антигипотензивное средство

Формула изобретения

1. Применение производных изотиомочевин и их солей структурной формулы



где R₁=H, СН₃СО, С₂ Н₅СО, CH₂=СНСО, СН₂=С(СН ₃)СО, С₆Н₅СО, m-FC₆H ₄CO, m-ClC₆Н₄СО, BrC₁₁ H₂₂CO;

R₂=CH₃, С ₂Н₅, n-С₃Н₇, i-С₃ Н₇, С₄Н₉, C₄H ₈F, C₂H₄F, C₂H₄ OH, CH₂=CH-СН₂-, СН₂-СН-СН ₂;

Х=Cl, Br, I, диалкилфосфат, метансульфонат в качестве антигипотензивного средства.

2. Фармакологическая композиция для лечения гипотензивных состояний, содержащая действующее вещество и фармакологически приемлемый носитель, отличающаяся тем, что в качестве действующего вещества она содержит фармакологически приемлемую соль изотиомочевины по п.1.

3. Фармакологическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что в качестве фармакологически приемлемой соли используют бромид.

4. Фармакологическая композиция по п.2, отличающаяся тем, что она предназначена для лечения гипотензивного состояния, вызванного кровопотерей, травмой или шоком.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к новым лекарственным средствам, которые могут найти применение в медицинской практике при лечении хронических и острых гипотензивных состояний (кровотечение, травма, шок, отравление), особенно в скорой и неотложной медицинской помощи, так как оно может быть использовано для производства новых антигипотензивных средств.

Заявлены антигипотензивные средства, содержащие в качестве действующего вещества производные изотиомочевины и их соли.

Изобретение расширяет ассортимент веществ антигипотензивного действия. Соединение относится к новым лекарственным средствам, которое может найти применение в медицинской практике, как новое химическое соединение, влияющее на артериальное давление. Это вещество может быть использовано для лечения хронической и острой гипотонии.

Изобретение направлено на область удовлетворения жизненных потребностей человека - создание новых лекарственных средств, которые могут найти применение в химико-фармацевтической и медицинской промышленности.

В настоящее время в медицинской практике известны лекарственные средства гипертензивного действия, воздействующие либо непосредственно на гладкую мускулатуру сосудистой стенки, либо посредством стимуляции альфа-адренорецепторов. Обычно используют адреномиметики (адреналин, норадреналин, мезатон, эфедрин и др.) и препараты полипептидной природы (глюкагон, октапрессин, антиотенинамид и т.п.).

Главный недостаток препаратов с полипептидной структурой и большинства адреномиметиков заключается в короткой продолжительности их действия. Для пролонгирования действия препараты вводят в виде перфузии. [I.M.Autkunson, S.I.Dusting, V.I.Rand, Aust. J. Exp. Biol. Med., V.50, p.847-859 (1972), "Acidosis induced by catecholamines in acidosis"].

По фармакологическим свойствам наиболее близким прототипом предлагаемым соединениям является известный лекарственный препарат мезатон.

Мезатон представляет собой гидрохлорид 1-(м-оксифенил)-2-метиламиноэтанола, Он селективно стимулирует ₁-адренорецепторы, вызывая сужение артериол, повышает систолическое и диастолическое давление. Антигипотензивное действие мезатона длится около 20 минут после внутривенного введения (0.1-0.5 мл 1% раствора) (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, 14-е изд., М.: Новая волна, 2000, часть 1, С.233; О.М.Авакян, Фармакологическая регуляция функции адренорецепторов, М., Медицина, 1988, С.8).

Адреномиметики, в том числе мезатон, имеют некоторые общие недостатки. Они действуют непродолжительно - всего лишь в пределах 20 минут, увеличивают потребление кислорода тканями, вызывают метаболический ацидоз, аритмии, возбуждение ЦНС. (О.М.Авакян. Фармакологическая регуляция функции адренорецепторов. М., Медицина, 1988, С.8; В.Г.Кулинский, А.Н.Ковалевский, Бюл. Эксперим. Биол. Мед., 1984, С.9 «Дуалистический контроль катехоламинами потребления кислорода организмом мышей»). Для них характерно возникновение вторичной гипотензии. Кроме того, адреномиметики не корригируют артериальную гипотензию, вызванную адреноблокаторами и в условиях метаболического ацидоза имеют лишь слабый антигипотензивный эффект (С.Kortanje, V.I.Mathy, R.Chartdorp, Haunyn Gohinedeleg is Arh. Pharmakol., v.330, N 3, p.187, 1985, "Influence respiratory acidosis or alkalosis on response imediated by and alfa-adrenoreseptor in pithed normotensive rats", I.M.Autkunson, S.I. Dusting, V.I.Rand, Aust. J.ExpBiol. Med., v.50, p.847, 1972, 'Acidjsis induced by catecholamines in acidosis').

Исследования влияния различных химических соединений на артериальное давление крови, проведенные ранее авторами изобретения, показали, что некоторые производные изотиомочевины, тиазолина и тиазина обладают способностью в той или иной мере повышать нормальное и пониженное артериальное давление, изменяемое в результате эндотоксического шока. Однако следует отметить, что они не обладают продолжительным гипертензивным действием и весьма токсичны.

(С.Я.Проскуряков, Н.Г.Кучеренко, А.И.Тришкина и др., Бюл. Эксп. Биол и Мед., 2002, Т.134, № 10, С.393-396. «NO-ингибирующая и вазотропная активность некоторых соединений, содержащих тиоамидиновую группу»., С.Я.Проскуряков, М.В.Филимонова, Ю.Г.Верховский и др., Бюл. Эксп. Биол. и Мед., 2004, Т.138, № 10, С.446-449, «Влияние ингибитора NO-синтазы 2-ААДТ на эндотоксининдуцированные изменения гемодинамики и дыхания крыс»)

В результате проведенных нами исследований в этом направлении было обнаружено, что производные изотиомочевины обладают выраженным антигипотензивным действием.

Целью предлагаемого изобретения является увеличение длительности действия антигипотензивного средства и снижения его токсичности по сравнению с препаратами, применяющимися в медицинской практике для лечения гипотензивных состояний.

Поставленная цель достигается настоящим изобретением, а именно применением производных изотиомочевин и их солей структурной формулы

где R₁=Н, СН₃СО, С₂Н₅СО, CH₂=СНСО, СН₂ =С(СН₃)СО, С₆Н₅СО, m-FC ₆H₄CO, m-ClC₆Н₄СО, BrC ₁₁Н₂₂СО; R₂=СН₃, С ₂Н₅, n-С₃Н₇, i-С₃ H₇, C₄H₉, C₄H ₄F, C₂H₄F, C₂H₄ OH, СН₂=СН-СН₂-, СН₂-СН-СН ₂; Х=Cl, Br, I, диалкилфосфат, метансульфонат в качестве антигипотензивного средства.

Поставленная цель достигается также другим изобретением, а именно фармакологической композицией для лечения гипотензивных состояний.

Фармакологическая композиция для лечения гипотензивных состояний, содержащая действующее вещество и фармакологически приемлемый носитель, отличается тем, что в качестве действующего вещества она содержит фармакологически приемлемую соль изотиомочевины.

В частности, в качестве фармакологически приемлемой соли можно использовать бромид.

Фармакологическая композиция, в частности, может быть предложена для лечения гипотензивного состояния, вызванного кровопотерей, травмой или шоком.

Найденные соединения менее токсичны, чем мезатон (ЛД₅₀ 191 мг/кг). Введение животным этих веществ не вызывает никаких видимых изменений со стороны частоты сердечных сокращений частоты дыхания на протяжении всего периода наблюдения. По длительности гипертензивного действия предлагаемые вещества превосходят мезатон и другие препараты, применяющиеся в медицинской практике для лечения гипотензивных состояний.

Выявленные эффекты показывают, что предлагаемые соединения отличаются от известных средств, которые применяются для повышения артериального давления.

Использование их в медицинской практике создает новые возможности в лечении острых и, возможно, хронических артериальных гипотензий, а также в случаях неотложной и скорой помощи.

В доступной литературе эти соединения не описаны, что свидетельствует о том, что они получены нами впервые.

Синтез производных изотиомочевины

Патентуются производные изотиомочевины, обладающие антигипотензивным действием, имеющие общую формулу

где R₁=Н, СН₃СО, С₂Н₅СО, СН₂=СНСО, СН₂ =С(СН₃)СО, С₆Н₅СО, m-FC ₆H₄CO, m-ClC₆Н₄СО, BrC ₁Н₂₂СО.

R₂=СН ₃, С₂Н₅, n-С₃Н₇ , i-С₃Н₇, C₄H₉, C ₄H₈F, C₂H₄F, C₂ H₄OH, СН₂=СН-СН₂-, СН₂ -СН-СН₂

Х=Cl, Br, I, диалкилфосфат, метансульфонат.

Пример 1. (Т-982) 1-Ацетил-2-этилизотиомочевины гидробромид. Смесь 2,0 г (15,9 ммоль) ацетилтиомочевины и 3,68 г (33,8 ммоль) бромистого этила в 7 мл ацетонитрила нагревают в запаянной ампуле на кипящей водяной бане 40 ч. Растворитель сливают, а остаток кипятят с ацетонитрилом до растворения. Выделившиеся после охлаждения кристаллы отфильтровывают и повторно кристаллизуют из ацетонитрила. Выход 2,0 г (51,9%). Т_пл. 120-121°С.

¹Н ПМР (500 МГц, DMSO-d6) 2,2 (с, 3Н; СН₃СО), 1,3 (т, 3Н), 3,3 (к, 2Н), 11,2 (ш, 2Н; NH₂₊).

C₅H ₁₁BrN₂OS

Вычислено: С 26,44 Н 4,88 N 12,33

Найдено: С 26,77 Н 5,12 N 12,08

Пример 2. (Т-975) 1-Ацетил-2-изопропилизотиомочевины гидробромид. Смесь 2,0 г (15,9 ммоль) ацетилтиомочевины, 3,3 г (26,5 ммоль) бромистого изопропила и 2,8 г (16,9 ммоль) йодистого калия в 7,5 мл свежеперегнанного ацетонитрила нагревают в запаянной ампуле на кипящей водяной бане 40 ч. Осадок KI отфильтровывают, а растворитель упаривают. Остаток перекристаллизовывают из 4-метил-пентанона-2. Выход 1,5 г (37,5%). Т_пл. 138-140°С.

¹Н ПМР (500 МГц, DMSO-d6) 2,2 (с, 3Н; СН₃СО), 1,3 (с, 6Н), 4,1 (м, 1Н), 11,0 (ш, 2Н; NH₂ ⁺).

C₆H₁₃ BrN₂OS

Вычислено: С 29,88 Н 5,43 N 11,62

Найдено: С 29,25 Н 5,51 N 11,56

Пример 3. (Т-977) 2-изопропилизотиомочевины диизопропилфосфат. Смесь 2,0 г (26,3 ммоль) тиомочевины и 5,9 г (26,4 ммоль) триизопропилфосфата при перемешивании нагревают 7 час при 132-135°С. После охлаждения к смеси добавляют 10 мл 4-метилпентанона-2 и образовавшийся осадок отфильтровывают и перекристаллизовывают из смеси ацетон-этанол (2:1). Выход 2,5 г (80,6%). Т_пл. 197-198°С.

¹Н ПМР (500 МГц, DMSO-d6) 1,3 (д, 6Н), 1,2 (д, 6Н), 3,8 (м, 1Н SCH) 4,2 (м, 1Н ОСН ₃); 9-11 (ш, 2Н; NH₂₊).

C ₁₀H₂₄N₂O₄PS

Вычислено: С 39,99 Н 8,39 N 9,33

Найдено: С 39,81 Н 8,77 N 9,66

Биологическое изучение свойств изотиомочевины

Опыты выполнены на 40 крысах - самцах Wistar массой 300-400 г (по 7-11 животных в группе). Каждую крысу наркотизировали тиопенталом натрия (60 мг/кг в/б) и регистрировали параметры частоты дыхательных движений (ЧДД), частоты сердечных сокращений (ЧСС), артериального давления в левой сонной артерии, систолического и диастолического (АДс и АДд), а также показатели электрокардиограммы в трех стандартных отведениях (ЭКГ).

Для создания гиповолемического шока из яремной вены производили забор крови в объеме 1,4-1,9% от массы опытного животного. После стабилизации показателей повторяли регистрацию указанных параметров. Затем животному вводили внутрибрюшинно одно из исследуемых соединений производных изотиомочевины: Т-975, Т-977, Т-982 в дозе 5 или 10 мг/кг и продолжали наблюдение до окончания видимого проявления эффекта. Наблюдение за контрольными животными с кровопотерей продолжали в течение 90 минут.

Для мониторного контроля и обработки исследуемых физиологических параметров использовали прибор Polygraph RM-6000 (Nihon Kohden, Япония) и кардиограф (Nihon Kohden, Япония). Статистическую обработку результатов исследований проводили с использованием параметрических критериев: t - критерия Стьюдента и критерия Фишера и непараметрического U-критерия Манна - Уитни (прикладной пакет Statistica 5.5).

Результаты экспериментов

Пример 1. Известно, что тяжелой (severe hemorrhage) считается кровопотеря 20-25 мл/кг или 1,5% от веса животного, умеренной (moderate hemorrhage) - 15 мг/кг или 0,7% [Саркисов, П.И.Ремезов. Воспроизведение болезней человека в эксперименте. / Под ред. А.А.Вишневского //М. - 1960. - 780 с. Feuerstein G., Mohamed А.В., Stull R., Goldstein D.S., Zerbe R.L., Ramwell P.W., Faden A.I. Effects of Nafazatrom on cardiovascular, sympathetic, and endocrine responses to hemorrhagic shock in conscious rats.// Circulatory Shock 17: 223-232 (1985).

Tiniakov R., Osei-Owusu P., Scrogin K.E. The 5-HT1A receptor agonist? 8-OH-DPAT, increases cardiac output and renal perfusion in rats subject to hypovolemic shock / // J Pharmacol Exp Ther November 2006: 1124-1135]. В данной работе кровопотеря составляла 1,4-1,9% от веса опытного животного, что относится к весьма тяжелой степени и предполагает гибель части животных вследствие гиповолемического шока.

Глубина падения среднего артериального давления (САД) в используемой нами модели кровопотери составила 125 мм рт.ст и достигала 36% от исходного, что даже превышает показатели литературных данных (3). Через 10-15 минут после окончания забора крови показатели АД опытных крыс начинали постепенно увеличиваться и к 90 минутам наблюдений составляли 66-68% от исходных значений (табл.1). Частота пульса у крыс вследствие кровопотери снижалась, у части животных - выражено (менее 300 ударов в минуту). Частота дыхательных движений существенно не менялась в ходе исследований. У части крыс дыхание становилось поверхностным.

Препарат Т-975 в дозе 5 мг/кг в/б не вызывал изменений показателей гемодинамики у крыс с кровопотерей.

Внутрибрюшинное введение Т-975 в дозе 10 мг/кг крысам (n=8) в состоянии гиповолемического шока вызывало выраженное и устойчивое увеличение показателей АДс и АДд (табл.2). Эффект развивался уже с 4-5 минуты после инъекции, без видимых изменений состояния животного, и к 15 минутам достигал 90% от исходных значений. После 45 минут антигиповолемическое действие препарата Т-975 постепенно снижалось. На протяжении всего периода наблюдений эффект оставался значимым в сравнении с показателями кровопотери данной группы и в сравнении с соответствующим временем модели кровопотери.

Показатели ЧСС увеличивались менее выражено, различия с исходными значениями оставались значимыми до окончания периода наблюдения. Частота дыхания у экспериментальных крыс практически не изменялась.

Пример 2. Антигипотензивное действие препарата Т-977 (5 мг/кг в/б, n=7) развивалось у крыс в состоянии геморрагического шока также через 1-2 минуты после инъекции (табл.3) без каких-либо внешних признаков проявления эффекта. Уже с 5 минуты действия Т-977 показатели АДс и АДд опытных животных достоверно выше показателей кровопотери и соответствующего времени модели кровопотери. Выраженный антигиповолемический эффект Т-977 в дозе 5 мг/кг продолжался более 90 минут. Показатели АД в исследуемый промежуток времени вполне соответствуют физиологическим нормам для крыс, хотя в нашем исследовании они достоверно отличаются от высоких значений исходных АДс и АДд.

Частота пульса, достоверно сниженная в результате кровопотери, уже с 10 минуты действия Т-977 постепенно увеличивалась, не достигая, однако, исходных показателей.

Частота дыхания под действием Т-977, как и в других группах, не менялась.

Пример 3. Введение препарата Т-982 в дозе 5 мг/кг в/б крысам в состоянии геморрагического шока (n=7) вызывало выраженный, но относительно кратковременный антигиповолемический эффект (табл.4). Повышение АД наблюдалось уже через 1-2 минуты после инъекции и к 7-10 минутам достигало максимума, около 80% от исходных значений. Однако через 12-15 минут действие препарата ослабевало и к 20-25 минутам после введения Т-982 значения АД у большинства опытных крыс не отличались от показателей соответствующего времени модели кровопотери.

Показатели частоты пульса за такое короткое время проявления эффекта не успевали существенно измениться.

Показатели частоты дыхания в этой группе крыс несколько повышались как после кровопотери, так и под действием Т-982.

В результате исследований ряда производных изотиомочевины выявлены соединения, обладающие выраженной антигиповолемической активностью на модели геморрагического шока у крыс. Эффект развивался с первых минут после внутрибрюшинного введения (Т-977, Т-982, Т-975), достигал 80-90% от исходных показателей АД к 7-10 минутам (Т-982), либо к 15-20 минутам (Т-975, Т-977) и продолжался 20-25 минут (Т-982), более 45 минут (Т-975)и более 90 минут (Т-977).

Частота сердечных сокращений, сниженная в состоянии геморрагического шока, у большинства животных под действием указанных соединений имела устойчивую тенденцию к учащению.

Визуальных реакций у наркотизированных животных на введение исследованных соединений не наблюдалось, частота дыхания не изменялась

Как видно из приведенных данных, антигипотензивное действие соединений Т-975, Т-977 и Т-982 в дозах 5 и 10 мг/кг продолжается от 25 до 90 мин, что значительно превосходит длительность действия мезатона и препаратов с полипептидной структурой.

Таким образом, установлено, что соединения Т-975, Т-977 и Т-982 обладают выраженным антигипотензивным действием и способны эффективно и достаточно длительно нивелировать критическое снижение артериального давления, вызванное тяжелой кровопотерей без возникновения вторичной гипотензии, что характерно для адреномиметиков, в том числе и для мезатона. Следует отметить, что эти соединения менее токсичны, чем мезатон.

Проведенные исследования достоверно свидетельствуют, что соединения Т-975, Т-977 и Т-982 могут применяться для лечения острых и хронических гипотензивных состояний.

Таблица 1. Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери (n=11).
Группы, время после введения рецептуры	ЧСС	АДс	АДд	ЧДД
(уд/мин)	(мм рт.ст.)	(мм рт.ст.)	(в минуту)
Исходно	413.1±10.43	186.3+3.51	132.9+2.31	72.4±3.87
После кровопотери
2 минуты	-	69.7±6,85*	48.1±9.04*	-
5 минут	-	75.2±6.94*	47.0±6.68*	-
10 минут	359.5±12.86*	77.4±4.93*	51.1±5.04*	83.4±7.72*
20 минут	358.7±13.30*	86.4±8.03*	62.9±8.30*	78.6±6.69
30 минут	372.2±17.11	98.4±9.89*	73.5±9.44*	78.5±6.81
40 минут	383.2±14.26	112.8±10.05*	79.7±9.58*	72.4±5.67
50 минут	387.9±11.89	111.3±8.40*	78.5±7.62*	77.4±6.71
60 минут	402.7±11.51	П8.3±6.85*	82.9±6.32*	77.7±6.76
70 минут	416.3±8.41	123.0±5.50*	85.5±5.13*	79.3±6.27
80 минут	429.3±8.85	126.7±5.49*	87.5±4.96*	79.4±4.17
90 минут	434.2±9.41	127.1±4.73*	87.3±4.10*	80.8±5.30
Примечание: * - достоверность различий с исходным значением по t-критерию Стьюдента (Р 0,05)
n - количество животных

Таблица 2. Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения Т-975 (10 мг/кг в/б) (n=8).
Группы, время после введения рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДд (мм рт.ст.)	ЧДД (в минуту)
Исходно	416.0±11.15	179.9±4.22	130.2±1.41	73.50±4.85
После кровопотери
5 минут	326,5±11.14*	71.5±5.53*	43.4±6.35*	83.62±4.85
Т-975 10 мг/кг в/бр
2 минуты	-	104.0±8.89*''м	79.6±9.73*''м	-
5 минут	-	141.2±9.34*''м	116.7±7.26''м	-
7 минут	296.2±29.50*м	148.9±7.53*''м	123.2±5.33''м	80.2±6.42
10 минут	326.2±7.18*	154.1±11.90''м	124.0±9.84''м	81.4±5.67
15 минут	351.7±7.75*	164.0±6.61''м	133.8±4.04''м	77.1±5.53
20 минут	362.4±13.24*	158.1±5.18*''м	129.1±4.23''м	77.4±4.43
30 минут	370.7±4.92*''	161.2±6.68*''м	130.5±3.98''м	73.7±4.36
40 минут	370.2±6.57*''	153.3±6.38*''м	123.3±3.82''м	72.7±5.13
50 минут	352.7±6.64*	137.0±9.77*''м	107.7±7.36''м	75.7±5.19
60 минут	368.8±9.94*''	142.5±9.90*''м	109,5±8.60*''м	77.0±5.43
Примечание: достоверность различий по t-критерию Стьюдента (Р 0,05)
* - с исходным значением;
'' - с кровопотерей,
м - с соответствующим временем модели кровопотери.
n - количество животных

Таблица 3. Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения Т-977 (5 мг/кг в/б) (n=7).
Группы, время после введения рецептуры	ЧСС (уд/мин)	АДс (мм рт.ст.)	АДц (мм рт.ст.)	ЧДД (в минуту)
Исходно	439.7±12.76	194.1±5.74	135.4±2.7	68.0±2.69
После кровопотери
5 минут	360.8±16.26*	66.4±7.83*	41.3±7.48*	68.3±4.13
Т-977 5 мг/кг в/бр
2 минуты	-	83.8±9.03*	60.8±10.56*	-
5 минут	-	100.6±7.26*''м	81.1±7.71*''м	-
10 минут	371.1±23.52*	118.8±9.36*''м	98.4±8.41*''м	75.4±2.85
20 минут	374.1±8.81*	133.0±6.47*''м	112.3±6.10*''м	72.8±3.76
30 минут	380.0±15.95*	142.3±7.72*''	116.3±5.98*''м	71.1±6.63
40 минут	388.1±14.89*	147.7±8.20*''м	120.1±6.88''м	67.6±4.94
50 минут	388.8±14.93*	145.6±7.07*''м	115.3±6.01*''м	67.0±3.80
60 минут	398.8±14.89	148.1±10.05*''м	114.6±8,16*''м	69.0±3.93
70 минут	401.4±13.36	140.6±12.83*''	108.6±11.57*''	70.3±2.98
80 минут	403,8±12.74*	155,0±5.83*''м	120.0±5.71''м	68.3±3.32
90 минут	410.7±10.77''	159.5±5.68*''м	124.7±3.95*''м	69.3±1.33
Примечание: достоверность различий по t-критерию Стьюдента (Р 0,05)
* - с исходным значением;
'' - с кровопотерей, n - количество животных
м - с соответствующим временем модели кровопотери.

Таблица 4. Показатели гемодинамики и дыхания наркотизированных крыс после тяжелой кровопотери и введения Т-982 (5 мг/кг в/б, n=7).
Группы, время после введения	ЧСС	АДс	АДд	ЧДД
рецептуры	(уд/мин)	(мм рт.ст.)	(мм рт.ст.)	(в минуту)
Исходно	428.7±19.47	184.1±3.77	137.0±4.45	75.1±3.32
После кровопотери
10 минут	369.1±15.25*	92.1±7.03*	67.8±8.14*	92.6±7.48
Т-982 5 мг/кг в/бр
2 минуты	-	106.4±9.63*м	83.1±9.54*м	-
5 минут	-	133.8±8.84*''м	107.4±9.24*''м	-
10 минут	362.8±20.08*	141.6±9.63*''м	116.0±8.28*''м	92.8±6.41*
15 минут	-	129.8±7.65*''м	109.0±6.10*''м	-
20 минут	347.1±24.16*	117.0±7.24*	97.7±6.14*	88.1±6.86
25 минут	110.4±7.24*	90.8±6.68*"
Примечание: достоверность различий по t-критерию Стьюдента (Р 0,05)
'' - с исходным значением;
* - с кровопотерей;
м - с соответствующим временем модели кровопотери.
n - количество животных