способ прогнозирования невынашивания во втором триместре беременности

Формула изобретения

Способ прогнозирования невынашивания беременности во втором триместре беременности путем исследования сыворотки крови, отличающийся тем, что определяют в сыворотке крови содержание трансформирующего фактора роста- 2 (ТФР- 2), и если ТФР- 2 меньше 1806,8 пг/мл, то прогнозируют угрозу прерывания беременности, в случае, если ТФР- 2 больше 1806,8 пг/мл, то дополнительно определяют уровень субстанции Р (SP) и, если он больше 0,274 нг/мл, то также прогнозируют угрозу прерывания беременности во втором триместре.

Описание изобретения к патенту

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования невынашивания беременности во втором триместре беременности.

Задача охраны здоровья матери и ребенка является важной составляющей частью здравоохранения, имеющей первостепенное значение для формирования здорового поколения с самого раннего периода жизни (Кулаков В.И., 2005). Реализация этой задачи возможна лишь при создании оптимальных условий для сохранения здоровья женщины, решения вопросов рациональной тактики ведения беременности и родов, а также профилактики репродуктивных потерь (Абрамченко В.В., 2004; Сидельникова В.М., 2005).

В современном акушерстве проблема невынашивания беременности не теряет своей актуальности. По данным многих авторов, частота этой патологии, не имеющая тенденции к снижению на протяжении последних 20 лет, составляет 10-25% от всех беременностей (Сидельникова В.М. и соавт., 2001; Genazzi A.R., 2003). В настоящее время установлено, что невынашивание беременности представляет собой полиэтиологический комплекс, в развитии и реализации которого принимают участие важнейшие системы организма женщины. Несомненным является тот факт, что нервная система оказывает важное регуляторное влияние на органы иммунной системы. Физиологическая нейрорегуляция иммунного ответа организма необходима для его полноценного развития (Сотникова Н.Ю., Громова О.А., Новикова Е.А., 2004).

Поэтому поиск новых патогенетических механизмов развития самопроизвольного прерывания беременности представляет огромный практический интерес, т.к. позволит разработать новые диагностические критерии и, как следствие, тактику ведения больных.

На сегодняшний день ранней диагностике и прогнозированию невынашивания беременности посвящено значительное количество работ. При этом просматриваются два основных направления разрабатываемых методик: биохимические и иммунологические, с одной стороны, и инструментальные - с другой. При этом к инструментальным в основном относятся методы УЗИ.

Из первой группы методов известен способ прогнозирования угрозы прерывания беременности в ранние сроки путем определения в периферической крови концентрации фактора угнетающего миграцию лейкоцитов до и после однократной иммунизации донорскими лейкоцитами (патент РФ №2014598, 1994).

Недостатками способа являются техническая сложность выполнения, а также невозможность динамического наблюдения за состоянием беременности с помощью этого метода.

Известен способ ранней диагностики невынашивания беременности путем определения в периферической крови относительного содержания нейтрофилов, имеющих на своей поверхности структуры, реагирующие с трофобластическим Х-гликопротеидом (патент РФ №2077729, 1997). К недостаткам метода относятся его трудоемкость и неспецифичность.

Известен способ прогнозирования угрозы невынашивания беременности путем определения содержания периферических Т-лимфоцитов до и после инкубации с АМГФ (патент №2077727, 1997).

Известен способ доклинического прогнозирования невынашивания беременности путем определения в плазме крови содержания фибрин-мономерных комплексов. По их величине прогнозируют прерывание беременности в I, II или III триместрах (патент РФ №2123698, 1998). К недостаткам метода относится его неспецифичность.

Известен способ прогнозирования угрозы прерывания беременности по определению концентрации эстриола, плацентарного лактогена и интерлейкина (ИЛ) - 6 в сыворотке крови (патент РФ №2285926, 2006).

Данный способ принят нами за прототип.

Недостатком данных способов является их трудоемкость.

Известен способ прогнозирования невынашивания беременности путем ультразвукового исследования органов малого таза и определения в сыворотке крови прогестерона, хорионического гонадотропина и уровня альфа-2-микроглобулина в сыворотке крови (заявка РФ №2004135161, 2006). Недостатком данного способа является его трудоемкость и неспецифичность.

Известен способ прогноза невынашивания беременности путем определения содержания цитокинов в периферической крови и слизи цервикального канала у женщин с невынашиванием беременности инфекционного генеза по уровню ИФН- и ИЛ-8 в периферической крови и слизи цервикального канала, повышение которых служит маркерами неблагополучия на ранних этапах беременности (Т.Н.Сумеди, Л.В.Ганковская, Е.Н.Долгина и др. Содержание цитокинов в периферической крови и слизи цервикального канала у женщин с невынашиванием беременности инфекционного генеза // Российский журнал иммунологии, 2005 г. - т.9, - N2. - стр.93-102). Недостатком данного способа является то, что он не позволяет провести диагностику угрозы прерывания беременности во 2 триместре.

Из вышеизложенного очевидно, что на сегодняшний день основными недостатками способов прогнозирования невынашивания беременности являются неспецифичность и трудоемкость.

Задача изобретения: разработка специфичного способа прогнозирования невынашивания во втором триместре беременности с целью назначения своевременных и адекватных лечебных мероприятий.

Поставленная задача решается тем, что у беременной во втором триместре определяют в сыворотке крови содержание трансформирующего фактора роста- 2 (ТФР- 2), и если ТФР- 2 меньше 1806,8 пг/мл, то прогнозируют угрозу прерывания беременности, в случае, если ТФР- 2 больше 1806,8 пг/мл, то дополнительно определяют уровень субстанции Р (SP) и, если он больше 0,274 нг/мл, то также прогнозируют угрозу прерывания беременности во втором триместре.

Чувствительность метода - 89,8%

Специфичность метода - 93,3%

Точность - 89%

Достоверность (р<0, 001)

Новый технический результат состоит в том, что данный способ обладает высокой точностью, чувствительностью и специфичностью. Предложенный метод исследования позволяет с высокой точностью прогнозировать течение второго триместра беременности, т.е. с 12 и до 28 нед. гестации.

Таким образом, патогенетически обоснованный прогноз невынашивания беременности еще на доклинической стадии позволит своевременно выделить группу беременных, угрожающих по развитию данной патологии, и провести раннее профилактическое лечение, которое существенно снизит частоту невынашивания беременности и благоприятно отразится на показателях перинатальной заболеваемости и смертности в условиях обострившейся демографической ситуации.

В генезе репродуктивных потерь на любом этапе беременности в настоящее время убедительно доказана роль персистирующей урогенитальной бактериально-вирусной инфекции (Сидельникова В.М., 2001), эндокринной патологии (Сидельникова В.М., 1986). Учитывая аллогенность плода, не вызывает сомнений, что в инициации преждевременного прерывания беременности важную роль играют иммунные механизмы (Айламазян Э.К., Павлов О.В., Сельков С.А., 2004). Поддержание гомеостаза в организме обеспечивается взаимодействием между эндокринной и иммунной системой посредством нейромедиаторов, к числу которых принадлежат нейропептиды.

Вещество субстанция Р (H-Arg-Pro-Lys-Pro-Gln-Gln-Phe-Phe-Gly-Leu-Met-NH2) - один из наиболее известных пептидов, открытых в 1931 г. Этот нейропептид присутствует в немиелинизированных волокнах С-типа и маленьких миелинизированных А-дельта-типа и синтезируются клетками дорзальных рогов ганглиев, а затем транспортируются вдоль аксонов в нервные окончания, где они накапливаются в плотных везикулах (Гомазков О.А., 1995). Субстанция Р (SP) - главный медиатор болевой нейротрансмиссии. Иннервация женских половых органов осуществляется автономными (адренергическими, холинергическими) и сенсорными нервами, а также пептидергическими нервными волокнами, содержащими субстанцию Р, вазоактивный интестинальный пептид, кальцитонин-ген связывающий пептид, нейропептид Y (Klukovits et al., 2002, Zupko et al., 2005, Bae et al., 2001). Достаточно противоречива информация о количестве субстанция Р-зависимых нервных волокон в матке на протяжении беременности. Известно, что происходит денервация матки в течение гестации, физиологическим значением которой является сохранение, рост и развитие плода (С.Schmidt, E.Lobos, К.Spanel-Borowski, 2003). Однако иннервация шейки матки более выражена, и при этом не наблюдается потери нервных окончаний, т.е. сохраняется их функция (Кулаков В.И, Мурашко Л.Е., 2002). В шейке матки на эндотелии посткапиллярных венул обнаружены рецепторы SP, при этом предполагается влияние нейропептидов на микроциркуляцию (Collins et al., 2002, Pokabia et al., 2002). Так, введение SP небеременным крысам в эксперименте вызывало вазодилатацию, плазменную экстравазацию и миграцию лейкоцитов в шейке матки, т.е. изменения характерные для «созревающей» шейки матки (Collins et al., 2002). Как провоспалительный агент, SP стимулирует Т-клеточную пролиферацию (Payany et al., 1985), увеличение синтеза иммуноглобулинов вызывает хемотаксис моноцитов, нейтрофилов, фибробластов, индуцирует дегрануляцию мастоцитов и высвобождение гистамина, стимулирует фагоцитоз в макрофагах, секрецию интерлейкинов (ИЛ-1, ИЛ-6, фактора некроза опухоли- ), моноцитами (Goode et al., 1998). Этот нейропептид служит локальным «контролером» микроокружения благодаря действию на эндотелиальные клетки, макрофаги, лимфоциты, синовиоциты, тучные клетки (Geppetti P.A., Holzer P., 1996; McDonald D.M. et al., 1996). Спектр действия SP от регуляторного воздействия на иммунную систему до контроля сосудистого тонуса, что объясняет, как нейропептид генерирует и поддерживает воспалительный процесс, называемый «нейрогенным» (Meggs W.J., 1995). С точки зрения физиологической беременности неоправданным является деление цитокинов на "вредные" и "полезные". Оказалось, что повышение продукции некоторых цитокинов (в том числе и так называемых вредных) тканью плаценты сопровождает не только патологические процессы, такие как выкидыш и преждевременные роды, но и является характерным признаком нормальных своевременных родов.

В экспериментах на грызунах убедительно доказано абортогенное действие субстанции Р за счет увеличения продукции фактора некроза опухоли- , интерлейкина-1 макрофагами и снижения содержания трансформирующего фактора роста - 2, обладающего иммуносупрессивными свойствами (Arck P.C., 1997; Markert U.R., 1997), т.о. субстанция Р нарушает "цитокиновый баланс" в матке, существующий во время беременности, происходит увеличение провоспалительных цитокинов, тем самым реализуется отторжение плода. Нарушение этого равновесия в результате действия экзогенных или эндогенных факторов может привести к осложнениям беременности, крайним проявлением которых является спонтанное преждевременное ее прерывание (Павлов О.В., Сельков С.А., Лалаян Д.В., Аржанова О.Н., 2003).

В ходе собственных исследований нами получены очень интересные результаты.

Проводя анализ исследования трансформирующего фактора роста - 2 (ТФР- 2), мы можем констатировать предсказуемость лабораторных результатов. ТФР - 2, являясь иммуносупрессивным фактором, способствует формированию супрессорной доминанты, блокирует реакции клеточного иммунитета и способствует превалированию эффектов Th2-регуляторных цитокинов. В ходе нашего исследования выявлено, что при нормально протекающей беременности зарегистрированы высокие показатели содержания в сыворотке крови ТФР- 2, составившие 2756,75 (2461,75-3628,88) пг/мл и в 2 раза ниже при угрозе невынашивания беременности - соответственно 1375,5 (756-2707,5) пг/мл (р<0,001), а после курса комплексной терапии несколько повышался до 1980,5 (936,5-3092) пг/мл.

Исследование субстанции Р при физиологической гестации показало низкий уровень ее содержания, равный 0,19 (1,14-0,21) нг/мл. В сыворотке крови беременных с угрозой невынашивания этот показатель увеличивался практически в 2 раза и составил 0,35(0.2-0.93) нг/мл (р<0,001), и сохранял тенденцию к росту, несмотря на проводимую терапию. При повторном обследовании концентрация субстанции Р возросла до 0,43 (0,19-1,03) нг/мл и достоверно отличалась от контроля (р<0,001). Таким образом, мы можем констатировать, что угроза невынашивания беременности во втором триместре развивается на фоне стабильно низкого уровня провоспалительных цитокинов, но, в то же время повышенном содержании субстанции Р в сыворотке крови. Низкий уровень провоспалительных цитокинов на системном уровне можно объяснить тем, что состояние наших пациенток не было критическим.

Поскольку в доступной литературе до настоящего времени нет стандартных нормативных показателей провоспалительных цитокинов, и роль их в эмбриогенезе резко изменяется в зависимости от концентрации, разработанный нами метод прогнозирования позволяет во втором триместре беременности определять только 2 показателя, а именно субстанции Р и ТФР- 2, что является достаточным для расчета прогностического критерия. Субстанция Р является важным модулятором воспаления, т.к. индуцирует синтез «провоспалительных» медиаторов (интерлейкина 1, 6, фактора некроза опухоли и др.) макрофагами и активирует фагоцитоз, в то же время снижает содержание иммуносупрессивных факторов. Известно, что только при высоком содержании ТФР- 2 возможно пролонгирование беременности.

Способ осуществляют следующим образом.

У беременной женщины утром натощак из локтевой вены забирают кровь (желательно самотеком в пластиковую или силиконированную пробирку), затем стандартным методом получают сыворотку крови. Определяют ТФР- 2 и субстанцию Р. Если ТФР- 2 меньше 1806,8 пг/мл, то прогнозируют угрозу прерывания беременности, в случае, если ТФР-р2 больше 1806,8 пг/мл и SP больше 0,274 нг/мл, то также прогнозируют угрозу прерывания беременности во втором триместре и назначают адекватную терапию.

Уровень ТФР- 2 в сыворотке крови определяют методом иммуноферментного анализа наборами фирмы BIOSOURCE (USA). Промывочный буфер, растворы стандартов, стрептавидин-пероксидазного конъюгата готовят согласно инструкции к набору. Предварительно проводят разведение проб рабочим буфером в 50 раз затем окисляют пробы 1N соляной кислотой, инкубируют 15 минут и нейтрализуют пробы раствором 1 N гидроксида натрия.

В соответствующие лунки планшета, покрытые поликлональными антителами к ТФР- 2 человека, вносят по 100 мкл стандартов, контролей и исследуемых проб. Накрывают планшет пленкой и инкубируют 3 часа при комнатной температуре. По окончании инкубации промывают лунки планшета промывочным буфером 3 раза на промывочном устройстве для микропланшетов ELISA WASHER HUMAN (USA).

Затем во все лунки вносят по 100 мкл раствора биотинилированных антител к ТФР- 2 человека. Инкубируют планшет при комнатной температуре в течение 2 часов. Промывают планшет 3 раза промывочным буфером, как описано выше. Во все лунки вносят по 100 мкл раствора стрептавидин - пероксидазного конъюгата и инкубируют планшет 20 минут при комнатной температуре. Затем проводят промывку, как описано выше. Во все лунки вносят по 100 мкл раствора субстрата и инкубируют при комнатной температуре в течение 30 минут. Останавливают цветную реакцию добавлением 100 мкл стоп-реагента в каждую лунку.

Измерение оптической плотности при 450 нм и обсчет результатов проводят на фотометре MULTILABEL COUNTER 1420 (Дания).

В компьютерное обеспечение прибора вводят численные значения концентраций ТФР- 2 в стандартных растворах и получают после измерения концентрацию ТФР- 2 в опытных пробах. Полученные результаты умножают на фактор разведения (50) и выражают уровень ТФР- 2 в сыворотке крови пациента в пг/мл.

Уровень субстанции Р (SP) в сыворотке крови пациентов определяют методом иммуноферментного анализа наборами фирмы ВАСНЕМ GROUP (USA).

Приготовление растворов стандартов, конъюгатов, промывочного и рабочего буфера осуществляют согласно инструкции к набору. Во все лунки планшета вносят по 25 мкл первичной антисыворотки и инкубируют планшет в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем в соответствующие лунки планшета вносят по 50 мкл растворов стандартов или исследуемых проб, инкубируют 2 часа при комнатной температуре. Во все лунки планшета вносят по 25 мкл раствора биотинилированного конъюгата, накрывают планшет пленкой и оставляют на ночь при температуре 2-8С.

По окончании инкубации 5 раз промывают лунки планшета промывочным буфером на промывочном устройстве для микропланшетов ELISA WASHER HUMAN (USA). Во все лунки планшета вносят по 100 мкл раствора стрептавидин-пероксидазного конъюгата и инкубируют планшет в течение 1 часа при комнатной температуре. Промывают планшет, как описано выше. Во все лунки планшета вносят по 100 мкл раствора ТМБ, инкубируют в темноте в течение 15 минут, останавливают цветную реакцию добавлением в каждую лунку 100 мкл раствора 2N HCl.

Измерение оптической плотности при 450 нм и обсчет результатов проводили на фотометре MULTILABEL COUNTER 1420 (Дания).

В компьютерное обеспечение прибора вводят численные значения концентраций субстанции Р в стандартных растворах и получают после измерения концентрацию субстанции Р в опытных пробах в нг/мл.

Работоспособность заявляемого способа подтверждается клиническими примерами.

Пример 1

Первобеременная Х-о, 22 года, на очередном приме в женской консультации жалоб не предъявляет. Клинико-лабораторное обследование без патологии. Протокол УЗИ: по гестации 22 нед. Фетометрия соответствует. Органы плода без особенностей. Плацента по задней стенке, амбилатерально, 0 степени зрелости, толщина плаценты 20 мм. Нормоводие. Допплерометрия: нарушение гемодинамики не обнаружено. При влагалищном исследовании: шейка матки отклонена кзади, влагалищная часть шейки матки длиной 2,5 см, плотная, наружный зев закрыт. Матка увеличена соответственно сроку гестации, вне тонуса. Предлежит головка плода, подвижна над первой плоскостью малого таза. Выделения слизистые, скудные. С целью решения вопроса о целесообразности превентивной терапии проведено обследование на определение в сыворотке крови уровня ТФР- 2 (равен 2672 пг/мл). Дополнительно исследовали уровень субстанции Р (равен 0,154 нг/мл). Т.к. уровень ТФР- 2 больше, чем 1806,8 пг/мл, а уровень субстанции Р меньше 0,274 нг/мл, то данную пациентку можно отнести больную в группу здоровых беременных, не требующих медикаментозной сохраняющей терапии. Течение данной беременности было благоприятным.

Пример 2.

Повторнобеременная П-й, 28 лет, в анамнезе 1 срочные роды, 2 искусственных аборта (без осложнений), наблюдается в женской консультации с 8 недель беременности. Течение гестации без патологии. Данные общеклинического обследования в пределах нормативных значений. УЗИ: по гестации 13 нед. CRL-75 мм - 13 нед. 4 дн. Хорион по передней стенке, на 2 см выше внутреннего зева. Допплерометрия: нарушение гемодинамики не обнаружено. При влагалищном исследовании: шейка матки отклонена кзади, влагалищная часть шейка матки длиной 2,5 см, плотная, наружный зев закрыт. Матка увеличена соответственно сроку гестации, вне тонуса. Выделения слизистые, скудные. С целью решения вопроса о тактике ведения настоящей беременности проведено обследование на определение в сыворотке крови уровня ТФР- 2 (равен 695 пг/мл), т.е. ТФР- 2 меньше 1806,8 пг/мл, что согласно нашему методу, позволяет отнести данную беременную в группу риска по невынашиванию. Беременной был рекомендован курс сохраняющей терапии. Однако больная не выполнила рекомендации, сославшись на субъективно хорошее самочувствие. Через 10 дней больная обратилась с жалобами на боли внизу живота, тонус матки. УЗИ: срок гестации 14 нед. 3 дн. Фетометрия соответствует. Плацента по задней стенке, амбилатерально, 0 степени зрелости, нормальной толщины. Нормоводие. Допплерометрия: нарушение маточно-плацентарной гемодинамики 1А ст. При влагалищном исследовании: шейка матки отклонена кзади, влагалищная часть шейка матки длиной 2,5 см, плотная, размягчена по периферии, наружный зев 0,1 см. Матка увеличена соответственно сроку гестации, в тонусе. Выделения слизистые, скудные. Больной в условиях стационара проведен курс сохраняющей терапии. Беременность пролонгирована.

Пример 3

Первобеременная О-к, 29 лет, на очередном приеме у участкового акушера-гинеколога жалоб не предъявляет. На учете по беременности состоит с 7-8 нед. Течение гестации без патологии. В сроке 16 нед. по собственной инициативе провела УЗИ: по гестации 16 нед. 3 дн. Фетометрия соответствует. Плацента по задней стенке амбилатерально, 0 степени зрелости, нормальной толщины. Нормоводие. Допплерометрия: нарушение гемодинамики не обнаружено. При влагалищном исследовании: шейка матки отклонена кзади, влагалищная часть шейки матки длиной 2,5 см, плотная, наружный зев закрыт. Матка увеличена соответственно сроку гестации, вне тонуса. Выделения слизистые, скудные. С целью решения вопроса о тактике ведения настоящей беременности проведено обследование на определение в сыворотке, уровня ТФР- 2 (равен 4312,5 пк/мл). Т.к. уровень ТФР- 2 больше 1806,8 пг/мл, дополнительно исследовали в сыворотке крови уровень субстанции Р (равен 0,47 нг/мл). Т.к. уровень субстанции Р больше 0,274 нг/мл, согласно нашей методике следует отнести данную беременную в группу риска по невынашиванию беременности. Проведен курс превентивной терапии. Беременность протекала без признаков угрожающего позднего аборта.

Достоверность способа подтверждена клинико-лабораторными исследованиями.

Целью нашей работы явилась разработка диагностических критериев на основе изучения компонентов "нейрогенного " воспаления. В рамках решения поставленных задач, мы провели комплексное обследование 79 беременных в сроке от 12 до 28 нед. гестации. В основную группу были включены 49 беременных с клиническими и УЗИ-признаками угрозы прерывания беременности, находившихся на стационарном лечении в отделении патологии беременности ФГУ "РНИИАП Росмедтехнологий" (г. Ростов-на-Дону). Группу контроля составили 30 женщин с физиологическим течением беременности в те же гестационные сроки по данным ретроспективного анализа их наблюдения в рамках программы "Акушерский мониторинг", осуществляющей поликлинический этап наблюдения и ведения беременных. У всех женщин получено информированное согласие, помимо этого одобрение на проведение исследований было получено от локального этического комитета Ростовского НИИ акушерства и педиатрии. Всем пациенткам проведено клинико-лабораторное обследование, включающее, динамическое клиническое, гормональное, биохимическое, генетическое, ультразвуковое и допплерометрическое исследование, а также определено содержание в сыворотке крови субстанции Р, интерлейкина-1 , -6, фактора некроза опухоли- и трансформирующего фактора роста- 2. В основной клинической группе проводилось двукратное иммунологическое обследование, соответственно до и после курса стандартной терапии, направленной на пролонгирование беременности.

У 48 пациенток удалось купировать угрозу прерывания беременности, и только у одной женщины, несмотря на проводимую терапию, беременность прервалась. Успешное течение гестационного процесса, по-нашему мнению, обусловлено тенденцией к увеличению содержания ТФР- 2, обладающего иммуносупрессивными свойствами, способствующего переключению иммунного ответа на Тh2-регуляторный механизм. Подводя итог нашей работы, мы с высокой степенью достоверности (р<0,001) можем утверждать, что наиболее чувствительными и статистически значимыми лабораторными показателями угрозы прерывания беременности являются уровни ТФР- 2 и SP в сыворотке крови, изменение которых играет ведущую и первостепенную роль в развитии данной патологии. И еще одним подтверждением нашего вывода можно считать наличие болевого синдрома у всех беременных основной группы, а ведь SP - главный медиатор ноцицепции.

Процедура статистической обработки полученных эмпирических данных предусматривала последовательное выполнение нескольких этапов. Проверялось распределение исходных переменных на нормальность. Далее проводилась процедура описательной статистики, с помощью которой находились медианы, моды и доверительные интервалы, а также проверялись выборочные средние у различных групп. Достоверность полученных результатов рассчитывалась при доверительной вероятности 0,95. Полученные результаты представлены в таблицах 1-3.

* - достоверность различий р<0,05 по сравнению с контрольной группой,

** - достоверность различий р<0,01 по сравнению с контрольной группой,

*** - достоверность различий р<0,001 по сравнению с контрольной группой.

Содержание компонентов нейрогенного воспаления в сыворотке крови у беременных контрольной группы.

Таблица 1
показатель	FNO (пг/мл)	IL-1 (пг/мл)	IL-6 (пг/мл)	ТФР-2 (пг/мл)	SP (нг/мл)
медиана	29,31	3,37*	9,25*	2756,75***	0,19***
1 квартиль	20,02	1,10	6,49	2461,75	0,14
2 квартиль	68,00	6,72	27,68	3628,88	0,21

Содержание компонентов нейрогенного воспаления в сыворотке крови у беременных основной группы до терапии.

Таблица 2
показатель	FNO (пг/мл)	IL-1 (пг/мл)	IL-6 (пг/мл)	ТФР-2 (пг/мл)	SP (нг/мл)
медиана	26,2	1,78*	7,9*	1375,5***	0,35***
1 квартиль	22,7	1,31	6,6	756,5	0,2
2 квартиль	31,1	2,82	9,7	2707,5	0,93

Содержание компонентов нейрогенного воспаления в сыворотке крови у беременных основной группы после терапии.

Таблица 3
показатель	FNO (пг/мл)	IL-1 (пг/мл)	IL-6 (пг/мл)	ТФР-2 (пг/мл)	SP (нг/мл)
медиана	29,8	1,75*	7,12**	1980,5***	0,43***
1 квартиль	24	1,28	6,19	936,5	0,19
2 квартиль	36,7	2,27	9,6	3092	1,03

Обработка исходных рядов признаков осуществлялась с использованием пакета PolyAnalyst 3.5 PRO и EXCEL 2003.

Для сравнения межгрупповых различий использовали метод Вилкоксона для независимых групп с помощью пакета AtteStat 6.4. Для анализа многомерных нелинейных зависимостей использовали пакет PolyAnalist 3.5 Pro, одна из функций которого включает в себя технологию «эволюционного программирования».

Специальный модуль непрерывно преобразует "лучшую" на данный момент программу с внутреннего представления во внешний язык PolyAnalyst - язык символьных правил (Symbolic Rule Language), понятный человеку: математические формулы, условные конструкции и так далее. Это позволяет пользователю понять суть полученной зависимости, контролировать процесс поиска, а также получать графическую визуализацию результатов.

Преимуществом заявляемого метода состоит в том, что у беременных во втором триместре на основании высокочувствительных современных лабораторных маркеров производится прогнозирование невынашивания беременности с целью раннего назначения адекватной терапии. В клинической практике это позволит снизить угрозу перинатальных потерь за счет своевременного выявления беременных группы риска по развитию данной патологии, и провести раннее профилактическое лечение, которое существенно снизит частоту невынашивания беременности и благоприятно отразится на показателях перинатальной заболеваемости и смертности в условиях обострившейся демографической ситуации. Возможность одновременной подготовки к исследованию большого количества проб крови и небольшие затраты времени исследования, что позволяет использовать способ в скрининговых исследованиях.

Данный способ нетравматичен, обладает быстротой исполнения с использованием стандартных тест-систем, что позволяет широко использовать его в практическом здравоохранении.