способ определения предрасположенности к заболеваниям зависимости

Формула изобретения

1. Способ определения предрасположенности к заболеваниям зависимости, характеризующийся тем, что в сыворотке крови определяют естественные антитела к опиоидным пептидам методом иммуноферментного анализа, включающим инкубацию анализируемой пробы с коньюгатом гаптен: макромолекулярный носитель, иммобилизованным на твердой фазе, последующую инкубацию образовавшегося иммунного комплекса с коньюгатом антител против иммуноглобулинов класса М и G человека, меченных ферментом, при этом в качестве коньюгата используют конъюгат, в котором гаптен относится к группе опиоидных пептидов, а макромолекулярный носитель имеет белковую или полимерную природу, после чего рассчитывают индекс предрасположенности путем деления разницы показателя оптической плотности анализируемого образца и среднего по группе значения показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров на среднее по группе значение показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров и при абсолютном значении индекса больше 0,25 определяют высокую предрасположенность к заболеваниям зависимости.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве опиоидного пептида используют соединение из ряда -эндорфин, дерморфин, энкефалин.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что макромолекулярный носитель выбран из ряда поли- или олигоакрилатов, полилизинов или альбумина.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что для увеличения точности определения дополнительно в сыворотке крови определяют естественные антитела к биогенным аминам или пептидам ренин-ангиотензиновой системы методом иммуноферментного анализа, включающим инкубацию анализируемой пробы с коньюгатом гаптен: макромолекулярный носитель, иммобилизованным на твердой фазе, последующую инкубацию образовавшегося иммунного комплекса с коньюгатом антител против иммуноглобулинов класса М и G человека, меченных ферментом, при этом в качестве коньюгата используют конъюгат, в котором гаптен относится к группе биогенных аминов, а макромолекулярный носитель имеет белковую или полимерную природу, после чего рассчитывают индекс предрасположенности путем деления разницы показателей оптической плотности анализируемого образца и среднего по группе значения показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров на среднее по группе значение показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров и при абсолютном значении индекса больше 0,25 определяют высокую предрасположенность к заболеваниям зависимости.

5. Способ по п.4, отличающийся тем, что в качестве биогенного амина используют соединение из ряда серотонин, дофамин, норадреналин, адреналин или гистамин.

6. Способ по п.4, отличающийся тем, что в качестве пептида ренин-ангиотензиновой системы используют соединение из ряда ангиотензин II, брадикинин, вазопрессин.

7. Способ по п.4, отличающийся тем, что макромолекулярный носитель выбран из ряда поли- или олигоакрилатов, полилизинов или альбумина.

8. Способ по любому из пп.1-7, отличающийся тем, что в случае получения положительного значения разницы показателя оптической плотности анализируемого образца и среднего по группе значения показателя оптической плотности образцов крови здоровых доноров определяют предрасположенность к наркотической зависимости или ожирению.

9. Способ по любому из пп.1-6, отличающийся тем, что в случае получения отрицательного значения разницы показателя оптической плотности анализируемого образца и среднего по группе значения показателя оптической плотности образцов крови здоровых доноров определяют предрасположенность к наркотической зависимости или ожирению.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины и может быть использовано с целью выявления лиц с высоким риском развития предрасположенности к заболеваниям зависимости.

В настоящее время в мире отмечено увеличение числа людей с различной формой заболевания зависимости, с проявлением клиники патологического влечения к употреблению лекарственных препаратов, наркотиков, алкоголя, азартным играм, продуктам питания и т.д. Эти люди нуждаются в своевременной диагностике и оказании лечебно-реабилитационной помощи.

Болезни зависимости относят к нейрохимическим патологиям. Их развитие сопровождается нарушением взаимодействия центральной нервной и иммунной системы.

Одной из основных нейрофизиологических предпосылок высокой мотивации потребления психоактивных (ПАВ) веществ является врожденная недостаточность активности "системы награды" мозга, обусловленная, главным образом, дефицитом дофаминовой нейромедиаторной системы [Анохина И.П., Векшина Н.Л., Вертинская А.Г. Центральные механизмы предрасположенности к зависимости от психоактивных веществ. // Журн. невропатологии и психиатрии им. С.С.Корсакова. 1997. Т.97. № 12. С.83] [Анохина И.П., Вертинская А.Г., Векшина Н.Л. и др. Наследственный алкоголизм: некоторые нейрохимические механизмы. // Вести. РАМН, 1999. № 6. С.43].

На первой стадии человек не подозревает о заболевании, у него есть только мотивация повысить настроение, т.е. запустить механизм выброса эндогенных опиоидов, серотонина и других биорегуляторов. Эти медиаторы являются участниками основных биохимических процессов, в регуляции которых принимает участие нервная и иммунная системы. Известно, что в механизме формирования зависимости от психоактивного, токсического вещества ведущая роль принадлежит медиаторам именно опиоидной и катехоламиновой систем.

Каждый психоактивный препарат имеет свой фармакологический спектр действия. Однако у всех веществ, способных вызвать синдром зависимости, имеется общее звено фармакологического действия - это характерное влияние на катехоламиновую (КА) нейромедиацию в лимбических структурах мозга, в частности в системе подкрепления.

Воздействие ПАВ приводит к интенсивному выбросу из депо в этих отделах мозга нейромедиаторов из группы КА, в первую очередь дофамина (ДА), а следовательно - к значительно более сильному возбуждению системы подкрепления. Такое возбуждение нередко сопровождается положительно окрашенными эмоциональными переживаниями. Свободные КА подвергаются действию ферментов метаболизма и быстро разрушаются. Повторные приемы ПАВ приводят к истощению запасов нейромедиаторов, что проявляется недостаточно выраженным возбуждением системы подкрепления при поступлении "нормального" импульса. Психофизически у человека это выражается падением настроения, ощущением вялости, слабости, переживаниями скуки, эмоционального дискомфорта, депрессивными симптомами. Прием ПАВ на этом фоне вновь вызывает дополнительное высвобождение нейромедиаторов из депо, что временно компенсирует их дефицит в синаптической щели и нормализует деятельность лимбических структур мозга. Этот процесс сопровождается субъективным ощущением улучшения состояния, эмоциональным и психическим возбуждением и т.д. Однако свободные КА быстро разрушаются, что приводит к дальнейшему падению их содержания, ухудшению психоэмоционального состояния и соответственно к стремлению вновь использовать ПАВ.

Ранняя диагностика таких состояний очень важна, т.к. помимо всего эти заболевания имеют социальный аспект.

Известен способ определения предрасположенности к формированию опиатной зависимости, в котором определяют in vitro концентрацию циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) при тестовой нагрузке морфином в сочетании с налоксоном в нативных и в нативных предварительно морфинизированных мононуклеарных клетках периферической крови, рассчитывают индекс предрасположенности путем деления значения концентрации цАМФ в нативных предварительно морфинизированных на ее значение в нативных мононуклеарных клетках и при значении индекса более 1,3 определяют высокую предрасположенность к формированию опиатной зависимости (RU 2177157 C1, МКИ 7 G01N 33/68, опуб.2001.12.20).

Этот способ имеет высокую точность, однако сложен и определяет лишь опиатную зависимость.

Из уровня техники известен способ прогнозирования риска возникновения аддитивных, компульсивных и импульсивных расстройств в форме алкоголизма, ожирения и табакокурения путем молекулярно-генетического исследования гена DRD2 (Pat. US 5550021, 27.08.1996).

Однако проведение медико-генетического исследования является длительным многозатратным процессом, требующим дорогостоящего оборудования и высокой квалификации специалистов.

Предлагаемое изобретение решает задачу поиска новых диагностических маркеров определения предрасположенности к заболеваниям зависимости и проведения более технологичной процедуры анализа.

Способ определения предрасположенности к заболеваниям зависимости характеризуется тем, что в сыворотке крови определяют естественные антитела к опиоидным пептидам методом иммуноферментного анализа, включающим инкубацию анализируемой пробы с коньюгатом гаптен: макромолекулярный носитель, иммобилизованным на твердой фазе, последующую инкубацию образовавшегося иммунного комплекса с коньюгатом антител против иммуноглобулинов класса М и G человека, меченных ферментом, при этом в качестве коньюгата используют конъюгат, в котором гаптен относится к группе опиоидных пептидов, а макромолекулярный носитель имеет белковую или полимерную природу, после чего рассчитывают индекс предрасположенности путем деления разницы показателя оптической плотности анализируемого образца и среднего по группе значения показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров на среднее по группе значение показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров и при абсолютном значении индекса больше 0,25 определяют высокую предрасположенность к заболеваниям зависимости.

В качестве опиоидных пептидов можно использовать соединение из ряда -эндорфин, дерморфин или энкефалин.

Макромолекулярный носитель выбран из ряда поли- или олигоакрилатов, полилизинов или альбумина.

Для увеличения точности определения дополнительно в сыворотке крови определяют естественные антитела к биогенным аминам или пептидам ренин-ангиотензиновой системы методом иммуноферментного анализа, включающим инкубацию анализируемой пробы с коньюгатом гаптен: макромолекулярный носитель, иммобилизованным на твердой фазе, последующую инкубацию образовавшегося иммунного комплекса с коньюгатом антител против иммуноглобулинов класса М и G человека, меченных ферментом, при этом в качестве коньюгата используют конъюгат, в котором гаптен относится к группе биогенных аминов, а макромолекулярный носитель имеет белковую или полимерную природу, после чего рассчитывают индекс предрасположенности путем деления разницы показателей оптической плотности анализируемого образца с аналогичными показателями контрольной пробы на показатель оптической плотности контрольной пробы и при абсолютном значении индекса больше 0,25 подтверждают высокую предрасположенность к заболеваниям зависимости.

В качестве биогенного амина можно использовать соединение из ряда серотонин, дофамин, норадреналин, адреналин или гистамин.

В качестве пептида ренин-ангиотензиновой системы можно использовать соединение из ряда ангиотензин II, брадикинин, вазопрессин.

Макромолекулярный носитель выбран из ряда поли- или олигоакрилатов, полилизинов или альбумина.

В случае получения положительного значения разницы показателя оптической плотности анализирумого образца и среднего по группе значения показателя оптической плотности образцов крови здоровых доноров определяют предрасположенность к наркотической зависимости или ожирению.

В случае получения отрицательного значения разницы показателя оптической плотности анализирумого образца и среднего по группе значения показателя оптической плотности образцов крови здоровых доноров определяют предрасположенность к наркотической зависимости или ожирению.

Техническим результатом, полученным при решении поставленной задачи, является разработка относительно недорогого и простого способа, реализуемого на оборудовании, доступного практически любой поликлиники, отличающейся высокой технологичностью с точностью безопасного объективного определения предрасположенности к заболеваниям широкого круга зависимости достигаемой 87%.

Способ осуществляют следующим образом.

Исследованы сыворотки крови. Для исследования у пациентов брали кровь из вены или из пальца в количестве от 0,2 до 0,5 мл. Забор крови проводили в динамике в 1-е, 3-и, 7-е, 21-е сутки для больных наркоманией и алкоголизмом. Для пациентов с игровой зависимостью кровь для анализа забирали в момент обращения к врачу.

Исследованные выборки. Исследовались 4 группы больных разных форм зависимости: больных опийной наркоманией со стажем употребления наркотиков от 0,5 до 5 лет (14 чел.), больных алкоголизмом со стажем употребления от 4 до 6 лет (11 чел.), больные с игровой зависимостью (14 чел.) со стажем заболевания от 1 до 3 лет, больные ожирением (24 чел.).

Контрольную группу составили 20 здоровых доноров.

Методы исследований.

Исследование выполняли по специально разработанной системе, включающей клинико-диагностическое, экспериментально-психологическое обследование. В ходе лечения осуществляли дезинтоксикационные мероприятия, купирование абстинентного синдрома, с нормализацией соматоневрологических нарушений и метаболизма, коррекцию психопатологических расстройств. В качестве инструмента исследования использовали гетерогенный твердофазный иммуноферментный анализ (ИФА). Процедура проведения ИФА традиционно включает стадии иммобилизации антигена на полистирольный планшет, инкубацию с анализируемым образцом сыворотке крови и детекцию образовавшихся иммунных комплексов. Для реализации первой стадии ИФА были получены конъюгированные антигены низкомолекулярных соединений с применением полимерной матрицы, выбранной из ряда поли- или олигоакрилатов (4-полинитрофенилакрилата), полилизинов или альбумина.

Использование этого приема позволяет полностью сохранить структуру исходных высоколабильных гаптенов.

Синтез конъюгированного антигена -эндорфина, дерморфина, энкефалина, серотонина, дофамина, норадреналина, адреналина, гистамина, ангиотензина II, брадикинина, вазопрессина на основе поли(4-нитрофенил)акрилата выполняли следующим образом. К раствору 6 мг (0,036 ммоль) поли(4-нитрофенил)акрилата в 1 мл ДМФА абс. добавляли указанные выше соединения в диапазоне концентраций от 0,036 ммоль до 0,009 ммоль. Выдерживали реакционную смесь в течение суток при температуре 20°С, затем добавляли для инактивации не прореагировавшего активированного эфира 5% раствор аммиака. Растворитель упаривали в вакууме. Оставшееся масло многократно промывали эфиром и растворяли в 1 мл ДМФА абс., оставляли на хранение при температуре минус 20°С.

Количество молей гаптена, связавшихся с полимерной матрицей, определяли спектрофотометрически по выделяющемуся в процессе реакции п-нитрофенолу. В синтезированных конъюгатах содержалось от 5 до 40 молей гаптена на моль полимерного носителя.

Панель антигенов включала эндогенные биорегуляторы, относящиеся к следующим классам - опиоидные пептиды: ( -эндорфин, дерморфин, энкефалин), биогенные амины: (серотонин, гистамин, дофамин, норадреналин, адреналин), пептиды ренин-ангиотензиновой системы (ангиотензин II, брадикинин, вазопрессин). С помощью ИФА определяли в сыворотке крови обследованных пациентов иммуноглобулины класса М и G (IgM, IgG), специфически реагирующие с конъюгированными антигенами вышеперечисленных эндогенных биорегуляторов.

Условия выполнения ИФА для выявления естественных антител к указанным выше соединениям, а также оценку получаемых результатов, проводили на основании стандартных критериев. Планшет сенсибилизировали раствором антигена (по 100 мкл в лунку) в диапазоне концентрации от 1 мкг/мл до 3 мкг/мл для серотонина, адреналина, норадреналина, от 0,5 мкг/мл до 4 мкг/мл для -эндорфина, энкефалина, от 0,1 мкг/мл до 2 мкг/мл для дофамина, дерморфина в 0.02 М карбонатном буфере (рН 9.5) в течение 18 часов при температуре 4°С.

После сорбции планшет отмывали трижды (3х100 мкл) 0.005% раствором твин-20 в забуференном физиологическом растворе (ЗФР), (рН 7.2) и вносили в лунки в двух повторах по 100 мкл исследуемой сыворотки в ЗФР, содержащем 0.01% твин-20, в разведении 1/200 для серотонина, дерморфина и дофамина и 1/100 для -эндорфина, энкефалина и адреналина, норадреналина. Планшет инкубировали в течение 1 часа при температуре 37°С.

После инкубации планшет отмывали, как описано выше, и добавляли в лунки по 100 мкл раствора антивидовых антител против IgM, IgG человека, меченных пероксидазой хрена в разведении 1/2000. Планшет инкубировали в течение 1 часа при температуре 37°С. Далее планшет промывали, как описано выше, и заполняли (по 100 мкл в лунку) субстратной смесью, содержащей 1/5 часть ТМБ и 0.4% Н₂О₂ в 0.05 М фосфатно-цитратном буфере. Планшет инкубировали в течение 10 минут в темноте. Затем останавливали ферментативную реакцию добавлением в лунки по 50 мкл 10% H ₂SO₄ и измеряли оптическую плотность (OD ₄₅₀) на спектрофотометре при длине волны 450 нм.

На основании результатов ИФА проводили анализ содержания иммуноглобулинов класса М(IgM) в индивидуальных сыворотках больных и здоровых доноров, определяя достоверное изменение уровня антител. За величину порогового уровня, разделяющего сыворотки доноров и больных, имеющих повышенный либо пониженный уровень антител к исследуемым антигенам, принимали значение OD₄₅₀ в ИФА, отличающееся от среднего значения OD₄₅₀ в ИФА для группы доноров, на величину трехкратного стандартного отклонения. Полученные данные обработали статистически по критерию Стьюдента.

В таблице 1 представлены результаты ИФА определения антител к серотонину, -эндорфину, дофамину в группе больных опиатной наркоманией и алкоголизмом, где *р<0,01 (в сравнении с донорами).

В таблице 2 представлены данные ИФА определения антител к серотонину, -эндорфину, дофамину у больных наркоманией в ходе проведения терапии, где *р<0,01 (в сравнении с донорами).

В таблице 3 представлены данные ИФА определения антител к серотонину, -эндорфину, дофамину у больных алкоголизмом в ходе проведения терапии, где *р<0,01 (в сравнении с донорами).

В таблице 4 представлены данные ИФА определения антител к эндогенным биорегуляторам у больных ожирением -эндорфину, дофамину, серотонину, гистамину и ангеотензину II, где *р<0,01 (в сравнении с донорами).

В таблице 5 представлены данные ИФА определения антител к -эндорфину, дофамину, серотонину у больных игроманией, где *р<0,01 (в сравнении с донорами).

В таблице 6 представлены сравнительные результаты ИФА антител к -эндорфину, дофамину, серотонину и определения уровня реабилитационного потенциала в группе больных игроманией.

В результате проведенных исследований выявлены естественные антитела (е-Ат), различающиеся как иммунохимическими свойствами, так и количественным содержанием у больных алкоголизмом и наркомании и доноров (таблица 1). Наличие е-Ат к дофамину и серотонину, относящихся к группе биогенных аминов, достоверно превышало норму у 91% и 87% больных наркоманией соответственно. В случае -эндорфина, относящегося к группе опиоидных пептидов, увеличение уровня е-Ат наблюдалось только у 62% пациентов этой группы. У оставшейся части больных наркоманией содержание е-Ат оставалось в пределах нормы. В группе больных алкоголизмом при определении естественных антител у 95% пациентов наблюдался специфический иммунодефицит, т.е. достоверное снижение уровня е-Ат по сравнению с нормой ко всем выбранным для исследования антигенам. При определении антител к ангиотензину вазопрессину, относящихся к группе пептидов ренин-ангиотензиновой системы, в сыворотке крови больных данной группы также была отмечена тенденция к изменению содержания е-Ат.

Полученные результаты выявляют различия при определении показателей гуморального иммунитета в обследованных группах, а именно в содержании естественных антител в крови больных алкоголизмом и наркоманией. Эти данные косвенным образом говорят и о концентрации самих эндогенных биорегуляторов, являющихся стимуляторами образования естественных антител.

В дальнейшем, проводили определения естественных антител к исследуемым антигенам у больных наркоманией и алкоголизмом в период их лечения и нахождения в стационаре. Результаты анализа представлены в таблице 2. В ходе лечения больных наркоманией отмечена тенденция к нормализации содержания е-Ат только для -эндорфина и лишь на 21-й день нахождения в стационаре. В случае серотонина и дофамина уровень антител оставался достоверно повышенным для этой категории больных в течение всего периода времени лечения. Возможно, этим больным требуется более длительное время находиться под наблюдением врача в стационаре.

Результаты анализа естественных антител в сыворотке крови пациентов, больных алкоголизмом, приведены в таблице 3. Анализируя полученные результаты, можно отметить, что в отличие от группы больных опийной наркоманией, у этой категории пациентов происходит увеличение уровня естественных антител к серотонину и дофамину от достоверно сниженного к их нормальному содержанию, соответствующему донорам. Более чем у половины больных этой группы к концу лечения восстанавливалось содержание антител к -эндорфину. Причем повышение уровня антител начинается уже после 7 дня лечения в стационаре.

При анализе результатов ИФА достоверные изменения уровней е-АТ в сыворотке крови больных игроманией по сравнению с нормой обнаружено для 4-х пациентов увеличение содержания е-Ат к серотонину, дофамину, а у 10 обследованных больных был достоверно снижен уровень антител к -эндорфину. Результаты анализа и распределение по антигенам представлены в таблице 5. Индивидуализация полученных результатов ИФА для каждого больного явилась подтверждением предположения, что возникновение и прогрессирование болезни «игромания» имеет одинаковые с наркоманией патогенетические механизмы, хотя эта зависимость и не связана с прямым действием экзогенного токсического вещества на организм человека. Было установлено, что из 14 обследованных пациентов-игроманов у 10 человек (72%) почти в 2 раза снижен уровень специфических естественных антител к -эндорфину (группа II). А у оставшихся 4-х человек обследованной групп значение оптической плотности соответствует норме (группа 1).

При следующем рассмотрении результатов ИФА было обнаружено, что в этой же группе (1) при нормальном содержании антител к -эндорфину достоверно увеличивается уровень специфических естественных антител к серотонину и дофамину. Во второй группе (II) больных-игроманов (10 человек) с пониженным содержанием антител к -эндорфину - уровень естественных антител к серотонину и дофамину оставался в норме. Таким образом, сравнительное определение уровней естественных антител к опиоидным пептидам, биогенным аминам и пептидам ренин-ангиотензиновой системы свидетельствует об участии указанных нейромедиаторов в заболевании игроманией.

Для практической оценки полученных результатов для клиники и возможности их использования в дальнейшем в качестве дополнительного диагностического критерия проведено сопоставление результатов ИФА определения естественных антител с УРП - уровнем реабилитационного потенциала (таблица 5). При сопоставлении результатов ИФА определения естественных антител к опиоидным пептидам и биогенным аминам с уровнем реабилитационного потенциала было установлено, что высокий УРП в диапазоне 146 -135 обнаружен у больных с достоверно повышенным содержанием естественных антител к серотонину и дофамину, при этом уровень антител к -эндорфину остается нормальным (группа 1). Средний УРП 67-78 соответствует пациентам в группе (II) больных-игроманов. Именно для этой категории больных обнаружен специфический иммунодефицит, т.е. у данных лиц достоверно снижено содержание естественных антител к -эндорфину.

Таким образом, полученные результаты указывают на корреляцию между различными формами болезней зависимости и изменением в иммунной системе. При этом у больных наркоманией или ожирением наблюдается увеличение иммуноглобулинов, связывающих нейромедиаторы опиоидной природы, а у больных алкоголизмом или игроманией наблюдается снижение этих показателей. Проведенные дополнительно исследования показали, что достоверно определять высокую предрасположенность к заболеваниям зависимости с точностью до 87% можно при значении индекса предрасположенности, определяемом путем деления разницы показателя оптической плотности анализируемого образца крови при определении естественных антител к опиоидным пептидам и среднего по группе значения показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров на среднее по группе значение показателей оптической плотности образцов крови здоровых доноров, и при абсолютном значении индекса больше 0,25 определяют высокую предрасположенность к заболеваниям зависимости.

В то время как определение естественных антител к биогенным аминам или пептидам ренин-ангиотензиновой системы является дополнительным подтверждением взаимосвязи между различными формами болезней зависимости и изменением в иммунной системе. При значении индекса предрасположенности больше 0,25 точность корреляции составила 60-80%.

Таким образом, определение естественных антител к биогенным аминам или пептидам ренин-ангиотензиновой системы служит дополнительным фактором подверждения наличия или отсутствия предрасположенности к заболеваниям зависимости.

При этом из результатов анализа данных, представленных в таблицах 1, 2, 4, следует, что в случае получения положительного значения разницы показателя оптической плотности анализирумого образца и среднего по группе значения показателя оптической плотности образцов крови здоровых доноров определяют предрасположенность к наркотической зависимости или ожирению, а из результатов анализа данных, представленных в таблицах 3, 5, 6, следует, что в случае получения отрицательного значения разницы показателя оптической плотности анализирумого образца и среднего по группе значения показателя оптической плотности образцов крови здоровых доноров определяют предрасположенность к наркотической зависимости или ожирению.

ПРИМЕРЫ

С помощью ИФА определяли в сыворотке крови обследованных пациентов иммуноглобулины класса М и G (IgM, IgG), специфически реагирующие с антигенами опиоидных пептидов: бета-эндорфина, дерморфина, энкефалина, биогенных аминов: серотонина, дофамина, норадреналина, адреналина, гистамина или пептидов ренин-ангиотензиновой системы: ангиотензина II, брадикинина, вазопрессина и рассчитывали индекс предрасположенности к заболеванию зависимости по описанной выше схеме.

Пример 1. Мама пациента К. обратилась за консультацией по вопросу наличия у ее сына риска возникновения зависимости от наркотиков. Проведенное иммунологическое исследование методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена -эндорфина выявило у пациента увеличение уровня антител. Расчет индекса предрасположенности составил величину 0,38 соответственно для каждого указанного антигена. Дополнительно проведенное исследование с использованием в качестве антигена конъюгата серотонина установило индекс предрасположенности 0,27 серотонина. Сопоставление полученных результатов с учетом их статистического анализа позволило сделать заключение о наличии у пациента предрасположенности к наркомании. Даны рекомендации выбора образа жизни и по коррекции психологических особенностей.

Пример 2. Мама пациента А. обратилась за консультацией по вопросу наличия у ее сына риска возникновения зависимости от наркотиков. Это было связано с тем, что наблюдая за сыном в домашней обстановке отмечала тягу к употреблению психоактивных веществ. Иммунологическое исследование методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена дерморфина и энкефалина, выявило у пациента увеличение уровня антител. Индекс предрасположенности составил величину 0,29, 0.26 соответственно для каждого антигена. Дополнительно исследование с использованием в качестве антигена конъюгата дофамина установило индекс предрасположенности 0,25. Сопоставление полученных результатов с учетом их статистического анализа позволило сделать заключение о наличии у пациента предрасположенности к наркомании. Даны рекомендации выбора образа жизни с акцентом на формирование волевых качеств и снижение уровня агрессивности и напряженности.

Пример 3. Пациент М. обратился за консультацией по вопросу наличия у него риска возникновения алкогольной зависимости в связи с тем, что отмечал тенденцию к злоупотреблению спиртными напитками. Результаты иммунологического исследования методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена -эндорфина свидетельствовали о наличии у пациента увеличения уровня антител. Расчет индекса предрасположенности составил величину 0,45 соответственно для каждого указанного антигена. Дополнительно проведенное исследование с использованием в качестве антигена конъюгата серотонина и дофамина, и норадреналина установило индекс предрасположенности 0,25 серотонина, 0,26 дофамина и 0,42 норадреналина. На основании статистического анализа полученных результатов сделано заключение о предрасположенности пациента к алкоголизму. Даны рекомендации по коррекции психического статуса с ориентацией на корректность при взаимодействии с окружающими.

Пример 4. Пациент Н. обратился за консультацией по вопросу наличия у него риска возникновения алкогольной зависимости в связи с тем, что отмечал тенденцию к злоупотреблению спиртными напитками. Результаты иммунологического исследования методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена дерморфина, энкефалина свидетельствовали о наличии у пациента увеличения уровня антител. Расчет индекса предрасположенности составил величину 0,25, 0,29 соответственно для каждого указанного антигена. Дополнительно проведенное исследование с использованием в качестве антигена конъюгата вазопрессин и ангиотензин II установило индекс предрасположенности 0,25 и 0,26 соответственно. На основании статистического анализа полученных результатов сделано заключение о предрасположенности пациента к алкоголизму. Даны рекомендации по коррекции психического статуса с ориентацией на корректность при взаимодействии с окружающими.

Пример 5. Пациентка О. обратилась за консультацией по поводу риска возникновения у нее заболевания зависимости при черезмерном употреблении продуктов питания, склонности к ожирению. Проведенное иммунологическое исследование методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена -эндорфина, дерморфина, энкефалина выявило у пациента увеличение уровня антител. Расчет индекса предрасположенности составил величину 0,37, 0,25, 0.29 соответственно для каждого указанного антигена. Дополнительно проведенное исследование с использованием в качестве антигена конъюгата гистомина и дофамина установило индекс предрасположенности 0,37 гистомина и 0,41 дофамина. Сопоставление полученных результатов с учетом их статистического анализа позволило сделать заключение о наличии у пациента предрасположенности к ожирению. Даны рекомендации, направленные на формирование здорового образа жизни, здоровых взаимоотношений с окружающими и повышение самооценки.

Пример 6. За консультацией обратился будущий супруг пациентки X., обеспокоенный риском возникновения у нее алкогольной зависимости. Результаты иммунологического исследования методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена -эндорфина, дерморфина, энкефалина, свидетельствовали о наличии у пациента увеличения уровня антител. Расчет индекса предрасположенности составил величину 0,40, 0,25, 0.31 соответственно для каждого указанного антигена. Дополнительно проведенное исследование с использованием в качестве антигена конъюгата серотонина и дофамина, норадреналина установило индекс предрасположенности 0,35 серотонина, 0,43 дофамина и 0,42 норадреналина. На основании статистического анализа полученных результатов сделано заключение о наличии у пациентки предрасположенности к алкогольной зависимости. Даны рекомендации по укреплению волевых качеств, повышению самооценки, ориентации на достижения и коррекции межличностных отношений.

Пример 7. Пациент Д. обратился за консультацией по вопросу наличия у него риска возникновения игровой зависимости. Проведенное иммунологическое исследование методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием конъюгированного антигена -эндорфина, дерморфина, энкефалина выявило у пациента увеличение уровня антител. Расчет индекса предрасположенности составил величину 0,36, 0,39, 0.32 соответственно для каждого указанного антигена. Дополнительно проведенное исследование с использованием в качестве антигена конъюгата серотонина и дофамина установило индекс предрасположенности 0,25 серотонина и 0,26 дофамина. Сопоставление полученных результатов с учетом их статистического анализа позволило сделать заключение о наличии у пациента предрасположенности к игромании.

Даны рекомендации по формированию здорового образа жизни и контролю за фоном настроения (психоэмоциональным статусом).

Заявленный способ дает возможность с высокой степенью точности (87-96%) прогнозировать риск возникновения расстройств в форме наркомании, алкоголизма, игромании, ожирения для своевременной и качественной профилактики возникновения указанных заболеваний зависимости, что способствует повышению уровня здоровья населения и снижению темпов формирования аддиктивной субпопуляции в современном обществе.

Таблица 1
Способ определения предрасположенности к заболеваниям зависимости.
Группа больных и доноров	Значение OD450 в ИФА в среднем по группе
Серотонин	-эндорфин	Дофамин	Ангиотензин II	Вазопрессин
Больные наркоманией	1,153±0,027	0,941±0,016	1,052±0,019	0,921±0,013	0,969±,018
Больные алкоголизмом	0,439±0,023	0,259±0,005	0,329±0,037	0,475±0,015	0,489±0,025
Доноры	0,670±0,026	0,588±0,021	0,721±0,029	0.671±0.032	0.634±0.031
	=0,037	=0,029	=0,053	=0,062	=0,048

Таблица 2
Исследуемый антиген	Средние по группе значения ОD450 в ИФА
Больные наркоманией	Доноры
Этапы забора крови в динамике лечения
1-й день	3-й день	7-й день	21-й день
Серотонин	1,15±0,027	1,10±0,031	0,95±0,024	0,90+0,021	0,670±0,026
-эндорфин	0,94±0,016	0,99±0,023	0,81±0,025	0,64±0,019	0,588±0,021
Дофамин	1,05±0,019	1,01±0,021	0,95±0,022	0,90±0,025	0,721±0,029

Таблица 3
Способ определения предрасположенности к заболеваниям зависимости.
Исследуемый антиген	Средние по группе значения ОD450 в ИФА*
Больные алкоголизмом	Доноры
Этапы забора крови в динамике лечения
1-й день	3-й день	7-й день	21-й день
Серотонин	0,44±0,023	0,39±0,025	0,51±0,018	0,62±0,019	0,670±0,026
-эндорфин	0,26±0,005	0,41±0,029	0,45±0,017	0,49±0,027	0,588±0,021
Дофамин	0,33±0,037	0,34±0,019	0,49±0,021	0,61±0,019	0,721±0,029

Таблица 4
Исследуемый антиген	Средние по группе значения ОD450 в ИФА*
Больные ожирением	Доноры
Выше нормы	Ниже нормы
OD450 ИФА	Кол-во чел.	OD 450 ИФА	Кол-во чел.
Ангеотензин II	0,92±0,12	12	-	-	0,55±0,09
-эндорфин	-	-	0,23±0,02	3	0,45±0,06
Дофамин	0,80±0,06	14	-	-	0,52±0,04
Серотонин	0,82±0,09	14	-	-	0,55±0,07
Гистамин	1,06±0,12	12	-	-	0,74±0,08

Таблица 5
Способ определения предрасположенности к заболеваниям зависимости.
Исследуемый антиген	Средние по группе значения OD450 в ИФА*
Больные игроманией	Доноры
Выше нормы	Ниже нормы
OD450ИФА	Кол-вочел.	OD 450 ИФА	Кол-во чел.
-эндорфин	-	-	0,321±0,027	10	0,588±0,021
Дофамин	1,180±0,061	4	-	-	0,721±0,029
Серотонин	0,927±0,094	4	-	-	0,670±0,026
Ангиотензин II	-	-	0,502±0,018	10	0.671±0.032
Вазопрессин	-	-	0,528±0,024	10	0.634±0.031

Таблица 6
Больные игроманией (14 человек)	Диапазон УРП	Уровень е-Ат Серотонин	Уровень е-Ат -эндорфин	Уровень е-Ат Дофамин
Группа 1 (4 человека)	146-135	Повышен	Норма	Повышен
Группа II (10 человек)	67-78	Норма	Понижен	Норма