способ лечения хронического остеомиелита у животных

Формула изобретения

Способ лечения хронического остеомиелита у животных путем осуществления традиционной комплексной терапии, включающей иммуностимулирующий препарат-корректор интерферонового статуса, отличающийся тем, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живой массы на курс лечения.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к способам иммунотерапии заболеваний, протекающих со снижением иммунного статуса, конкретно к способам лечения больных хроническим остеомиелитом животных.

Известен способ лечения больных хроническим остеомиелитом (патент № 2073514), включающий введение антибактериальных и десенсибилизирующих средств, витаминов, анаболов с дополнительным введением до и после операции ксимедона по 0,5 г 4 раза в день в течение 20 суток и последующим повторением курсов лечения через 6 месяцев на протяжении 1,5 лет.

Недостатками данного способа являются длительный курс лечения (до 20 суток) и необходимость проведения повторных курсов лечения данным препаратом через 6 месяцев на протяжении 1,5 лет.

Известен способ лечения остеомиелита (прототип - патент РФ на изобретение № 2152214), включающий иммуностимулирующие препараты, согласно которому корригируют интерфероновый статус введением индукторов интерферона класса неовир, циклоферон в дозе 500-1600 мг на курс лечения. Данные стимуляторы интерферонообразования вводят с момента поступления больного внутримышечно через день курсом 5-7 инъекций в дозе 4-6 мг/кг, в итоге курс лечения по длительности составляет 14 суток.

Недостатками данного способа являются длительный курс лечения (до 14 суток) и необходимость проведения повторного курса лечения при существенном снижении интерферонового статуса.

Технической задачей является сокращение сроков лечения, устранение необходимости в проведении повторных курсов терапии.

Техническая задача достигается способом лечения хронического остеомиелита у животных путем осуществления традиционной комплексной терапии, включающей иммуностимулирующий препарат-корректор интерферонового статуса, отличающийся тем, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живого веса.

Отличие предлагаемого изобретения от прототипа состоит в том, что дополнительно индуцируют рост, деление и активность Т- и В-лимфоцитов иммунной системы введением ронколейкина на 1, 2, 3 и 6 сутки терапии в нормативной дозе 20 тыс.МЕ/кг живого веса.

Способ осуществляют следующим образом.

Проводят традиционную комплексную терапию, включающую санацию гнойного очага, его дренирование, антибактериальную, дезинтоксикационную, десенсибилизирующую и антиоксидантную терапию, одновременно проводят стимуляцию иммунитета: коррекцию интерферонового статуса, дополнительное индуцирование роста, деления и активности Т- и В-лимфоцитов путем введения ронколейкина в дозе 80 тыс.МЕ/кг живого веса на курс лечения. При этом вводят с момента поступления больного животного внутримышечно или подкожно на 1, 2, 3 и 6 сутки по 20 тыс.ME на 1 кг живого веса.

Препарат обладает иммунокоррегирующими свойствами, направленными на осуществление противобактериального иммунитета, процессов восстановления поврежденных тканей, а при стойком иммунодефиците действует как иммунореабилитатор. Ронколейкин как стимулятор интерферонообразования, фактор роста, деления и активности Т-, В-лимфоцитов, использован в комплексном лечении 10 экспериментально больных кроликов с хроническим остеомиелитом. Проведен сравнительный анализ эффективности лечения с 10 экспериментально больными хроническим остеомиелитом кроликами, вкомплексном лечении которых применялся циклоферон по методу прототипа. Остеомиелит моделировали по методике Кошкина В.И., Нагибина В.И. (1970 г.) на 3-4-месячных кроликах породы «Нидерландская красная», массой 3,5-4,0 кг, подобранных по принципу аналогов. Модель основана на факторе длительного раздражения костного мозга и микробной флоры, которая бы длительное время находилась в месте введения и не могла бы быстро распространяться по кровяному руслу. В качестве инфекционного агента использовали однодневную культуру золотистого стафилококка. Кролика фиксировали к столу в положении лежа на спине. После удаления шерсти область нижней трети диафиза большеберцовой кости обрабатывали 10% раствором настойки йода. Под общей и местной анестезией на внешней поверхности нижней трети диафиза голени производили продольный разрез кожи длиной 2 см. Мышцы тупо раздвигали по ходу волокон до кости, надкостницу продольно рассекали и сдвигали в сторону. В отличие от вышеуказанной модели в освобожденной костной площадке проводили перфорацию кости не перфоратором, а спицей Киршнера, проходя первый кортикал до костномозгового канала. Также сочли излишним использование капроновой губки в качестве депонирующего элемента для бактериального агента. Микробную взвесь вводили непосредственно в костный канал шприцем. Отверстие в кости не пломбировали. Модель развивалась в течение 1-1,5 месяца. Все животные хорошо переносили моделирование, оставались подвижными. При наружном осмотре животные щадили пораженную конечность. Пальпаторное обследование обнаруживало плотный инфильтрат.К 30-45 суткам после заражения рентгенологически отмечали появление периостальных наслоений, очагов просветления в месте введения патогенного агента, в метафизе большеберцовой кости деструктивную полость с нечеткими контурами, имеющую округлую форму и окруженную склерозированной костной тканью, ослабление четкости рисунка кости, экзастозы. При иммунологическом исследовании у больных остеомиелитом животных выявлены глубокие нарушения в иммунной системе (таблица № 1).

Таблица № 1
Иммунологические показатели в процессе моделирования хронического остеомиелита у кроликов
Срок моделирования	Показатели
Содержание -ИНФ, (пг/мл)	Содержание Т-лимфоцитов, (%)	Содержание В-лимфоцитов, (%)
До начала моделирования	М-19,14	М-37,3	М-13,1
m-1,32	m-1,20	m-1,12
К концу моделирования (к 45 суткам)	М-8,94	М-23,4	М-9,2
m-1,03	m-0,23	m-0,13

Как видно из таблицы 1, количество Т-лимфоцитов в периферической крови экспериментальных животных к 45 суткам достоверно ниже (23,4%), чем до экспериментального моделирования (37,3%). В процессе экспериментального моделирования наблюдалась тенденция к стойкому снижению В-лимфоцитов. Так, до заражения их процент в среднем составлял 13,1, а уже к 45-м суткам болезни - 9,2. Уровень -ИНФ ( -интерферон) перед экспериментальным моделированием составлял 19,14 пг/мл, а к 45-м суткам после операции резко снизился до 8,94 пг/мл. По данным иммунологических показателей, все кролики нуждались в иммунной реабилитации.

После окончания курса лечения экспериментально больных животных хроническим остеомиелитом кроликов по предлагаемому способу и по способу прототипа у кроликов, которым вводился ронколейкин, наблюдалось более благоприятное течение процесса по сравнению с группой, которой вводили циклоферон. Оно выражалось в ранней нормализации температуры, исчезновении рентгенологических признаков воспаления, развитии грануляционной ткани. Клиническое улучшение подтверждается данными лабораторных исследований, приведенных в таблице № 2.

Таблица № 2
Иммунологические показатели у кроликов в процессе их лечения по предлагаемому способу и по способу прототипа
Срок лечения	Показатели
Содержание -ИНФ, (пг/мл)	Содержание Т-лимфоцитов, (%)	Содержание В-лимфоцитов, (%)
по предлагаемому способу	по прототипу	no предлагаемому способу	по прототипу	no предлагаемому способу	по прототипу
До начала лечения	М-8,94	M-8,94	М-23,4	M-23,4	М-9,2	М-9,2
m-1,03	m-1,03	m-0,23	m-0,23	m-0,13	m-0,13
На 1 сутки лечения	М-8,95	M-8,93	М-23,5	M-23,4	М-9,3	М-9,2
m-1,11	m-0,12	m-0,27	m-0,42	m-0,03	m-0,15
На 2 сутки лечения	М-16,93	М-10,83	М-25,4	M-23,7	М-10,1	М-9,2
m-0,96	m-1,17	m-0,13	m-0,17	m-0,15	m-0,23
На 3 сутки лечения	М-25,28	М-12,72	М-28,8	M-24,1	М-12,62	М-9,3
m-1,01	m-1,01	m-1,01	m-1,03	m-0,32	m-0,18
На 4 сутки лечения	М-25,29	М-14,61	М-28,8	M-24,4	М-14,3	М-9,3
m-1,03	m-0,89	m-0,23	m-1,18	m-0,65	m-0,56
На 5 сутки лечения	М-23,87	М-16,51	M-26,1	M-24,7	М-12,9	М-9,4
m-1,19	m-1,05	m-1,14	m-0,65	m-1,12	m-0,6
На 6 сутки лечения	М-23,85	M-20,29	M-26,4	M-24,9	М-13,0	М-9,6
m-0,94	m-1,11	m-0,31	m-0,23	m-0,01	m-0,47
На 7 сутки наблюдения (через 6 суток от начала лечения)	M-28,18	М-20,32	M-29,3	M-25,1	М-14,8	М-9,6
m-1,74	m-1,07	m-1,42	m-0,87	m-1,12	m-1,04
На 8 сутки наблюдения (через 7 суток от начала лечения)	M-28,13	М-21,06	M-29,7	M-25,3	М-14,5	М-9,5
m-0,94	m-0,74	m-1,12	m-1,17	m-0,95	m-1,24
На 9 сутки наблюдения (через 8 суток от начала лечения)	M-28,15	M-21,86	M-29,9	M-25,6	М-14,6	М-9,6
m-0,91	m-1,02	m-1,08	m-0,82	m-0,82	m-0,14
На 10 сутки наблюдения (через 9 суток от начала лечения)	M-28,20	М-22,61	M-29,8	M-25,9	М-14,7	М-9,6
m-1,06	m-0,57	m-0,85	m-1,25	m-1,04	m-0,84
Через 14 суток от начала лечения	М-28,86	M-27,02	M-32,14	M-26,3	М-17,6	М-9,6
m-1,94	m-1,17	m-1,59	m-0,76	m-1,43	m-0,68
Через 20 суток после курса лечения	М-28,03	M-25,63	M-39,6	M-20,6	M-22,3	М-8,8
m-1,87	m-1,24	m-1,64	m-0,87	m-1,18	m-0,07

Иммунологические показатели уровня -ИНФ, Т- и В-лимфоцитов, представленные в таблице 2, свидетельствуют о том, что за первые трое суток введения происходит накопление препарата в крови, который провоцирует клетки организма к выработке -интерферона, Т- и В-лимфоцитов. Затем на 4 и 5 сутки уровень -интерферона, Т- и В-лимфоцитов остается практически без изменений, поэтому нет необходимости ежедневного введения препарата. Тем не менее, на 5-е сутки уровень -интерферона Т- и В-лимфоцитов несколько уменьшается, поэтому на 6-е сутки снова вводится ронколейкин. А после истечения 6-х суток, кроме нормализации иммунологических показателей, наблюдается улучшение состояния животных по клиническим признакам и стойкий терапевтический эффект в течение последующих суток наблюдения без регистрации случаев возникновения рецидивов.

Из таблицы 2 также видно, что применение препарата-корректора ронколейкина в комплексном лечении хронического остеомиелита через 6 суток курса терапии приводит к достоверному повышению в 1,3 раза уровня Т-лимфоцитов в периферической крови группы больных животных, леченных по предлагаемому способу. У больных животных, которым ронколейкин не применялся, а вводился циклоферон, через 6 суток лечения повышение Т-лимфоцитов было минимальным (в 1,1 раза). Через 6 суток от начала лечения наблюдалось увеличение количества В-лимфоцитов в 1,6 раза у кроликов, в комплексном лечении которых применялся ронколейкин, и практически не изменилось у экспериментальных животных, которым инъецировали циклоферон. Так, процент Т-лимфоцитов на 20-е сутки после окончания курса терапии составил 39,6 в крови кроликов, лечение которых проводилось по предлагаемому способу, и 20,6 - в крови кроликов группы сравнения. Относительное содержание В-лимфоцитов к этому же периоду составило 22,3 и 8,8% соответственно. Изменения в клеточном звене иммунитета кроликов, леченных по методу прототипа, позволяют выявить недостаточное функционирование иммунной системы. По окончании курса терапии по предлагаемому способу у экспериментально больных кроликов через 6 суток содержание -ИНФ увеличилось в 3 раза, в то время как у кроликов, леченных по методу прототипа, содержание -ИНФ увеличилось в 3 раза только через 14 суток. Кроме того, у животных, которым применялся ронколейкин, в отдаленном периоде (к 20-м суткам) после окончания курса терапии показатель -ИНФостался на высоком уровне, в то время как в группе кроликов, которым применялся циклоферон, произошло его снижение в 1,2 раза.

Сохранение показателя -ИНФ на высоком уровне свидетельствует о достижении стойкого клинического эффекта, что исключает необходимость в проведении повторных курсов терапии. Предложенный способ сокращает сроки лечения с 14 до 6 дней (таблица № 3).

Таблица № 3
Сравнительные показатели продолжительности курса лечения по предлагаемому способу и по способу-прототипу
Показатель	По прототипу	По предлагаемому способу
Продолжительность курса лечения (сутки)	14	6

В качестве примера проводим следующее клиническое наблюдение. Кролик № 5, 4 мес., породы «Нидерландская красная», массой 3,5 кг. Диагноз - хронический остеомиелит нижней трети диафиза большеберцовой кости. Состояние животного средней тяжести. Наблюдается вялость, плохой аппетит, бледность слизистых оболочек и кожи на непигментированных участках тела животного. При наружном осмотре животное щадит пораженную конечность, при движении отмечается хромота. При пальпации отмечается резкая болезненность. Температура тела - 39,9°С. В анализе крови: эритроциты 4.9×10 ¹²/л, гемоглобин 89 г/л, лейкоциты 12,6×10⁹ /л со сдвигом ядра влево, СОЭ 8 мм/ч. Содержание -ИНФ 8,3 пг/мл, относительное содержание Т-лимфоцитов 21%, В-лимфоцитов 8%. Температура кожи в области поражения выше на 1,5°С по сравнению с симметричным участком. При рентгенологическом исследовании отмечен в метафизе большеберцовой кости очаг деструкции с нечеткими границами, вокруг которого располжена склерозированная костная ткань, в области поражения наблюдается нечеткость границ кортикального слоя кости, имеются зоны расслоения и экзастозы. Проводилась традиционная комплексная терапия: внутримышечное введение цефазолина, витаминотерапия. Проведен курс иммунокорректора ронколейкина по 70 тыс.ME внутримышечно на 1, 2, 3 и 6 сутки, 4 инъекции. Курсовая доза составила 280 тыс.ME. На вторые сутки после введения ронколейкина температура тела снизилась, достигнув нормального значения. Через 6 суток от начала лечения состояние больного животного удовлетворительное, хромота отсутствует, животное подвижно, охотно потребляет корм и воду. Температура кожи на симметричных участках одинаковая. В анализе крови: эритроциты 7,4×10¹²/л, гемоглобин 110 г/л, лейкоциты 8,1×10 ⁹/л, СОЭ 1,5 мм/ч. Содержание -ИНФ 27,8 пг/л, Т-лимфоцитов 26%, В-лимфоцитов 14%. Контрольное обследование проводили на 20-е сутки после окончания курса терапии. На контрольной рентгенограмме выявили исчезновение признаков воспаления, заполнение деструктивной полости молодыми грануляциями, четкость рисунка кости. В анализе крови: эритроциты 7,8×10 ¹²/л, гемоглобин 125 г/л, лейкоциты 6,1×10⁹ /л, СОЭ 1,5 мм/ч. Уровень -ИНФ составил 27,9 пг/л, Т-лимфоцитов 37%, В-лимфоцитов 20%.

Результаты проведенных исследований позволяют сделать вывод, что использование ронколейкина в коррекции нарушений процессов костеобразования и иммунодепрессий является эффективным и может быть использован в клинике.