препарат, содержащий иммуноглобулин против боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствор для внутримышечного введения

Формула изобретения

Препарат, содержащий иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки (БГЛ) из сыворотки крови лошадей, раствор для внутримышечного введения, обладающий вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо и используемый для экстренной профилактики БГЛ у людей, представляющий собой 9,0-11,0%-ный раствор иммуноглобулинов гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, содержащий -глобулиновую фракцию в количестве не менее 85,0% от количества общего белка, в качестве неспецифических примесей содержащий альбумин, - и -глобулиновые фракции в количестве не более 15,0% и остаточный этиловый спирт в количестве не более 4,5%, имеющий величину рН от 7,0 до 7,5 и характеризующийся титром вируснейтрализующих антител не менее 1:1024.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к области медицины, конкретно к лекарствам и медикаментам (к иммуноглобулинам) для терапевтических целей, и может быть использовано для экстренной профилактики Боливийской геморрагической лихорадки (БГЛ) у людей.

БГЛ - зоонозная природно-очаговая инфекция, возбудитель которой, вирус Мачупо, относится к семейству Arenaviridae и вызывает у людей острое лихорадочное заболевание, протекающее с выраженным геморрагическим синдромом и высокой (до 70%) летальностью [1, 2].

Специфические средства профилактики и лечения БГЛ в настоящее время в нашей стране отсутствуют. Лечение заболевших симптоматическое.

Из данных зарубежных источников известно, что при введении обезьянам иммунной сыворотки реконвалесцентов после перенесенной БГЛ с титром ВНА 1:2048 в количестве, равном 10 и 3 эквивалентным единицам плазмы для человека (200-250 мл), через 2 часа после подкожного заражения макаков вирусом Мачупо в дозе 10⁵ БОЕ заболевание не развивается. При лечебном назначении препарата развивается очень легкое заболевание продолжительностью до 2-х суток [3].

Введение донорского иммуноглобулина на 7-9 сутки от начала заболевания оказалось неэффективным [3].

Существенными недостатками иммунной плазмы (сыворотки) реконвалесцентов, являющейся сырьем для выделения донорского иммуноглобулина, являются возможное наличие в ней вирусных контаминантов (гепатитов В и С, ВИЧ и др.), опасных для человека и низкое содержание вируснейтрализующих антител.

Кроме того, Российская Федерация (РФ) не располагает сывороткой реконвалесцентов, так как БГЛ не является эндемичной для нашей страны, поэтому получение донорского иммуноглобулина в РФ невозможно.

Выходом из сложившейся ситуации может стать получение высокоочищенных гетерологичных иммуноглобулинов. Разрабатываемый препарат аналогов в РФ не имеет. В практике сывороточного дела традиционно используемым продуцентом для получения иммунных сывороток ко многим возбудителям является лошадь [4].

Целью данного изобретения является разработка препарата, содержащего иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствора для внутримышечного введения, предназначенного для экстренной профилактики БГЛ у людей.

Сущность изобретения заключается в способности вируса Мачупо индуцировать у лошадей выработку специфических протективных антител и использовании нативной гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, в качестве сырья для получения специфического препарата. Разработанный препарат, содержащий иммуноглобулин против БГЛ, представляет собой 9,0-11,0%-ный раствор иммуноглобулинов гипериммунной сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, обладает вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо и оказывает выраженное профилактическое действие при БГЛ.

Технический результат изобретения заключается в том, что разработанный препарат, обладающий титром вируснейтрализующих антител не менее 1:1024, обеспечивает специфическую экстренную профилактику БГЛ у экспериментальных животных и рекомендован для экстренной профилактики БГЛ у людей.

Разработанный препарат, содержащий иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствор для внутримышечного введения является новым, поскольку аналогичный гетерологичный препарат в мировой практике отсутствует.

Пример выполнения

Сырьем для получения препарата иммуноглобулина является гипериммунная лошадиная сыворотка, содержащая антитела к вирусу Мачупо. Выделение иммуноглобулина из сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо, проводят методом спиртового фракционирования на холоду по Кону [5].

Препарат, содержащий иммуноглобулин против БГЛ из сыворотки крови лошадей, представляет собой прозрачную или слегка опалесцирующую жидкость, бесцветную или с желтоватым оттенком, иногда с наличием незначительного, легко разбивающегося при встряхивании осадка, с величиной рН от 7,0 до 7,5 и является 9,0-11,0%-ным раствором иммуноглобулинов сыворотки крови лошадей, содержащей антитела к вирусу Мачупо. Содержание гамма-глобулиновой фракции в нем составляет не менее 85,0% от количества общего белка. В качестве неспецифических примесей в препарате присутствуют альбумин, - и -глобулины в количестве не более 15,0% и остаточный этиловый спирт, содержание которого не более 4,5%. Препарат обладает вируснейтрализующей активностью к вирусу Мачупо, характеризующейся титром вируснейтрализующих антител не менее 1:1024.

Препарат стерильный, апирогенный и нетоксичный. При внутримышечном введении он оказывает выраженное профилактическое действие при БГЛ.

Было получено 10 серий препарата иммуноглобулина против БГЛ из сыворотки крови лошадей.

По физико-химическим и иммунобиологическим показателям препарат иммуноглобулина лошадиного против БГЛ соответствует показателям качества коммерческих гетерологичных иммуноглобулинов, выделенных из сыворотки крови лошадей [6, 7].

Характеристика препаратов представлена в таблице.

Примером наилучшего использования препарата, содержащего иммуноглобулин против Боливийской геморрагической лихорадки из сыворотки крови лошадей, раствора для внутримышечного введения может являться его применение в качестве средства экстренной профилактики БГЛ у людей.

Таблица Характеристика гетерологичных препаратов иммуноглобулина, полученных из сыворотки крови лошадей
Наименование показателя качества, единица измерения	Величина показателя для препаратов иммуноглобулина
	антирабического [6, 7]	против БГЛ (данные по 10 сериям)
Описание	Прозрачная или слабо опалесцирующая жидкость, бесцветной или слабо желтой окраски.	Прозрачная или слегка опалесцирующая жидкость, бесцветная или с желтоватым оттенком. Допускается наличие незначительного осадка, легко разбивающегося при встряхивании.
Концентрация водородных ионов, ед. рН	От 6,6 до 7,4	От 7,0 до 7,5
Количество общего белка, процент	От 9,0 до 11,0	От 9,1 до 10,7
Содержание гамма-глобулиновой фракции, процент	Не менее 80,0	От 85,0 до 90,3
Содержание остаточного этилового спирта, процент	Не более 4,5	От 4,0 до 4,5
Пирогенность	Апирогенный	Апирогенный
Токсичность	Нетоксичный	Нетоксичный
Стерильность	Стерильный	Стерильный

БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЕ ДАННЫЕ

1. Peters C.J., Buchmeier M., Rollin P.E., Ksiazek T.G. Arenaviruses. In: Fields. B.N. // Fields Virology. - 1996a. - P.1521-1551.

2. de Manzione N., Salas R.A., Paredes H., Godoy О., et al. Venezuelan hemorrhagic fever: clinical and epidemiological studies of 165 cases. // Clin. Infect. Dis. - 1998. - Vol.26. - P.308-313.

3. Eddy J.A. Prophylaxis and treatment of Bolivian hemorrhagic fever with immune serum or purified -globulin. // 1973. Usamriied planning sessions 18-19 October 1973. USA Medical Research Institute of Infection Disease, Fort Detrick, Frederick, Maryland. - P.19-24.

4. Бургасов П.Н. Руководство по вакцинному и сывороточному делу. - М., 1978.

5. Cohn E.J., Strong L., Hughes W.L. et al. Preparation and properties of serum and plasma proteins // J. Amer. Chem. Soc. - 1946. - Vol.68, №3. - P.459-475.

6. Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади жидкий: ФСП 42-0020-4413-03 / Минздрав РФ.

7. Иммуноглобулин антирабический из сыворотки крови лошади жидкий, раствор для инъекций 150 МЕ/мл: НД 42-13071-04 / Минздрав Украины.