способ получения нанокомпозитных полимерных материалов с биологической активностью и нанокомпозитные полимерные материалы, полученные этим способом

Формула изобретения

1. Способ получения нанокомпозитных полимерных материалов с биологической активностью путем формирования наноструктурированной поверхности (НСП) на подложке из биосовместимого полимерного материала, включающий нанесение на поверхность биосовместимого полимерного материала пленки на основе углерода толщиной, не превышающей нанометровый диапазон, отличающийся тем, что поверхность биосовместимого полимерного материала предварительно обрабатывают потоками ионов химически активных и/или инертных газов, и/или их смесей при средней энергии ионов 500-3000 эВ и плотности тока ионов 0,5-5 мА/см² до получения рельефа поверхности со среднеквадратичной шероховатостью (Rq) 5,0-200 нм, после чего на полученную поверхность наносят пленку на основе углерода, при этом параметры рельефа НСП регулируют путем изменения состава газа для обработки потоками ионов, и/или материала для нанесения углеродной пленки, и/или выбора режимов проведения этих операций с возможностью получения свойств НСП, определяющих заданную биологическую активность материала.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве химически активных газов используют, например, активную смесь кислорода и азота (воздушную смесь), или кислород, или тетрафторметан.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве инертных газов используют, например, неон, или аргон, или криптон, или ксенон.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что нанесение пленки на основе углерода производят методом ионно-стимулированного осаждения из газовой фазы паров углеводородов, например циклогексана.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что параметры рельефа НСП избирательно регулируют путем изменения толщины пленки на основе углерода посредством управления временем ее нанесения.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что параметры рельефа НСП избирательно регулируют путем изменения фазового и/или кластерного состава углеродной пленки посредством управления энергией ионов и/или использования различных углеводородов.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве биосовместимого полимерного материала используют синтетические полимеры, например полиэтилентерефталат и политетрафторэтилен.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве биосовместимого полимерного материала используют биодеградируемые природные полимеры, например хитозаны, или ацетилцеллюлозу, или полиоксиалканоаты.

9. Способ по п.1, отличающийся тем, что для получения материалов селективного действия наноструктурированную поверхность полимерного материала дополнительно модифицируют органическими производными фуллерена.

10. Способ по п.12, отличающийся тем, что в качестве органических производных фуллерена используют фуллереновые модификаторы с фрагментами гетероциклических соединений, состав которых соответствует заданному свойству получаемого материала.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что нанесение органических производных фуллерена на НСП осуществляют методом центрифугирования.

12. Способ по п.9, отличающийся тем, что для получения выраженной антимикробной активности и противогрибковой активности в случае использования полимеров с гидрофобными функциональными группами в составе производного фуллерена используют хинолин или индол.

13. Способ по п.9, отличающийся тем, что для получения выраженной противоопухолевой активности в качестве фуллеренового модификатора используют диаду фуллерен-порфирин.

14. Нанокомпозитный полимерный материал, обладающий биологической активностью, включающий биосовместимый полимерный материал и нанесенную на его поверхность пленку на основе углерода толщиной, не превышающей нанометровый диапазон, отличающийся тем, что поверхность биосовместимого полимерного материала, на которой размещена пленка на основе углерода, выполнена в виде рельефа со среднеквадратичной шероховатостью (Rq) 5,0-200 нм.

15. Нанокомпозитный полимерный материал по п.14, отличающийся тем, что он обладает противомикробной активностью, при этом отношение площадей поверхности с высоким (не менее 50 В) и низким (не более 20 В) потенциалами составляет не менее 0,5, а отношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии составляет 5-40.

16. Нанокомпозитный полимерный материал по п.15, отличающийся тем, что радиус основания выступов (R) на поверхности НСП составляет 80-230 нм, а их высота (Н) равна 10-50 нм.

17. Нанокомпозитный полимерный материал по п.14, отличающийся тем, что он обладает противоопухолевой активностью, при этом среднеквадратичная шероховатость поверхности материала (Rq) составляет 25-70 нм, отношение площадей поверхности с высоким (не менее 50 В) и низким (не более 20 В) потенциалом составляет не менее 0,5, а отношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии составляет не менее 5.

18. Нанокомпозитный полимерный материал по п.14, отличающийся тем, что радиус выступов выполнен не менее 500 нм, а их высота составляет не менее 500 нм.

19. Нанокомпозитный полимерный материал по п.14, отличающийся тем, что в качестве биосовместимого полимерного материала используют синтетические полимеры, например полиэтилентерефталат или политетрафторэтилен.

20. Нанокомпозитный полимерный материал п.14, отличающийся тем, что в качестве биосовместимого полимерного материала используют биодеградируемые природные полимеры, например хитозаны, ацетилцеллюлоза, полиоксиалканоаты.

21. Нанокомпозитный полимерный материал, обладающий биологической активностью, включающий биосовместимый полимерный материал, поверхность которого выполнена в виде рельефа, со среднеквадратичной шероховатостью (Rq) 5,0-200 нм, и нанесенную на эту поверхность пленку на основе углерода толщиной, не превышающей нанометровый диапазон, отличающийся тем, что он содержит слой органических производных фуллерена, расположенный на поверхности пленки на основе углерода.

22. Нанокомпозитный полимерный материал по п.21, отличающийся тем, что в качестве органических производных фуллерена используют, например, диады, содержащие фуллерен-фармакофорный фрагмент.

23. Нанокомпозитный полимерный материал по п.22, отличающийся тем, что в качестве органических производных фуллерена используют 1-метил-2-(индолил-3) фуллеропирролидин (диаду фуллерен-индол).

24. Нанокомпозитный полимерный материал по п.22, отличающийся тем, что в качестве органических производных фуллерена используют 1-метил-2-(хинолинил-2)- фуллеропирролидин (диаду фуллерен-хинолин).

25. Нанокомпозитный полимерный материал по п.22, отличающийся тем, что в качестве органических производных фуллерена используют диаду фуллерен-порфирин.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области нанотехнологии и наноструктурированным полимерным биоматериалам и может быть использовано в биотехнологии, медицине, пищевой промышленности и других областях для разработки средств различного назначения с антибактериальными и лечебными свойствами, в частности для создания лечебных повязок и медицинских средств нового поколения, в том числе трансдермальных лечебных форм и средств адресной доставки лекарственных препаратов.

Известен способ получения материалов медицинского применения (Патент РФ №2153887, МПК А61L 27/30, оп.2000 г.), включающий нанесение на поверхность полимера углеродсодержащей наноструктурированной модифицирующей пленки.

Однако полученные известным способом структуры не обладают собственной биологической активностью.

Известны способы получения наноструктурированных углеродных полимеров (Патент РФ №2282583, МПК С01 В 31/00, оп.2005 г.) и наноструктурированных алмазоподобных углеродных пленок для медицинских применений [R.J.Narayan, Mat.Sci.Eng., С 25, 405 (2005)], которые обладают высокой гемосовместимостью, низким коэффициентом трения и тромборезистетнтными свойствами, обусловленными их биоинертностью. Однако они также не проявляют биологической активности, а потому не находят применения при создании непосредственно лечебных средств.

Известны наноструктурные материалы с биоцидными свойствами (Патент РФ №2195473, МПК С09D 05/14, оп.2002 г), содержащие в качестве бактерицидного компонента наноструктурные частицы металлов, в частности серебра. Такие материалы используются преимущественно для защитных покрытий различных объектов и, поскольку не обладают биосовместимостью, не применимы в медицине и биотехнологиях, для использования их в качестве лечебных средств, например в виде антимикробных материалов, соприкасающихся с телом человека.

В то же время биология и медицина представляют собой широкие области использования наноструктурных материалов для создания медицинских препаратов и лечебных систем, например, известны нанокомпозитные материалы («Нанотехнология в ближайшем десятилетии. Прогноз и направление исследований», под. ред. М.К.Роко и др., М., Мир, 2002 г.) с наночастицами алмаза, которые, проникая в раковые клетки, разрушают их.

Наиболее близким к описываемому изобретению является способ получения нанокомпозитных биологически активных полимерных материалов (В.М.Елинсон, В.В.Слепцов, А.Н.Лямин, В.В.Потрясай, Л.Н.Костюченко, А.Д.Мусина. «Барьерные свойства углеродных пленок, нанесенных на полимерную основу в условиях агрессивной окружающей среды», Труды V Международной научно-технической конференции «Высокие технологии в промышленности России». Москва, МГТУ им.Н.Э.Баумана, 1999 г., стр.419-426), включающий формирование наноструктурированной поверхности (НСП) на подложке из биосовместимого полимерного материала посредством обработки поверхности подложки потоками ионов химически активных или инертных газов, или их смеси с последующим модифицированием сформированной НСП путем нанесения на нее пленки на основе углерода.

Полученные известным способом материалы биосовместимы, обладают бактериостатическими и гипоаллергенными свойствами, высокой химической стойкостью по отношению к биосфере человека и рекомендованы для применения в таких медицинских изделиях как зонды различных типов, катетеры, дренажные трубки, полимерные контактные линзы, контейнеры для контактных линз.

Однако известный способ не позволяет формировать НСП с шероховатостью Rq, превышающей 1-2 нм, при этом наносимые углеродные покрытия имеют толщину более 200 нм, что не дает возможности создавать матричные структуры и ограничивает их использование в качестве биологически активных элементов изделий медицинского назначения.

Кроме того, биологическая активность известных материалов недостаточна для создания лекарственных средств селективного действия, например с выраженной антимикробной или противоопухолевой активностью, а потому известные материалы предполагают крайне ограниченную область применения.

Таким образом, технический результат, получаемый от использования настоящего изобретения, состоит в обеспечении возможности создания нового класса материалов, безопасных в применении, обладающих широким спектром биологической активности, в расширении области применения этих материалов, включая возможность использования их в качестве лекарственных средств внутренней адресной доставки, а также возможность создания трансдермальных лечебных форм и биологически активных систем селективного действия на различные клеточные структуры.

Кроме того, технический результат, получаемый от использования настоящего изобретения, состоит в повышении технологичности и экологической безопасности производства таких материалов.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе получения нанокомпозитного биологически активного полимерного материала, включающем формирование наноструктурированной поверхности (НСП) на подложке из биосовместимого полимерного материала посредством обработки поверхности подложки потоками ионов химически активных и инертных газов с последующим модифицированием сформированной НСП путем нанесения на нее пленки из углеродсодержащего материала, параметры рельефа НСП регулируют с возможностью получения свойств НСП, определяющих заданную биологическую активность материала.

При этом параметры рельефа НСП можно избирательно регулировать путем изменения формы и размеров ее элементов, а также расстояния между ними посредством изменения режимов обработки исходной поверхности потоками ионов газов и/или выбора их состава.

Целесообразно для получения полимерного нанокомпозитного материала с антимикробной активностью обработку исходной поверхности потоками ионов газов осуществляют в условиях средней энергии ионов 500-3000 эВ при плотности тока ионов 0,5-5 мА/см² и времени обработки потоком ионов от 1 до 30 мин с возможностью образования наноструктурированной поверхности подложки со среднеквадратичной шероховатостью (Rq) 5,0-200 нм при радиусе основания выступов (R) 80-230 нм и высоте выступов Н в интервале 10-200 нм.

Для обработки поверхности подложки потоками ионов газов могут быть использованы химически активные и/или инертные газы, и/или их смеси.

Предпочтительно в качестве химически активных газов использовать активную смесь кислорода и азота (воздушную смесь), кислород, тетрафторметан и др.

В качестве инертных газов могут быть использованы неон, аргон криптон, ксенон.

Модифицирование НСП целесообразно производить путем нанесения пленок на основе углеродсодержащего материала методом ионно-стимулированного осаждения из газовой фазы паров углеводородов, содержащих в молекуле частично или полностью sp³-гибридизованные атомы углерода, например, циклогексана.

При этом параметры рельефа НСП можно избирательно регулировать путем изменения толщины пленки из углеродсодержащего материала посредством управления временем осаждения модифицирующего или изменяя фазовый и кластерный состав пленки углерода путем управления энергией ионов и/или использования различных углеводородов.

Целесообразно в качестве биосовместимого полимерного материала использовать синтетические полимеры, например полиэтилентерефталат и политетрафторэтилен и др.

В качестве биосовместимого полимерного материала могут быть использованы биодеградируемые природные полимеры, например хитозаны, ацетилцеллюлоза, полиоксиалканоаты и др.

При этом для получения материалов селективного действия наноструктурированная поверхность полимерного материала может быть дополнительно модифицирована органическими производными фуллерена.

Целесообразно использовать фуллереновые модификаторы с фрагментами гетероциклических соединений, состав которых соответствует заданному свойству.

Нанесение органических производных фуллерена на НСП может быть осуществлено методом осаждения spin coating.

Для получения выраженной антимикробной активности и противогрибковой активности в составе производного фуллерена предпочтительно использовать хинолин или индол.

Для получения выраженной противоопухолевой активности в качестве фуллеренового модификатора предпочтительно использовать диаду фуллерен-порфирин.

Указанный технический результат достигается также тем, что в нанокомпозитном полимерном материале, обладающем биологической активностью и включающем биосовместимый полимерный материал с наноструктурированной поверхностью (НСП), последняя представляет собой двухслойную матричную систему, содержащую пленку на основе углерода, которая расположена не менее чем на 60% на выступах, сформированных на поверхности полимера в результате обработки ее потоками ионов.

При этом нанокомпозитный полимерный материал, обладающий противомикробной активностью, должен иметь величину среднеквадратичной шероховатости поверхности (Rq) не менее 5,0 нм, соотношение площадей поверхности с высоким (не менее 50 В) и низким (не более 20 В) потенциалом не менее 0,5, а соотношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии составляет 5-40.

Предпочтительно, чтобы радиус (R) основания выступов на поверхности НСП составлял 80-230 нм, а их высота (Н) 10-50 нм.

Целесообразно, чтобы нанокомпозитный полимерный материал, обладающий противоопухолевой активностью, имел среднеквадратичную шероховатость поверхности материала 25-70 нм, соотношение площадей поверхности с высоким (не менее 50 В) и низким (не более 20 В) потенциалом - не менее 0,5, а соотношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии - не менее 5.

При этом радиус выступов НСП нанокомпозитного полимерного материала, обладающего противоопухолевой активностью, выполнен не менее 500 нм, их высота составляет не менее 500 нм.

Целесообразно в качестве биосовместимого полимерного материала использовать синтетические полимеры, например полиэтилентерефталат или политетрафторэтилен, или биодеградируемые природные полимеры, например хитозаны, ацетилцеллюлозу, полиоксиалканоаты и др.

Указанный технический результат достигается также тем, что в нанокомпозитном полимерном материале, обладающем биологической активностью и включающем биосовместимый полимерный материал с сформированной наноструктурированной поверхностью (НСП) в виде двухслойной матричной системы, содержащей пленку на основе углерода, содержится слой органических производных фуллерена, осажденный на НСП.

В качестве органических производных фуллерена целесообразно использовать диады, содержащие фуллерен-фармакофорный фрагмент.

В качестве органических производных фуллерена могут быть использованы

1-метил-2-(индолил-3)фуллеропирролидин (диада фуллерен-индол),

1-метил-2-(хинолинил-2)фуллеропирролидин (диада фуллерен-хинолин) или

диада фуллерен-порфирин.

Установлено, что биологическая активность нанокомпозитных материалов зависит от свойств наноструктурированной поверхности, которые, в свою очередь, определяются технологическими факторами процесса получения НСП, что создает предпосылки для создания нанокомпозитных материалов с различным лечебным действием путем изменения режимов проведения операций по обработке исходной поверхности и ее модификации с применением методов ионно-плазменной технологии.

При этом различные формы и геометрические размеры наноструктуры в целом, а также различные формы и размеры ее элементов, например форма выступов, их радиус и высота, а также расстояния между ними, выраженные в таких характеристиках как шероховатость НСП, соотношение площадей поверхности с высоким и низким потенциалом и соотношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии определяют тот или иной вид биологической активности.

Как показали эксперименты, предварительная обработка поверхности полимеров, толщина покрытия, энергия частиц существенно влияют на изменение заряда поверхности полимеров. В процессе нанесения углеродного слоя пленки биосовместимого полимерного материала приобретают избыточный положительный заряд порядка до нескольких мкКл/м². При этом, например, предварительная обработка поверхности пленок в смесях Ar+О₂ и воздушной смеси приводит к более эффективной зарядке поверхности образца в сравнении с обработкой в плазме CF₄ .

Исследования материалов, полученных по способу в соответствии с изобретением, показали, что воспроизводимость, например, антимикробных свойств биосовместимых полимерных материалов может быть надежно достигнута, если среднеквадратичная шероховатость поверхности материала находится в интервале 5,0-200 нм, соотношение площадей поверхности с высоким (не менее 50 В) и низким (не более 20 В) потенциалом составляет не менее 0,5, а соотношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии составляет не менее 5-40.

В случае получения материала с противоопухолевой активностью воспроизводимость свойств наблюдается при среднеквадратичной шероховатости в интервале 25-70 нм, соотношение площадей поверхности с высоким (не менее 50 В) и низким (не более 20 В) потенциалом составляет не менее 0,5, а соотношение дисперсного и полярного компонентов полной поверхностной энергии составляет не менее 5.

Обнаружено, что посредством управления режимами технологического процесса по получению нанокомпозитных материалов и оптимизации процессов обработки поверхности полимерных материалов направленными потоками ионов химически активных и инертных газов или их смесей можно воспроизводимо получать НСП с различными свойствами.

Таким образом, появляется возможность придавать одному и тому же полимеру, выбранному в качестве исходного материала, различные функциональные характеристики и заданные лечебные свойства.

При использовании же в качестве исходного биосовместимого полимера биодеградируемых природных полимеров, какими являются хитозаны, ацетилцеллюлоза, полиоксиалканоаты и др., способ в соответствии с изобретением дает возможность получать также и материалы в виде лекарственных средств внутренней доставки.

Кроме того, выявлена возможность дополнительной модификации материалов с НСП производными фуллерена, что позволяет увеличивать биомедицинские возможности получаемых материалов, а следовательно, значительно расширять круг их применения. Так, в зависимости от состава фрагмента, присоединенного к фуллереновому сфероиду модифицированный производными фуллерена нанокомпозитный материал приобретает селективно выраженную антимикробную, или противоопухолевую, или другую биологическую активность. Такими фрагментами могут быть, например, порфирин, индол, хинолин и др.

Исследования биологической активности различных производных фуллерена позволили подтвердить, что помимо уже достаточно широко известных электрофизических, оптических, адсорбционных и других полезных технических свойств производных фуллерена, особое место занимает возможность их применения в биологической и медицинской химии. Такая возможность обусловлена тем, что размер, гидрофобность, трехмерность и электронные свойства фуллерена очень привлекательны для медицинской химии.

Имеются сведения о перспективах применения производных фуллерена для лечения нейродегенеративных заболеваний, фотодинамической терапии рака, ВИЧ-инфекций, а также антибактериальной активности по отношению к грамотрицательным и грамположительным бактериям, резистентным к другим антимикробным средствам.

Упомянутые биологические свойства производных фуллерена являются предпосылкой для создания новых биологически активных соединений в соответствии с описываемым изобретением, в частности путем осаждения производных фуллерена на НСП.

В результате экспериментов подтверждена возможность нанесения производных фуллерена на НСП с различными поверхностными характеристиками, а проведенные микробиологические испытания влияния разнообразных фуллереновых компонентов в матрицах показали выраженное и избирательное ингибирование роста тест-организмов (различных бактерий и патогенных грибков) при модифицировании НСП производными фуллеренов.

Исследования биологической активности материалов с различными производными фуллерена позволяют подтвердить, что селективная биологическая активность может изменяться при использовании фуллереновых модификаторов с различными гетероциклическими фрагментами.

Конкретную селективно выраженную биологическую активность получают путем присоединения к фуллереновому сфероиду фрагментов с соответствующим заданному свойству составом, например:

- для получения выраженной антимикробной активности в качестве фармакофорного фрагмента используют хинолин или индол,

- для получения выраженной противоопухолевой активности в качестве фармакофорного фрагмента используют порфирин.

Полученные описываемым способом материалы характеризуются уникальными биомедицинскими свойствами, которые обусловлены совокупностью физико-химических свойств этих материалов.

При этом указанные свойства достигаются изменением степени дисперсности поверхности биосовместимых материалов с НСП, сформированными ионно-плазменной обработкой, с последующим нанесением пленок на основе углерода и дополнительной модификацией гетероциклическими производными фуллерена.

Способ получения нанокомпозитного полимерного материала согласно настоящему изобретению содержит следующие этапы.

1. Обработка поверхности полимера потоком ионов инертных и химически активных газов. Создание рельефа с заданными характеристиками.

2. Нанесение пленки на основе углерода на поверхность полимера с заданным рельефом. Создание пленки на основе углерода толщиной от 5 нм позволяет с высокой точностью регулировать параметры матричной структуры и получать рельеф НСП с заданными свойствами.

3. Нанесение слоя синтезированных органических производных фуллерена с различным типом фармакофорного модификатора (порфирин, хинолин, индол и др.) на поверхность биополимера с заданным рельефом.

В качестве исходного материала для обеспечения указанных свойств выбирают биосовместимые полимеры, например широко используемые в биологии и медицине полиэтилентерефталат (ПЭТФ) и политетрафторэтилен (ПТФЭ). В случае получения материалов для лекарственных средств внутренней адресной доставки в качестве биосовместимого полимерного материала используют биодеградируемые природные полимеры, например хитозаны, ацетилцеллюлозу или полимеры бактериального происхождения (полиоксиалканоаты и др.).

Наноструктурированную поверхность на основе биосовместимого полимерного материала формируют путем обработки его поверхности потоком ионов инертных и/или химически активных газов, или их смеси. Наиболее доступной химически активной смесью является смесь O ₂+N₂ (воздух), однако, могут быть использованы и кислород, тетрафторметан (CF₄ ), неон, аргон, криптон, ксенон, и др.

Обработку потоками ионов осуществляют, например, с помощью ионного источника ИИ-4-0,15 на вакуумной установке для ионного и ионно-химического травления металлов, полупроводников и диэлектриков.

Создание рельефа с заданными характеристиками осуществляют путем оптимизации параметров технологического процесса для получения материала с заданной биологической активностью. С этой целью предварительно разрабатывают технологические схемы и их аппаратурную реализацию, настроенную на условия, соответствующие формированию НСП с той или иной биологической активностью.

Управление свойствами формируемой поверхности для получения различной биологической активности осуществляют путем изменения ее рельефа, заряда и химического состава поверхности при ионной бомбардировке. Получение заданных свойств осуществляют в соответствии с выбранным оптимальным режимом обработки за счет изменения условий формирования направленного пучка ионов, а также состава газовой смеси.

Так, например, для получения материала с антимикробным действием обеспечивают шероховатость поверхности Rq 5,0-200 нм при радиусе основания выступов R 80-230 нм и высоте выступов Н в интервале 10-50 нм и с этой целью обработку поверхности полимера потоком ионов газовой смеси O₂ +N₂ (по составу эквивалентную составу воздуха) производят при средней энергии ионов 500-3000 эВ, плотности тока ионов 0,5-5 мА/см² в течение 1-30 мин.

В то же время для получения материала с противоопухолевым действием шероховатость поверхности Rq создают не менее 25 нм при радиусе выступов не менее 500 нм и их высоте также не менее 500 нм и для этого обработку поверхности осуществляют в течение 1-30 мин ионами большой молекулярной массы.

Следующим этапом получения нанокомпозитного материала является модифицирование сформированной НСП путем нанесения на нее пленок из направленных ионно-плазменных потоков, например, паров углеводородов. В этом случае получают пленки на основе углерода толщиной 1-500 нм. Управление свойствами полученной модифицированной НСП осуществляют за счет регулирования фазового и кластерного состава пленки на основе углерода и толщины пленки.

Плазмообразующий газ (углеводород), тип гибридизации которого влияет на структуру и свойства получаемых пленок, а следовательно, и на свойства НСП в целом, выбирают, преимущественно исходя из условий высокого процентного содержания алмазной фазы в углеродной пленке, которая влияет как на электрофизические, так и на механические характеристики покрытий. Таким образом, в качестве углеводородов выбирают, как правило, вещества с достаточно высоким давлением насыщенных паров, при том, что их молекулы должны содержать полностью или частично sp³-гибридизованные атомы углерода. Например, в качестве такого углеводорода используют циклогексан, у которого все атомы углерода имеют sp³-гибридизацию связей в молекуле, что является предпосылкой наличия высокого процентного содержания алмазной фазы в углеродной пленке. Могут быть использованы также смеси углеводородов с инертными или другими газами.

На предварительно очищенную поверхность полимера с заданным рельефом наносят пленку на основе углерода из направленного ионно-плазменного потока частиц посредством, например, ионного источника ИИ-4-0,15 на вакуумной установке при соответствующих ускоряющем напряжении и токе разряда. Время осаждения устанавливают в соответствии с заданной толщиной получаемого покрытия.

В каждом конкретном случае регулируют условия проведения осаждения, варьируют соотношение компонентов углеродсодержащего материала, ускоряющее напряжение, ток разряда, продолжительности процесса, изменяя тем самым состав и свойства получаемого покрытия.

При этом фазовый и кластерный состав пленки углерода изменяют одновременно с изменением толщины пленок путем изменения энергии ионов и использования различных углеводородов и тем самым получают НСП с заданным рельефом и составом поверхности.

Толщину слоя регулируют путем управления временем осаждения модифицирующего агента и в зависимости от толщины пленки получают НСП с различной степенью биологической активности. Оптимальная толщина углеродной пленки составляет 1-500 нм.

Для получения материалов селективного действия на наноструктурированную поверхность полимерного материала наносят органические производные фуллерена, например, содержащие фрагменты порфирина, хинолина, индола и др.

Модификация НСП производными фуллерена может быть осуществлена методами простой адгезии путем осаждения из растворов.

Нанесение фуллереновых модификаторов на образцы полимеров с наноструктурированной поверхностью осуществляют также методом осаждения spin coating с использованием центрифуги.

Процесс состоит в 20-кратном нанесении капли раствора (концентрации 0,6 мг/мл) фуллереновых соединений в хлороформе на подложку при вращении 3000 об/мин. Затем образец высушивают на воздухе от остатков растворителя. Такая методика обеспечивает нанесение порядка 30 монослоев.

Для модификации НСП производными фуллерена могут быть использованы и такие технологии, как метод Ленгмюра-Блоджетт. Этот метод характеризуется хорошей воспроизводимостью, а возможность регулирования ориентации молекул в монослое при нанесении, а также числа наносимых монослоев позволяет дополнительно воздействовать на поверхностные характеристики НСП, а следовательно, и на биологическую активность получаемых материалов.

Контроль электрофизических свойств и топологии НСП осуществляют методом электронной микроскопии, методом сканирующей зондовой микроскопии и методом исследования краевого угла смачивания.

Методом электронной микроскопии проводят панорамный анализ исследуемых образцов и выявляют структуру как поверхности, так и среза образца.

Методом сканирующей зондовой микроскопии (СЗМ) проводят как панорамный, так и количественный анализ поверхности. При этом на основе регистрируемых в СЗМ массивов данных сканирования определяют целый спектр характеристик поверхности, в том числе параметры шероховатости, принятые международными стандартами, фрактальные параметры и другие свойства поверхности.

Проведение исследований в режиме атомно-силовой микроскопии в условиях высокого разрешения позволяет наблюдать и контролировать сам процесс роста непосредственно in situ: формирование рельефа поверхности, образование пленки, скорость роста и ее зависимость от направления на уровне отдельных молекул. Для каждого из рассматриваемых образцов получают изображения поверхности в разных точках и при различном увеличении. Размер сканов берут от 10 до 0,2 мкм. На основе данных сканирования для каждого скана определяют совокупность характеристик микрорельефа поверхности. Основными определяемыми параметрами являются характерные горизонтальный размер R и высота пика H (находимые по профилям поверхности), периметр L (находимый выделением линии уровня) особенностей рельефа поверхности, шероховатость поверхности (среднеквадратичное отклонение R_q, рассчитываемое по всем точкам скана), площадь участка поверхности S, а также фрактальная размерность поверхности D_F.

Для определения химической неоднородности твердой поверхности, контроля ее качества и стандартизации полученного материала используют метод исследования краевого угла смачивания (КУС), который является экспериментальным проявлением изменения поверхностной энергии материала. На основе измерения углов смачивания по отношению к двум жидкостям и расчете работы адгезии можно получить удельную полную энергию поверхности и ее полярный и дисперсионный компоненты ^s, ^d, ^p.

Химический состав поверхности определяют путем регистрации ИК-спектра с помощью Фурье-спектрометра Bruker Equinox 50S в области от 400 до 4000 см ^-1 с 500-кратным накоплением при шаге сканирования 2 см ^-1.

Измерение заряда поверхности производилось методом динамического конденсатора. Этот метод дает интегральную величину удельного заряда. Для получения данных о распределении поверхностного потенциала материала используется также метод АСМ.

Экспериментальную оценку биомедицинских свойств полученных материалов осуществляют следующим образом.

Антимикробную активность композитных материалов проводят с использованием музейных штаммов грамположительных, грамотрицательных бактерий и грибов (в частности, были использованы штаммы: Staphylococcus aureus ATCC 29213, Escherichia coli ATCC 54383, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Candida albicans), предварительную подготовку которых осуществляют следующим образом.

Суспендируют 3-4 колонии 20-часовой культуры исследуемых микроорганизмов в 2 мл физиологического раствора. Полученную суспензию доводят до стандарта мутности по шкале McFarland (1,5×10 ⁸ кое/мл). Базовую суспензию разводят в физиологическом растворе методом серийных разведений. После разведения базовой суспензии получают 6 пробирок для каждого вида микроорганизмов с концентрациями 1,5×10⁷, 1,5×10 ⁶, 1,5×10⁴, 1,5×10 ³, 1,5×10² кое/мл.

Полученные в соответствии с описываемым способом материалы с биологической активностью и отличающиеся друг от друга в зависимости от режимов технологии изготовления и химического строения фуллереновых модификаторов исследуют по следующей методике.

Исследуемые материалы разрезают на фрагменты размером 1×1 см. По 2 фрагмента из каждой серии помещают в пробирку с жидкой питательной средой для контроля стерильности покрытий. Для каждого из исследуемых микроорганизмов используют 2 ряда фрагментов по 4 в каждом. Из пробирок с концентрациями 1,5×10⁵, 1,5×10⁴, 1,5×10 ³, 1,5×10² кое/мл дозатором забирают по 25 мкл суспензии микроорганизма. Каждую концентрацию наносят параллельно на 2 одинаковых фрагмента полимерной подложки с биоцидным покрытием (или без покрытий для контрольных исследований). Первый ряд из четырех покрытий с четырьмя разными концентрациями микроорганизмов смывают 1 мл бульона Мюллер-Хинтона сразу же после нанесения бактериальной суспензии и производят высев 0,1 мл на дифференциально-диагностические плотные среды. Для стафилококков на желточно-солевой агар, для Escherichia coli и Pseudomonas aeruginosa на агар Эндо, для Candida albicans на агар Сабуро. Второй ряд из четырех покрытия с инокулянтами инкубируют во влажной камере в термостате 2 ч при 37°С. После инкубации фрагменты покрытий отмывают в 1 мл бульона и также по 0,1 мл высеивают на плотные, соответствующие каждому виду микроорганизма среды. Все чашки инкубируют в термостате при 37°С в течение 48, а для грибов 72 ч.

Учет результатов проводят визуально по наличию роста и подсчета колоний микроорганизмов, выросших на дифференциально-диагностических твердых питательных средах, для первого ряда (без инкубации во влажной камере) и второго ряда (с инкубацией во влажной камере) покрытий.

По разности количества выросших колоний на первом и втором рядах чашек высчитывают снижение титра обсемененности (если это происходило). Результативный титр снижения обсемененности для каждого из исследованных микроорганизмов берут как среднее значение по снижению обсемененности во всех четырех разведениях. Снижение титра обсемененности считают фактом, подтверждающим наличие биоцидной активности у исследуемых материалов.

Испытания противоопухолевой активности проводили на перевивной клеточной линии рака молочной железы человека, полученной из американской коллекции типовых клеточных структур (АСТСС). Подсчитывали отношение фракции выживших клеток в зависимости от времени культивирования на исследуемых образцах полимерных материалов к фракции выживших клеток на культуральном пластике (полистироле).

Ниже представлены конкретные примеры реализации описываемого изобретения, где в примерах 1-9 приведены варианты осуществления способа получения нанокомпозитных полимерных материалов и результаты оценки биомедицинских свойств полученных материалов.

На диаграммах фиг.1-6 представлены зависимости антимикробной, а на фиг.7 - противоопухолевой активности от параметров микрорельефа и/или вида модификатора полученных в соответствии с описываемым изобретением материалов с НСП.

Пример 1. Подложку из полиэтилентерефталата (ПЭТФ) помещают на вращающийся барабан-подложкодержатель вакуумной установки с ионным источником ИИ-4-0,15. Камеру вакуумной установки откачивают турбомолекулярным насосом (ТМН-500) до давления (5÷6)×10 ^-3 Па. В качестве рабочего газа используют воздушную смесь, представляющую собой смесь азота и кислорода в соотношении 4:1, которую с помощью натекателя впускают в ионный источник до давления 10^-1 Па. Обработку поверхности ПЭТФ производят при величине энергии ионов 700±100 эВ и плотности ионного тока 2,0±0,3 мА/см² в течение 3 минут.

Затем ионно-плазменным методом наносят пленку алмазоподобного углерода. Нанесение покрытий производят методом ионно-стимулированного осаждения из газовой фазы циклогексана с помощью второго ионного источника при ускоряющем напряжении от 2 до 4кВ, токе в катушке соленоида (I_с) 2 А и токе разряда от 100 до 300 мА. Время осаждения варьируют от 5 до 10 мин в соответствии с заданной толщиной покрытия, которую контролируют по свидетелю с помощью микроскопов МИИ-4 и МИИ-11. В результате получают пленки алмазоподобного углерода толщиной соответственно 50 и 100 нм.

Измерения параметров НСП проводят методом АСМ и путем измерения КУС по отношению к двум разным жидкостям - воде и этиленгликолю - и на основе полученных данных рассчитывают удельную энергию поверхности и ее полярный и дисперсионный компоненты ^s, ^d, ^p.

Измерение заряда, проведенное методом динамического конденсатора, показало наличие заряда 280 нКл/м².

Высокий поверхностный потенциал составляет 55 В, а низкий 22 В, соотношение площадей с высоким и низким потенциалом составляет 0,51.

Результаты измерения параметров полученных НСП и исследования антимикробной активности, представленные в таблице 1 и на графике (фиг.1) зависимости снижения инокуляционной дозы от шероховатости поверхности НСП, показывают наличие биоцидной активности только при определенных параметрах НСП и отсутствие ее в контрольном образце, что свидетельствует о влиянии режимов обработки и толщины наносимой углеродной пленки на состояние биологической активности полученного материала. При этом имеет место пороговая зависимость снижения инокуляционной дозы от параметров НСП на ПЭТФ, в частности от величины среднеквадратичной шероховатости поверхности. Из представленных данных можно сделать вывод о возможности управления биологической активностью материалов, а именно антимикробной активностью, путем изменения степени дисперсности поверхности материала.

Пример 2. Обработку поверхности ПЭТФ и нанесение пленки углерода производят аналогично описанному в примере 1, но ионную обработки поверхности в воздушной смесью проводят в течение 10 мин.

Исследование параметров рельефа методом АСМ, распределение поверхностного потенциала методом АСМ и определение удельной поверхностной энергии и ее полярного и дисперсионного компонентов проводились по методикам, описанным в примере 1.

Параметры полученных НСП и результаты исследования антимикробной активности, представленные в таблице 2, наглядно свидетельствуют, что степень дисперсности НСП и условия ее модификации определяют ее антимикробную активность. Следовательно, управляя условиями формирования НСП на поверхности биосовместимых полимерных материалов, создается возможность селективно воздействовать на различные виды микроорганизмов (грамположительных и грамотрицательных).

Пример 3. Обработку поверхности ПЭТФ и нанесение пленки углерода производят аналогично способу, описанному в примере 1, но для ионной обработки поверхности используют в качестве рабочего газа тетрафтометан (CF₄), который с помощью натекателя впускают в ионный источник до давления 10 ^-1 Па. Обработку ионным потоком проводят в течение 10 минут.

Исследование параметров рельефа методом АСМ, распределение поверхностного потенциала методом АСМ и определение удельной поверхностной энергии и ее полярного и дисперсионного компонентов проводились по методикам, описанным в примере 1.

Параметры полученных НСП и результаты исследования антимикробной активности, представленные в таблице 3, демонстрируют зависимость состояния биологической активности от состава рабочего газа для ионной обработки поверхности и свойств НСП.

Пример 4. Обработку поверхности ПЭТФ и нанесение пленки углерода производят аналогично способу, описанному в примере 1, но для ионной обработки поверхности используют смесь аргона с кислородом в соотношении 1:1.

Измерение распределения поверхностного потенциала методом АСМ показало, что максимальный потенциал составлял 75 В, а минимальный 25 В. Соотношение потенциалов составляло 3,0, а соотношение площадей с высоким и низким потенциалом составляет 0,5.

Параметры полученных НСП представлены в таблице 4.

Результаты исследований показывают, что обработка поверхности ПЭТФ ионами смеси аргона и кислорода в соотношении 1:1 и нанесение пленки углерода приводит к изменению степени дисперсности поверхности и изменению ее заряда.

Изменение степени дисперсности поверхности, распределение поверхностного потенциала и интегральный заряд поверхности приводят к появлению и изменению антибактериальных свойств. Представленные на фиг.2 и в таблице 4 результаты исследования антибактериальной активности полученных, обработанных ионами смеси аргона с кислородом в соотношении 1:1 материалов, показали наличие пороговой зависимости снижения инокуляционной дозы от среднеквадратичной шероховатости поверхности НСП (R_q) для граммотрицательных микроорганизмов (Escherichia coli ATCC 54383, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853).

Зависимость антибактериальной активности от среднеквадратичной шероховатости имеет пороговый характер, как и в случае обработки ПЭТФ ионами воздушной смеси, у которого это наблюдалось в отношении грамположительных микроорганизмов.

Пример 5. Подложку из полиэтитетрафторэтилена (ПТФЭ) помещают на вращающийся барабан-подложкодержатель вакуумной установки и производят обработку поверхности ПТФЭ потоком ионов аналогично примеру 1 в течение 30 минут. В качестве рабочего газа используют тетрафтометан (CF₄).

Пленку алмазоподобного углерода наносят методом ионно-стимулированного осаждения из газовой фазы циклогексана при ускоряющем напряжении от 2 до 4 кВ, I_с=2 А и токе разряда от 100 до 300 мА. Время осаждения варьировалось от 1 до 2 мин в соответствии с заданной толщиной покрытия, которая контролировалась по свидетелю с помощью микроскопов МИИ-4 и МИИ-11. Получены пленки толщиной 10 и 20 нм.

Результаты измерения параметров НСП, проведенных методом АСМ и измерения КУС по отношению к двум разным жидкостям воде и этиленгликолю представлены в таблице 5.

Измерения распределения поверхностного потенциала, проводимые методом АСМ, показывают, что максимальный потенциал составляет 150 В, а минимальный 20 В. Соотношение потенциалов составляет 7,5, а соотношение площадей с высоким и низким потенциалом 0,55.

Исследования противоопухолевой активности полученного материала показали гибель более 50% раковых клеток молочной железы через 4 часа инкубирования, т.е. образец ПТФЭ, обработанный CF₄, обладает острой цитотоксичностью. Исследования показали также, что при нанесении дополнительного слоя фуллерен-порфирина цитотоксичность усиливается. Нанесение пленок углерода толщиной 20 нм исключает острую цитотоксичность, но сохраняет долю погибших клеток (40%) через 72 часа инкубирования. Таким образом, противоопухолевая активность (острая цитотоксичность) наблюдается у поверхности с R_q, равным 33,5 нм, высотой выступов 899 нм и их радиусом 1221 нм при соотношении площадей с высоким и низким потенциалом 0,55.

При нанесении пленки -С:Н толщиной 20 нм наблюдается противоопухолевая активность без острой цитотоксичности. Таким образом, изменение степени дисперсности поверхности полимера изменяет биологическую активность материала.

Пример 6. Обработку поверхности пленочного хитозана с молекулярной массой 500 кДа и степенью деацетилирования 76% производят в воздушной плазме ВЧ-диодного разряда при мощности 2 кВт и давлении 2×10-4 мм рт.ст. в течение 5 мин. Нанесение пленки на основе углерода производят аналогично описанному в примере 1 в течение 2 мин. Получают пленку толщиной 20 нм.

Далее проводят измерения параметров НСП методом АСМ и измерения КУС, рассчитывают удельную энергию поверхности и ее полярный и дисперсионный компоненты ^s, ^d, ^p. Измерения распределения поверхностного потенциала методом АСМ показали, что максимальный потенциал составляет 58 В, а минимальный 23 В. Соотношение потенциалов составило 2,52, а соотношение площадей с высоким и низким потенциалом составляет 0,52.

Параметры полученных НСП представлены в таблице 6.

Исследование антимикробной активности показало, что в результате обработки поверхности хитозана в воздушной смеси обнаружено увеличение антибактериальной активности в отношении грамотрицательных микроорганизмов Escherichia coli ATCC 54383 и Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853.

Уменьшение инокуляционной дозы в отношении Escherichia coli ATCC 54383 определялось фактором 2, после обработки в воздушной плазме ВЧ-диодного разряда - фактором 3, а после нанесения пленки а-С:Н - фактором 3,5. Уменьшение инокуляционной дозы в отношении Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 определялось фактором 1,5, после обработки в воздушной плазме ВЧ-диодного разряда - фактором 4,5, а после нанесения пленки -С:Н - фактором 4,2.

Полученные результаты свидетельствуют о возможности управления биологической активностью хитозана путем изменения дисперсности его поверхности.

Пример 7. На поверхности ПЭТФ путем модифицирования ионно-плазменной обработкой и нанесением пленки углерода по методу, описанному в примере 1, получают НСП с пленкой алмазоподобного углерода толщиной 10 нм, 20 нм, 50 нм и 100 нм со среднеквадратичной шероховатостью R _q 5,6 нм, 7,1 нм, 10,4 нм и 9,8 нм соответственно. После чего по методу spin coating с использованием центрифуги наносят слой производного фуллерена - диады фуллерен-хинолин. Процесс осуществляют путем 20-кратного нанесения капли раствора (концентрации 0,6 мг/мл) соединения 1-метил-2-(хинолил-2)фуллеропирролидина в хлороформе на подложку при скорости вращения 3000 об/мин. Затем образец высушивают на воздухе от остатков растворителя. Такая методика обеспечивает нанесение 30 монослоев диады фуллерен-хинолин.

Сравнительный анализ антимикробной активности модифицированного ПЭТФ и модифицированного ПЭТФ с нанесенным слоем диады фуллерен-хинолин, проведенный аппликационным методом, представлен на диаграммах фиг.3-5, которые показывают, что уменьшение иннокуляционной дозы в отношении Pseudomonas aeruginosa и грибов вида Candida albicans для образца пленки углерода 10 нм со слоем диады фуллерен-хинолин определялась соответственно факторами 0 и 2, а для образца, модифицированного ПТЭФ при той же толщине пленки углерода - только фактором 0 в обоих случаях.

Для образцов с толщиной пленки углерода 50 нм при наличии слоя диады фуллерен-хинолин уменьшение иннокуляционной дозы составляет соответственно 5,5 и 3, а для образцов модифицированного ПТЭФ при той же толщине пленки углерода - фактором 0 и 4, что свидетельствует о зависимости биологической активности как от структуры НСП, так и от свойств ее поверхности.

Пример 8. На поверхности ПЭТФ путем модифицирования ионно-плазменной обработкой и нанесением пленки углерода по методу, описанному в примере 1, наносят слой производного фуллерена - диады фуллерен-индол. Процесс осуществляют аналогично примеру 7 путем 20-кратного нанесения капли раствора (концентрации 0,6 мг/мл) соединения 1-метил-2-(индолил-3)фуллеропирролидина.

Результаты исследования антимикробной активности модифицированного ПЭТФ и модифицированного ПЭТФ с нанесенным слоем фуллеренового модификатора с фрагментом индола, проведенного аппликационным методом, представлены на диаграммах фиг.3-6.

Сравнительный анализ данных, приведенных в указанных диаграммах, наглядно свидетельствует об имеющей место зависимости биологической активности полученных материалов как от структуры НСП и от свойств ее поверхности, так и от модифицирующего агента.

Пример 9. Обработку поверхности ПЭТФ и нанесение пленки углерода производят аналогично описанному в примере 1, но для ионной обработки поверхности используют в качестве рабочего газа тетрафтометан (CF₄ ), которым воздействуют на поверхность подложки в течение 30 минут и после нанесения пленки алмазоподобного углерода поверхность материала с НСП модифицируют диадой С₆₀ -порфирин по описанному в примере 7 методу.

Для полученных образцов ПЭТФ НСП (f1) и ПТЭФ НСП, модифицированных диадой С ₆₀-порфирин (f1-porph), проводили исследование противоопухолевой активности, результаты которого приведены в диаграмме фиг.7.

Сравнение цитотоксического действия материала ПЭТФ НСП f1 и ПЭТФ НСП, модифицированного порфириновым производным фуллерена f1-porph, показывает, что полимерный материал без модификации органическим производным фуллерена (f1) сам по себе обладает цитотоксическим действием, максимальная цитотоксичность проявляется в гибели ˜70% клеток через 48 ч инкубации. Модификация образца f1 диадой С₆₀-порфирин f1-porf приводит к усилению цитотоксичного действия полимерного материала, максимальная цитотоксичность, которая выражается в гибели ˜90% раковых клеток, проявляется также через 48 ч инкубации, что свидетельствует о том, что цитотоксическое действие f1-porph является результатом совместного действия как самой полимерной подложки с НСП, так и N-метилфуллеропирролидина с порфириновым фрагментом.

Результаты проведенных исследований демонструют перспективность дальнейшего изучения диады С₆₀-порфирин как потенциального агента для лечения раковых заболеваний.

Таким образом, результаты микробиологического исследования материалов в соответствии с изобретением показывают, что модификация поверхности НСП приводит к появлению или усилению избирательных анитимикробных и противогрибковых свойств новых композитных материалов. Так, использование в качестве фуллеренового модификатора диады фуллерен-хинолин увеличивает активность материала по отношению к Pseudomonas aeruginosa более чем в 6 раз по сравнению с немодифицированным материалом (фиг.3). Диада фуллерен-индол обеспечивает увеличение эффективности антимикробного действия материала в 5 раз против Staphylococcus aureus (фиг.6) и в 10 раз по отношению патогенным грибкам Candida albicans (фиг.4). Модификация поверхности НСП диадой С₆₀-порфирин приводит к усилению цитотоксичного действия полимерного материала.

Использование производных фуллерена[60] в качестве модифицирующего агента существенно расширяет круг задач, в которых возможно использование материалов с НСП, и позволяет получать материалы с избирательным биологическим действием.

Способ получения нанокомпозитных биологически активных полимерных материалов универсален, и в тоже время позволяет получать нанобиоматериалы с различным биологическим действием: антимикробным, противоопухолевым, нейролептическим, иммуномодулирующим и др.

Способ получения нанокомпозитных полимерных материалов с биологической активностью в соответствии с изобретением позволяет реализовать:

- технологическую возможность создания и регулирования избирательности биологических свойств получаемых биологически активных материалов;

- возможность существенного уменьшения дозы действующих лечебных средств;

- создавать совершенно новые антимикробные средства, по отношению к которым отсутствуют резистентные штаммы микроорганизмов.

Кроме того, универсальность описываемого способа позволяет осуществить общий подход к созданию оборудования для изготовления материалов с различным биологическим действием, а также позволяет получать материалы для создания:

- изделий медицинского назначения (трансдермальные лечебные средства и матрицы для адресной доставки лекарств);

- упаковки стерилизованных изделий, увеличивающей сроки хранения;

- контейнеров для очистки и хранения контактных линз;

- изделий пищевой и парфюмерной промышленности;

- перевязочных и других средств медицинского применения.

Таблица 1 Характеристики НСП поверхности образцов наноуглеродных пленок на ПЭТФ с обработкой в воздушной смеси в течение 3 минут и их антимикробная активность
№	Описание объекта исследования	Размер скана (мкм)	R q (нм)	R (нм)	Н (нм)	Параметры поверхности			Антимикробная активность
						d, мДж/м2	р, мДж/м2	d/ p	Снижение инокуляционной дозы в отношении Candida Albicans
1	ПЭТФ, обр. возд., 3 мин	5×5	5,0	123	11,8	50,6	6,2	8,16	0
2	ПЭТФ, обр. возд., 3 мин. -С:Н˜50 нм	5×5	10,4	92	14,6	50,6	8,9	5,68	4
3	ПЭТФ, обр. возд., 3 мин. -С:Н˜100 нм	5×5	9,8	107	15,7	52,3	4,8	10,8	0
4	ПЭТФ (контроль)	5×5	2,66	135	6.3	41,2	2,0	20,6	0

Таблица 2 Характеристики поверхности образцов наноуглеродных пленок на ПЭТФ с обработкой в воздушной смеси в течение 10 мин и их антимикробная активность
№ обр.	Описание объекта исследования	Rq (нм)	R (нм)	Н (нм)	Параметры поверхности			Антимикробная активность снижение инокуляционной дозы в отношении:
					d, мДж/м2	p, мДж/м2	d/ p	St.Aur	E. Coli	Ps.Aeg.	Candida Albicans
1	ПЭТФ, обработанный возд. 10 мин	158	78	32	52,3	2,9	18,0	4	3	4	6
2	ПЭТФ, обработанный возд. 10 мин; -С:Н˜10 нм	102	84	36	53,9	3,8	14,9	4	4	3	5
3	ПЭТФ. обработанный возд. 10 мин; -С:Н˜20 нм	98	103	36	54,7	3,6	15,19	2	3	2	4
6	ПЭТФ, контроль	2,66	135	63	41,2	2,0	20,6	0	0	0	0

Таблица 3 Характеристики НСП поверхности образцов наноуглеродных пленок на ПЭТФ с обработкой в тетрафтометане (CF4) в течение 10 минут и их антимикробная активность
№ обр.	Описание объекта исследования	Rq (нм)	R (нм)	Н (нм)	Параметры поверхности			Антимикробная активность
					d, мДж/ м2	p, мДж/м2	d/ p	Снижение инокуляционной дозы в отношении
								Е. Coli	Candida Albicans
1	ПЭТФ, обработанный CF4 10 мин	4,79	216	8,99	52,3	2,9	18,0	0	0
2	ПЭТФ, обработанный CF4 10 мин; -С:Н˜10 нм	6,8	95	19	53,9	3,8	14,9	0	0
3	ПЭТФ, обработанный CF4 10 мин -С:Н˜20 нм	7,4	103	29	54,7	3,6	15,19	0	0
4	ПЭТФ, обработанный CF4 10 мин; -С:Н˜50 нм	10,65	107	58	52,2	5,1	10,2	3	3,5
5	ПЭТФ, обработанный CF4 10 мин -С:Н˜100 нм	9,43	157,5	34,9	53,1	3,0	17,7	0	2,5
6	ПЭТФ, контроль	2,66	135	63	41,2	2,0	20		0

Таблица 4 Характеристики НСП на ПЭТФ после обработки в смеси аргона с кислородом и нанесения пленок углерода и их антимикробная активность
№	Описание объекта исследования	Rq (нм)	R (нм)	Н (нм)	Параметры поверхности			Антимикробная активность, уменьшение инокуляционной дозы в отношении
					d, мДж/м2	p, мДж/м2	d/ p	Escherichia coli	Pseudomonas aeruginosa
1	ПЭТФ, обраб. Ar+O 2, 5 мин	122,7	68	177,2	53,8	1,51	35,6	2	2,5
2	ПЭТФ, обраб. Ar+O2, 5 мин; -С:Н˜10 нм	125,3	88	168	59,4	1,52	38,9	0	0
3	ПЭТФ, обраб. Ar+O2, 5 мин; -С:Н˜20 нм	109,5	111	159	54,7	1,4	39	0	0
4	ПЭТФ, обраб. Ar+O2, 5 мин; -С:Н˜50 нм	108,2	107	137,8	57,9	1,62	35,74	3	2
5	ПЭТФ, обработ Ar+O2, 5 мин, -С:Н 100 нм	40,5	98	137,8	58,7	2,5	23,5	0	0
6	ПЭТФ, контроль	2,66	135	6,3	41,2	2,0	20,6	0	0

Таблица 5 Характеристики НСП поверхности образцов наноуглеродных пленок на ПТФЭ с обработкой в тетрафтометане (CF4)
№	Описание объекта исследования	Размер скана, мкм	Rq, нм	R, нм	Н, нм	Параметры поверхности
						d , мДж/м 2	p , мДж/м 2	d/ p
1	ПТФЭ, обр. CF4, 30 мин, -С:Н˜10 нм	10×10	47,5	768	677	76,1	15,6	5,0
2	ПТФЭ, обр. CF 4, 30 мин, -С:Н˜20 нм	10×10	60,6	565	686	75,0	12,1	6,0
3	ПТФЭ, обр. CF 4, 30 мин	10×10	33,5	1221	899	74,3	10,1	7,4
4	ПТФЭ (контроль)	10×10	27,4	768	584	76,2	13,6	5,9

Таблица 6 Характеристики НСП на хитозане после обработки его в воздушной смеси и нанесения пленок углерода
№ обр.	Описание объекта исследования	Размер скана, мкм	Rq, нм	R, нм	Н	Параметры поверхности
						d, мДж/м2	р, мДж/м2	d/ p
1	Хитозан пленочный. Контроль	5×5	28,9	68	171	53,9	8,5	6,1
2	Хитозан пленочный, обраб. 5 мин атм	5×5	46,4	129	153	55,5	4,91	11,3
3	Хитозан пленочный, обраб. 5 мин атм; -С:Н ˜20 нм	5×5	38,6	88	141	56,2	5,1	11,07