n-[2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)]амид 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты, обладающий противовоспалительной и анальгетической активностью

Формула изобретения

N-[2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)]амид 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты формулы:



обладающий противовоспалительной и анальгетической активностью.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области органической химии, к новым биологически активным веществам класса N-гетериламидов 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты, а именно к N-[2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)]амиду 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты (1) формулы

обладающего противовоспалительной и анальгетической активностью, что позволяет предположить его использование в медицине в качестве лекарственного противовоспалительного и анальгетического средства. Ближайшим аналогом по структуре и действию заявляемому соединению является N-(2-тиазолил)амид 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты [Пулина Н.А., Юшков В.В., Залесов В.В., Мокин П.А., Одегова Т.Ф., Сыропятов Б.Я., Яценко К.В. Поиск биологически активных соединений среди производных о-гидроксифенилглиоксалевой кислоты // Фармация. - 2007. - № 5. - С.35-37] формулы

Структурный аналог 2 обладает слабым противовоспалительным и анальгетическим действием, недостаточным для практического здравоохранения.

Эталоном сравнения выбрана натриевая соль 2-[(2,6-дихлорфенил)-амино]-фенилуксусной кислоты (диклофенак) (3) формулы

который широко применяется в лечебной практике и является аналогом по действию [Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - С.170].

Задачей изобретения является поиск в ряду N-гетериламидов 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты веществ с выраженной противовоспалительной и анальгетической активностью и низкой токсичностью.

Поставленная задача достигается получением N-[2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)]амида 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты (1), обладающего противовоспалительной и анальгетической активностью. Заявляемое соединение 1 синтезируют взаимодействием 2,3-дигидробензо[b]фуран-2,3-диона с 2-амино-5-этил-1,3,4-тиадиазолом в среде безводного хлороформа при комнатной температуре с последующим выделением целевого продукта известными методами по схеме:

Пример 1 получения соединения 1. К раствору 1.48 г (0.01 моль) 2,3-дигидробензо[b]фуран-2,3-диона в 30 мл безводного хлороформа прибавляют суспензию 1.29 г (0.01 моль) 2-амино-5-этил-1,3,4-тиадиазола в 25 мл того же растворителя и перемешивают при комнатной температуре в течение одного часа. Реакционную смесь охлаждают до 0°С, осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из диоксана. Выход 2.08 г (75%). Т.пл. 172-173°С. Найдено, %: C 52.12; H 4.09; N 15.18. C₁₂ H₁₁N₃O₃S. Вычислено, %: C 51.98; H 4.00; N 15.15.

ИК спектр (Specord M80, вазелиновое масло, , см^-1): 3205 (NHCO), 1695 (CO NH), 1640, 1610, 1580 (C²=O, C=C, C=N). Спектр ЯМР ¹H (Bruker DRX 500, ДМСО-d₆, ГМДС, , м.д.): 1.31 т (3H, CH₃, J 7.4 Гц), 2.97 к (2H, CH₂, J 7.4 Гц), 6.81-7.67 м (4H, C₆ H₄), 10.74 с (1H, NH), 12.85 уш.с (1H, OH).

Полученное соединение 1 представляет собой светло-желтое кристаллическое вещество, растворимое в толуоле, диметилсульфоксиде, нерастворимое в воде и алканах.

Противовоспалительная активность изучена в опытах на 30 белых беспородных крысах обоего пола массой 220-260 г. Соединение 1 вводили перорально в дозе 50 мг/кг в виде взвеси в 2% крахмальном растворе за час до моделирования острого каррагенинового воспаления. Каррагениновый отек вызывали субплантарной инъекцией 0.1 мл 1% раствора флогогена в заднюю лапу крысы. О противовоспалительной активности судили по изменению выраженности воспаления в динамике, которое регистрировали онкометрически через 1, 3 и 5 часов после моделирования воспаления [Методические рекомендации по экспериментальному изучению нестероидных противовоспалительных веществ, фармакологический комитет МЗ СССР, протокол № 22 от 11 ноября 1982. - Москва, 1982]. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Препаратом сравнения служил диклофенак в дозе 10 мг/кг. Результаты обработаны статистически с помощью программы Excel 2003 и представлены в таблице.

Анальгетическая активность соединения 1 изучена на 12 белых мышах самцах массой 20-25 г по методу термического раздражения [Н.Б.Эдди, Д.Леймбах // Фармакология и токсикология. - 1960. - № 4. - С.311-315]. Исследуемое соединение 1 вводили в дозе 50 мг/кг перорально в виде взвеси в 2% крахмальном растворе за 1 час до помещения животных на горячую пластинку. Показателем болевой чувствительности служила длительность пребывания мышей на пластинке до наступления оборонительного рефлекса - облизывания лапок. Контрольным животным вводили эквиобъемное количество 2% крахмального раствора. Препаратом сравнения служил диклофенак в дозе 10 мг/кг. Результаты обработаны статистически с помощью программы Excel 2003 и представлены в таблице.

Острую токсичность (ЛД₅₀) заявляемого соединения 1 определяли на 24 белых беспородных мышах обоего пола массой 18-22 г при внутрибрюшинном пути введения в виде взвеси в 2% крахмальном растворе по экспресс-методу В.Б. Прозоровского [Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. // Фармакология и токсикология. - 1978. - № 4. - С.497-502]. Установлено, что ЛД₅₀ соединения 1 составляет 1500 мг/кг. Согласно классификации токсичности препаратов, соединение 1 относится к классу практически нетоксичных веществ [Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К. Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - С.196-197]. Оно в 20 раз менее токсично, чем диклофенак.

Таблица
Противовоспалительная, анальгетическая активность и острая токсичность соединения 1
Соединение	Доза, мг/кг	ЛД50 мг/кг	% торможения каррагенинового отека	Латентный период оборонительного рефлекса, с
1 час	3 часа	5 часов
Контроль	-	-	0,0±0,0	0,0±0,0	0,0±0,0	10,0±0,5
1	50	1500
Диклофенак	10	74
*=p<0,05, **=p<0,01, *** =p<0,001
1 - по сравнению с контролем; 2 - по сравнению с диклофенаком.

Как видно из таблицы, соединение 1 проявило выраженную противовоспалительную активность в течение всего периода наблюдения, а на пике воспаления оно практически не уступает диклофенаку. Кроме того, соединение 1 показало значительную анальгетическую активность на уровне эталона сравнения. Необходимо отметить, что эффективная доза диклофенака составляет 0,14 от его ЛД₅₀, а у заявляемого соединения - 0,03 от его ЛД₅₀, что свидетельствует об определенных преимуществах соединения 1 перед диклофенаком в плане его безопасности и эффективности.

Таким образом, N-[2-(5-этил-1,3,4-тиадиазолил)]амид 2-(2-гидроксифенил)-2-оксоэтановой кислоты (1) более эффективен и менее токсичен в сравнении с диклофенаком, что делает возможным использование его для создания новых лекарственных препаратов, обладающих противовоспалительной и анальгетической активностью.

ЛИТЕРАТУРА

1. Пулина Н.А., Юшков В.В., Залесов В.В., Мокин П.А., Одегова Т.Ф., Сыропятов Б.Я., Яценко К.В. Поиск биологически активных соединений среди производных о-гидроксифенилглиоксалевой кислоты // Фармация. - 2007. - № 5. - С.35-37.

2. Машковский М.Д. Лекарственные средства. - 15-е изд., перераб., испр. и доп. - М.: ООО «Новая волна», 2005. - С.170.

3. Методические рекомендации по экспериментальному изучению нестероидных противовоспалительных веществ, Фармакологический комитет МЗ СССР, протокол № 22 от 11 ноября 1982. - Москва, 1982.

4. Н.Б.Эдди, Д.Леймбах // Фармакология и токсикология. - 1960. - № 4. - С.311-315.

5. Прозоровский В.Б., Прозоровская М.П., Демченко В.И. // Фармакология и токсикология. - 1978. - № 4. - С.497-502.

6. Измеров И.Ф., Саноцкий И.В., Сидоров К.К., Параметры токсикометрии промышленных ядов. - М.: Медицина, 1977. - С.196-197.