5) - мыши, получавшие паклитаксел в дозе 20 мг/кг однократно внутрибрюшинно на 9 сут развития опухоли и полисахариды мать-и-мачехи в дозе 10 мг/кг, начиная с 6 сут развития опухоли (11 введений).
На 4 и 7 сут после введения паклитаксела собирали периферическую кровь из хвостовой вены, определяли ее показатели на автоматическом гематологическом анализаторе «Abacus» («Diatron») в ветеринарном режиме. Обработку полученных результатов проводили с помощью непараметрического критерия Вилкоксона-Манна-Уитни. Различия считали достоверными при Р 0,05 [3].
Однократное введение паклитаксела мышам линии C57B 1/6 с карциномой легких Льюис в дозе 20 мг/кг к 4 сут приводило к следующим сдвигам показателей периферической крови: уменьшалось число количества эритроцитов, концентрация гемоглобина, гематокрит относительно контроля (табл.1). Восстановление этих показателей до контрольного уровня происходило лишь к 7 сут. Выраженная нейтропения (количество нейтрофилов снижалось под действием цитостатика в 5,3 раза относительно контроля) наблюдалась на 4 сут после применения паклитаксела и сохранялась до 7 сут.
Если цитостатик сочетали с введением полисахаридов мать-и-мачехи, то такие показатели как концентрация гемоглобина, количество эритроцитов и гематокрит восстанавливались и достигали уровня контрольных значений уже к 4 сут наблюдения. Нейтропения, вызываемая паклитакселом, на 4 сут после его введения наблюдалась в группах комбинированного лечения, но к 7 сут у мышей, которым кроме цитостатика был проведен курс лечения полисахаридами мать-и-мачехи обыкновенной, количество нейтрофильных гранулоцитов значимо возрастало (в 2,7 раза) и превосходило таковое у леченных только паклитакселом мышей (табл.1).
Эксперименты по изучению корректорных свойств полисахаридов листьев мать-и-мачехи обыкновенной в отношении нейтрофилов по сравнению с известным стимулятором гранулоцитопоэза нейпогеном проводили на мышах-самках линии C57B 1/6 массой 19-20 г возрастом 3 мес. Карциному легких Льюис перевивали внутримышечно по 5 млн опухолевых клеток на мышь. Все мыши с карциномой легких Льюис были распределены на группы:
1. «Контроль» (n=5) - мыши, получавшие ежедневно в течение 12 сут по 0,1 мл ампульной воды для инъекций внутрибрюшинно.
2. «Паклитаксел» (n=5) - мыши, получавшие паклитаксел в дозе 32 мг/кг однократно на 8 сут развития опухоли.
3. «Паклитаксел + полисахариды мать-и-мачехи» (n=5) - мыши, получавшие паклитаксел однократно в дозе 32 мг/кг внутрибрюшинно на 8 сут развития опухоли и полисахариды мать-и-мачехи в дозе 20 мг/кг, начиная с 6 сут развития опухоли (12 введений).
4. «Паклитаксел + Нейпоген» (n=5) - мыши, получавшие паклитаксел в дозе 32 мг/кг однократно внутрибрюшинно на 8 сут развития опухоли и нейпоген в дозе 30 мкг/кг в 5% растворе глюкозы подкожно 5 введений, начиная со следующего дня после введения паклитаксела. На 4 и 7 сутки после введения паклитаксела у мышей из хвостовой вены собирали периферическую кровь и проводили подсчет общего количества лейкоцитов и лейкоцитарной формулы общепринятыми методами [4].
При использовании паклитаксела в дозе 32 мг/кг (табл.2) в однократном режиме у мышей с опухолью на 4 сут после введения цитостатика наблюдалась лейкопения, количество лейкоцитов снижалось 2,0 раза (Р 0,01) относительно нелеченых мышей. В этот же срок наблюдения у животных с опухолью, получавших паклитаксел, абсолютное количество нейтрофилов падало в 15,5 раз (Р 0.01) по сравнению с контрольной группой. К 7 сут после введения паклитаксела у мышей наблюдалось восстановление общего числа лейкоцитов до контрольного уровня. Однако в этот срок численность нейтрофильных гранулоцитов не достигла исходных значений и была достоверно ниже контрольного уровня (в 1,3 раза). Если в схему лечения цитостатиком добавляли полисахариды мать-и-мачехи обыкновенной, количество сегментоядерных нейтрофилов уже к 4 сут возрастало в 4,0 раза (Р 0,01), а к 7 сут превосходило в 1,9 раза (Р 0,01) таковое в группе леченых только цитостатиком мышей. Хотя эффект нейпогена в отношении лейкоцитов был более выражен, стоит отметить, что полисахариды мать-и-мачехи обыкновенной не вызывали чрезмерного повышения численности клеток белой крови (в отличие от нейпогена), эффект полисахаридов был достаточен, чтобы достичь физиологической нормы и обеспечить защиту организма от развития инфекций и осложнений, связанных с угнетением кроветворения под влиянием паклитаксела.
Таким образом, гематотоксичность паклитаксела в эксперименте на мышах с карциномой легких Льюис снижалась при совместном с ним применении полисахаридов листьев мать-и-мачехи обыкновенной.
Полисахариды из листьев мать-и-мачехи обыкновенной являются перспективными в плане создания на их основе препаратов-корректоров цито-статической терапии.
Литература
1. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15 изд., М.: РИА «Новая волна», 2008. - 1206 с.
2. Фармакология: учебник. - 10-е издание. - М.: ГЭОТАР - Медиа, 2008. - 752 с.
3. Гублер Е.В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. - Л.: Медицина, 1978. - 193 с.
4. Гольдберг Е.Д., Дыгай A.M., Шахов В.П. Методы культуры ткани в гематологии. - Томск: Изд-во Томского Университета, 1992 - 264 с.
Таблица 1 | ||||||||
Влияние полисахаридов из листьев мать-и-мачехи обыкновенной на показатели периферической крови у мышей с карциномой легких Льюис на фоне применения паклитаксела | ||||||||
Группа | Гемоглобин, г/л | Эритроциты, 1012/л | Гематокрит, % | Нейтрофилы сегментоядерные, 109/л | ||||
4 сут | 7 сут | 4 сут | 7 сут | 4 сут | 7 сут | 4 сут | 7 сут | |
1. Контроль | 145,2±14,2 | 128,0±13,8 | 8,3±0,8 | 7,7±0,9 | 33,9±3,3 | 32,4±3,6 | 4,4±0,2 | 2,9±0,3 |
2. Паклитаксел | 113,4±4,0 | 163,2±15,2 | 6,6±0,31 | 10,2±1,0 | 27,3±1,5 | 43,4±4,5 | 0,8±0,1 | 2,2±0,3 |
1-2P 0,05 | 1-2P<0,05 | 1-2P±0.01 | 1-2P 0,05 | |||||
3. Паклитаксел + полисахариды мать-и-мачехи | 149,0±12,0 | 190,6±16,8 | 8,9±0,9 | 12,11±1,1 | 36,6±3,7 | 50,7±4,6 | 0,7±0,2 | 5,9±0,4 |
2-3P 0,05 | 2-3P 0,05 | 1-5 0,05 | 2-5P 0,05 | 1-5P 0,05 | 2-3P 0,01 | |||
Примечание. Здесь и далее перед уровнем значимости P указаны номера сравниваемых групп |
Таблица 2 | ||||
Влияние полисахаридов из листьев мать-и-мачехи обыкновенной и нейпогена на количество нейтрофилов периферической крови у мышей с карциномой легких Льюис на фоне применения паклитаксела | ||||
Группа | Общее количество лейкоцитов, 109/л | Нейтрофилы сегментоядерные, 109/л | ||
4 сут | 7 сут | 4 сут | 7 сут | |
1. Контроль | 13,0±0,8 | 15,6±1,1 | 3,1±0,4 | 4,8±0,3 |
2. Паклитаксел | 6,4±0,4 | 15,9±1,4 | 0,2±0,1 | 3,7±0,5 |
1-2P 0,01 | 1-2P 0,01 | 1-2P 0,05 | ||
3. Паклитаксел + полисахариды мать-и-мачехи | 6,5±0,5 | 17,5±2,19 | 0,8±0,3 | 7,1±1,1 |
2-3P 0,05 | 2-3P 0,05 | |||
4. Паклитаксел + нейпоген | 121±1,2 | 30,6±6,9 | 2,3±0,6 | 10,6±2,3 |
2-4P 0,01 | 2-4P 0,01 | 2-4P 0,05 | 2-4P 0,01 |
Класс A61K36/28 Asteraceae или Compositae (семейство сложноцветных), например ромашка, девичья трава (пиретрум), тысячелистник или эхинацея
Класс A61P43/00 Лекарственные средства для специфических целей, не указанные в группах 1/00