антиагрегационное средство
Классы МПК: | A61K31/46 8-азабицикло [321] октан; его производные, например атропин, кокаин A61P7/02 антитромботические средства; антикоагулянты; ингибиторы аггрегации тромбоцитов |
Автор(ы): | Васильева Татьяна Михайловна (RU), Петрухина Галина Николаевна (RU), Мирзоян Рубен Симонович (RU), Середенин Сергей Борисович (RU), Макаров Владимир Александрович (RU), Ганьшина Тамара Сергеевна (RU), Пятин Борис Михайлович (RU), Косточка Леонид Михайлович (RU) |
Патентообладатель(и): | Государственное Учреждение Научно-исследовательский институт фармакологии имени В.В. Закусова Российской академии медицинских наук (RU), Государственное Учреждение Гематологический научный центр Российской академии медицинских наук (RU) |
Приоритеты: |
подача заявки:
2005-12-28 публикация патента:
27.04.2009 |
Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии, и касается разработки нового антиагрегационного средства. Для этого предлагается использовать тропоксин (гидрохлорид 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана), известный ранее в качестве противомигреневого средства. Тропоксин обладает выраженной антиагрегационной активностью, превосходящей активность используемого в клинической практике антиагрегационного препарата трентал.
Формула изобретения
Применение гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана (тропоксина) в качестве антиагрегационного средства.
Описание изобретения к патенту
Изобретение относится к области медицины и может быть использовано для лечения ишемических поражений мозга и сердца, а также нарушений микро- и макроциркуляции в других органах. Кардиоваскулярные и цереброваскулярные расстройства занимают ведущее место среди основных причин смертности и инвалидизации населения различных стран. Антиагрегационные средства широко применяются в комплексной терапии сердечно-сосудистых заболеваний.
Известны средства, снижающие агрегационную способность тромбоцитов. В частности, пентоксифиллин (трентал). Он снижает агрегационную способность тромбоцитов и обладает сосудорасширяющим действием, поэтому нашел широкое применение при лечении нарушений мозгового и регионального кровообращения (С.Крыжановский, М.Вититнова. Современные лекарственные средства. М.: Ризол классик, 2005). Вместе с тем пентоксифиллин обладает рядом существенных побочных эффектов. К ним относятся тошнота, рвота, чувство тяжести в эпигастрии, тахикардии, артериальная гипотензия, головокружение, нарушение сна, судороги, возбуждение, аллергические реакции. Все это часто ограничивает его применение в клинической практике.
Широко применяется также ацетилсалициловая кислота. Она оказывает мощное антиагрегационное действие как in vitro, так и in vivo. Однако данное соединение тормозит противотромботическую активность сосудистой стенки, что является крайне нежелательным в процессе лечения и профилактики тромбозов. Именно в силу этих причин часты случаи так называемой "аспиринорезистентности" у значительного контингента больных. Кроме того, ацетилсалициловая кислота обладает сильным ульцерогенным эффектом, вызывает лейкопению и др. В силу изложенного, изыскание новых ингибиторов агрегации тромбоцитов остается актуальной задачей фармакологии.
Нами предложено использовать в качестве средства, тормозящего агрегационную способность тромбоцитов, гидрохлорид 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октан (тропоксин). Он снижает агрегационную способность тромбоцитов при ее индукции адреналином в конечной концентрации 2-7 мг/мл, а АДФ-индуцированную агрегацию в концентрации 0,01-10 мг/мл. По своей антиагрегационной активности тропоксин превосходит пентоксифиллин при использовании как in vitro, так и ex vivo.
Данные закономерности подтверждаются следующими примерами.
Конкретные примеры, подтверждающие антиагрегационную активность тропоксина
Пример 1. Эксперименты по изучению влияния гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана на агрегационную активность тромбоцитов in vitro были выполнены на венозной крови здоровых доноров, которую получали путем пункции кубитальной вены и стабилизировали 3,8%-ным раствором цитрата натрия в соотношении 9:1. Для приготовления богатой тромбоцитами плазмы кровь центрифугировали в течение 10 минут при 1000 об/мин, после чего верхний слой плазмы переносили в другую пробирку, а остаток повторно центрифугировали в течение 20 минут при 3000 об/мин для получения плазмы, бедной тромбоцитами.
Агрегацию тромбоцитов исследовали на агрегометре фирмы "Biola" (Россия) по методу G.G.V.Born. С этой целью в кювету прибора помещали 300 мкл исследуемой богатой тромбоцитами плазмы. Исследуемое вещество добавляли в кювету агрегометра, инкубировали в течение 5-ти минут при 37°С и затем индуцировали процесс тромбоцитарной агрегации. В качестве проагрегантов в работе использовали АДФ (Boehringer Mannheim, Австрия) в конечной концентрации 1×10 -5 М и адреналин (Reanal, Венгрия) в конечной концентрации 2,5×10-6 М. Оптическим контролем служил такой же объем плазмы, не содержащей тромбоцитов. О степени агрегации судили по максимальной величине падения оптической плотности после окончания реакции (Amax) по сравнению с исходной величиной. При инкубации обогащенной тромбоцитами плазмы с 0,01 мг/мл гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана АДФ-индуцированная агрегация тромбоцитов снижалась с 59% до 46%.
Пример 2. Плазму, обогащенную тромбоцитами, приготовляли как описано в примере 1. При инкубации обогащенной тромбоцитами плазмы с 3 мг/мл гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана АДФ-индуцированная агрегационная способность тромбоцитов снижалась до 29%. На интактной плазме она составила 56%.
Пример 3. Плазму, обогащенную тромбоцитами, приготовляли как описано в примере 1. При инкубации обогащенной тромбоцитами плазмы с 7 мг/мл гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана АДФ-индуцированная агрегационная способность тромбоцитов снижалась до 18%. На интактной плазме она составила 55%.
Пример 4. Плазму, обогащенную тромбоцитами, приготовляли как описано в примере 1. При инкубации обогащенной тромбоцитами плазмы с 2 мг/мл гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана адреналин-индуцированная агрегационная способность тромбоцитов снижалась до 38%. На интактной плазме она составила 58%.
Пример 5. Плазму, обогащенную тромбоцитами, приготовляли как описано в примере 1. При инкубации обогащенной тромбоцитами плазмы с 7 мг/мл гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана адреналин-индуцированная агрегационная способность тромбоцитов снижалась до 2%. На интактной плазме она составила 54%.
Пример 6. Плазму, обогащенную тромбоцитами, приготовляли как описано в примере 1. При инкубации обогащенной тромбоцитами плазмы с 7 мг/мл пентоксифиллина АДФ-индуцированная агрегационнная способность тромбоцитов снижалась до 40%. На интактной плазме она составила 53%.
Пример 7. В экспериментах по изучению влияния гидрохлорида 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октана на агрегацию тромбоцитов ex vivo использовали кроликов обоего пола массой 3,0-4,0 кг, которым болюсно внутривенно вводили данное вещество в дозе 10 мг/кг веса. Для инъекции гидрохлорид 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октан предварительно растворяли в 5 мл физиологического раствора. Образцы крови для оценки тромбоцитарной активности забирали из краевой вены уха животного методом свободного падения капель. Кровь брали до введения вещества (контрольный опыт) и через 15, 45, 75 и 90 минут после введения. Стабилизацию крови и приготовление образцов бедной и богатой тромбоцитами плазмы, а также измерение тромбоцитарной агрегации проводили с применением тех же методик, что и при работе с кровью доноров.
В исходном состоянии агрегационная способность тромбоцитов интактного кролика составила 54%. Через 15 мин после введения она составила 37%, через 45 мин - 28%, через 75 мин - 23%, через 90 мин - 34%. Таким образом, гидрохлорид 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октан проявил антиагрегационную активность не только в условиях in vitro, но и ex vivo.
Пример 8. В экспериментах по изучению влияния пентоксифиллина на агрегацию тромбоцитов ex vivo использовали кроликов обоего пола массой 3,0-4,0 кг, которым болюсно внутривенно вводили данное вещество в дозе 10 мг/кг веса. Для инъекции пентоксифиллин предварительно растворяли в 5 мл физиологического раствора. Образцы крови для оценки тромбоцитарной активности забирали из краевой вены уха животного методом свободного падения капель. Кровь брали до введения вещества (контрольный опыт) и через 15, 45, 75 и 90 минут после введения. Стабилизацию крови и приготовление образцов бедной и богатой тромбоцитами плазмы, а также измерение тромбоцитарной агрегации проводили с применением тех же методик, что и при работе с кровью доноров. В исходном состоянии агрегационная способность тромбоцитов интактного кролика составила 51%. Через 15 мин после введения она составила 43%, через 45 мин - 39%, через 75 мин - 30%, через 90 мин - 45%.
Таким образом, тропоксин (гидрохлорид 3-(3,4,5-триоксибензоил-оксиимино)-8-метил-8-азабицикло[3,2,1]октан) по своей антиагрегационной активности как in vitro, так и ex vivo превосходит пентоксифиллин, используемый в клинической практике в качестве антиагреганта.
Класс A61K31/46 8-азабицикло [321] октан; его производные, например атропин, кокаин
Класс A61P7/02 антитромботические средства; антикоагулянты; ингибиторы аггрегации тромбоцитов