способ комбинированного лечения хронической ишемии конечности
Классы МПК: | G09B23/28 в медицине |
Автор(ы): | Покровский Михаил Владимирович (RU), Артюшкова Елена Борисовна (RU), Покровская Татьяна Григорьевна (RU), Парфенова Елена Викторовна (RU), Цоколаева Зоя Ивановна (RU), Суковатых Борис Семенович (RU), Пашков Денис Валерьевич (RU), Бежин Александр Иванович (RU), Гладченко Михаил Петрович (RU), Артюшкова Екатерина Вячеславовна (RU), Орлова Ангелина Юрьевна (RU) |
Патентообладатель(и): | Покровский Михаил Владимирович (RU), Артюшкова Елена Борисовна (RU), Пашков Денис Валерьевич (RU), Суковатых Борис Семенович (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2007-12-06 публикация патента:
27.04.2009 |
Изобретение относится к экспериментальной медицине, а именно экспериментальной кардиофармакологии и хирургии, и может быть использовано для комбинированного лечения хронической ишемии конечности. Для этого лабораторному животному с экспериментальной ишемией конечности на 7 сутки после моделирования производят операцию реваскуляризирующей остеомиопластики. Затем вводят внутрибрюшинно L-аргинин один ра эффективное восстановление кровообращения. 1 табл.
Формула изобретения
Способ комбинированного лечения хронической ишемии конечности, отличающийся тем, что лабораторному животному с экспериментальной ишемией конечности на 7 сут после моделирования ишемии конечности производят операцию реваскуляризирующей остеомиопластики, а затем вводят внутрибрюшинно L-аргинин один раз в сутки с 7-го по 28-й день в дозе до 200 мг/кг.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к медицине, в частности к экспериментальной хирургии и фармакологии.
Наиболее близким к заявленному решению является способ коррекции ишемии конечности с помощью ежедневного однократного введения L-аргинина в дозе от 30 до 200 мг/кг, предложенный М.В.Покровским и соавт. (пат. № 2302239 от 10.07.2007 г.).
Недостатком описанного метода лечения ишемии является то, что монотерапия L-аргинином затрагивает только одно патогенетическое звено, в то время как каскад биохимических изменений в тканях и сложность патогенетических механизмов при ишемии требуют применения различно действующих методов лечения.
Перспективным представляется метод комбинированной коррекции ишемии конечности с привлечением операции реваскулязирующей остеомиопластики, выполнение которой обеспечивает инфильтрацию мышцы стволовыми клетками и ангиогенными факторами костного мозга, а также введения L-аргинина в наибольшей дозе - 200 мг/кг, - что приводит к освобождению оксида азота и достижению эндотелиопротективного, вазодилатирующего и проангиогенного эффектов.
Техническим результатом изобретения является способ коррекции ишемии конечности, включающий выполнение операции реваскуляризирующей остеомиопластики с последующим введением L-аргинина.
Технический результат достигается тем, что на 7 день после моделирования ишемии конечности выполняется операция реваскуляризирующей остеомиопластики на голени, а затем ежедневного внутрибрюшинно один раз в сутки вводится L-аргинин в дозе 200 мг/кг, который является донатором NO и регулирует тканевую перфузию за счет эндотелий зависимого вазодилятирующего эффекта.
СПОСОБ ОСУЩЕСТВЛЯЕТСЯ СЛЕДУЮЩИМ ОБРАЗОМ
Опыты проводят на белых крысах-самках линии «Wistar», половозрелых, средней массой тела 230-260 г.
Моделирование ишемии конечности проводили под наркозом (этаминал натрия 35 мг/кг) путем удаления участка магистрального сосуда, включающего бедренную артерию, подколенную артерию и начальные отделы артерии голени. Оценку микроциркуляции в мышцах голени животного проводят при помощи лазер-доплеровского флоуметра Biopac-systems MP-100 и датчика TSD-144 (США). Для этого под наркозом (этаминал натрия 35 мг/кг) иссекали участок кожи в переднебоковом участке области голени. Запись уровня микроциркуляции осуществляли в пяти точках (середина длины мышцы, точки на 3-5 мм выше и ниже, латеральное и медиальнее первой). Регистрация уровня микроциркуляции проводилась в группах с моделированием ишемии конечности и в группах на фоне лечения ишемии конечности L-аргинином, при помощи реваскуляризирующей остеомиопластики, а также комбинированным методом с привлечением операции реваскуляризирующей остеомиопластики и последующим введением L-аргинина в дозе 200 мг/кг. Результаты учитывали на 10, 21 и 28 сутки наблюдения.
При статистической обработке данных рассчитывали среднее значение, ошибку среднего, величину стандартного отклонения, достоверность различий между группами при помощи t-критерия. Различия считали достоверными при р<0,05.
ПРИМЕР КОНКРЕТНОГО ВЫПОЛНЕНИЯ
Уровень микроциркуляции в правой и левой мышцах голени интактных животных не отличался друг от друга и составил в среднем 533,2+9,7 п.е. (перфузионных единиц). Результаты оценки уровня микроциркуляции у животных с моделированием ишемии задней конечности и в группах, получавших лечение, представлены в таблице (табл.1).
Таблица 1. | |||
Величина уровня микроциркуляции в контрольной группе и в группах, получавших лечение (М±m в абсолютных значениях, n=10) | |||
Группа | 10 сутки | 21 сутки | 28 сутки |
Хроническая ишемия конечности (контроль) | 209,2±6,4 | 312,1±13,9 | 369,6±14,6 |
Хроническая ишемия конечности+L-аргинин 200 мг/кг | 239,5±11,6* | 415,4±19,7* | 489,4±18,5* |
Хроническая ишемии конечности+операция реваскуляризирующей остеомиопластики | 249,16±9,84* | 439,21±24,18* | 567,16±28,12* |
Хроническая ишемии конечности+операция реваскуляризирующей остеомиопластики+L-аргинин 200 мг/кг | 267,0±17,29* | 491,23±18,47* х | 622,84±21,12* ху |
* - статистические значимые различия по сравнению с контролем при р<0,05. х - статистические значимые различия по сравнению с группой, получавшей L-аргинин 200 мг/кг при р<0,05. у - статистически значимые различия по сравнению с группой, получавшей оперативное лечение при р<0,05. |
Из таблицы видно, что уровень микроциркуляции после операции моделирования ишемии задней конечности резко падает (с 533,2 п.е. до 209,2 п.е.; р<0,001), а затем медленно восстанавливается. На 28 сутки уровень микроциркуляции в контроле остается достоверно ниже значения, которое регистрируется в группе интактных животных (369,6 п.е. против 533,2 п.е.; р<0,001).
На фоне лечения отличия между опытными и контрольными группами появляются уже на 10 сутки: в группах, получавших лечение L-аргинином в дозе 200 мг/кг, оперативное и комбинированное лечение уровень микроциркуляции достоверно выше, чем в контроле (р<0,05).
Аналогичная картина наблюдается и на 21 сутки эксперимента, где в опытных группах имеются статистически значимые различия по сравнению с контролем при р<0,05.
Максимальные различия между опытными группами и контролем имели место на 28 сутки. Здесь регистрируются наилучшие показатели уровня микроциркуляции и статистически значимая разница по сравнению с контролем при р<0,05. Следует отметить, что уровень микроциркуляции во всех группах, получавших лечение достоверно не отличался от такового в группе интактных животных, что позволяет говорить о полном восстановлении кровообращения в конечности под влиянием лечения.
Наилучшие результаты отмечены в группе животных, получавших комбинированное лечение, где имеются достоверные различия по сравнению с контролем на всех сроках эксперимента, а также достоверные различия по сравнению с группой, получавшей лечение L-аргинином в дозе 200 мг/кг.
Таким образом, сочетанное использование операции реваскуляризирующей остеомиопластики и L-аргинина в дозе 200 мг/кг имеет преимущества перед монотерапией L-аргинином. Это позволяет рекомендовать данное сочетание к использованию и как наиболее перспективное.