способ моделирования постмедикаментозного иммунодефицита
| Классы МПК: | G09B23/28 в медицине |
| Автор(ы): | Пигунова Людмила Александровна (RU), Демешко Наталия Ивановна (RU), Гринзайд Юрий Моисеевич (RU), Скворцова Жанна Александровна (RU), Мельникова Валентина Ивановна (RU) |
| Патентообладатель(и): | Федеральное государственное учреждение "Пятигорский государственный научно-исследовательский институт курортологии Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию" (ФГУ "Пятигорский ГНИИК Росздрава") (RU) |
| Приоритеты: |
подача заявки:
2007-07-23 публикация патента:
27.03.2009 |
Изобретение относится к экспериментальной медицине и может быть использовано для моделирования иммунодефицита, характерного для онкологических пациентов. Для чего осуществляют вынужденное плавание животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно. Затем на следующий день проводят разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора и исследование иммунологических показателей на 5-6 день после инъекции. Способ обеспечивает адекватное воспроизведение модели, наиболее приближенной к реальной ситуации за счет предварительной инициации стресса. 1 табл.
(56) (продолжение):
CLASS="b560m"с.118-121. АЛЕКСЕЕВА М.Н. «Иммуномодулирующее действие импульсного низкоэнергетического лазерного излучения при вторичных иммунодефицитных состояниях, индуцированных стрессом, автореф. к.м.н. 1995 г. АЛЕШИН В.Б. «Влияние метоклопрамида на выживаемось и морфологию крови белых крыс в условиях двигательно-холодового стресса», Морфогенез тканей и органов в условиях адаптации, 1990 г., с.5-9. YU J et al. "[Effects of oxyfedrine on high blood viscosity and myocardial necrosis induced by epinephrine and ice water stress in rats]" Zhongguo Yao Li Xue Bao. 1993 Jul; 14(4): 364-6.
Формула изобретения
Способ моделирования иммунодефицита, характерного для онкологических пациентов, включающий вынужденное плавание животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 мин в течение 3 дней ежедневно, затем на следующий день разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора и исследование иммунологических показателей на 5-6 день после инъекции.
Описание изобретения к патенту
Известен способ моделирования постмедикаментозного иммунодефицита (Микроволны миллиметрового диапазона в профилактике экспериментального постмедикаментозного иммунодефицита цитостатического генеза. Авт. Н.И.Демешко и др. Актуальные вопросы восстановительной медицины, курортологии и физиотерапии: Матер. Международного конгресса «Здравница - 2006. - М., 2006). Способ прототипа заключается в инициации иммунодефицитного состояния посредством разовой внутрибрюшинной инъекции 0,5 мл цитостатика циклофосфана в дозе 4-8 мг/100 г массы тела животного. Этот способ нельзя признать полностью адекватным реальным клиническим ситуациям, когда у многих онкологических пациентов химиотерапия протекает на фоне другого не менее важного фактора иммунодефицита - стресса.
Способ изобретения гораздо более близок к этим ситуациям. Сущность его заключается в том, что вначале у экспериментальных животных, например крыс, вызывают стресс. Этот процесс осуществляется путем вынужденного плавания животных в водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно. На следующий день производят инъекцию циклофосфана в дозе 8-10 мг/100 г массы тела животного внутрибрюшинно. На 5 день после инъекции проводят прижизненные иммунологические исследования - содержание лейкоцитов и лейкоформула крови, фагоцитоз нейтрофилами по Иванову и Чухловину (К методике определения поглотительной и переваривающей способности нейтрофилов. - Лаб. дело. - 1967. - 10. - 610-613), масс селезенки и тимуса.
Способ осуществляют следующим образом - вначале инициируют модель стресса путем вынужденного плавания животных в питьевой водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно, на следующий день производят разовую внутрибрюшинную инъекцию 8-10 мг циклофосфана в расчете на 100 г массы тела животного в 1,0 мл раствора. На 5-6 день после инъекции исследуют иммунологические показатели.
Для изучения адекватности и тяжести предлагаемой модели изучено 31 крыс-самцов линии Вистар массой тела 200-250 г, разделенные на 4 группы. Первую группу представляли 7 интактных животных. 7 крыс второй группы получали инъекцию циклофосфана в дозе 8-10 мг/100 г массы тела; у 8 животных 3 группы инициировали стресс путем вынужденного плавания животных в питьевой водопроводной воде при температуре 18°-20°С по 15-20 минут в течение 3 дней ежедневно); 4 группа - крысы, у которых сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем они получали инъекцию циклофосфана (9).
На 5-6 день после инъекции производилось исследование иммунологических тестов.
Данные таблицы убедительно показывают, что в результате воздействия по способу изобретения развиваются достоверные иммуносупрессорные сдвиги как в отношении масс иммунокомпетентных органов, так и по основным показателя фагоцитоза - ФАЛ (фагоцитарная активность лейкоцитов), ФИЛ (фагоцитарный индекс лейкоцитов) и ПЗФ (показатель завершенности фагоцитоза).
| Влияние разработанной модели и ее компонентов на показатели иммунитета | |||||||
| Показатель | Группа | N гр. | N | M | m | P | |
| Масса селезенки, мг | Интактная | 1 | 7 | 1345 | 96,2 | 1-2<0.01 | 2-3<0.01 |
| ц/ф 1,0 | 2 | 7 | 898 | 100,1 | 1-3>0.1 | 2-4>0.05 | |
| стресс | 3 | 8 | 1475,1 | 150,4 | 1-4>0.6 | 3-4>0.2 | |
| Стресс + ц/ф 1.0 | 4 | 9 | 1250 | 136,5 | |||
| Масса тимуса, мг | Интактная | 1 | 9 | 248,3 | 24,2 | 1-2<0.001 | 2-3<0.01 |
| ц/ф 1,0 | 2 | 7 | 101,6 | 18,8 | 1-3>0.1 | 2-4>0.1 | |
| стресс | 3 | 8 | 199,9 | 24,5 | 1-4<0.01 | 3-4>0.05 | |
| Стресс + ц/ф 1.0 | 4 | 9 | 143,4 | 18,4 | |||
| ФАЛ, % | Интактная | 1 | 9 | 47,8 | 1,93 | 1-2<0.001 | 2-3>0.05 |
| ц/ф 1,0 | 2 | 7 | 23,4 | 2,17 | 1-3<0.001 | 2-4>0.8 | |
| стресс | 3 | 8 | 18,80 | 1,00 | 1-4<0.001 | 3-4<0.05 | |
| Стресс + ц/ф 1.0 | 4 | 9 | 22,9 | 1,38 | |||
| ФИЛ, ед. | Интактная | 1 | 9 | 0,98 | 0,09 | 1-2<0.001 | 2-3>0.05 |
| ц/ф 1,0 | 2 | 7 | 0,39 | 0,08 | 1-3<0.001 | 2-4>0.3 | |
| стресс | 3 | 8 | 0,23 | 0,02 | 1-4<0.001 | 3-4>0.2 | |
| Стресс + ц/ф 1.0 | 4 | 9 | 0,30 | 0,05 | |||
| ПЗФ, % | Интактная | 1 | 9 | 26,7 | 1,45 | 1-2<0.001 | 2-3>0.3 |
| ц/ф 1,0 | 2 | 7 | 5,86 | 2,42 | 1-3<0.001 | 2-4>0.5 | |
| стресс | 3 | 8 | 10,50 | 3,65 | 1-4<0.001 | 3-4>0.5 | |
| Стресс + ц/ф 1.0 | 4 | 9 | 8,03 | 2,78 | |||
Способ может быть проиллюстрирован следующими примерами.
1. Интактная крыса-самец линии Вистар №1, масса тела 210 г. Дополнительных воздействий не получала. Исследование животного осуществлено одновременно с животными опытной группы (на 5 день после инъекции циклофосфана). Масса селезенки 1200 мг, масса тимуса 243 мг, АОК селезенки 104 Кл/чП, ФАЛ 54%, ФИЛ 1,56 ед., ПЗФ 28,2%.
2. Крыса-самец линии Вистар №23, масса тела 210 г получила инъекцию раствора циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 570 мг, масса тимуса 64 мг, АОК селезенки 136 Кл/чП, ФАЛ 26%, ФИЛ 0,28 ед., ПЗФ 7,14%.
3. Крыса-самец линии Вистар №13, масса тела 230 г, у которой сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем она получила инъекцию циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 970 мг, масса тимуса 86 мг, АОК селезенки 120 Кл/чП, ФАЛ 24%, ФИЛ 0,36 ед., ПЗФ 11,1%.
4. Крыса-самец линии Вистар №14, масса тела 250 г, у которой сначала инициировался стресс по вышеописанной методике, а затем она получила инъекцию циклофосфана в вышеуказанной дозе. Исследование животного осуществлено на 5 день после инъекции. Масса селезенки 1130 мг, масса тимуса 140 мг, АОК селезенки 160 Кл/чП, ФАЛ 24%, ФИЛ 0,26 ед., ПЗФ 7,6%.