корректор системы гемостаза, проявляющий ингибирующее действие на адгезивно-агрегационную функцию тромбоцитов для профилактики патологического тромбообразования

Формула изобретения

Применение дигидрохлорида гидразида 2-[1-(тиетанил-3)бензимидазолил-2-тио]уксусной кислоты формулы



в качестве корректора системы гемостаза - ингибитора адгезивно-агрегационной функции тромбоцитов для профилактики патологического тромбообразования.

Описание изобретения к патенту

Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к фармакологии, и может быть использовано для получения веществ, обладающих ингибирующим действием на адгезивно-агрегационную функцию тромбоцитов.

Известен пентоксифиллин (трентал) в качестве средства, подавляющего агрегацию тромбоцитов (Государственный реестр лекарственных средств. - М. - 2004. - т.2. - с.1141-1142). Клинические исследования свидетельствуют о способности пентоксифиллина оказывать выраженное положительное влияние на гемодинамику вследствие вазодилатации и усиление коллатерального кровообращения и на состояние микроциркуляции, главным образом за счет повышение деформируемости эритроцитов (Reilly DT, Quinton DN, Barrie WW. A controlled trial of pentoxifylline (Trental 400) in intermittent claudication: clinical, haemostatic and rheological effects. N Z Med J.. 1987; 100:445-447. Dettori AG, Pini M, Moratti A, Paolicelli M, Basevi P, Quintavalla R, Manotti C, Di Lecce С Acenocoumarol and pentoxifylline in intermittent claudication: a controlled clinical study: the APIC study group.Angiology. 1989; 40 (pt 1):237-248.), что ограничивает его применение в качестве эффективных и избирательно подавляющих агрегацию тромбоцитов средств.

Прототипом изобретения является ацетилсалициловая кислота, уменьшающая агрегацию, адгезию тромбоцитов и тромбообразование и широко применяемая в качестве профилактического антитромботического средства (Государственный реестр лекарственных средств. - М. - 2004. - т.2. - с.142-145).

Задачей изобретения является расширение арсенала средств для профилактики патологического тромбообразования.

Технический результат - получение биологически активного вещества, обладающего профилактическими средствами и препятствующего тромбообразованию, проявляющего тромболитическую активность.

Сущность изобретения: применение дигидрохлорида гидразида 2-[1-(тиетанил-3)бензимидазолил-2-тио]уксусной кислоты (соединение 1) в качестве корректора системы гемостаза, проявляющего ингибирующее действие на адгезивно-агрегационную функцию тромбоцитов (синтез соединения 1 описан: Ф.А.Халиуллин, Е.К.Алехин, Е.Э.Клен, Л.А.Рябчинская, В.А.Катаев, А.Ш.Богданова. «Синтез и иммунотропная активность производных (бензимидазолил-2-тио) уксусных кислот, содержащих тиетановый цикл» // ХФЖ Т.35 № 1 2001, с.12-15).

Исследование антиагрегационной активности и дезагрегационного эффекта проводили in vitro по методу Вrn в модификации O'Brien (Вrn G.V.R " Aggregation of blood platelets by adenosine diphosphate and its reversal". // Nature - 1962 - Vol.194 4832 - p.924-929) на агрегометре "Thromlite-1006А" на донорской крови человека. Метод основан на регистрации изменения оптической плотности богатой тромбоцитами плазмы до и после введения определенного количества индуктора агрегации тромбоцитов. В качестве индуктора агрегации использовали аденозиндифосфат (АДФ) в концентрации 20 мкМ.

В качестве препарата сравнения использовалась ацетилсалициловая кислота (АСК), в связи с широким применением в качестве профилактического антитромботического средства (лидирующее место по «частоте назначаемости» в мире), доступностью и экономичностью, достаточной эффективностью, доказанной многочисленными фундаментальными и клиническими (AITIA, CCS, AICLA, ESPS, ACCS, SPAF, DTT и др.) исследованиями (Машковский М.Д. Лекарственные средства // М: Медицина, 2000. - Т.1, с.122. Антитромбоцитарная терапия ацетилсалициловой кислоты (Пер. с англ.)/ Под ред. Руды М.Я. // М.: Химические свойства, 1999. - Руды М.Я. - 345 с.). Клинические исследования свидетельствуют о способности пентоксифиллина оказывать выраженное положительное влияние на гемодинамику вследствие вазодилатации и усиление коллатерального кровообращения и на состояние микроциркуляции, главным образом за счет повышения деформируемости эритроцитов (Reilly DT, Quinton DN, Barrie WW. A controlled trial of pentoxifylline (Trental 400) in intermittent claudication: clinical, haemostatic and rheological effects. N Z Med J.. 1987; 100:445-447. Dettori AG, Pint М, Moratti A, Paolicelli М, Basevi P, Quintavalla R, Manotti C, Di Lecce С Acenocoumarol and pentoxifylline in intermittent claudication: a controlled clinical study: the APIC study group.Angiology. 1989; 40 (pt 1):237-248.), что ограничивает его применение в качестве эффективных и избирательно подавляющих агрегацию тромбоцитов средств. Согласно литературным данным, АСК in vitro и in vivo проявляет исключительно антиагрегатное действие, способность вызывать дезагрегацию тромбоцитарных агрегатов незначительна, а данные о неэффективности АСК у определенной категории пациентов (Е.И.Киношенко. Аспирин при ишемической болезни сердца: зачем, когда, сколько? // Вестник новых медицинских технологий - 1999 - Т.VI, № 3-4. Баркаган З.С. Плюсы и минусы профилактического и лечебного применения аспирина при коронарной болезни сердца. В кн: Прогресс и проблемы в лечении заболеваний сердца и сосудов. Материалы юбилейной конф. Санкт-Петербургского университета // СПб.; 1997. 7-8. Баркаган З.С. Основы контролируемой антитромботической терапии в пожилом и старческом возрасте // Клиническая геронтология Т.9 № 5 2003) свидетельствует о необходимости поиска новых корректоров системы гемостаза.

Пример 1. Влияние соединения 1 на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов Оценивали степень снижения АДФ-индуцированной агрегации при предварительной 5-минутной инкубации вещества в обогащенной тромбоцитами плазме. Изучение зависимости эффекта от концентрации (таблица 1).

По результатам исследования установлено, что введение 10 ^-3 М вещества в кювету агрегометра за 5 мин до индуктора приводит к подавлению агрегации тромбоцитов в среднем на 53,147% относительно контроля. Полученные агрегаты быстро распадаются: через 2 мин после ввода АДФ - 19,0%, а через 5 мин - уже 57,4% первоначально существующих агрегатов. 50% тромбоцитарных агрегатов распадается в течение 3,5 мин после достижения максимума агрегации. При изучении зависимости эффекта от концентрации установлено, что ЕС₅₀ соответствует 10^-4 М/л.

Пример 2. Влияние соединения 1 на дезагрегацию тромбоцитов

Дезагрегационный эффект рассчитывали в % распавшихся тромбоцитарных агрегатов после ввода соединения 1 через 5 мин после АДФ (таблица 2).

Введение соединения 1 на высоте АДФ-индуцированной агрегации в течение 5 мин приводит к дезагрегации в среднем 15,2% первоначально существующих агрегатов тромбоцитов, что превышает показатели АСК.

Таблица 1
Влияние соединения 1 на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов
Группа	Конц., М/л	Подавление АДФ-индуцированной агрегации тромбоцитов, в % к контролю
Соединение 1	10 -3	53,147±7,76*
10-4	50,0±3,18*
10-5	49,0±4,72*
АСК	10-3	56,0±1,95*
Примечание: * - отличие от контроля достоверно (р<0,05);

Таблица 2
Влияние соединения 1 на дезагрегацию тромбоцитов
Группа	Конц., М/л	% распада тромбоцитарных агрегатов к контролю
Соединение 1	10 -3	15,2±3,6*
АСК	10-3	-
Примечание: * - отличие от контроля достоверно (р<0,05);